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心肌细胞培养液对鼻咽癌细胞生长的体外抑制作用实验研究 被引量:8
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作者 吴敬波 崔艳慧 +2 位作者 张建文 范娟 文庆莲 《四川肿瘤防治》 2006年第2期83-85,共3页
目的:恶性肿瘤可转移至机体所有器官,但在心肌中罕见。本实验拟通过研究心肌微环境因素对不同转移潜能的鼻咽癌细胞的影响,探讨心肌内转移瘤罕见的机制。方法:原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,用 MTT法分析和比较心肌细胞条件性上清液(C... 目的:恶性肿瘤可转移至机体所有器官,但在心肌中罕见。本实验拟通过研究心肌微环境因素对不同转移潜能的鼻咽癌细胞的影响,探讨心肌内转移瘤罕见的机制。方法:原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,用 MTT法分析和比较心肌细胞条件性上清液(CMCM)对高转移潜能鼻咽癌细胞的体外抑制作用。研究设空白对照, 以顺铂作为CMCM的阳性对照,以正常细胞鼠肾小球系膜细胞为阴性对照。结果:鼻咽癌细胞与不同浓度的CM CM共同培养后,细胞存活率明显下降,与DMEM相比差异均具有显著性(P<0.05),而对正常细胞的细胞存活率无明显影响(P>0.05)。DDP对鼻咽癌细胞和正常细胞均具有显著性抑制作用(P<0.05)。结论:新生大鼠心肌细胞上清液可选择性的抑制鼻咽癌细胞的增殖;这种抑制作用与化疗药物顺铂作用机制可能不同。心肌微环境中可能存在某种抑瘤物质,这可能是心肌转移瘤罕见性的主要机制。 展开更多
关键词 心肌细胞 条件培养液 鼻咽癌细胞 WISTAR大鼠
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高三尖杉酯碱对鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 被引量:6
2
作者 唐旭东 周克元 +2 位作者 祝其锋 蔡康荣 丁航 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期63-66,共4页
目的 探讨高三尖杉酯碱 (homoharringtonine,HHT)对鼻咽癌细胞CNE 2Z的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法 采用MTT法检测增殖抑制率和IC50 ,流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和Hoechst 3 3 2 5 8/PI荧光染色分析细胞凋亡。结果 不同浓度的HHT... 目的 探讨高三尖杉酯碱 (homoharringtonine,HHT)对鼻咽癌细胞CNE 2Z的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法 采用MTT法检测增殖抑制率和IC50 ,流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和Hoechst 3 3 2 5 8/PI荧光染色分析细胞凋亡。结果 不同浓度的HHT分别处理CNE 2Z细胞 2 4、48和 72h ,抑制率随浓度的增加和时间的延长而增高 ,其IC50 分别为(0 62 9± 0 0 3 9)、(0 483± 0 0 2 7)、(0 3 89± 0 0 2 7)mg·L-1,各IC50 间差异有统计学意义 (P <0 0 1)。 1、0 5mg·L-1HHT处理细胞 8h ,流式细胞术观察到凋亡峰 ,荧光染色可见凋亡形态学改变 ,流式细胞术和荧光染色检出的凋亡率均高于对照组 (P <0 0 1) ;1mg·L-1HHT处理细胞 8h ,琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯带。结论 HHT对CNE 2Z细胞具有增殖抑制作用 ,此抑制作用具有剂量和时间依赖性 ;HHT可诱导CNE 展开更多
关键词 高三尖杉酯碱 鼻咽癌 细胞增殖 细胞凋亡
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心肌细胞条件培养液对鼻咽癌细胞生长抑制作用体外实验研究 被引量:6
3
作者 崔艳慧 梁海军 +2 位作者 吴敬波 任培蓉 张建文 《中国肿瘤》 CAS 2007年第1期44-46,共3页
[目的]探讨心肌微环境因素对高转移潜能鼻咽癌细胞的影响。[方法]原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,用MTT法比较心肌细胞条件性上清液(CMCM)对高转移潜能鼻咽癌细胞的体外抑制作用。以顺铂作为CMCM的阳性对照,以正常细胞鼠肾小球系膜细... [目的]探讨心肌微环境因素对高转移潜能鼻咽癌细胞的影响。[方法]原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,用MTT法比较心肌细胞条件性上清液(CMCM)对高转移潜能鼻咽癌细胞的体外抑制作用。以顺铂作为CMCM的阳性对照,以正常细胞鼠肾小球系膜细胞作为鼻咽癌细胞的阴性对照。[结果]鼻咽癌细胞与不同浓度的CMCM共同培养后,细胞存活率明显下降(P<0.05),而对正常细胞鼠肾小球系膜细胞存活率无明显影响(P>0.05)。[结论]新生大鼠心肌细胞条件培养液可选择性地抑制鼻咽癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 心肌细胞 条件培养液 鼻咽癌细胞 WISTAR大鼠
