肾移植急性排斥大鼠的CD4^+CD25^+调节性T细胞水平及相关调节因子的表达变化 被引量：7

1

作者 袁树珍 许云鹏 +5 位作者 隋晓露 顾凤娟 张艾莎 张燕子 谢婷妃 陈继红 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期295-301,共7页

目的观察肾移植术后急性排斥大鼠外周血中叉头状转录因子3(Foxp3)阳性的CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+ Treg细胞)水平及其T盒转录因子TBX1(TBX1)和肌细胞特异性增强因子2D(MEF2D)表达变化,结合肾功能、血浆白细胞介素10(IL-10)、... 目的观察肾移植术后急性排斥大鼠外周血中叉头状转录因子3(Foxp3)阳性的CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+ Treg细胞)水平及其T盒转录因子TBX1(TBX1)和肌细胞特异性增强因子2D(MEF2D)表达变化,结合肾功能、血浆白细胞介素10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)及肾组织病理变化,探讨其中的调控机制。方法建立大鼠肾移植模型,分为急性排斥组(急排组)和非急性排斥(非急排)组。测定两组大鼠肾功能(尿素氮和血肌酐);ELISA法测定血浆中IL-10和IFN-γ;HE染色法观察肾脏组织病理。应用流式细胞术分选测定CD4^+CD25^+ Treg细胞;实时定量PCR测定CD4^+CD25^+ Treg细胞的Foxp3、TBX1和MEF2D mRNA表达;Western印迹测定CD4^+CD25^+ Treg细胞Foxp3、TBX1和MEF2D蛋白表达。结果与非急排组相比,急排组尿素氮和血肌酐均升高,IL-10下降,IFN-γ升高(均P<0.05)。急排组肾组织病理出现肾小球肥大和系膜细胞显著增生,毛细血管增生和中性粒细胞浸润;肾间质明显水肿和肾小管坏死,伴有淋巴细胞、浆细胞及中性粒细胞浸润。与非急排组相比,急排组外周血CD4^+CD25^+ Treg细胞比例降低(4.50%±0.50%比5.74%±1.96%,P<0.05),CD4^+CD25^+ Treg细胞Foxp3、MEF2D的mRNA和蛋白表达均降低(均P<0.01),TBX1的mRNA和蛋白表达均升高(均P<0.01)。结论肾移植急性排斥大鼠免疫耐受细胞CD4^+CD25^+ Treg细胞减少,Foxp3、MEF2D、IL-10表达降低,TBX1、IFN-γ表达增强,共同促进肾移植急性排斥反应的发生发展,加重肾损伤。 展开更多

关键词 移植物排斥 T淋巴细胞 叉头转录因子类 T-盒域蛋白质类 MEF2转录因子

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大蒜新素对变应性鼻炎大鼠转录因子T-bet和GATA-3表达的影响 被引量：5

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作者 陈冬 李玉晓 +3 位作者 李添应 文卫平 史剑波 何晓光 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期133-138,共6页

目的探讨大蒜新素对大鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）模型血淋巴细胞中转录因子T-bet和GATA-3表达的影响。方法健康SD大鼠30只，雌雄各半，以随机数字表法分为3组，即药物组、对照组和空白组，每组10只。药物组用卵清蛋白（oval... 目的探讨大蒜新素对大鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）模型血淋巴细胞中转录因子T-bet和GATA-3表达的影响。方法健康SD大鼠30只，雌雄各半，以随机数字表法分为3组，即药物组、对照组和空白组，每组10只。药物组用卵清蛋白（ovalbumin，OVA）辅以氢氧化铝和灭活百日咳杆菌佐剂建立AR模型，成功后每日腹腔注射大蒜新素0．4ml，剂量为25mg／（kg·d），连用10d。对照组造模方法同药物组，成功后每日腹腔注射生理盐水0．4ml，连用10d。空白组除无OVA致敏和激发外，其他处置方法同对照组。采集心脏血2ml，分离出血浆和淋巴细胞，采用酶联免疫吸附（ELISA）方法检测血浆中白细胞介素（interleukin，IL）4和1干扰素（interferon，IFN）的含量，采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测淋巴细胞中转录因子T—bet和GATA-3的表达，并应用半定量方法计算二者的相对表达量。结果药物组、对照组和空白组大鼠血浆中IL4的水平（x±s，以下同）分别是（6．292±1．734）、（14．252±1．971）、（4．916±0．600）pg／ml；IFN-γ的水平分别是（24．338±2．375）、（12．364±1．749）、（16．136±2．012）pg／ml。药物组血浆中IL4的水平低于对照组，差异有统计学意义（t=4．23，P〈0．05），与空白组比较，差异无统计学意义（t=1．01，P〉0．05）。药物组血浆中IFN-γ的水平高于对照组和空白组，差异有统计学意义（t值分别为4．61、5．79，P值均〈0．05）。对照组血浆中IFN-γ的水平和空白组比较，差异无统计学意义（t=1．17，P〉0．05）。药物组、对照组和空白组血淋巴细胞中转录因子GATA-3相对表达量的中位数（M）分别是0．826、1．029和0．474，3组间差异有统计学意义（χ2=6．599，P=0．019）；转录因子T—bet的相对表达量中位数（M）分别为1．245、0．280和0．544，3组间差异有统计� 展开更多

