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低氧诱导因子-1α去类泛素化修饰降低子宫内膜癌干细胞干性维持并增加对化疗敏感性的研究 被引量:7
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作者 袁俐 姜忠敏 +4 位作者 陈旭红 边希云 李艳霞 马晓芳 刘晓智 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第45期3579-3582,共4页
目的通过诱导低氧诱导因子(HIF)-1α蛋白去类泛素化修饰降低子宫内膜癌干细胞的干性维持潜能,并增加其对化疗药物的敏感性。方法利用慢病毒质粒介导基因转染沉默KLE子宫内膜癌细胞泛素载体蛋白9(Ubc9)表达,免疫印迹方法检测Ubc9... 目的通过诱导低氧诱导因子(HIF)-1α蛋白去类泛素化修饰降低子宫内膜癌干细胞的干性维持潜能,并增加其对化疗药物的敏感性。方法利用慢病毒质粒介导基因转染沉默KLE子宫内膜癌细胞泛素载体蛋白9(Ubc9)表达,免疫印迹方法检测Ubc9、小泛素相关修饰蛋白(SUMO)-1和HIF-1α蛋白表达水平;96孔板中培养并计算肿瘤干细胞克隆形成率及克隆球直径;流式细胞周期术检测细胞周期变化;MTT细胞毒性实验和流式细胞凋亡方法检测Ubc9沉默对子宫内膜癌干细胞对化疗药物顺铂的治疗敏感性。结果免疫印迹结果显示,Ubc9基因沉默效果良好,共价结合状态的SUMO-1及HIF-1α蛋白水平明显下降(P〈0.05);Ubc9基因沉默使子宫内膜癌干细胞克隆形成率由(31.61±5.29)%下降至(11.42±3.07)%,同时细胞周期由G1向G2期后移,顺铂IC50由44.37 mg/L下降至7.39 mg/L,细胞凋亡率由(26.22±4.03)%下降至(41.59±5.37)%。结论通过沉默Ubc9基因表达能够诱导HIF-1α蛋白去SUMO化修饰,进而降低子宫内膜癌干细胞干性维持能力,并增强其化疗敏感性,为未来子宫内膜癌的基因治疗提供了新的参考和借鉴。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 肿瘤干细胞 小泛素相关修饰蛋白 顺铂 诱导低氧诱导因子-1α
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大鼠未羧化骨钙素融合蛋白的表达纯化及活性鉴定 被引量:2
2
作者 高璟英 任乐乐 +4 位作者 丁亚琴 钟向琴 白涛 刘云峰 章毅 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期806-809,共4页
目的研究表达和纯化大鼠未羧化骨钙素融合蛋白并鉴定其活性。方法将大鼠的骨钙素(BGLAP)基因克隆到p Sumo-Mut表达载体中,构建小泛素相关修饰物-骨钙素质粒(p Sumo-BGLAP)并进行质粒酶切及测序鉴定。质粒在大肠杆菌的表达系统中转化后,... 目的研究表达和纯化大鼠未羧化骨钙素融合蛋白并鉴定其活性。方法将大鼠的骨钙素(BGLAP)基因克隆到p Sumo-Mut表达载体中,构建小泛素相关修饰物-骨钙素质粒(p Sumo-BGLAP)并进行质粒酶切及测序鉴定。质粒在大肠杆菌的表达系统中转化后,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),11℃低温诱导方法,表达出小泛素相关修饰物-骨钙素(Sumo-BGLAP)融合蛋白。融合蛋白通过Ni亲和纯化方法被纯化,通过胰岛素分泌实验被鉴定生物活性。结果质粒的酶切及测序结果显示与目的基因的序列和蛋白分子量吻合,表明质粒p Sumo-BGLAP构建成功。经转化、诱导和纯化后较高纯度的Sumo-BGLAP融合蛋白被获得。胰岛素分泌实验结果显示,16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖下,胰岛素分泌为(37.64±3.80)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.03 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(63.91±4.67)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.3 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(68.47±5.83)μU·L^(-1)(均P<0.01)。结论大鼠未羧化骨钙素的融合蛋白被成功表达和纯化,并且有生物活性,能用于进一步研究其对葡萄糖代谢的调节作用。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 骨钙素 原核表达 胰岛素分泌
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SUMO化修饰在恶性血液病中的意义
3
作者 胡静宇 陈燕 《临床血液学杂志》 CAS 2014年第5期745-749,共5页
1 SUMO修饰简述 1.1 SUMO分子组成 小泛素相关修饰蛋白(small-ubiquitin related modifier,SUMO)是一种广泛存在于真核生物体内且在生物进化过程中高度保守的一类类泛素蛋白,由大约98个氨基酸残基组成。在脊椎动物中,细胞主要表达3... 1 SUMO修饰简述 1.1 SUMO分子组成 小泛素相关修饰蛋白(small-ubiquitin related modifier,SUMO)是一种广泛存在于真核生物体内且在生物进化过程中高度保守的一类类泛素蛋白,由大约98个氨基酸残基组成。在脊椎动物中,细胞主要表达3种SUMO分子:SUMO-1,SUMO-2和SUMO-3。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 SUMO化修饰 恶性血液病
