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Promoter hypomethylation and reactivation of MAGE-A1 and MAGE-A3 genes in colorectal cancer cell lines and cancer tissues 被引量:17
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作者 Kyung-Hee Kim Jin-Sung Choi +2 位作者 Il-Jin Kim Ja-Lok Ku Jae-Gahb Park 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第35期5651-5657,共7页
AIM: To verify the expression and methylation status of the MAGE-A1 and MAGE-A3 genes in colorectal cancer tissues and cancer cell lines. METHODS: We evaluated promoter demethylation status of the MAGE-A1 and MAGE-A... AIM: To verify the expression and methylation status of the MAGE-A1 and MAGE-A3 genes in colorectal cancer tissues and cancer cell lines. METHODS: We evaluated promoter demethylation status of the MAGE-A1 and MAGE-A3 genes by RT-PCR analysis and methylation-specific PCR (MS-PCR), as well as sequencing analysis, after sodium bisulfite modification in 32 colorectal cancer cell lines and 87 cancer tissues. RESULTS: Of the 32 cell lines, MAGE-A1 and MAGE-A3 expressions were observed in 59% and 66%, respectively. Subsequent to sodium bisulfite modification and MSPCR analysis, the promoter hypomethylation of MAGE-A1 and MAGE-A3 was confirmed in both at 81% each. Promoter hypomethylation of MAGE-A1 and MAGE-A3 in colorectal cancer tissues was observed in 43% and 77%, respectively. Hypomethylation of MAGE-A1 and MAGE-A3 genes in corresponding normal tissues were observed in 2% and 6%, respectively. CONCLUSION: The promoter hypomethylation of MAGE genes up-regulates its expression in colorectal carcinomas as well as in gastric cancers and might play a significant role in the development and progression of human colorectal carcinomas. 展开更多
关键词 mage-A1 mage-A3 PROMOTER HYPOMETHYLATION Colorectal cancer
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MAGE-1、MAGE-3基因在胃癌和胃活检组织中的表达及意义 被引量:13
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作者 陈雪华 刘炳亚 +4 位作者 张冬青 张奕 张轶 李建芳 朱正纲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期310-313,共4页
目的 :检测黑色素瘤抗原基因 1、 3(MAGE 1和MAGE 3)在胃癌中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法 :采用RT PCR法 ,对 36例胃癌患者的癌组织和相应的癌旁“正常”黏膜 ,以及 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织中 ,MAGE 1和MAG... 目的 :检测黑色素瘤抗原基因 1、 3(MAGE 1和MAGE 3)在胃癌中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法 :采用RT PCR法 ,对 36例胃癌患者的癌组织和相应的癌旁“正常”黏膜 ,以及 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织中 ,MAGE 1和MAGE 3基因的表达进行研究 ,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果 :36例胃癌组织中 ,MAGE 1基因的表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36 ) ,MAGE 3基因的表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36 )。