关键词 疾病模型 动物 鼻炎 变应性 常年性 烯丙化合物 二硫化物类 T盒域蛋 白质类 GATA-3转录因子

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外源性视黄酸对斑马鱼Tbx1基因的影响 被引量：3

3

作者 张立凤 桂永浩 +6 位作者 钟涛 王跃祥 钱林溪 董永新 蒋璆 孙淑娜 宋后燕 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期267-271,共5页

目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏发育的影响,探讨视黄酸对 Tbx1基因在斑马鱼胚胎发育中表达的影响。方法采用化学遗传学的方法在斑马鱼胚胎发育至胚胎受精后12.5 h时给予5×10^(-8)mol/L 和10^(-7)mol/L 外源性视黄酸处理1.5 h。... 目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏发育的影响,探讨视黄酸对 Tbx1基因在斑马鱼胚胎发育中表达的影响。方法采用化学遗传学的方法在斑马鱼胚胎发育至胚胎受精后12.5 h时给予5×10^(-8)mol/L 和10^(-7)mol/L 外源性视黄酸处理1.5 h。采用胚胎整体原位杂交和实时荧光定量 PCR 方法观察外源性视黄酸对斑马鱼胚胎发育过程中 Tbx1基因时空表达模式的影响。结果整体原位杂交显示 Tbx1在斑马鱼胚胎发育过程中主要在咽弓、心脏和耳囊表达。在12.5 hpf 给予斑马鱼胚胎5×10^(-8)mol/L 或10^(-7)mol/L 视黄酸处理1.5 h,可以导致 Tbx1基因在咽弓和心脏的表达明显下调。与5×10^(-8)mol/L 视黄酸处理组相比,10^(-7)mol/L 视黄酸对 Tbx1基因表达的抑制作用更为明显。结论视黄酸可以调节斑马鱼发育过程 Tbx1基因的表达,且这种调控作用具有明显的剂量依赖性。视黄酸是导致胚胎发育过程中 Tbx1表达异常的主要非遗传因素,并可进一步导致咽弓和心脏的发育异常。 展开更多

关键词 维甲酸 斑马鱼 鳃区 心脏 T盒域蛋白质类

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实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎中T-bet的表达及意义 被引量：10

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作者 褚利群 杨培增 +5 位作者 李兵 周红颜 黄祥坤 张锐 俞琼 纪淑兴 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2004年第3期172-174,共3页

目的　研究实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎 (EAU )中 T- bet的表达及意义。　方法　L ewis大鼠 2 8只 ,用视网膜 S抗原与 Freund完全佐剂免疫 2 4只大鼠以诱导 EAU模型 ,另外 4只作为正常对照。免疫组大鼠分别于免疫后 7、12、15、2 1... 目的　研究实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎 (EAU )中 T- bet的表达及意义。　方法　L ewis大鼠 2 8只 ,用视网膜 S抗原与 Freund完全佐剂免疫 2 4只大鼠以诱导 EAU模型 ,另外 4只作为正常对照。免疫组大鼠分别于免疫后 7、12、15、2 1d被处死 ,取所有大鼠的眼球和脾脏 ,固定后制作眼组织平片和眼球及脾脏的石蜡连续切片。使用单克隆抗 T- bet和 CD4的抗体 ,通过免疫组织化学细菌蛋白过氧化物酶法在上述组织平片及切片上进行免疫组织化学单染和双染色 ,在光学显微镜下观察并计数阳性细胞 ,数据经 SPSS11.0统计学软件分析。　结果　正常眼和脾组织中均见少量 T- bet阳性细胞 ;免疫后 7d,虹膜、视网膜及脾脏中 T- bet的表达增加 ,免疫后 15 d达高峰 ,免疫后 2 1d表达降低 ,但仍高于正常组。免疫组织化学双染色显示 ,T- bet阳性细胞中多数为 CD4 + 。　结论　T- bet在 EAU的发病中起着重要作用 ,其作用可能是通过激活辅助性 T淋巴细胞 1而实现的。 展开更多

关键词 实验 自身免疫性葡萄膜视网膜炎 T-BET 免疫组织化学 THL细胞 TH2细胞

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F框/WD-40域蛋白7在乳腺癌预后预测中的价值及功能研究

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作者 罗飞 罗宁 +1 位作者 李晓宇 贾红燕 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第6期1265-1269,共5页