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miR-342-3p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及可能机制 被引量:6
4
作者 王菲 李巍 +1 位作者 冯帅 庞仕秀 《解剖科学进展》 2019年第3期260-264,共5页
目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、HNE-1、5-8F、HONE-1中miR-342-3p的表达水平。采用脂质体介导法向CNE-2细胞转... 目的探讨Aβ1-42对小鼠巨噬细胞RAW264.7向炎症性细胞转变的影响及机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、HNE-1、5-8F、HONE-1中miR-342-3p的表达水平。采用脂质体介导法向CNE-2细胞转染miR-342-3p模拟物记为miR-342-3p mimic组,转染模拟物对照的CNE-2细胞记为NC组,不行转染的CNE-2细胞记为Control组。以qRT-PCR检测转染效果,四甲基偶氮唑盐(MTT)法和克隆形成实验检测转染对细胞增殖的影响,Annexin-Ⅴ-FITC/PI双染色法检测转染对细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞中caspase-3、Ki-67及NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与鼻咽上皮细胞NP69相比,miR-342-3p在鼻咽癌细胞中的表达水平显著降低。与Control组和NC组相比,miR-342-3p mimic组细胞miR-342-3p的表达水平显著升高,细胞OD值明显降低,克隆形成率显著下降,凋亡显著升高(P<0.05),细胞中caspase-3激活水平升高,Ki-67、p-IKKα、p-IKKβ蛋白水平降低(P<0.05)。结论 miR-342-3p在鼻咽癌细胞中呈低表达,上调鼻咽癌CNE-2细胞中miR-342-3p的表达能够抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用与抑制NF-κB信号通路的激活相关。 展开更多
关键词 miR-342-3p NF-ΚB信号通路 鼻咽癌细胞 增殖 凋亡
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大分割电离辐射对放射抗性鼻咽癌细胞免疫原性死亡的影响 被引量:1
5
作者 龙金华 冷吉 +1 位作者 曾宪琳 金仙槐 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第10期1145-1150,1155,共7页
目的研究大分割电离辐射对放射抗性鼻咽癌(NPC)细胞系C666-1R细胞活力、细胞周期及免疫原性细胞死亡(ICD)的影响。方法采用0、2、4、6、8、10、12及14 Gy剂量电离辐射照射NPC细胞株C666-1和C666-1R后、常规培养48 h,采用CCK-8法检测细... 目的研究大分割电离辐射对放射抗性鼻咽癌(NPC)细胞系C666-1R细胞活力、细胞周期及免疫原性细胞死亡(ICD)的影响。方法采用0、2、4、6、8、10、12及14 Gy剂量电离辐射照射NPC细胞株C666-1和C666-1R后、常规培养48 h,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR法检测钙网蛋白(CRT)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)及热休克蛋白70(HSP70)mRNA的表达水平,ELISA和Western blot法检测细胞CRT、HMGB1及HSP70蛋白表达水平,采用试剂盒检测细胞内腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量。结果经放射处理后不同照射剂量的C666-1R细胞活力均高于C666-1(P<0.05);与未放射细胞相比,经2~14 Gy电离辐射照射的2种NPC细胞株活力均明显下降(P<0.05),8 Gy照射的细胞活性最低(P<0.05),细胞周期阻滞于G_(2)期,CRT、HMGB1及HSP70 mRNA或蛋白表达水平、细胞内的ATP含量均上调(P<0.05)。结论大分割电离辐射能够诱导放射抗性NPC细胞发生ICD。 展开更多
关键词 大分割电离辐射 鼻咽癌细胞 放射抗性 细胞周期 免疫原性细胞死亡
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二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响 被引量:5
6
作者 马玉龙 李红 +2 位作者 周雪琴 王刘倩 王敏 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第5期839-842,共4页
