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幽门螺杆菌感染患者血清IL-8和TNFα的水平变化及临床意义探讨 被引量:15
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作者 童明宏 孙晨光 贺士平 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第2期106-108,共3页
目的 监测幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,HP)感染患者血清白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的变化规律 ,探讨HP的致病机制。方法 用胃镜检查尿素酶试验、蛋白印迹法对HP进行定性分析、分组 ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测... 目的 监测幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,HP)感染患者血清白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的变化规律 ,探讨HP的致病机制。方法 用胃镜检查尿素酶试验、蛋白印迹法对HP进行定性分析、分组 ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测IL 8、TNFα的表达水平。结果 高毒力型HP感染组患者血清IL 8、TNFα水平与低毒力型HP感染组、HP阴性组相比差异有显著性 (P <0 .0 1) ,HP感染者血液IL 8和TNFα呈正相关。结论 高毒力型HP的感染是IL 8和TNFα升高的主要因素 ,表明IL 8和TNFα在胃。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 血清学检查 临床意义 白细胞介素8 肿瘤坏死因子α 细胞毒相关蛋白 细胞空泡毒素
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黄芪对梗阻性黄疸大鼠心肌TNFα及SOD基因mRNA表达的影响 被引量:10
2
作者 巩鹏 王忠裕 +2 位作者 王洪江 陈海龙 关风林 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2003年第3期165-169,共5页
目的 :探讨黄芪对梗黄心肌组织中TNFα、SOD基因mRNA表达的影响及分子生物学作用机制。 方法 :RT -PCR法扩增cDNA ,电泳扫描后半定量分析TNFα、SOD基因mRNA表达 ,组间比较。 结果 :黄芪可明显降低梗黄大鼠心肌组织中TNFα、mRNA基因表... 目的 :探讨黄芪对梗黄心肌组织中TNFα、SOD基因mRNA表达的影响及分子生物学作用机制。 方法 :RT -PCR法扩增cDNA ,电泳扫描后半定量分析TNFα、SOD基因mRNA表达 ,组间比较。 结果 :黄芪可明显降低梗黄大鼠心肌组织中TNFα、mRNA基因表达 ,上调SODmRNA表达 ,降低血浆中TNFα水平 ,并使SOD合成增多 ,对梗黄心肌损害起到保护作用。 结论 :黄芪通过下调TNFαmRNA基因表达、上调SODmRNA表达、降低血清中TNFα水平 ,并使SOD合成增多 ,在多层次、多靶点通过双相调节作用 ,保护梗黄对心肌的损害。 展开更多
关键词 黄芪 梗阻性黄疸 大鼠 心肌 tnfα SOD基因 mRNA 表达
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TNFα对NIH/3T3细胞、肝贮脂细胞增殖及前胶原表达的影响 被引量:10
3
作者 高春芳 孔宪涛 范列英 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期25-27,共3页
TNFα系单核-巨噬细胞产生的细胞因子,具有明确促进纤维母细胞增殖的作用,但对胶原产生的影响文献报道不尽相同。本文研究并比较了重组TNFα对NIH/3T3细胞及大鼠肝贮脂细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响,结果发... TNFα系单核-巨噬细胞产生的细胞因子,具有明确促进纤维母细胞增殖的作用,但对胶原产生的影响文献报道不尽相同。本文研究并比较了重组TNFα对NIH/3T3细胞及大鼠肝贮脂细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响,结果发现TNFα具有促进上述两种细胞增殖作用,且具剂量依赖性。原位杂交显示,在单个细胞水平,TNFα可抑制或降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA水平的表达。本研究提示肝贮脂细胞与纤维母细胞类似,接受TNFα调控,TNFα在肝纤维化始动激活及调控中具重要作用。 展开更多
关键词 tnfα 纤维母细胞 贮脂细胞 基因
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原发性肝癌基因治疗研究—含人TNF基因重组逆转录病毒转移系统的构建与表达 被引量:8
4