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SUMO化反应在肾脏疾病中的作用探索
4
作者 朱冰冰 王伟铭 陈楠 《国际内科学杂志》 CAS 2007年第12期732-735,739,共5页
小泛素相关修饰物(SUMO)与靶蛋白的共价结合是一种真核基因表达的翻译后加工形式。SU-MO化能够使蛋白质更加稳定,进而调节许多关键的细胞活动,如核运输、信号传递、凋亡、细胞周期调控以及基因表达的调控等。此外SUMO化还可通过过氧化... 小泛素相关修饰物(SUMO)与靶蛋白的共价结合是一种真核基因表达的翻译后加工形式。SU-MO化能够使蛋白质更加稳定,进而调节许多关键的细胞活动,如核运输、信号传递、凋亡、细胞周期调控以及基因表达的调控等。此外SUMO化还可通过过氧化物酶体增殖物激活受体-γ、核转录因子-κB及转化生长因子-β依赖的途径参与抗炎和致纤维化过程,本文就这一机制可能在肾脏疾病中发挥的作用作一综述。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ 核转录因子-ΚB 转化生长因子-β肾脏疾病
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糖尿病微血管病SUMO基因163 A/G多态性的相关性研究 被引量:1
5
作者 陈思娇 李红燕 +3 位作者 郭英华 杨红艳 朱贺 宋今丹 《心血管康复医学杂志》 CAS 2010年第5期475-478,共4页
目的:探讨小泛素样修饰蛋白(SUMO)基因163A/G多态性与糖尿病微血管病变相关性。方法:运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对30例2型糖尿病(T2DM)患者[正常白蛋白尿(DM0)组10例,微量白蛋白尿(DM1)组10例,大量白蛋白尿(DM2)组10例... 目的:探讨小泛素样修饰蛋白(SUMO)基因163A/G多态性与糖尿病微血管病变相关性。方法:运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对30例2型糖尿病(T2DM)患者[正常白蛋白尿(DM0)组10例,微量白蛋白尿(DM1)组10例,大量白蛋白尿(DM2)组10例]和10例健康对照者(NC)的SUMO基因163A/G多态性进行检测,并比较各组间基因型频率、等位基因频率及相关临床指标。结果:本组实验人群中SUMO基因163位点存在3种基因型,即AA型、GA型和GG型。NC组与T2DM组各基因型和等位基因频率无显著差异(x2=2.231,P=0.121;x2=0.015,P=0.906);DM组(DM1+DM2)的GA基因型频率高于DM0组(x2=4.454,P=0.038);DM1组与DM2组基因型和等位基因频率无统计学差异(x2=0.041,P=0.973;x2=0.123,P=0.683)。Logistic回归分析显示SUMO基因GA基因型(OR=2.31,P<0.05)与糖尿病肾病相关。结论:SUMO基因GA基因型可能是糖尿病微血管病发生的危险因素。 展开更多
关键词 糖尿病血管病变 基因 小泛素相关修饰蛋白质类
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核因子-κB信号通路中小泛素样修饰蛋白与2型糖尿病的关系 被引量:11
6
作者 郭英华 陈思娇 宋今丹 《医学研究生学报》 CAS 2011年第5期538-541,共4页
小泛素样修饰蛋白化是通过一系列小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)酶介导的生化级联反应将SUMO共价结合于靶蛋白的赖氨酸残基上,提高蛋白质稳定性,介导靶分子定位和功能调节的过程。经典通路κB抑制蛋白激酶(in... 小泛素样修饰蛋白化是通过一系列小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)酶介导的生化级联反应将SUMO共价结合于靶蛋白的赖氨酸残基上,提高蛋白质稳定性,介导靶分子定位和功能调节的过程。经典通路κB抑制蛋白激酶(inhibitory proteinκB kinaseβ,IKKβ)/核因子κB(nuclear factorsκB,NF-κB)途径是炎性反应的关键信号转导通路。而NF-κB是公认的参与炎症和免疫反应的调节因子。研究发现,不仅NF-κB抑制蛋白(inhibitory protein,IκBa)的SUMO化修饰参与NF-kB信号通路的调节,而且SUMO酶可以直接介导NF-kB对靶基因的转录调控,某些蛋白也可能与SUMO化蛋白有相互作用。文中对SUMO修饰系统、SUMO循环及参与SUMO化循环的酶对NF-kB信号通路的转录调控及其与2型糖尿病相关性研究进行综述。 展开更多
关键词 小泛素样修饰蛋白 核因子-ΚB 2型糖尿病
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莫诺苷通过抑制炎症反应改善脑出血模型大鼠的神经功能 被引量:11
7
作者 袁志俊 何晓英 +2 位作者 袁平 郑晓梅 李小刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第8期1217-1222,共6页