目的:探讨二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响。方法:分别给予鼻咽癌细胞CNE-1二甲双胍(5m M)、2Gy放射线照射、二甲双胍(5 m M)联合2Gy放射线照射处理后,采用MTT实验、克隆形成实验检测和比较其细胞增殖抑制率和克隆... 目的:探讨二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响。方法:分别给予鼻咽癌细胞CNE-1二甲双胍(5m M)、2Gy放射线照射、二甲双胍(5 m M)联合2Gy放射线照射处理后,采用MTT实验、克隆形成实验检测和比较其细胞增殖抑制率和克隆形成抑制率。结果:MTT实验结果显示:与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞增殖抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆形成实验结果显示,与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞克隆形成抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍联合放射线照射能够有效的抑制鼻咽癌细胞CNE-1的增殖。 展开更多
关键词 二甲双胍 放射线照射 鼻咽癌细胞 细胞增殖
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siRNA靶向沉默MALAT-1对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K/ATK通路的影响 被引量:5
7
作者 曹亚莉 李宏慧 +3 位作者 邵渊 朱云 黄建华 张鹏飞 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第6期892-896,共5页
目的:探究siRNA靶向沉默MALAT-1对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法:分别以10、20、30、40、50 nmol/L浓度的siRNA靶向沉默体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE的基因MALAT-1,以实时荧光定量(qRT-PCR)分别在24、48 h后检测MALAT... 目的:探究siRNA靶向沉默MALAT-1对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法:分别以10、20、30、40、50 nmol/L浓度的siRNA靶向沉默体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE的基因MALAT-1,以实时荧光定量(qRT-PCR)分别在24、48 h后检测MALAT-1 mRNA表达水平,筛选合适的siRNA作用浓度和时间。将CNE细胞分为三组:空白对照组、siRNA阴性对照组和siRNA组,siRNA处理细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3)及PI3K/AKT通路蛋白(PI3K、ATK、p-AKT)表达情况。结果:选定30 nmol/L浓度的siRNA作用于CNE细胞48 h;siRNA处理细胞后,与空白对照组相比,siRNA组细胞增殖率明显降低,凋亡率明显升高,Bax、caspase-3蛋白表达明显升高,Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);AKT蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。siRNA阴性对照组各指标均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:siRNA可靶向沉默MALAT-1,抑制鼻咽癌细胞增殖,促进其凋亡,可能是通过抑制PI3K/AKT通路实现的。 展开更多
关键词 SIRNA沉默 增殖 凋亡 PI3K/AKT通路 MALAT-1 鼻咽癌细胞
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吉非替尼对鼻咽癌细胞株CNE2放疗增敏作用 被引量:5
8
作者 何本夫 孙爱民 +3 位作者 黄碧燕 王雯珺 郑小康 罗荣城 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期991-994,共4页
目的应用吉非替尼作用于鼻咽癌细胞株CNE2,观察其放疗增敏作用。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及吉非替尼对细胞放射敏感性的影响;用克隆形成法绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比。以流... 目的应用吉非替尼作用于鼻咽癌细胞株CNE2,观察其放疗增敏作用。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及吉非替尼对细胞放射敏感性的影响;用克隆形成法绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比。以流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化和凋亡情况。结果 MTT显示与单纯照射组比较,联合吉非替尼照射组细胞生存率显著降低(0.582±0.012vs0.398±0.016,P=0.0020);FCM显示吉非替尼联合放射组S期细胞显著下降(P=0.000),而G2/M期细胞比值显著增加(P=0.000),吉非替尼和放射线可协同作用,使CNE2细胞的周期再分布显著变化。结论吉非替尼可增强鼻咽癌细胞株CNE2放射敏感性,其机制可能与改变细胞周期的分布相关。 展开更多