作者 陆云飞 林进令 +2 位作者 邱庆明 黎乐群 廖清华 《广西医科大学学报》 CAS 1997年第4期1-3,共3页
将人TNFα基因克隆到重组逆转录病毒载体pRUFneo,构建了含人TNF基因重组逆转录病毒载体RUF-TNF。将RUF-TNF转染包装细胞FlyA13,经药物筛选获得稳定分泌含人TNF基因重组逆转录病毒的细胞株Fly... 将人TNFα基因克隆到重组逆转录病毒载体pRUFneo,构建了含人TNF基因重组逆转录病毒载体RUF-TNF。将RUF-TNF转染包装细胞FlyA13,经药物筛选获得稳定分泌含人TNF基因重组逆转录病毒的细胞株FlyRUFN14。FlyRUFN14产生的病毒上清液能直接转染靶细胞Saos-2。本研究建立的逆转录病毒介导的TNF基因转移系统为肝癌及其他恶性肿瘤的基因治疗提供了条件。 展开更多
关键词 tnfα基因 重组逆转录病毒 基因治疗 肝肿瘤
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造血干细胞移植供者TNF-α基因多态性在GVHD中的频率分析 被引量:5
5
作者 王静波 任汉云 +2 位作者 李丹 孙倩 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期133-137,共5页
探讨供者肿瘤坏死因子α(TNF α)基因多态性在重度急性移植物抗宿主病 (aGVHD)和广泛型慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)中的作用。本研究应用变性高效液相色谱结合DNA测序检测了TNF α 30 8和TNF α 2 38基因在重度aGVHD和广泛型cGVHD的分... 探讨供者肿瘤坏死因子α(TNF α)基因多态性在重度急性移植物抗宿主病 (aGVHD)和广泛型慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)中的作用。本研究应用变性高效液相色谱结合DNA测序检测了TNF α 30 8和TNF α 2 38基因在重度aGVHD和广泛型cGVHD的分布。结果表明 ,2 1例Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD病人中有 8例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,而2 8例 0度 /Ⅰ度aGVHD病人中仅 1例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,提示TNF α 30 8(G/A)在Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD中的频率明显高于 0度 /Ⅰ度aGVHD的病人 (P <0 .0 1)。在 2 3例广泛性cGVHD病人中有 7例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,而17例未发生cGVHD的病人中仅 1例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,提示TNF α 30 8(G/A)在广泛性cGVHD中的频率高于未发生cGVHD的病人 (P <0 .0 5 )。在 2 1例Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD和 2 8例 0度 /Ⅰ度aGVHD及 2 3例广泛性cGVHD及17例未发生cGVHD的病人中均有 1例呈现TNF α 2 38(G/A)阳性 ,提示TNF α 2 38(G/A)在上述各组病人间的频率无明显差异。结论 :TNF α 30 8(G/A)阳性与Ⅲ度 展开更多
关键词 造血干细胞移植 tnfα基因 基因多态性 GVHD 频率分析 急性移植物抗宿主病 变性高效液相色谱法 慢性移植物抗宿主病
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冠心病患者肿瘤坏死因子α水平及其基因多态性的研究 被引量:5
6
作者 向萍霞 李艳 +1 位作者 张平安 陈会 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第5期434-437,共4页
目的 研究中国汉族人群中血清肿瘤坏死因子α(TNFα)水平及其 - 2 38、- 30 8位点基因多态性与冠心病之间的相关性。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测血清TNFα水平 ,同时应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR... 目的 研究中国汉族人群中血清肿瘤坏死因子α(TNFα)水平及其 - 2 38、- 30 8位点基因多态性与冠心病之间的相关性。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测血清TNFα水平 ,同时应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术检测TNFα基因多态性。结果 冠心病组血清TNFα水平显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。两组的 - 2 38、- 30 8位点基因型和等位基因的分布差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,- 2 38位点GA +AA基因型的血清TNFα水平 [(2 3.5 7± 6 .96 )ng/L]显著高于GG基因型 [(17.2 8± 7.17)ng/L](P <0 .0 5 ) ,在陈旧性心肌梗死 (OMI)患者和稳定型心绞痛 (SA)患者中均未检出GA和AA基因型 ,但与急性心肌梗死 (AMI)患者及不稳定型心绞痛 (UA)患者比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 血清TNFα水平显著升高提示炎性反应在冠心病病程中有重要作用 ;TNFα的水平可能受其基因多态性的影响。 展开更多