背景:研究表明莫诺苷在大鼠缺血性脑损伤模型中具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、促进血管和神经再生、抗血小板聚集和神经保护作用,但莫诺苷是否可以抑制脑出血的炎症反应尚不清楚。目的:观察不同剂量的莫诺苷对大鼠脑出血后炎症因子白细胞介... 背景:研究表明莫诺苷在大鼠缺血性脑损伤模型中具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、促进血管和神经再生、抗血小板聚集和神经保护作用,但莫诺苷是否可以抑制脑出血的炎症反应尚不清楚。目的:观察不同剂量的莫诺苷对大鼠脑出血后炎症因子白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和炎症相关蛋白NF-κB和SUMO2/3的影响及神经功能变化。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血和莫诺苷低、中、高剂量组,后4组大鼠采用自体尾动脉血注入法建立脑出血模型,术后莫诺苷低、中、高剂量组分别给予莫诺苷30,90,270 mg/kg每天3次灌胃给药,连续7 d,假手术组和模型组给予等量生理盐水。给药7 d后应用NSS评分观察各组大鼠神经功能缺损症状;评分后取大鼠血肿周围脑组织,苏木精-伊红染色观察血肿周围神经细胞形态结构的变化;ELISA法检测大鼠脑组织炎症因子白细胞介素1、肿瘤坏死因子α水平;免疫组化法及Western blotting法检测通道蛋白NF-κB和SUMO2/3蛋白的表达。结果与结论:(1)与脑出血组比较,莫诺苷低、中、高剂量组神经功能缺损改善,其中高剂量组改善最明显(P<0.05);(2)与假手术比较,脑出血组和莫诺苷低、中、高剂量组神经功能受损,炎症因子白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和炎症相关蛋白NF-κB、SUMO2/3表达增多(P<0.05);(3)与脑出血组比较,莫诺苷低、中、高剂量组炎症因子白细胞介素1、肿瘤坏死因子α表达减少,炎症相关蛋白NF-κB降低,SUMO2/3表达增多(P<0.05),以高剂量组作用最明显(P<0.05)。提示:高剂量莫诺苷可通过炎症调节蛋白的变化,下调炎症因子的表达,抑制炎症反应改善脑出血大鼠的神经功能。 展开更多
关键词 脑出血 山茱萸科 小泛素相关修饰蛋白质类 NF-κB 白细胞介素1 肿瘤坏死因子α
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SUMO化修饰:一种多功能的蛋白质翻译后修饰方式 被引量:9
8
作者 刘世荣 何维 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期212-215,共4页
SUMO分子是一种结构上与泛素相似的分子,它参与蛋白质翻译后修饰。SUMO化循环与泛素化循环过程相似,但SUMO化修饰具有与泛素化修饰截然不同的功能。泛素化修饰的靶分子主要被蛋白酶体降解,而SUMO化修饰则介导靶分子定位和功能调节。新... SUMO分子是一种结构上与泛素相似的分子,它参与蛋白质翻译后修饰。SUMO化循环与泛素化循环过程相似,但SUMO化修饰具有与泛素化修饰截然不同的功能。泛素化修饰的靶分子主要被蛋白酶体降解,而SUMO化修饰则介导靶分子定位和功能调节。新近发现SUMO化修饰参与调控线粒体分裂、DNA损伤修复及调节基因组稳定性、调控离子通道及生物节律。此外,SUMO化修饰功能的紊乱会导致某些疾病的发生。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 翻译后修饰 SUMO化修饰 蛋白质
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去SUMO化蛋白酶的生物学功能与作用基础研究 被引量:7
9
作者 程金科 左勇 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1117-1121,共5页
小泛素样修饰蛋白(SUMO)修饰是一种新发现的类泛素蛋白质修饰形式。SUMO修饰由活化酶E1、接合酶E2和连接酶E3等三个酶相继作用来完成。同时它又是一个动态的、可逆的过程,其去SUMO修饰的过程则是由SUMO特异性蛋白酶(SENP)家族来介导。... 小泛素样修饰蛋白(SUMO)修饰是一种新发现的类泛素蛋白质修饰形式。SUMO修饰由活化酶E1、接合酶E2和连接酶E3等三个酶相继作用来完成。同时它又是一个动态的、可逆的过程,其去SUMO修饰的过程则是由SUMO特异性蛋白酶(SENP)家族来介导。在蛋白质SUMO修饰的动态过程中,SENP介导的去SUMO过程是决定其靶蛋白质SUMO修饰水平的一个主要因素,同时也是SUMOylation被调节的一个主要环节。SENP家族包括SENP1、SENP2、SENP3、SENP5、SENP6、SENP7等成员,每个成员具有不同的细胞内定位和底物特异性。虽然对其生化特性进行了大量研究,但SENP在参与的细胞生命活动过程中的作用并未十分了解。我们通过分析SENP1和SENP2基因敲除小鼠的表型,发现了SENP1通过正反馈机制调控缺氧-HIF1α和雄激素受体所介导的信号通路,从而在HIF1α与AR所参与的生理病理过程中发挥了重要作用。同时,我们发现SENP2通过调控PcG的活性,参与心脏的发育过程。这些结果表明SENP在调控其靶蛋白所参与的信号通路中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 小泛素样修饰蛋白 蛋白质修饰 SUMO特异性蛋白酶
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APP/PS1转基因鼠脑内小泛素化修饰物-1上调可能参与阿尔茨海默病老年斑形成和神经突起变性的调节 被引量:7