目的探究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在乳腺癌(BC)发生发展中的临床意义及功能。方法利用免疫组织化学技术对BC组织芯片中FBXW7的表达进行检测,受试者工作特征曲线(ROC)曲线确定FBXW7表达的阈值,使用Kaplan-Meier生存分析和比例风险回归模... 目的探究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在乳腺癌(BC)发生发展中的临床意义及功能。方法利用免疫组织化学技术对BC组织芯片中FBXW7的表达进行检测,受试者工作特征曲线(ROC)曲线确定FBXW7表达的阈值,使用Kaplan-Meier生存分析和比例风险回归模型(COX)预测FBXW7表达与患者预后的关系。向BC细胞系MCF7和MDA-MB-231转染pcDNA3-FBXW7wt质粒,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)验证过表达效率。通过噻唑蓝(MTT)法和集落形成实验检测细胞增殖;可穿透性细胞培养小室检测细胞迁移。统计学方法分别采用独立样本t检验和方差分析。结果FBXW7在BC组织中的表达低于癌旁正常组织(8.537±0.536比9.619±0.360,t=21.080,P<0.05),低表达与BC患者预后差相关(104.143比133.714,χ^(2)=6.146,P<0.05),且在年龄≥60岁(90.333比113.615,χ^(2)=4.747,P<0.05)、右乳为病灶部位(107.150比137.727,χ^(2)=4.685,P<0.05)、病理T2(92.700比114.760,χ^(2)=4.063,P<0.05)、有淋巴结转移(104.083比132.211,χ^(2)=4.124,P<0.05)、TNMⅢ期(87.062比130.333,χ^(2)=5.494,P<0.05)、雌激素受体(ER)阳性(97.381比133.478,χ^(2)=4.902,P<0.05)和人表皮生长因子受体2(Her-2)阳性(93.181比131.727,χ^(2)=6.219,P<0.05)的BC人群中,FBXW7低表达患者的总生存期明显短于FBXW7高表达患者。单因素[比值比(OR):3.374;95%可信区间(CI):1.213~9.382,P<0.05]和多因素COX分析(OR:3.335;95%CI:1.062~10.476;P<0.05),结果显示FBXW7是BC患者生存状态的危险因素。MCF7和MDA-MB-231细胞FBXW7过表达效率分别为67.129倍[(0.998±0.055)比(66.972±0.423),t=78.560,P<0.05]和39.523倍[(0.998±0.050)比(39.456±0.210),t=54.640,P<0.05]。过表达FBXW7可显著抑制BC细胞系MCF7和MDA-MB-231细胞的增殖[MCF7组第4天为(1.639±0.045)比(1.141±0.842),t=10.400,P<0.05;MDA-MB-231组第2天为(0.519±0.030)比(0.410±0.025),t=5.447,P<0.05;第3天为(1.416±0.68)比(1.129±0.022),t=7.939,P<0.05;第4天为(1.910±0.071)比(1.247±0.069),t=13.310,P<0.05]、克隆形成[(211 展开更多

关键词 F框/WD-40域蛋白7 乳腺癌 预后 抑癌基因

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FTO调控FBXW7的m6A甲基化修饰促进宫颈癌放化疗抵抗的机制研究 被引量：1

6

作者 高辉 曲冬颖 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第3期232-236,242,共6页

目的探讨肥胖相关蛋白(obesity-associated protein,FTO)和F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)在宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)放化疗抵抗中的作用.方法实时荧光聚合酶链反应(real-tim... 目的探讨肥胖相关蛋白(obesity-associated protein,FTO)和F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)在宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)放化疗抵抗中的作用.方法实时荧光聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western印迹检测CSCC细胞中FTO和FBXW7表达.TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据分析FTO和FBXW7表达及相关性.在CSCC细胞中过表达FTO,免疫沉淀检测FBXW7的mRNA的m6A表达变化.四甲基偶氮唑盐比色法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测FTO和FBXW7在CSCC细胞放化疗抵抗中的作用.结果与人正常宫颈上皮细胞(HUCEC)比较,FTO和FBXW7在CSCC细胞(SiHa,c-33a)中弱表达(P<0.05);FTO调控FBXW7的mRNA的m6A甲基化水平.过表达FTO的CSCC细胞在经过照射和顺铂处理后,细胞存活比例下降,放化疗抵抗减轻(P<0.05);而在此基础上抑制FBXW7,治疗后的细胞存活比例增加,诱导了CSCC放化疗抵抗(P<0.05).结论FTO可以去除FBXW7的m6A甲基化修饰,上调FBXW7的表达,抑制CSCC对放化疗的抵抗.FTO对CSCC恶性表型的影响是通过FBXW7实现的. 展开更多

关键词 宫颈鳞状细胞癌 肥胖相关蛋白 FBXW7 m6A甲基化 放化疗抵抗

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Plk1 PBD蛋白原核表达、分离纯化与活性鉴定 被引量：5

7

作者 陈云雨 刘刚 +1 位作者 张晶 刘晓平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1453-1457,共5页