关键词 tnfα 基因多态性 血清 冠心病患者 肿瘤坏死因子α 基因型 AA 水平 位点 中国汉族人群
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离心机训练对大鼠脑及其它组织IL-6和TNFα基因表达水平的影响 被引量:6
7
作者 刘建彬 王洪波 +2 位作者 刘丽 梁雪清 于立身 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期649-653,共5页
为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz~ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、... 为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz~ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、脑、肺、肾和小肠组织 ,分别提取mRNA并定量 .用地高辛标记IL 6和TNFαcDNA作为探针 ,进行狭缝杂交 ,杂交结果通过光密度扫描定量后 ,进行统计学处理 .离心机训练不同时间 ,比较大鼠各组织IL 6和TNFα基因表达水平的变化 .结果显示随着训练时间的延长 ,表达水平均有所差异 .提示训练对大鼠脑及其它主要组织IL 6和TNFα基因表达水平有影响 。 展开更多
关键词 离心机训练 大鼠脑 IL-6 tnfα 基因表达水平 脑组织 心肌组织 加速度耐力
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IL-6表达增高及TNFα下调参与bcl-2反义寡脱氧核苷酸诱导的细胞凋亡的调控 被引量:2
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作者 陈鑫基 胡建达 +1 位作者 陈志哲 吕联煌 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第6期495-498,共4页
目的 探讨 bcl- 2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (antisense phosphorothioateoligodeoxynucleotide,AS- PS- ODN)诱导细胞凋亡的调控机理。方法 合成 bcl- 2 AS- PS- ODN作用于小细胞肺癌细胞株 NCI- H44 6 ,流式细胞仪 DNA倍体分析和脱... 目的 探讨 bcl- 2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (antisense phosphorothioateoligodeoxynucleotide,AS- PS- ODN)诱导细胞凋亡的调控机理。方法 合成 bcl- 2 AS- PS- ODN作用于小细胞肺癌细胞株 NCI- H44 6 ,流式细胞仪 DNA倍体分析和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡 ;多重半定量逆转录 -聚合酶链反应检测 bcl- 2 AS- PS- ODN处理前后 bcl- 2、c- myc、survivin、bax、s10 0 A2 、TNFα、TGFβ1及 IL- 6等基因 m RNA表达的变化。结果 bcl- 2 AS- PS- ODN能够诱导 NCI-H44 6细胞凋亡 ,随着 bcl- 2 m RNA水平的下降 ,IL- 6表达增高 72 .71% (P<0 .0 5 ) ,TNFα表达下调6 5 .90 % (P<0 .0 5 ) ,而 c- myc、survivin、bax、s10 0 A2 、TGFβ1等基因的表达无明显变化。结论 IL- 6表达增高及 TNFα下调参与 bcl- 2反义寡脱氧核苷酸所诱导的细胞凋亡的调控。 展开更多
关键词 bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 小细胞肺癌 凋亡调控 IL-6基因 tnfα基因
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TNFα诱导激活NF-κB上调抑癌基因CDKN2B表达 被引量:5
9
作者 周飞 彭仲特 +2 位作者 郑锦玲 曾咏仪 周梦逸 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期972-981,共10页