关键词 吉非替尼 放射增敏 细胞周期 细胞凋亡 鼻咽癌细胞
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激光共聚焦显微镜实时动态观察不同微环境中鼻咽癌细胞摄取大黄素差异研究 被引量:5
9
作者 陈云龙 侯华新 +2 位作者 莫春燕 王春苗 黎丹戎 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期485-489,共5页
目的:以人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞为研究对象,采用激光共聚焦显微镜动态检测细胞对大黄素的摄取,探讨不同微环境对CNE-1、CNE-2细胞摄取大黄素的影响。方法:通过MTT方法检测大黄素对CNE-1和CNE-2细胞在乏氧和正常培养的条件下的生长抑... 目的:以人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞为研究对象,采用激光共聚焦显微镜动态检测细胞对大黄素的摄取,探讨不同微环境对CNE-1、CNE-2细胞摄取大黄素的影响。方法:通过MTT方法检测大黄素对CNE-1和CNE-2细胞在乏氧和正常培养的条件下的生长抑制作用,选择无细胞毒性浓度的大黄素,激光共聚焦显微镜完美对焦系统分别观察两种细胞在乏氧、无血清、与血管内皮细胞共培养后对大黄素的摄取及这些过程的细胞形态学变化。结果:鼻咽癌2种细胞无论单独培养和共培养,在乏氧及无血清条件下摄取大黄素后,与相应的对照组细胞比较荧光强度最强,达到最大摄取浓度所需时间最短(P<0.05);总体而言,CNE-2细胞对大黄素的摄取速度快于CNE-1细胞,共培养体系中CNE-1细胞对大黄素的摄取速度慢于单细胞培养体系,而CNE-2细胞则相反。乏氧状态的鼻咽癌细胞在摄取大黄素后会出现明显的细胞皱缩、变圆、起泡等凋亡的形态学变化。大黄素对鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞在乏氧和不乏氧情况下半数抑制浓度(IC50)分别为18.34、16.87μg·mL-1和20.44、19.87μg·mL-1。结论:鼻咽癌细胞对大黄素的摄取与细胞的培养条件、乏氧状态等微环境有关,改变微环境有利于提高药物的靶向性。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 鼻咽癌细胞 大黄素摄取 微环境动态分析 大黄素抗癌活性分析
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白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中caspase-6的活化 被引量:5
10
作者 唐旭东 周克元 +1 位作者 陈小文 陈素珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期100-103,共4页
目的:探讨白藜芦醇(Res)诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中是否有caspase-6的活化。方法:用Western-blot分析caspase-6酶原的裂解,半定量RT-PCR检测caspase-6mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:用Res 0(对照)、25、50、... 目的:探讨白藜芦醇(Res)诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中是否有caspase-6的活化。方法:用Western-blot分析caspase-6酶原的裂解,半定量RT-PCR检测caspase-6mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:用Res 0(对照)、25、50、100、200μmol/L处理细胞24小时,caspase-6酶原的表达随药物浓度的增加而减少,100 μmol/L时开始出现活性裂解片段P20(20 kD),200μmol/L时P20增加;caspase-6 mRNA的表达呈浓度依赖性的增加(P<0.01);caspase-6活性呈浓度和时间依赖性的升高(P<0.01)。结论:Res诱导CNE-2Z细胞凋亡过程中有caspase-6的活化。 展开更多
关键词 鼻咽癌 CNE-2Z细胞 细胞凋亡 白藜芦醇 CASPASE-6 活性变化 基因表达 浓度依赖性 时间依赖性
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Vascular Endothelial Growth Factorl65-regulated Nasopharyngeal Carcinoma Cell Lines Invasion and Migration Involve Expression and Activation of Matrix Metalloproteinase-2 被引量:2
11
作者 王彦君 孔维佳 +5 位作者 乐建新 孙大为 李伟 姚琪 孙宇 董继华 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第5期621-624,共4页