目的:原核表达保罗样激酶1底物结合域(Polo-like kinase 1 Polo-box domain,Plk1 PBD)蛋白,经分离纯化后进行生物学活性鉴定。方法:以HeLa cDNA为模板经PCR反应扩增Plk1 PBD基因,利用DNA重组技术与pET-28a载体连接构建重组质粒。将重组... 目的:原核表达保罗样激酶1底物结合域(Polo-like kinase 1 Polo-box domain,Plk1 PBD)蛋白,经分离纯化后进行生物学活性鉴定。方法:以HeLa cDNA为模板经PCR反应扩增Plk1 PBD基因,利用DNA重组技术与pET-28a载体连接构建重组质粒。将重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3),经诱导培养后进行Plk1 PBD蛋白原核表达。采用亲和层析方法分离纯化Plk1PBD蛋白后,以酶联免疫吸附测定实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和荧光偏振实验(fluorescence polarization,FP)进行生物学活性鉴定。结果:测序与重组质粒酶切结果表明,成功构建了pET-28a-Plk1 PBD原核表达质粒。SDS-PAGE电泳和Western blot实验证实了Plk1 PBD蛋白的原核表达。ELISA实验和FP实验表明Plk1 PBD蛋白具有良好的生物学活性。结论:成功进行了Plk1 PBD蛋白的原核表达、分离纯化与活性鉴定,为其生物学功能研究及以Plk1 PBD蛋白为靶标的新型抗肿瘤药物发现奠定了基础。 展开更多

关键词 PLK1 PBD蛋白 原核表达 亲和层析 荧光偏振

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喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系 被引量：1

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作者 邝林 赵静 +1 位作者 张静 伦巍巍 《实用癌症杂志》 2023年第5期779-782,共4页

目的探讨喉癌组织中F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)表达与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析83例喉癌患者资料,比较患者癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;分析FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理参数... 目的探讨喉癌组织中F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)表达与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析83例喉癌患者资料,比较患者癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;分析FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理参数的关系;比较不同预后患者FBXW7、SCC-Ag表达的阳性率。结果患者癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%(P<0.05)。单因素分析显示,癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达具有密切联系(P<0.05);随访6个月内预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率(29.63%)高于预后不良患者(10.34%),癌组织SCC-Ag表达阳性率(62.96%)低于预后不良患者(89.66%)(P<0.05)。结论喉癌组织中FBXW7表达阳性率明显降低,SCC-Ag阳性表达率显著升高。喉癌患者癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况均与其癌组织FBXW7、SCC-Ag表达关系密切,且癌组织FBXW7、SCC-Ag表达对患者预后情况有一定的提示作用。 展开更多

关键词 喉癌组织 F框/WD-40域蛋白7 鳞状细胞癌抗原 临床病理参数 预后

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sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性分析

9

作者 王松凡 阎婷婷 于东 《中国民康医学》 2023年第14期113-116,共4页

目的:分析可溶性程序性死亡受体-配体1(sPD-L1)、三结构域蛋白26(TRIM26)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)与脑胶质瘤术后复发的相关性。方法:回顾性分析2020年1月至2022年2月该院收治的80例脑胶质瘤患者的临床资料,设为研究组,另选取同期80... 目的:分析可溶性程序性死亡受体-配体1(sPD-L1)、三结构域蛋白26(TRIM26)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)与脑胶质瘤术后复发的相关性。方法:回顾性分析2020年1月至2022年2月该院收治的80例脑胶质瘤患者的临床资料,设为研究组,另选取同期80名健康体检者,设为对照组。研究组均行脑胶质瘤切除术治疗,随访6个月后,脑胶质瘤术后复发21例。比较两组和不同病理特征患者术前、术后1个月血清s PD-L1、TRIM26、FBXW7水平,并采用Spearman相关性分析血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性及预测效能。结果:术后1个月,研究组血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平高于对照组,FBXW7水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月,未复发患者血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平低于复发患者,FBXW7水平高于复发患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平与脑胶质瘤术后复发均呈正相关(r>0,P<0.05);血清FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发呈负相关(r<0,P<0.05);术后1个月,受试者工作曲线(ROC)分析结果显示,血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平单项及联合检测预测脑胶质瘤术后复发的AUC分别为0.721、0.799、0.787、0.920,其中联合检测的预测价值最高。结论:血清sPD-L1、TRIM26mRNA与脑胶质瘤术后复发呈正相关,血清FBXW7与脑胶质瘤术后复发呈负相关;血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7单项检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值一般,联合检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值最高。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 复发 可溶性程序性死亡受体-配体1 三结构域蛋白26 F框/WD-40域蛋白7

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FBXW7、SCC在喉癌组织中表达及预后分析 被引量：3

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作者 王剑 周兴玮 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第6期940-946,共7页

目的分析喉癌组织F框/WD40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC)表达特点及其与预后的关系。方法采集84例喉鳞癌患者癌组织标本及20份癌旁组织标本,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(S-P)法测定癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC表达,探... 目的分析喉癌组织F框/WD40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC)表达特点及其与预后的关系。方法采集84例喉鳞癌患者癌组织标本及20份癌旁组织标本,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(S-P)法测定癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC表达,探究两者表达与喉癌病理特点的关系,Kaplan-Meier法分析不同FBXW7、SCC表达喉癌患者预后差异,Cox回归分析筛选预后影响因素。结果喉癌患者癌组织FBXW7阳性率低于癌旁组织,SCC阳性率高于癌旁组织(P<0.05);临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、病理分化程度为低分化、伴淋巴结转移、浸润深度为T3~T4期的喉癌患者癌组织FBXW7阳性率低于临床分期为Ⅰ+Ⅱ期、病理分化程度为中高分化、不伴淋巴结转移、浸润深度为T1~T2期的喉癌患者(P<0.05),SCC阳性率高于以上喉癌患者(P<0.05);喉癌患者累积3年生存率为51.19%,FBXW7阴性患者中位生存时间短于阳性患者,Log-rank检验差异无统计学意义(P>0.05);SCC阳性患者中位生存时间短于阴性患者,Log-rank检验差异无统计学意义(P>0.05);Cox回归分析显示:临床分期、病理分化程度、淋巴结转移、浸润深度、FBXW7、SCC均为影响喉癌生存率的相关因素(P<0.05)。结论喉癌癌组织FBXW7呈低表达、SCC呈过表达,两者均参与喉癌病理进展过程,且与不良预后有关。 展开更多