NF-κB通过转录调控其靶基因,在肿瘤发生发展和精准治疗中起关键作用。过表达抑癌基因细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)可抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡,但是否受NF-κB调节尚无报道。本文发现,NF-κB直接结合并上调CDKN2B基因:在... NF-κB通过转录调控其靶基因,在肿瘤发生发展和精准治疗中起关键作用。过表达抑癌基因细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)可抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡,但是否受NF-κB调节尚无报道。本文发现,NF-κB直接结合并上调CDKN2B基因:在TNFα处理的He La细胞内,CDKN2B的基因区覆盖大量NF-κB结合峰,其中富集倍数大于20的结合峰有14个。TRANSFAC软件分析发现,NF-κB结合峰内包含大量经典的κB位点。Ch IP-q PCR证明,TNFα诱导NF-κB结合CDKN2B基因。将NF-κB结合峰中心区DNA片段插入荧光素酶报告基因载体中,发现该DNA片段的插入使荧光素酶相对活性上调至7.88倍,TNFα处理又使其相对活性提高到2.37倍,且NF-κB/p65 siRNA显著干扰其相对活性的升高。免疫荧光检测显示,TNFα诱导激活NF-κB进入细胞核,而NF-κB/p65 siRNA阻止它入核。此结果提示,我们成功构建了具有NF-κB转录活性差异的细胞模型,q PCR检测两个已知的NF-κB靶基因NFKB2和STAT5A的表达,进一步验证该细胞模型构建成功。利用此细胞模型,发现受TNFα诱导激活的NF-κB,能够上调CDKN2B基因。总之,本文发现抑癌基因CDKN2B是NF-κB新的靶基因,NF-κB直接结合并上调CDKN2B基因在转录水平的表达。本研究为抑癌基因CDKN2B的抗肿瘤应用奠定了基础。 展开更多
关键词 tnfα 核因子ΚB 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B 靶基因 肿瘤
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人绒毛膜促性腺激素(hCG)抑制人PBMC促炎细胞因子mRNA的表达 被引量:3
10
作者 白虹 潘菊芬 +1 位作者 贾晓青 黄焕军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期193-195,203,共4页
目的 :探讨人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对促炎细胞因子基因表达是否有影响。方法 :人PBMC与不同浓度的hCG(10 0、5 0、2 5、12 5、6 2 5、3 12 5U ml)共同于 37℃、5 %CO2 条件下培养 4小时 ,培养细胞行RT PCR测定 ,RT PCR产物经琼脂糖... 目的 :探讨人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对促炎细胞因子基因表达是否有影响。方法 :人PBMC与不同浓度的hCG(10 0、5 0、2 5、12 5、6 2 5、3 12 5U ml)共同于 37℃、5 %CO2 条件下培养 4小时 ,培养细胞行RT PCR测定 ,RT PCR产物经琼脂糖电泳后用图象分析仪作半定量测定 ,比较各组结果。结果 :5 0~ 6 2 5U ml的hCG对TNF αmRNA的表达有抑制作用 ,且与不加hCG的对照组比较有显著差异 (P <0 0 1) ;而 2 5及 12 5U ml的hCG对PBMCIL 1及IL 6mRNA的表达均有明显抑制作用(P <0 0 1)。结论 :hCG在一定剂量范围内有抑制促炎细胞因子mRNA表达的作用 ,提示在正常人体中也可存在的hCG在机体促炎 抗炎自稳机制中可能参与一定作用。 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素(hCG) tnfα IL-1 IL-6 基因表达
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Effects of dexamethasone, cyproheptadine, anisodamine, and dinoprostone on TNF_α production in endotoxic shock 被引量:3
11
作者 王立赞 刘玉琴 +3 位作者 崔运河 朱凡河 王保生 论宁 《中国药理学报》 CSCD 1999年第2期171-174,共4页