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作者 赵晓燕 王丹丹 +1 位作者 单烨 朱粹青 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期253-262,共10页
小泛素化修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是一类重要的类泛素蛋白,研究显示一些神经退行性疾病相关蛋白可以被SUMO化修饰。本文旨在观察APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)鼠中SUMO-1表达及修饰的变化... 小泛素化修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是一类重要的类泛素蛋白,研究显示一些神经退行性疾病相关蛋白可以被SUMO化修饰。本文旨在观察APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)鼠中SUMO-1表达及修饰的变化,并探讨SUMO-1与AD病理的关系。采用免疫印迹的方法检测12月龄的APP/PS1转基因AD鼠脑内SUMO-1表达及修饰的变化,同时用免疫共沉淀及免疫荧光的方法研究AD鼠脑内SUMO-1与tau、APP和Aβ的关系。结果显示:(1)与正常野生型小鼠相比,AD鼠脑内SUMO-1表达及其修饰的蛋白增加,同时伴有泛素化蛋白的增加;(2)AD鼠大脑皮层的RIPA可溶蛋白组份中,SUMO-1修饰的tau增加,而AT8抗体识别的磷酸化tau的SUMO-1修饰减少,但422位点磷酸化tau的SUMO-1修饰没有明显改变;(3)SUMO-1与磷酸化tau、APP及Aβ免疫荧光双标显示,在AD鼠脑内SUMO-1可在老年斑的中部和周围分布,并且SUMO-1与AT8识别的磷酸化tau在老年斑周围的变性神经突起中有相对较多的共存,但与APP、PS422识别的磷酸化tau和Aβ的共定位很少。以上结果提示,SUMO-1在APP/PS1转基因AD小鼠脑内表达增加,并可能参与变性神经突起及老年斑形成的调节。 展开更多
关键词 老年性痴呆 小泛素化修饰物-1 TAU Β-淀粉样蛋白
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人成纤维细胞生长因子-21基因的克隆表达及蛋白的纯化 被引量:7
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作者 王会岩 田海山 +6 位作者 赵宏鑫 张耀方 万晓姗 邵明龙 杨苹 肖业臣 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期81-85,共5页
目的:构建和表达人成纤维细胞生长因子-21(FGF21)的基因工程菌,为治疗2型糖尿病的新药开发提供实验数据。方法:通过PCR方法,以质粒pET20b-FGF21为模板扩增FGF21全长,将其与分子伴侣SUMO相融合,再将该融合基因与原核表达载体pET20b连接... 目的:构建和表达人成纤维细胞生长因子-21(FGF21)的基因工程菌,为治疗2型糖尿病的新药开发提供实验数据。方法:通过PCR方法,以质粒pET20b-FGF21为模板扩增FGF21全长,将其与分子伴侣SUMO相融合,再将该融合基因与原核表达载体pET20b连接后转化至BL21(Rosetta)宿主细胞中,通过IPTG诱导获得可溶性表达。将融合蛋白经Ni-NTA、分子筛等进行纯化,获得的蛋白纯度在95%以上。结果:经酶切和基因测序证实获得的FGF21基因序列与GenBank(登录号NM019113)报道的完全一致,构建的pET20b-SUMO-FGF21表达载体在BL21大肠杆菌中成功表达FGF21蛋白,蛋白表达量在15%以上,经SDS-PAGE证实其相对分子质量为19401,与理论预期值相符。Western blotting分析该表达产物与人FGF21多克隆抗体具有特异性结合能力,经SUMO酶酶切后获得纯度大于95%以上的纯蛋白。结论:成功构建表达人FGF21融合蛋白的基因工程菌,经IPTG诱导、Ni-NTA、分子筛等进行纯化后获得了FGF21纯蛋白。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子21 pET-20b 小泛素相关修饰蛋白质类
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泛素化修饰和SUMO化修饰在电离辐射诱导的DNA损伤修复中的作用机制
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作者 张焕腾 孙毓筱 徐畅 《国际放射医学核医学杂志》 2024年第2期130-136,共7页
泛素和小泛素样修饰物(SUMO)以共价键形式连接到特定的蛋白底物上,进行泛素化修饰或SUMO化修饰,通过调控蛋白质的稳定性、活性、定位或相互作用来影响多种细胞活动,其中包括DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡和免疫应答等。当细胞受到DN... 泛素和小泛素样修饰物(SUMO)以共价键形式连接到特定的蛋白底物上,进行泛素化修饰或SUMO化修饰,通过调控蛋白质的稳定性、活性、定位或相互作用来影响多种细胞活动,其中包括DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡和免疫应答等。当细胞受到DNA损伤时,泛素化修饰和SUMO化修饰能够调控相关蛋白质的功能和相互作用,参与到DNA损伤修复和信号传导的过程中。这些修饰作用对于维持基因组的完整性至关重要。近年来,研究发现泛素化修饰和SUMO化修饰在DNA损伤修复中都发挥着重要作用。笔者对这些作用机制进行综述,为深入了解电离辐射诱导的DNA损伤修复机制提供参考。 展开更多