MAGE 1、MAGE 3的表达均为阳性者为 5 2 .78% (19/ 36 )。癌旁“正常”黏膜中 ,MAGE 1、MAGE 3基因的表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36 )和4 4 .4 4 % (16 / 36 ) ;MAGE 1、MAGE 3基因表达双阳性者为 30 .5 5 % (11/ 36 )。在 37例胃慢性炎症患者中 ,MAGE 1、MAGE 3基因的表达阳性率 ,分别为 2 9.73% (11/ 37)和 2 7.0 3% (10 /37) ;MAGE 1、MAGE 3基因的表达双阳性者为 8.1% (3/ 37)。胃癌组织中 ,MAGE 1和MAGE 3基因表达阳性率均高于癌旁和胃慢性炎症患者 ;在肿瘤组织中的表达阳性率与肿瘤浸润的深度和分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ;而与临床病理分期及淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。结论 :基于MAGE 1和MAGE 3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用这两种蛋白作为靶? 展开更多
关键词 胃癌 慢性胃炎 mage-1 mage-3 基因表达
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MAGE-1修饰的树突状细胞体外诱导杀伤人肝癌细胞 被引量:8
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作者 刘彬彬 叶胜龙 +4 位作者 贺平 郑宁 赵燕 孙瑞霞 汤钊猷 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2001年第3期151-153,共3页
目的 通过观察肿瘤相关抗原基因 MAGE-1转导的树突状细胞(dendritic cells, DC)体外诱导对人肝癌细胞株SMMC7721的细胞毒作用,探讨基因工程DC诱导特异性抗肝癌免疫的能力及其作为新型肝癌瘤苗的可... 目的 通过观察肿瘤相关抗原基因 MAGE-1转导的树突状细胞(dendritic cells, DC)体外诱导对人肝癌细胞株SMMC7721的细胞毒作用,探讨基因工程DC诱导特异性抗肝癌免疫的能力及其作为新型肝癌瘤苗的可能性。方法用基因工程手段构建含MAGE-1基因的重组逆转录病毒。经包装后转染从人外周血单个核细胞(PBMNC)诱导培养的DC, Western blot方法鉴定MAGE-1基因的表达。用MTT法检测转染及对照组DC体外诱导的对靶细胞的细胞毒作用,并计算杀伤率。结果 构建了一种含MAGE-1基因的重组逆转录病毒LMSN并转染了从人PBMNC中诱导培养的DC。 Western blot方法检测到外源MAGK-1基因在转染DC中的表达。 LMSN转染DC体外诱导的淋巴细胞在效靶比10:1的情况下对靶细胞的杀伤率为78.9%± 3.6%,LXSN转染DC诱导的杀伤率为34. 7%±4.3%,而未转染DC诱导的杀伤率为3.9%±21%。三组间的差别有显著性意义(P<0.01)。结论肿瘤相关抗原基因MAGE-1修饰的DC可在体外诱导出较强的对人肝癌细胞株SMMC7721的细胞毒作用。提示这种基因工程DC可能具诱导特? 展开更多
关键词 树突细胞 基因治疗 肝细胞癌 mage-1 体外诱导
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一个新的MAGE-1表位为肝癌细胞表面HLA-B7分子递呈 被引量:9
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作者 郭爱林 隋延仿 +5 位作者 叶菁 曲萍 张晓楠 张立红 张敏 卢兴森 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期252-255,共4页
目的 :肿瘤抗原的存在是机体识别肿瘤并激活免疫系统的物质基础 ,机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,故寻找被T细胞识别的肝癌细胞抗原肽 ,为肝癌免疫治疗奠定基础。方法 :对于肝癌细胞系HHCC(HLA A2 ,A2 9,B7,B5 1) ,应用细胞膜酸洗技术... 目的 :肿瘤抗原的存在是机体识别肿瘤并激活免疫系统的物质基础 ,机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,故寻找被T细胞识别的肝癌细胞抗原肽 ,为肝癌免疫治疗奠定基础。方法 :对于肝癌细胞系HHCC(HLA A2 ,A2 9,B7,B5 1) ,应用细胞膜酸洗技术使抗原肽从细胞膜表面脱落 ,经过凝胶层析 ,反相高效液相色谱层析得到不同组份多肽 ,高效液相色谱 质谱仪联用技术获得抗原肽的一级结构 ,通过氨基酸锚定位点分析 ,预测其HLA配体类型 ;互联网上氨基酸同源性分析确定其同源性序列 ;人工合成抗原肽 ,HLA同型树突状细胞递呈合成抗原肽刺激特异性CTL反应 ,51Cr杀伤实验检测CTL对肿瘤细胞系的杀伤作用。结果 :经过反相高效液相色谱层析后可以获得 10多个组份 ,其中一个组份经过液质联用鉴定和氨基酸同源性分析确定其序列为EPVTKAEML ,是黑色素瘤抗原 1,MAGE 1(12 1 12 9)表位 ,由HLA B7分子递呈 ,体外诱导实验表明其可以诱导出较强的CTL反应。结论 :液质联用技术是寻找抗原肽的有效方法 ,MAGE 1抗原肽EPVTKAEML对于HLA B7阳性及MAGE 展开更多