目的:研究地塞米松(Dex)、噻庚啶(Cyp)、山莨菪碱(Ani)和地诺前列酮(Din)对脂多糖(LPS)诱导的肿瘤坏死因子(TNFα)基因表达的影响和抑制TNFα产生的抗休克作用.方法:Wistar大鼠静脉注射LP... 目的:研究地塞米松(Dex)、噻庚啶(Cyp)、山莨菪碱(Ani)和地诺前列酮(Din)对脂多糖(LPS)诱导的肿瘤坏死因子(TNFα)基因表达的影响和抑制TNFα产生的抗休克作用.方法:Wistar大鼠静脉注射LPS(EcoliO111B4,5mg·kg-1)复制内毒素休克模型.Northern印迹杂交分析肝脏TNFαmRNA表达,放射免疫法测定血浆TNFα的含量.结果:LPS攻击后2h肝脏TNFαmRNA表达水平显著增高(放射性自显影扫描分析38±10vs盐水对照组11±8,P<001);血浆TNFα水平明显升高[(22±3)μg·L-1vs盐水对照组(22±10)μg·L-1,P<001].静脉注射LPS后立即静脉注射Dex5,Cyp5,Ani10及Din2mg·kg-1均能显著降低大鼠肝脏TNFαmRNA水平和血浆TNFα含量,提高LPS20mg·kg-1攻击的小鼠24h的存活率.结论:Dex,Cyp,Ani和Din均能显著抑制LPS诱导的TNFα基因表达,具有较强的抗休克作用. 展开更多
关键词 内毒素休克 tnfα 地塞米松 噻庚啶 山莨菪碱
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导入TNF-αcDNA片断鼠LAK细胞对小鼠移植肿瘤治疗的初步观察 被引量:3
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作者 张红霞 肖玉平 +2 位作者 陈红 隋成光 任常山 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期224-226,共3页
利用逆转录病毒中介的基因转移技术,将重组人TNF-αcDNA功能片断导入小鼠脾LAK细胞中,然后用此细胞对荷瘤小鼠局部治疗,并以导入NeoR基因的LAK细胞做对照。结果,经导有TNF-α基因的LAK细胞治疗的小鼠肿瘤... 利用逆转录病毒中介的基因转移技术,将重组人TNF-αcDNA功能片断导入小鼠脾LAK细胞中,然后用此细胞对荷瘤小鼠局部治疗,并以导入NeoR基因的LAK细胞做对照。结果,经导有TNF-α基因的LAK细胞治疗的小鼠肿瘤明显变小,甚至消失,小鼠寿命亦明显高于对照组。 展开更多
关键词 肿瘤 tnf-α 基因治疗 LAK细胞
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TNFα-308G/A位点基因多态性与糖尿病性牙周炎易感性的相关性研究 被引量:3
13
作者 王欣欣 辛欣 +4 位作者 李晔 孟昊天 朱波峰 李昂 苟建重 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2018年第8期440-445,共6页
目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)基因多态性与糖尿病性牙周炎(DP)易感性的相关性。方法:电子检索MEDLINE、Web of Science、CNKI、万方以及中国生物医学文摘数据库自建库至2016-04收录的所有文献,从中收集TNFα-(308G/A)位点基因多态性... 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)基因多态性与糖尿病性牙周炎(DP)易感性的相关性。方法:电子检索MEDLINE、Web of Science、CNKI、万方以及中国生物医学文摘数据库自建库至2016-04收录的所有文献,从中收集TNFα-(308G/A)位点基因多态性与DP易感性的相关研究并进行meta分析。同时采用病例对照研究进行验证:分别收集慢性牙周炎(CP)患者(60例)、健康对照者(N)(56例)、2型糖尿病(T2DM)患者(58例)、DP患者(60例)的血液样本并采用DNA测序法检测其TNFα-(308G/A)位点的基因型。随后采用χ~2检验分析基因型和等位基因频率在各组间分布的差异,并应用非条件Logistic回归分析计算风险比(OR)及95%可信区间(95%CI),以评估各基因型与DP发病风险的相关性。结果:meta分析结果显示,TNFα-(308G/A)位点多态性可能是汉族人群DP易感性的相关因素。病例对照研究结果显示,TNFα-(308G/A)位点的3种基因型(GG、GA、AA)及等位基因(G、A)频率在各组间的分布均有统计学差异(P<0.05);携带A等位基因的人群患DP的风险明显增加(OR=5.074,95%CI:1.857~13.868,P=0.002),而且携带GA基因型的人群患DP的风险显著高于携带GG基因型的人群(OR=5.637,95%CI:1.949~16.301,P=0.001)。结论:汉族人群中TNFα-(308G/A)位点基因多态性可能是DP易感性的相关因素。 展开更多
关键词 基因多态性 糖尿病性牙周炎 tnfα
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实验动物瘤周注射转TNF-α基因的舌癌DNL在体内分布的研究 被引量:3
14
作者 孟箭 郭伟 +3 位作者 张志愿 林国础 竺涵光 周晓健 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2002年第3期223-225,共3页