The effect of vascular endothelial growth factor (VEGF) overexpression on matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells in vitro and the possible mechanism involved were investigated... The effect of vascular endothelial growth factor (VEGF) overexpression on matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells in vitro and the possible mechanism involved were investigated, and the correlation between the expression of VEGF and MMP-2 in NPC evaluated. The NPC cells were transfected with PAd-trackVEGF165 plasmid. The expression levels of VEGF and MMP-2 mRNA and protein in NPC cells were detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot respectively. It was found that the expression of VEGF and MMP-2 mRNA and protein was significantly increased in NPC cells after transfection of VEGF 165. It was concluded that the expression of VEGF was correlated to the in vitro invasion of NPC cells, and the induction of MMP-2 by VEGF was a key process of NPC cell invasion. 展开更多
关键词 nasopharyngeal carcinoma cells vascular endothelial growth factor matrix metalloproteinase-2 gene transfection
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人鼻咽癌细胞株中肿瘤干细胞分离鉴定方法及肿瘤多药耐药机制 被引量:3
12
作者 刘超群 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2018年第8期956-961,共6页
目的:研究人鼻咽癌细胞株中肿瘤干细胞分离鉴定方法及对肿瘤多药耐药机制。方法:取鼻咽癌细胞株(SUNE),进行细胞的培养、传代及鉴定,采用免疫荧光细胞化学技术联合流式细胞仪检测SUNE中CD133^-及CD133^+细胞体外分化能力。利用免疫磁珠... 目的:研究人鼻咽癌细胞株中肿瘤干细胞分离鉴定方法及对肿瘤多药耐药机制。方法:取鼻咽癌细胞株(SUNE),进行细胞的培养、传代及鉴定,采用免疫荧光细胞化学技术联合流式细胞仪检测SUNE中CD133^-及CD133^+细胞体外分化能力。利用免疫磁珠分选技术完成CD133^+肿瘤细胞纯化,测定CD133^+细胞体外增殖能力,将其与未分选及CD133^-细胞进行比较。取顺铂、紫杉醇化疗药物,采用CCK^-8法测定CD133^+细胞耐药性。取10只4周龄ICR小鼠,皮下注射人鼻咽癌细胞株和普通细胞株,分析耐药性。结果:分离培养的SUNE在含有血清的培养基中呈贴壁生长,并且生长活跃,培养2~3 d后倒置显微镜下显示细胞呈梭形、扁平状,光泽度良好,培养2周左右细胞融合瓶底80.00%;流式细胞仪检测结果显示:约0.35%细胞表面膜存在抗原CD133。免疫细胞化学显示:SUNE细胞贴壁爬行,部分细胞能与SUNE中的CD133^-相互结合,荧光显微镜下显示呈现橙红色,球状;向经免疫磁珠分选后的细胞中加入培养基,细胞呈单细胞,球形,悬浮生长。随着培养时间的不断延长,细胞开始出现团状生长,体积增加,细胞数量增多,培养24 h后细胞开始贴壁生长,培养7 d后呈串状生长;CD133^+肿瘤细胞、CD133^-肿瘤细胞及未分选细胞随着时间的延长细胞均出现增长,且CD133^+肿瘤细胞增殖能力显著高于CD133^-肿瘤细胞及未分选细胞(P<0.05)。10只小鼠均可见瘤体形成,种植人鼻咽癌细胞株组的瘤体体积显著大于普通细胞株组(P<0.05)。结论:鼻咽癌干细胞中CD133^+对化疗药物的耐药性强。 展开更多
关键词 鼻咽癌 恶性肿瘤 肿瘤干细胞 分离鉴定 多药耐药 免疫荧光细胞化学技术 流式细胞仪 鼻咽癌细胞株 体外分化 免疫磁珠分选技术
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ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩 被引量:4
13
作者 叶东 张海峰 +2 位作者 朱林燕 王立伟 陈丽新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期216-220,共5页