关键词 喉癌 F框/WD40域蛋白7 鳞状细胞癌抗原 病理 预后

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miR-10a通过FBXW7-ZEB2轴调控非小细胞肺癌肿瘤化疗耐药的动物实验研究

11

作者 任宝恒 丁海斌 +3 位作者 杨栓盈 范志刚 陈旭 陈静 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第13期2431-2435,共5页

目的:通过动物实验,具体探讨微小RNA(mi R-10a)通过含F-框WD重复域蛋白7(FBXW7)-E盒锌指结合蛋白2(ZEB2)轴调控非小细胞肺癌的肿瘤化疗耐药作用。方法:非小细胞肺癌模型小鼠(n=42)随机平分为三组-模型组、mi R-10a组与环磷酰胺组,模型... 目的:通过动物实验,具体探讨微小RNA(mi R-10a)通过含F-框WD重复域蛋白7(FBXW7)-E盒锌指结合蛋白2(ZEB2)轴调控非小细胞肺癌的肿瘤化疗耐药作用。方法:非小细胞肺癌模型小鼠(n=42)随机平分为三组-模型组、mi R-10a组与环磷酰胺组,模型组给予生理盐水0.2 m L腹腔注射,环磷酰胺组给予环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,mi R-10a组给hsa-miR-10a mimics15 mg/kg联合环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,1次/d,持续给药14 d。结果:mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第7 d与第14 d的肿瘤体积低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的瘤体质量低于模型组,抑瘤率高于模型组,mi R-10a组与环磷酰胺组对比差异也有统计学意义(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的肿瘤细胞凋亡指数高于模型组,mi R-10a组高于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的血清FBXW7、ZEB2含量低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的FBXW7、ZEB2 m RNA与蛋白相对表达水平低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。结论:过表达mi R-10a能抑制非小细胞肺癌小鼠的FBXW7-ZEB2轴的激活,抑制血清FBXW7、ZEB2的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡,改善肿瘤化疗耐药性,促进缩小肿瘤体积。 展开更多

关键词 MiR-10a 非小细胞肺癌 小鼠 含F-框WD重复域蛋白7 E盒锌指结合蛋白2 化疗耐药 细胞凋亡

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miR-27a促进胃癌细胞AGS增殖与侵袭及其机制探讨 被引量：1

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作者 杨剑洋 贺德 +2 位作者 李志坚 纪周新 马广念 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第12期2129-2135,共7页

目的:探究miR-27a对胃癌细胞AGS增殖与侵袭能力的影响,并进一步探讨能否靶向调控盐诱导激酶1(salt induce kinase 1,SIK1)和F框/WD_40域蛋白7(F-box and WD_40 repeat domain protein 7,FBXW7)。方法:利用TCGA数据库分析胃癌组织与邻近... 目的:探究miR-27a对胃癌细胞AGS增殖与侵袭能力的影响,并进一步探讨能否靶向调控盐诱导激酶1(salt induce kinase 1,SIK1)和F框/WD_40域蛋白7(F-box and WD_40 repeat domain protein 7,FBXW7)。方法:利用TCGA数据库分析胃癌组织与邻近正常胃组织之间miR-27a表达水平的差异;利用脂质体Lipofectamine^(TM)2000将miR-27a mimics和miR-27a NC转入AGS细胞中,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-27a的表达,CCK-8实验检测细胞增殖活力,细胞平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。生物信息学预测miR-27a的靶基因,通过蛋白印迹实验验证miR-27a对SIK1的调控作用;通过双荧光酶素报告基因、Real-time PCR和蛋白印迹实验验证miR-27a对FBXW7的调控作用。利用TCGA数据库分析胃癌组织与邻近正常胃组织之间FBXW7 mRNA表达水平的差异,分析FBXW7 mRNA表达水平与胃癌患者5年生存率的关系。结果:TCGA数据库分析表明miR-27a在胃癌组织中的表达高于邻近正常胃组织。Real-time PCR表明miR-27a在模拟物组中的表达较对照组高,细胞功能实验表明过表达miR-27a能促进胃癌细胞的增殖与侵袭能力;TargetScan预测SIK1为miR-27a的潜在靶基因,蛋白印迹实验表明SIK1不能被miR-27a靶向负性调控。TargetScan预测FBXW7为miR-27a的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因结果表明miR-27a可抑制FBXW73’UTR双荧光素酶活性,突变其结合位点后抑制作用消失。Real-time PCR和蛋白印迹实验表明过表达miR-27a后FBXW7的蛋白与mRNA表达均明显下调。TCGA数据库分析表明胃癌组织中FBXW7 mRNA的表达较邻近正常胃组织明显下降,FBXW7 mRNA表达低的组胃癌患者5年生存率更低。结论:过表达miR-27a能增强胃癌细胞AGS的增殖与侵袭能力,可能是通过负性调控FBXW7发挥的促瘤作用。在胃癌细胞AGS中,SIK1不能被miR-27a负性调控,可能被FBXW7靶向介导泛素化降解。 展开更多