目的 探讨肿瘤周围注射经TNF α基因转导的舌癌引流淋巴结淋巴细胞 (DNL)体内分布的特点。方法 在建立人舌癌原位移植模型基础上 ,用氚标胸腺嘧啶核苷 (3H TdR)标记转TNF基因的舌癌DNL后肿瘤周围注射 ,分别检测注射后 6h、1 2h、2 4h... 目的 探讨肿瘤周围注射经TNF α基因转导的舌癌引流淋巴结淋巴细胞 (DNL)体内分布的特点。方法 在建立人舌癌原位移植模型基础上 ,用氚标胸腺嘧啶核苷 (3H TdR)标记转TNF基因的舌癌DNL后肿瘤周围注射 ,分别检测注射后 6h、1 2h、2 4h、48h、1 68h肿瘤组织及各脏器单位重量的放射活性 (衰变率 ,DPM)。结果 各重要脏器及血液中单位重量的TNF/DNL在不同的时间由高到低依次是 :1 2h瘤、脾、肝、肺 ,2 4、48、1 68h瘤、脾、肺、肝。瘤体单位重量DPM最高 ,平均是正常组织的 1 0 .9倍 ,是外周血的 1 2 .5倍。结论 肿瘤部位注射可提高肿瘤局部的TNF/DNL细胞量 。 展开更多
关键词 体内分布 舌癌 肿瘤引流淋巴结细胞 tnf-α基因
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转基因人肝癌细胞株(BEL 7404/TNF)的建立及其生物活性的初步研究 被引量:3
15
作者 邱庆明 陆云飞 《广西医科大学学报》 CAS 1999年第4期408-409,共2页
目的 :研究转基因肝癌细胞和其来源肝癌细胞株的生物学特性的差异。方法 :构建含人肿瘤坏死因子α基因 ( TNFα基因 )的重组逆转录病毒载体 ,将其导入人肝癌细胞株 BEL 74 0 4。通过 MTT比色法测定比较转基因肝癌细胞株及未转基因肝癌... 目的 :研究转基因肝癌细胞和其来源肝癌细胞株的生物学特性的差异。方法 :构建含人肿瘤坏死因子α基因 ( TNFα基因 )的重组逆转录病毒载体 ,将其导入人肝癌细胞株 BEL 74 0 4。通过 MTT比色法测定比较转基因肝癌细胞株及未转基因肝癌细胞株的生物活性。结果 :成功建立转基因肝癌细胞株。MTT比色法测定结果表明转基因的肝癌细胞株生长速度显著减慢。结论 :TNF基因转入肝癌细胞后 。 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 tnf基因 MTT比色法 肝肿瘤
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PLNCX-TNFα基因转染对人胆管癌细胞生长的影响 被引量:2
16
作者 巩鹏 王忠裕 +3 位作者 王洪江 马哲夫 谭广 殷朔 《肝胆外科杂志》 2002年第3期224-226,共3页
目的 研究 L NCX- TNFα基因过表达对人胆管癌细胞的作用。方法 构建 L NCX- TNFα复合体 ,培养人胆管癌细胞 ,L NCX- TNFα转染人胆管癌细胞 ,得到稳定表达 ,通过聚合酶链式反应 (PCR)、流式细胞仪 (FCM)、免疫组织化学等方法检测基... 目的 研究 L NCX- TNFα基因过表达对人胆管癌细胞的作用。方法 构建 L NCX- TNFα复合体 ,培养人胆管癌细胞 ,L NCX- TNFα转染人胆管癌细胞 ,得到稳定表达 ,通过聚合酶链式反应 (PCR)、流式细胞仪 (FCM)、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况。结果 重组体 L NCX- TNFα基因转染人胆管癌细胞后 ,能抑制细胞的生长和集落形成 ;流式细胞技术证实 ,L NCX- TNFα能诱导细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞 ,G2 - M期和 S期比例明显下降 ,凋亡细胞数也明显增加。结论  TNFα基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞在肿瘤基因治疗方面发挥作用。 展开更多
关键词 tnfα基因 胆管癌 逆转性病毒 凋亡 基因治疗
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PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析 被引量:2
17
作者 刘庆鑫 刘丽 +4 位作者 石缨 刘立忠 王烨 杨彦 曹颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期194-197,共4页
为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片... 为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片段 ;以 PSP94c DNA为探针 ,对 RT-PCR产物进行 Southern印迹分析 .结果表明 :转染 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的 NIH3T3细胞 ,其 RT- PCR产物杂交信号为阳性 .细胞培养上清用 TNF抗体行 Western印迹和 ELISA分析 ,检测结果为阳性 .生物学活性分析表明 ,细胞培养上清不仅具有 PSP94抑制人前列腺癌细胞 PC- 3生长的活性 ,而且显示出 TNFα对 L92 9细胞的细胞毒作用 .以上结果表明 ,pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a质粒能够正确表达目的基因 PSP94- TNFα D1 1 a,且表达的 PSP94- TNFαD1 1 a融合蛋白具有预期的双重生物学活性 . 展开更多
关键词 前列腺分泌蛋白 tnfα衍生物 融合基因表达 活性 前列腺癌
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人PSP94与TNFα衍生物联合治疗人前列腺癌的实验研究 被引量:1