关键词 泛素 小泛素相关修饰蛋白质类 辐射 电离 DNA损伤 DNA修复
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SUMO-1在实验性大鼠肝纤维化形成过程中的作用 被引量:4
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作者 肖志华 郭武华 张吉翔 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第14期1422-1427,共6页
目的:探讨小泛素相关修饰物(SUMO-1)在肝纤维化形成中的作用机制.方法:将90只♂SD大鼠分为2组:模型组(n=50)和对照组(n=40),对模型组给予40% CCl4 3μL/g皮下注射,分别于造模后2、4、6、8、10、12wk取肝组织,同时给予对照组等量的生理... 目的:探讨小泛素相关修饰物(SUMO-1)在肝纤维化形成中的作用机制.方法:将90只♂SD大鼠分为2组:模型组(n=50)和对照组(n=40),对模型组给予40% CCl4 3μL/g皮下注射,分别于造模后2、4、6、8、10、12wk取肝组织,同时给予对照组等量的生理盐水皮下注射,且分别在与模型组相同的时间处死动物.采用病理检查观察肝纤维化形成的变化,RT-PCR检测SUMO-1 mRNA的表达,Western blot检测SUMO-1蛋白的表达,将各周检测的数据进行分析,相互比较,并将各周数据分别与对照组进行比较分析.结果:随着肝纤维化至肝硬化的形成,SUMO-1mRNA在2、4、6、8、10、12wk的表达逐渐增强(0.725±0.017、0.786±0.018、0.803±0.023、0.831±0.020、0.863±0.016、0.892±0.008,P<0.01).Western blot显示SUMO-1的蛋白表达在2、4、6、8、10、12wk也是同时逐渐增强(0.810±0.059、0.873±0.049、0.923±0.055、0.959±0.032、0.988±0.011、0.998±0.004,P<0.01).结论:SUMO-1基因及蛋白表达在肝纤维化形成过程中逐渐增强,说明其在肝纤维化形成过程中具有重要的意义. 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物-1 转化生长因子-β1 细胞外基质 肝星状细胞 肝纤维化
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Arabidopsis small ubiquitin-related modifier protease ASP1 positively regulates abscisic acid signaling during early seedling development~~ 被引量:5
14
作者 Qiongli wang Gao-Ping Qu +3 位作者 Xiangxiong Kong Yan Yan Jigang Li Jing Bo Jin 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2018年第10期924-937,共14页
The small ubiquitin-related modifier (SUMO) modification plays an important role in the regulation of abscisic acid (ABA) signaling, but the function of the SUMO protease, in ABA signaling, remains largely unknown... The small ubiquitin-related modifier (SUMO) modification plays an important role in the regulation of abscisic acid (ABA) signaling, but the function of the SUMO protease, in ABA signaling, remains largely unknown. Here, we show that the SUMO protease, ASPI positively regulates ABA signaling. Mutations in ASPI resulted in an ABA-insensitive phenotype, during early seedling develop- ment. Wild-type ASP1 successfully rescued, whereas an ASPI mutant (C577S), defective in SUMO protease activity, failed to rescue, the ABA-insensitive phenotype of asp1-1. Expression of ABI5 and MYB3o target genes was attenuated in asp^-I and our genetic analyses revealed that ASP1 may function upstream of ABI5 and MYB3o. 展开更多