目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blottin... 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。 展开更多
关键词 ClC-3氯通道 SIRNA 鼻咽癌细胞 细胞容积
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双吲哚马来酰亚胺抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性的实验研究 被引量:3
14
作者 陈卫群 卢忠心 +3 位作者 陈和明 陈正炎 李志坚 胡元佳 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2004年第2期77-79,104,共4页
目的 探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚马来酰亚胺对鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性的影响 ,为体内端粒酶活性的调节机制的研究提供理论基础。方法 用不同浓度双吲哚马来酰亚胺处理鼻咽癌细胞CNE2不同时间后 ,用台盼蓝染色法检测细胞生存能... 目的 探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚马来酰亚胺对鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性的影响 ,为体内端粒酶活性的调节机制的研究提供理论基础。方法 用不同浓度双吲哚马来酰亚胺处理鼻咽癌细胞CNE2不同时间后 ,用台盼蓝染色法检测细胞生存能力 ,用PCR EIA法检测端粒酶活性。结果 PKC抑制剂双吲哚马来酰亚胺能显著地抑制鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性 ,且具有时间和剂量依赖性。该抑制剂不影响被处理细胞的生存能力 ,因为大多数被处理细胞能生存 (>80 % ) ,不同浓度双吲哚马来酰亚胺处理鼻咽癌细胞CNE2不同时间后细胞生存能力无统计学差异 (F =2 .4 4 ,P >0 .0 5 )。结论 双吲哚马来酰亚胺能显著抑制鼻咽癌细胞CNE2端粒酶活性 ,且具有时间和剂量依赖性。 展开更多
关键词 端粒酶 双吲哚马来酰亚胺/药理学 鼻咽癌细胞/药物作用
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金槐米槲皮素对人鼻咽癌细胞的干预作用研究 被引量:4
15
作者 顾生玖 刘建楠 +2 位作者 姚丽新 杨娜 朱开梅 《安徽农业科学》 CAS 2012年第18期9639-9640,9668,共3页
[目的]探讨金槐米槲皮素对人鼻咽癌CNE2细胞的干预作用。[方法]通过微波辅助提取法从桂北金槐米中提取槲皮素并纯化,用浓度20、40、60和80μmol/L的槲皮素作用于人鼻咽癌细胞CNE2;分别在24、48和72 h后,采用MTT法初步检测人鼻咽癌细胞... [目的]探讨金槐米槲皮素对人鼻咽癌CNE2细胞的干预作用。[方法]通过微波辅助提取法从桂北金槐米中提取槲皮素并纯化,用浓度20、40、60和80μmol/L的槲皮素作用于人鼻咽癌细胞CNE2;分别在24、48和72 h后,采用MTT法初步检测人鼻咽癌细胞被抑制的情况,用流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率、光学显微镜观察细胞形态学变化。[结果]从槐米中提取的槲皮素对鼻咽癌细胞有明显的抑制作用,且呈浓度、时间明显的依赖性,药物干预作用的最适浓度为60μmol/L,药物干预后形态学观察的最适宜时间为48 h。细胞周期分析显示,槲皮素能阻滞鼻咽癌细胞于G1期。[结论]从桂北金槐米中提取的槲皮素对人鼻咽癌细胞有较强的干预作用。 展开更多
关键词 金槐米 槲皮素 人鼻咽癌
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基于TGF-β1信号通路研究小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞迁移的作用机制 被引量:3
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作者 刘洁 史红健 +5 位作者 范婧莹 周芳亮 罗晶婧 程博 王贤文 何迎春 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3053-3060,共8页
目的研究小檗碱联合芒柄花黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路在其效应中的作用。方法采用实时无标记细胞功能分析仪监测小檗碱和芒柄花黄素单用及联合使用对鼻咽癌5-8F... 目的研究小檗碱联合芒柄花黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路在其效应中的作用。方法采用实时无标记细胞功能分析仪监测小檗碱和芒柄花黄素单用及联合使用对鼻咽癌5-8F、6-10B细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell实验检测TGF-β1信号通路激活后,小檗碱联合芒柄花黄素抑制细胞迁移效应的变化;采用Western blotting检测TGF-β1信号通路关键蛋白和迁移相关蛋白的表达。