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作者 刘丽 刘庆鑫 +4 位作者 刘立忠 石缨 谢宝树 冷爱军 曹颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期546-550,共5页
构建了表达人 PSP94、TNFα衍生物 ( TNFα D1 1 a)及 PSP94与 TNFα D1 1 a( PSP94- TNFαD1 1 a)双功能蛋白真核表达质粒 pc DNA- TNFα D1 1 a、pc DNA- PSP94和 pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a,与 rh PSP94和 rh TNFα D1 1 a蛋白分别... 构建了表达人 PSP94、TNFα衍生物 ( TNFα D1 1 a)及 PSP94与 TNFα D1 1 a( PSP94- TNFαD1 1 a)双功能蛋白真核表达质粒 pc DNA- TNFα D1 1 a、pc DNA- PSP94和 pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a,与 rh PSP94和 rh TNFα D1 1 a蛋白分别在人前列腺癌裸鼠移植瘤动物模型上进行了 PSP94与 TNFαD1 1 a联合治疗人前列腺癌的实验研究 .当动物肿瘤直径长至约 1 0 mm时 ,将以上 3种真核表达质粒分别以 50 μg/只的量给相应组动物的左右四头肌内注射一次 ,同时设 pc DNA3.0空载体对照组 ;rh PSP9450μg/kg、rh TNFαD1 1 a 1 0 0万单位 /kg、rh PSP94和 rh TNFαD1 1 a以同样剂量联合给药 ,肌肉注射 ,每 d一次 ,连续 1 0 d,同时设环磷酰胺阳性对照组和生理盐水阴性对照组 .基因治疗动物给药后第 1 5d处死 ,蛋白治疗组停药后第 2 d处死 ,观察疗效 ,计算抑瘤率 .结果显示 ,以上述方式给药 ,无论是基因治疗组还是重组蛋白组 ,给 PSP94的动物肿瘤虽然未见明显缩小 ,但肿瘤组织均出现不同程度的坏死和液化现象 ;给 TNFαD1 1 a的未见明显的抑瘤效果 ;PSP94-TNFαD1 1 a融合基因或 rh PSP94+ rh TNFαD1 1 a联合给药 ,不仅肿瘤有所缩小 ,而且也有不同程度的坏死和液化现象出现 .初步认为 :( 1 ) 展开更多
关键词 PSP94 tnfα衍生物 基因治疗 前列腺癌
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小鼠抗人TNF-α Fab基因的定点突变及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 张巍 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期338-340,共3页
目的 :对小鼠抗人TNF αFab基因进行人源化改造 ,并获得人源化Fab段的可溶性表达产物。方法 :应用一步反向PCR法 ,分别对小鼠VH、VL 基因进行定点突变。将突变基因克隆入载体pComb3H并诱导表达。结果 :成功地将鼠抗VH88位Ser突变为Ala ,... 目的 :对小鼠抗人TNF αFab基因进行人源化改造 ,并获得人源化Fab段的可溶性表达产物。方法 :应用一步反向PCR法 ,分别对小鼠VH、VL 基因进行定点突变。将突变基因克隆入载体pComb3H并诱导表达。结果 :成功地将鼠抗VH88位Ser突变为Ala ,VL17位Glu和 18位Lys分别突变为Asp和Arg。成功地构建了人源化Fab的可溶性表达质粒 ,并用Western blot检测到其在上清液中有表达。结论 :得到人源化Fab的可溶性表达产物 。 展开更多
关键词 tnfα 单克隆抗体 定点突变 基因表达
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受体介导TNFα基因转移的实验研究 被引量:1
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作者 陶箭 张国弛 +3 位作者 丁健青 张希衡 李彪如 童善庆 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第1期32-34,共3页
目的检测受体介导基因转移人肿瘤坏死因子α基因的靶向性和表达效率。方法人转铁蛋白同多聚赖氨酸共价交联,盐键合成交联蛋白和外源基因质粒的超分子复合物,对表达转铁蛋白受体的肿瘤细胞株进行β-半乳糖苷酶和人肿瘤环死因子α基因... 目的检测受体介导基因转移人肿瘤坏死因子α基因的靶向性和表达效率。方法人转铁蛋白同多聚赖氨酸共价交联,盐键合成交联蛋白和外源基因质粒的超分子复合物,对表达转铁蛋白受体的肿瘤细胞株进行β-半乳糖苷酶和人肿瘤环死因子α基因转移。结果检测到外源基因表达;转染人肿瘤坏死因子α基因后细胞上清液检测到一过性人肿瘤坏死因子α活性升高。结论受体介导基因转移具有良好的靶向性,但表达效率低。 展开更多
关键词 转铁蛋白 实验研究 基因转移 肿瘤坏死因子α
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