关键词 ASP ABA Arabidopsis small ubiquitin-related modifier protease ASP1 positively regulates abscisic acid signaling during early seedling development ABI Figure
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SUMO化修饰C/EBPα在高氧暴露所致支气管肺发育不良早产大鼠中的动态表达及作用 被引量:5
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作者 朱玥 卢红艳 +4 位作者 郝晓波 常明 王秋霞 万峰云 万雪晴 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期403-409,共7页
目的探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在支气管肺发育不良(BPD)早产大鼠中的表达及其作用。方法将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组(n=9),建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d,每组各... 目的探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在支气管肺发育不良(BPD)早产大鼠中的表达及其作用。方法将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组(n=9),建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d,每组各取3只大鼠采集肺组织,糖原染色观察肺组织分化情况;免疫组化检测Ki67表达;Western blot检测SUMO1及C/EBPα蛋白表达;免疫共沉淀检测SUMO化C/EBPα表达。结果与同时间点空气组相比,高氧组大鼠肺组织糖原染色强度4 d时减弱,7 d及14 d时明显增强;随高氧暴露时间延长,高氧组大鼠肺组织中Ki67表达逐渐升高,且均高于同时间点空气组;与空气组相比,高氧组C/EBPα蛋白4 d时表达增加,7 d及14 d时表达降低(P<0.05);高氧组SUMO1及SUMO化C/EBPα蛋白表达呈逐渐上升趋势,均明显高于同时间点空气组(P<0.05)。高氧组SUMO化C/EBPα表达与糖原染色强度及核增殖抗原Ki67均呈正相关(r=0.529、0.671,P<0.05)。结论高氧暴露所致早产大鼠BPD模型中,肺泡上皮细胞过度增殖与分化障碍可能与SUMO化C/EBPα表达增加相关。 展开更多
关键词 支气管肺发育不良 CCAAT增强子结合蛋白α 小泛素相关修饰物 大鼠
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蛋白激酶B1去类泛素化修饰抑制肝癌的增殖和转移 被引量:5
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作者 盛凤 沈依萌 +6 位作者 万乔浩 李艳霞 马晓芳 姜忠敏 张殿英 刘晓智 吴问汉 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期814-820,共7页
目的 探讨沉默泛素载体蛋白9(Ubc9)基因表达诱导蛋白激酶B1(AKT1)去类泛素化修饰,及其对肝癌细胞增殖和转移的影响.方法 利用RNA干扰技术沉默HepG2肝癌细胞Ubc9基因表达,Western blot法检测Ubc9、小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)和蛋... 目的 探讨沉默泛素载体蛋白9(Ubc9)基因表达诱导蛋白激酶B1(AKT1)去类泛素化修饰,及其对肝癌细胞增殖和转移的影响.方法 利用RNA干扰技术沉默HepG2肝癌细胞Ubc9基因表达,Western blot法检测Ubc9、小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)和蛋白激酶B1(AKT1)蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测HepG2细胞增殖活性,细胞划痕实验和Transwell方法检测细胞迁移能力.建立荷瘤鼠模型,测量肿瘤体积并绘制生长曲线,解剖肿瘤组织并称重比较.采用原位细胞凋亡实验检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和 MMP-9的表达情况.结果 siR-Ubc9基因转染可使HepG2细胞中Ubc9、共轭SUMO1、游离SUMO1和AKT1蛋白水平均明显下降(均P〈0.05).对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的细胞增殖指数分别为53.19%、54.25%和39.17%,细胞迁移距离分别为(59.47±4.66)μm、(56.56±5.37)μm和(34.57±6.61)μm,发生迁移的细胞数量分别为(89.44±8.36)个/视野、(93.84±8.79)个/视野和(41.67±5.39)个/视野,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义(均P〈0.05).对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的皮下肿瘤重量分别为(3.78±0.69)g、(3.72± 0.72)g和(2.09±0.61)g,细胞凋亡率分别为(7.79±2.21)%、(6.45±2.48)%,和(33.59±5.44)%,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义(均P〈0.05).对照组和siR-neg组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白均高表达,而siR-Ubc9组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达均低表达,差异均有统计学意义(均P〈0.05).结论 通过沉默肝癌细胞中Ubc9基因表达能够诱导AKT1去SUMO化修饰,进而抑制肝癌细胞的增殖和转移,为未来肝癌基因治疗提供了新的借鉴方法. 展开更多