关键词 miR-27a TCGA 盐诱导激酶1 F框/WD_40域蛋白7 胃癌细胞 增殖 侵袭

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F框／WD-40域蛋白7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量：1

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作者 余海 凌亭生 +3 位作者 施瑞华 束庆文 李杨 檀祝利 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期347-351,共5页

目的检测F框／WD-40域蛋白7（FBXW7）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）组织中的表达及临床意义，初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食... 目的检测F框／WD-40域蛋白7（FBXW7）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）组织中的表达及临床意义，初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食管上皮内瘤变组织中的表达情况，采用Western blot法及半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中FBXW7蛋白和mRNA表达水平，分析FBXW7表达与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌组织、癌旁正常组织、食管低级别上皮内瘤变组织和高级别上皮内瘤变组织中，FBXW7蛋白的阳性表达率分别为40．0％（36／90）、85．0％（17／20）、77．3％（17／22）和33．3％（6／18），差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7蛋白表达水平分别为0．283±0．055和0．657±0．091，差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7 mRNA相对表达水平分别为0．863±0．962和1．813±0．512，差异有统计学意义（P〈0．05）。单因素分析显示，FBXW7蛋白表达与肿瘤TNM分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关（均P〈0．05）。Cox多因素分析显示，仅淋巴结转移为食管鳞癌患者的独立预后因素（P〈0．05）。90例患者中，FBXW7蛋白阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为67．6％和39．3％，差异有统计学意义（P=0．01）。结论FBXW7mRNA及其蛋白在食管鳞癌组织和食管高级别上皮内瘤变组织中的表达显著减低，且其低表达与食管鳞癌患者的不良预后密切相关。作为一种肿瘤抑制基因，FBXW7可能对食管鳞癌的发生、发展和转移起重要作用，有可能成为反映食管鳞癌患者病情严重程度及判断其预后的重要分子生物学标志物。 展开更多

关键词 食管肿瘤 F框/WD-40域蛋白7 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 预后

原文传递

叉头框K1-卷曲螺旋结构域蛋白43轴对大肠癌细胞迁移和上皮-间充质转化的影响

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作者 谢晓 李好朝 +3 位作者 陈炳合 彭朝阳 司剑炜 曾宪清 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2313-2316,共4页

目的观察叉头框K1(FOXK1)-卷曲螺旋结构域蛋白43(CDC43)轴对大肠癌细胞迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2017年9月到2019年9月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的103例大肠癌和对应的癌旁组织作为研究对象,采用免疫组... 目的观察叉头框K1(FOXK1)-卷曲螺旋结构域蛋白43(CDC43)轴对大肠癌细胞迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2017年9月到2019年9月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的103例大肠癌和对应的癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析FOXK1蛋白表达水平;采用规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9系统(CRISPR-Cas9)技术在SW480细胞中建立FOXK1敲除细胞系(FOXK1 KO组)和对照细胞系(对照组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞增殖;采用Tanswell分析两组细胞迁移;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组细胞EMT。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织FOCK1表达水平(40.32±6.90)比较,大肠癌组织FOXK1蛋白表达水平显著增高(159.21±13.85),差异有统计学意义(t=4.918,P<0.05)。与对照组细胞FOXK1蛋白表达水平(1.09±0.21)比较,FOXK1 KO组细胞FOXK1蛋白表达水平显著下降,差异有统计学意义(t=5.012,P<0.05)。与对照组细胞吸光度值(1.94±0.28)比较,FOXK1 KO组细胞吸光度值显著下调(1.07±0.19),差异有统计学意义(t=3.162,P<0.05)。Transwell结果显示,与对照组细胞迁移数量[(95.28±10.20)个]比较,FOXK1 KO组细胞迁移数量显著下降[(48.39±8.21)个],差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。与对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(0.26±0.08)比较,FOXK1 KO组细胞E-cadherin表达水平显著增高(1.05±0.11),差异有统计学意义(t=3.001,P<0.05)。与对照组细胞间质细胞标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)(0.78±0.13)和波形蛋白(Vimentin)(1.15±0.19)表达水平比较,FOXK1 KO组细胞N-cadherin(0.31±0.11)和Vimentin表达水平显著下调(0.39±0.14),差异有统计学意义(t=2.891、2.318,P<0.05)。与对照组细胞CCDC43表达水平(1.20±0.22)比较,FOXK1 KO组细胞CCDC43蛋白表达水平显著下调(0.57±0.18),差异有统计学意义(t=2.581,P<0.05)。结论FOXK1在大肠癌中高表达,通过调控CCDC 展开更多