结果与对照组比较,小檗碱和芒柄花黄素单用可抑制5-8F和6-10B细胞增殖,小檗碱(5、10μmol/L)和芒柄花黄素(5、10μmol/L)联合作用于5-8F和6-10B细胞后,显示小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞增殖以协同效应为主;小檗碱联合芒柄花黄素显著降低鼻咽癌细胞TGF-β1和Smad3蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。采用TGF-β1激活TGF-β1信号通路后,小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞迁移的效应显著降低(P<0.01);与小檗碱10μmol/L+芒柄花黄素10μmol/L组相比,TGF-β1+小檗碱+芒柄花黄素组细胞TGF-β1、Smad3、磷酸化细胞外调节激酶1/2(phosphorylated extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)蛋白表达水平显著上调(P<0.05、0.01),N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低(P<0.01)。结论小檗碱联合芒柄花黄素能够协同抑制鼻咽癌细胞迁移,其作用机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞 小檗碱 芒柄花黄素 细胞迁移 转化生长因子-β1信号通路 协同效应
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人鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜观察 被引量:1
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作者 霍霞 林哲睿 +4 位作者 孙烁磊 黄文献 邱坤良 许险峰 徐锡金 《激光生物学报》 CAS CSCD 2003年第1期43-48,共6页
为探讨高分化和低分化鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的空间结构,采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽(FITC-phalloidin)标记F-actin、碘化吡啶(PI)标记核酸的荧光探针双重标记技术,对鼻咽癌细胞F-acti... 为探讨高分化和低分化鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的空间结构,采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽(FITC-phalloidin)标记F-actin、碘化吡啶(PI)标记核酸的荧光探针双重标记技术,对鼻咽癌细胞F-actin进行光学切片、三维重组及形态学观察。实验结果可见高分化鼻咽癌细胞F-actin呈芒刺状分布于细胞表面,而在细胞突起末端细胞间连接处呈束状、放射状密集分布;低分化鼻咽癌细胞F-actin明显少于高分化鼻咽癌细胞,仅沿细胞膜表面呈弯曲细小绒毛状分布。结果表明F-actin在细胞内的空间分布与鼻咽癌的分化类型有关,肿瘤或恶性转化细胞的F-actin在形态和结构方面有异常改变;共聚焦激光扫描显微镜光学切片结合荧光双重标记技术是研究细胞骨架结构的理想方法。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞 激光共聚焦显微镜 F-ACTIN 光学切片
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杨梅素调节JAK-STAT-IRF1信号通路对鼻咽癌细胞免疫逃逸的影响
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作者 张玉杰 李佳慧 司宇光 《河北医药》 CAS 2023年第24期3717-3721,共5页
目的探讨杨梅素对鼻咽癌细胞免疫逃逸的影响及对JAK-STAT-IRF1信号通路的调节作用。方法体外实验:培养人鼻咽癌CNE1细胞并分为对照组、杨梅素L组、杨梅素M组、杨梅素H组和杨梅素H+Broussonin E组,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst法检细... 目的探讨杨梅素对鼻咽癌细胞免疫逃逸的影响及对JAK-STAT-IRF1信号通路的调节作用。方法体外实验:培养人鼻咽癌CNE1细胞并分为对照组、杨梅素L组、杨梅素M组、杨梅素H组和杨梅素H+Broussonin E组,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst法检细胞凋亡;蛋白免疫印迹(Western blot)技术验证细胞叉头样转录因子3(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、磷酸化(p)-Janus激酶(JAK)1、JAK1、p-JAK2、JAK2、p-信号转导与转录激活子(STAT)1、STAT1、干扰素调节因子1(IRF1)蛋白表达。体内实验:建立BALB/c裸鼠鼻咽癌模型,随机分为模型组、杨梅素低剂量组、杨梅素中剂量组、杨梅素高剂量组和紫杉醇组,取瘤体并称重,流式细胞术检测巨噬细胞程序性死亡受体1配体(PD-L1)表达,Western blot法检测瘤体Foxp3、RORγt、p-JAK1、JAK1、p-JAK2、JAK2、p-STAT1、STAT1、IRF1蛋白表达。