关键词 肝肿瘤 小泛素相关修饰蛋白1 蛋白激酶B1 细胞增殖 肿瘤转移
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利用SUMO技术表达可溶性的拟南芥AtRD22蛋白 被引量:5
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作者 唐玉林 米子岚 +1 位作者 钟活权 江年琼 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期610-616,共7页
为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-R... 为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-RD22和p SUMO-RD22,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行AtRD22蛋白的表达.在0.3 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dithiogalactopyranoside,IPTG)诱导下,探索不同培养温度和诱导时间对可溶性蛋白表达的影响.结果表明,在实验条件下,转化p ET32a-RD22的重组菌表达AtRD22蛋白的总量高于转化p SUMO-RD22的重组菌,但后者的可溶性AtRD22蛋白表达量明显高于前者.当诱导温度为28或16℃,时间分别为6.0或8.0 h以上时,转化p SUMO-RD22的重组菌中可溶性目的蛋白的表达量相对较大.为进一步在体外研究AtRD22蛋白质的结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 蛋白质工程 拟南芥AtRD22 融合标签 小泛素相关修饰物 基因克隆 原核表达
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PIAS调控PPARγ的SUMO化修饰在小鼠内毒素性急性肺损伤内源性保护机制中的作用 被引量:1
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作者 吴晓炀 吴丽丽 +5 位作者 武雅 陈薇 董树安 苏乾 余剑波 宫丽荣 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期846-852,共7页
目的评价小泛素相关修饰物(SUMO)E3连接酶(PIAS)调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的SUMO化修饰在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)内源性保护机制中的作用。方法实验Ⅰ清洁级野生型雄性C57BL/6小鼠24只,6~8周龄,体质量18~22 g,采... 目的评价小泛素相关修饰物(SUMO)E3连接酶(PIAS)调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的SUMO化修饰在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)内源性保护机制中的作用。方法实验Ⅰ清洁级野生型雄性C57BL/6小鼠24只,6~8周龄,体质量18~22 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(C组)、ALI组、ALI+PPARγ诱导剂TZD组(ALI+T组)、ALI+TZD+SUMO化抑制剂漆树酸组(ALI+T+A组)。尾静脉注射LPS 15 mg/kg制备内毒素性ALI模型。ALI+T+A组注射LPS前1 h时腹腔注射漆树酸5 mg/kg;ALI+T组和ALI+T+A组注射LPS前30 min时腹腔注射TZD 50 mg/kg。给予LPS 12 h后处死小鼠取肺组织,测定湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察病理学结果,并行肺损伤评分;分别采用Western blot法和PCR法测定PIAS1、PIAS2、PIAS3和PIASy及其mRNA的表达。实验Ⅱ体外培养的小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)采用随机数字表法分为4组(n=5):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+PIAS2 siRNA组(L+P组)和LPS+Con siRNA组(L+C组)。C组常规培养,余3组给予10μg/ml LPS刺激MH-S细胞,制备内毒素攻击模型。L+P组和L+C组于加入LPS前48 h时分别转染50 nmol/L PIAS2 siRNA或Con siRNA。