关键词 叉头框K1 卷曲螺旋结构域蛋白43 大肠癌 迁移 上皮-间充质转化

原文传递

FBXW7/MCM7信号轴介导肝癌细胞增殖的研究

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作者 李英 王兴 +3 位作者 李永宁 刘鹏 刘松柏 潘耀振 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期191-197,共7页

目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7... 目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7的表达;采用Western blot检测FBXW7对MCM7蛋白表达的影响,CCK-8实验检测肝癌细胞的增殖活性,EdU细胞增殖检测分析肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验分析肝癌细胞的集落形成能力。结果 在MHCC-97H细胞中,FBXW7与MCM7存在互作关系:过表达FBXW7抑制了MCM7的蛋白表达水平、并抑制了肝癌MHCC-97H细胞的增殖(P <0.05),在过表达FBXW7的基础上增加MCM7的表达后,细胞增殖能力提高(P <0.05);下调FBXW7后细胞中MCM7表达增加、细胞增殖能力增强(P <0.05),而下调FBXW7的同时干扰MCM7表达后,细胞增殖能力减弱(P <0.05)。结论 FBXW7能抑制肝癌细胞增殖,其机制与负向调节肝癌细胞中促癌蛋白MCM7的表达水平有关。 展开更多

关键词 肝癌 F-box和WD重复结构域蛋白7 微小染色体维持蛋白-7 细胞增殖 MHCC-97H细胞

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UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响 被引量：6

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作者 孙迪 沈宜 +3 位作者 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期138-140,144,共4页

目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW... 目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。 展开更多

关键词 UO-126 宫颈癌细胞株(HeLa细胞) FBW7 MAPK

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FBXW7和RhoA/Rho激酶蛋白表达参与糖尿病大鼠心肌纤维化 被引量：4

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作者 申屠路媚 卢敏 +2 位作者 王燕 李杰 牟艳玲 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期1-8,共8页

目的探究F框/含蛋白7 WD-40域蛋白(FBXW7)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)的表达与糖尿病心肌纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,采用一次性ip链脲佐菌素60 mg·kg^(-1)建... 目的探究F框/含蛋白7 WD-40域蛋白(FBXW7)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)的表达与糖尿病心肌纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,采用一次性ip链脲佐菌素60 mg·kg^(-1)建立1型糖尿病大鼠模型,分别于2,4,8,12和16周进行检测。HE染色观察大鼠心脏组织形态变化;Masson染色和测定心肌羟脯氨酸(HYP)含量观察心肌胶原沉积程度;ELISA法检测血清中FBXW7,转化生长因子β_1(TGF-β_1)和结缔组织生长因子(CTGF)的含量;Western蛋白印迹和免疫组化法检测心肌中FBXW7,RhoA和ROCK1蛋白的表达。结果显微镜下可见糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞变性、坏死和纤维组织增生等。与正常对照组相比,4～16周时,模型组大鼠心肌组织中胶原沉积面积和胶原含量显著升高(P<0.05,P<0.01),呈递增趋势;2～4周时,大鼠血清中FBXW7含量显著增加(P<0.01),第8周时降低,但仍显著高于正常对照组(P<0.01);8～16周时,大鼠血清中TGF-β_1和CTGF含量逐渐升高(P<0.01)。Western蛋白印迹和免疫组化结果显示,模型组大鼠心肌RhoA和ROCK1蛋白表达在各时间点均显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);2～12周模型组大鼠心肌FBXW7表达较正常对照组显著升高(P<0.01,P<0.01),第4周表达最高,8～16周表达下降,与时间呈负相关(r=-0.988,P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论 FBXW7和RhoA/Rho激酶参与糖尿病大鼠心肌纤维化的发生发展,可能成为治疗糖尿病心肌病的靶点。 展开更多

关键词 糖尿病心肌病 心肌纤维化 F框/含蛋白7 WD-40域蛋白 RhoA蛋白家族 Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶

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敲低RBX1通过下调PHF5A抑制胰腺癌细胞增殖,迁移和侵袭并促进凋亡

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作者 张菁 阎优优 +1 位作者 徐栋超 张博 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1314-1322,共9页

目的:研究环盒蛋白1(ring-finger protein 1,RBX1)对胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用及其潜在的作用机制。方法:利用基因表达谱交互式分析网站(gene expression profile interactive analysis ... 目的:研究环盒蛋白1(ring-finger protein 1,RBX1)对胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用及其潜在的作用机制。方法:利用基因表达谱交互式分析网站(gene expression profile interactive analysis web⁃site,GEPIA),实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)、Western blot检测RBX1在PAAD组织、细胞中的表达和预后价值。使用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞克隆形成能力实验、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)、细胞划痕实验、Transwell实验检测RBX1敲低对胰腺癌-1(pancreatic carcinoma-1,PANC-1)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。通过LinkedOmics网站研究PAAD中RBX1和PHD锌指结构域蛋白5A(plant homodomain finger-like domaincontaining protein 5A,PHF5A)的相关性。qRT-PCR和Western blot检测RBX1敲低后PHF5A的表达,进行功能拯救实验。结果:RBX1在PAAD组织和细胞系中高表达,与不良预后相关(P<0.05)。RBX1敲低抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05)。RBX1和PHF5A在PAAD中具有相关性(r=0.692),且RBX1正向调控PHF5A表达(P<0.05)。功能拯救实验表明PHF5A过表达部分逆转了RBX1敲低对PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用(P<0.05)。结论:RBX1敲低通过下调PHF5A表达抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。 展开更多