结果与对照组相比,杨梅素L、M、H组CNE1细胞增殖能力以及RORγt、p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT1/STAT1、IRF1蛋白表达降低,细胞凋亡率和Foxp3蛋白表达增加(P<0.05);与杨梅素H组相比,杨梅素H+Broussonin E组细胞增殖能力以及RORγt、p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT1/STAT1、IRF1蛋白表达升高,细胞凋亡率和Foxp3蛋白表达减少(P<0.05);与模型组对比,杨梅素低、中、高剂量组Foxp3蛋白表达增加,瘤体质量以及PD-L1、RORγt、p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT1/STAT1、IRF1蛋白表达减少(P<0.05)。结论杨梅素可能通过抑制JAK-STAT-IRF1信号通路的激活抑制鼻咽癌细胞免疫逃逸。 展开更多
关键词 杨梅素 鼻咽癌细胞 Janus激酶/信号转导与转录激活子/干扰素调节因子1信号通路 免疫逃逸
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益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞转移潜能的细胞迁徙干预机制 被引量:4
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作者 刘丹丹 何迎春 尚云峰 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2010年第1期18-21,共4页
目的观察益气解毒方原方及其拆方对人鼻咽癌细胞CNE2 nm23-H1表达活性及运动潜能的影响,分析nm23-H1活性与瘤细胞迁徙潜能的关系,从细胞迁徙干预机制探讨其对鼻咽癌细胞转移潜能的抑制效应。方法制备益气解毒方原方及其拆方的大鼠药物血... 目的观察益气解毒方原方及其拆方对人鼻咽癌细胞CNE2 nm23-H1表达活性及运动潜能的影响,分析nm23-H1活性与瘤细胞迁徙潜能的关系,从细胞迁徙干预机制探讨其对鼻咽癌细胞转移潜能的抑制效应。方法制备益气解毒方原方及其拆方的大鼠药物血浆,MTT法确定药物血浆的IC50浓度,分别作用于体外培养的CNE2细胞;划痕试验检测细胞迁徙潜能,免疫细胞化学法检测nm23-H1基因表达活性,比较分析各项检测指标的组间差异。结果与正常大鼠血浆组比较,益气解毒方原方及其拆方药物血浆分别作用24h后,细胞迁徙数和迁移距离均显著降低(P<0.05);各组药物血浆分别作用12h、24h后,CNE2细胞nm23-H1表达水平显著升高(P<0.05),尤以原方和解毒组分作用明显,而益气组分和养阴组分则否。结论益气解毒方促进抑癌基因nm23-H1的表达活性并进而影响瘤细胞迁徙运动能力的生物力学机制,可能是该方抑制鼻咽癌细胞转移潜能的药理效应机制之一。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞 转移潜能 益气解毒方 迁徙运动 生物力学机制
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鼻咽癌变不同时期的体外三维培养模型建立的实验研究 被引量:2
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作者 廖雯婷 汪慧民 +8 位作者 李满枝 宋立兵 张玲 麦海强 夏云飞 郑美莲 符立梧 曾益新 曾木圣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1317-1321,共5页
背景与目的:三维培养更能模拟体内细胞的微环境,细胞的生物学特性比二维培养更接近于活体组织。本研究建立能反映鼻咽癌变过程中不同时期的鼻咽上皮细胞三维培养模型,为进一步研究鼻咽癌的发病机制提供模型。方法:非癌鼻咽活检标本体外... 背景与目的:三维培养更能模拟体内细胞的微环境,细胞的生物学特性比二维培养更接近于活体组织。本研究建立能反映鼻咽癌变过程中不同时期的鼻咽上皮细胞三维培养模型,为进一步研究鼻咽癌的发病机制提供模型。方法:非癌鼻咽活检标本体外培养用于建立鼻咽正常细胞;早期和晚期传代的正常细胞NPNE2、永生化的鼻咽上皮细胞NP69SV40T、鼻咽癌细胞SUNE-1及其高转移潜能亚株5-8F在Matrigel中培养,建立三维培养模型。结果:从非癌鼻咽活检标本长出具有上皮细胞形态特征的细胞,细胞出现衰老前,在体外能够增殖8~10代,角蛋白免疫组化证实其为上皮起源。除晚期传代的NPNE2外,所有细胞均能在三维体系中增殖,NPNE2及NP69SV40细胞主要形成网状结构,克隆形成数少,边沿清楚而光滑,并且细胞间连接紧密;SUNE-1和5-8F形成大而形态不规则的克隆,细胞间连接松散并且克隆边沿不规则,此外,5-8F尚形成大量的伪足,但不形成网状结构;而晚期传代的NPNE2增殖能力低,无法形成细胞网状结构,也不形成细胞克隆。结论:从非癌鼻咽活检标本成功培养出正常鼻咽上皮细胞,采用正常细胞、永生化鼻咽上皮细胞及肿瘤细胞建立了可能反映体内鼻咽癌发生、发展不同时期的三维培养模型。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 鼻咽癌细胞 正常上皮细胞 三维培养
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