加入LPS孵育24 h时收集细胞,检测细胞活力;采用流式细胞术检测肺泡M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞水平,计算M1型/M2型比值;采用Western blot法检测PIAS2和PPARγ表达,采用免疫共沉淀法测定PPARγ-SUMO1共表达;采用PCR测定TNF-α和IL-10的mRNA表达。结果实验Ⅰ与C组比较,其余3组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高,PIAS2及其mRNA表达上调(P<0.05);与ALI组比较,ALI+T组和ALI+T+A组肺损伤评分和肺组织W/D比值降低,PIAS2及其mRNA表达上调(P<0.05);与ALI+T组比较,ALI+T+A组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高,PIAS2及其mRNA表达下调(P<0.05)。4组间肺组织PIAS1、PIAS3和PIASy及其mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。实验Ⅱ与C组比较,其余3组细胞活力降低,PPARγ表达和PPARγ-SUMO1共表达上调,M1型和M 展开更多
关键词 小泛素修饰相关蛋白质类 PPARΓ 内毒素血症 急性肺损伤
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SENP蛋白在胶质瘤中表达与临床病理分级相关性 被引量:3
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作者 齐玲 沈楠 +5 位作者 王玮瑶 赵东海 杨淑艳 杨宁江 王艳春 任旷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1219-1221,共3页
目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶(SENP)在人脑胶质瘤中的表达变化及与临床病理分级相关性。方法选择神经外科手术切除的脑胶质瘤组织43例作为胶质瘤组,尸解来源的正常脑组织9例作为对照组;Western blot法检测胶质瘤组与对照组中SE... 目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶(SENP)在人脑胶质瘤中的表达变化及与临床病理分级相关性。方法选择神经外科手术切除的脑胶质瘤组织43例作为胶质瘤组,尸解来源的正常脑组织9例作为对照组;Western blot法检测胶质瘤组与对照组中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达变化,并分析SENP蛋白表达量与患者临床病理分级之间关系。结果胶质瘤组织中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达量[分别为(0.47±0.12)、(0.78±0.17)、(0.94±0.21)]均明显增加,与对照组[分别为(0.35±0.03)、(0.36±0.13)、(0.23±0.08)]比较,差异有统计学意义(均P<0.05);脑胶质瘤组织中SENP1、SENP2、SENP6蛋白表达量与患者临床病理分级呈正相关(r=0.82、0.83、0.91,均P<0.05)。结论胶质瘤组织中SENP蛋白表达明显升高,SENP蛋白表达量与胶质瘤发生发展密切相关。 展开更多
关键词 小泛素样修饰蛋白(SUMO) SUMO特异性蛋白酶(SENP) 胶质瘤 病理分级
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动力相关蛋白1的小泛素化相关修饰物化修饰在脑缺血/再灌注损伤中的作用 被引量:4
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作者 张高峰 尹曾 +4 位作者 陈怀龙 李秋杰 张照亮 时飞 王明山 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2017年第8期758-762,共5页
背景近年研究发现动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1, Drp1)介导的线粒体分裂在脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury, CI/RI)中发挥了重要作用,Drp1的小泛素化相关修饰物(small ubiquitin-related mo... 背景近年研究发现动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1, Drp1)介导的线粒体分裂在脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury, CI/RI)中发挥了重要作用,Drp1的小泛素化相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO) 化修饰能影响自身生物学效应。目的阐述Drp1的SUMO化修饰在CI/RI中的作用。内容分别描述Drp1蛋白、SUMO蛋白、SUMO相关酶(SUMO化酶/去SUMO化酶)及SUMO化修饰对Drp1生物学效应的影响。趋向研究SUMO化修饰影响Drp1的生物学效应的机制,为减轻或治疗CI/RI找到新的靶点或提供新的思路。 展开更多
关键词 动力相关蛋白1 小泛素化相关修饰物 线粒体分裂 凋亡 缺血 再灌注损伤
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