关键词 环盒蛋白1 PHD锌指结构域蛋白5A 胰腺癌 增殖 凋亡 侵袭迁移

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泛素连接酶FBW7的肿瘤抑制作用和机制 被引量：2

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作者 郭晓强 沈永青 +1 位作者 王越甲 段相林 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期998-1006,共9页

泛素-蛋白酶体系统是一个主要的蛋白质降解调节通路,在细胞分裂过程中发挥着重要作用,其成员在肿瘤中频繁存在着表达异常现象.FBW7又名AGO、hCDC4、FBXW7和SEL-10,是一种拥有7串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶(E3)... 泛素-蛋白酶体系统是一个主要的蛋白质降解调节通路,在细胞分裂过程中发挥着重要作用,其成员在肿瘤中频繁存在着表达异常现象.FBW7又名AGO、hCDC4、FBXW7和SEL-10,是一种拥有7串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶(E3)复合物的底物识别亚基发挥作用.FBW7是一种肿瘤抑制蛋白,其基因在多种肿瘤包括直肠癌、胃癌、卵巢癌和白血病中存在着基因突变或缺失.FBW7可直接结合和靶向作用多种转录激活因子或原癌基因,如周期蛋白E、c-Myc、c-Jun、Notch、MCL1、KLF5和mTOR等并对其进行泛素化修饰和随后的26S蛋白酶体降解.肿瘤抑制蛋白FBW7的研究对肿瘤发生机制的理解具有重要意义,同时也为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点.本文综述了FBW7的特征、肿瘤抑制作用及机制. 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体系统 泛素连接酶 FBW7 肿瘤抑制蛋白

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RSV感染气液相界面培养人支气管上皮细胞模型的建立及其对HMGB1和pMLKL表达的影响

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作者 王娟 廖焕金 +2 位作者 李延宁 戈伊芹 李佳 《检验医学》 CAS 2022年第2期177-182,共6页

目的构建呼吸道合胞病毒(RSV)感染气液相界面(ALI)培养的人支气管上皮细胞(hBEC)模型,为深入研究呼吸道病毒致病机制提供更接近体内环境的细胞模型;通过分析RSV感染对高迁移率族蛋白1(HMGB1)和磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(pMLKL)表... 目的构建呼吸道合胞病毒(RSV)感染气液相界面(ALI)培养的人支气管上皮细胞(hBEC)模型,为深入研究呼吸道病毒致病机制提供更接近体内环境的细胞模型;通过分析RSV感染对高迁移率族蛋白1(HMGB1)和磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(pMLKL)表达的影响,探讨RSV感染损伤支气管上皮的致病机制。方法将hBEC接种到Transwell膜上,进行液体浸没式培养,细胞汇合度达100%后转ALI培养,倒置显微镜观察细胞生长状态。细胞分化成熟后按照以下分组分别感染RSV病毒:6 h对照组,6 h感染复数(MOI)1.0组,6 h MOI 3.0组,24 h对照组,24 h MOI 1.0组,24 h MOI 3.0组。每组3个复孔。通过免疫荧光染色确认RSV感染效果和RSV感染对细胞核蛋白HMGB1和pMLKL表达的影响。结果经细胞扩展期液体浸没式培养4~10 d后,细胞汇合度达100%。转ALI培养约4周后,细胞条索状分布越来越清晰,且分泌肉眼可见的黏液,形成黏液层,将Transwell膜石蜡包埋切片,得到典型的假复层上皮HE染色结果。经抗RSV抗体免疫荧光染色确认,MOI为3.0感染24 h RSV病毒成功感染细胞;抗HMGB1和抗pMLKL免疫荧光双染色结果显示,该感染条件下,细胞核内出现粉色荧光[为蓝色4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和红色HMGB1荧光Merge结果],证实RSV感染后出现HMGB1核表达;而RSV感染前后均未见pMLKL表达。结论通过在Transwell膜上液体浸没式扩展培养和ALI分化培养,可获得分化良好的hBEC,且能较长时间维持其形态及功能,可为呼吸道病毒感染及其他常见呼吸道疾病研究提供更接近体内环境的细胞模型。在MOI 3.024 h条件下,RSV成功感染该细胞模型,并引起损伤相关分子蛋白HMGB1核表达。 展开更多

关键词 人支气管上皮细胞 气液相界面培养 呼吸道合胞病毒 高迁移率族蛋白1 磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域

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