关键词 肝癌 HLA-B7 液质联用技术 黑色素瘤特异性抗原1 抗原肽 mage-1
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MAGE-1基因在肝细胞性肝癌中的表达 被引量:6
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作者 刘彬彬 叶胜龙 +1 位作者 贺平 汤钊猷 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 1999年第2期91-93,共3页
目的探讨MAGE-1基因编码的肿瘤相关抗原作为肝细胞性肝癌(HCC)主动免疫治疗攻击靶点的可能性。方法用RT-PCR的方法检测了39例HCC及癌旁组织、3种人肝癌细胞株和5例非HCC病例肝组织中MAGE-1基因的表达... 目的探讨MAGE-1基因编码的肿瘤相关抗原作为肝细胞性肝癌(HCC)主动免疫治疗攻击靶点的可能性。方法用RT-PCR的方法检测了39例HCC及癌旁组织、3种人肝癌细胞株和5例非HCC病例肝组织中MAGE-1基因的表达。结果HCC癌组织中MAGE-1基因表达率明显高于癌分组织中的表达率,58.9%(2/39)对10.3%(4/39),P<001。3种细胞株均为阳性表达。结论MAGE-1基因可作为主动免疫治疗的攻击靶点,以进一步研究设计新的HCC免疫治疗策略。 展开更多
关键词 肝细胞 免疫疗法 mage-1 基因
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黑色素瘤抗原基因MAGE-1、MAGE-3和抑癌基因p53在肺癌中表达的研究 被引量:8
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作者 李秋泽 董子明 +2 位作者 赵国强 彭培立 赵洁 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第8期1106-1108,共3页
目的:分析肺癌组织MAGE-1和MAGE-3基因以及p53基因表达及其相互关系。方法:取肺癌组织标本30例,另取癌周组织作为对照。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测MAGE-1和MAGE-3基因以及p53基因的表达。结果:MAGE-1,MAGE-3在肺癌中有较... 目的:分析肺癌组织MAGE-1和MAGE-3基因以及p53基因表达及其相互关系。方法:取肺癌组织标本30例,另取癌周组织作为对照。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测MAGE-1和MAGE-3基因以及p53基因的表达。结果:MAGE-1,MAGE-3在肺癌中有较高表达,MAGE-3的表达高于MAGE-1的表达。p53在肺癌中表达较低,在正常组织中表达较高;MAGE-1在肺腺癌中表达较鳞癌高,MAGE-3在肺鳞癌中表达较高;MAGE-1,MAGE-3的表达可能与肿瘤分化程度无关;p53在小细胞肺癌中的表达有待进一步研究;p53与MAGE在体内表达成负相关。结论:MAGE-1、MAGE-3和p53在肺癌组织与正常组织中有不同的表达,MAGE-1、MAGE-3的表达与病理类型有关,与肿瘤分化无关。 展开更多
关键词 肺癌 mage-1 mage-3 p53 逆转录聚合酶链反应
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黑色素瘤抗原基因的检测及其在胃癌中的表达 被引量:6
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作者 张颖 陈世耀 +1 位作者 刘天舒 王吉耀 《中国临床医学》 北大核心 2005年第1期62-64,共3页
目的:检测并探讨分析黑色素瘤抗原基因(MAGE)在胃癌中的表达及其分布特点。方法:采用RT-PCR技术检测70 例胃癌组织及相应的癌旁正常组织中MAGE表达。结果:70例胃癌组织中MAGE-1、MAGE-3的阳性率分别为28.6%、35.7%,癌旁正常组织均不表... 目的:检测并探讨分析黑色素瘤抗原基因(MAGE)在胃癌中的表达及其分布特点。方法:采用RT-PCR技术检测70 例胃癌组织及相应的癌旁正常组织中MAGE表达。结果:70例胃癌组织中MAGE-1、MAGE-3的阳性率分别为28.6%、35.7%,癌旁正常组织均不表达。基因表达与患者的年龄、性别、Hp感染、肿瘤组织学分型无关(P>0.05)。结论:MAGE基因在胃癌组织中特异性表达,可以此作为靶抗原进行肿瘤免疫治疗。 展开更多
关键词 表达 mage-1 黑色素瘤抗原基因 胃癌组织 癌旁正常组织 靶抗原 mage基因 目的 分布特点
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肿瘤特异性抗原超家族新成员apr-1基因的克隆及亚细胞定位 被引量:7
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作者 晏伟 王文亮 +4 位作者 朱峰 成胜权 李擒龙 王丽 王成济 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期129-134,共6页
背景与目的apr1是我们在凋亡的人早幼粒白血病细胞HL-60中克隆的一个人类新基因,初步研究表明它可能是一个凋亡相关基因(GenBank ID NM_014061)。为进一步了解该基因的功能背景,我们克隆了该基因并进行了生物信息学分析和亚细胞定位。... 背景与目的apr1是我们在凋亡的人早幼粒白血病细胞HL-60中克隆的一个人类新基因,初步研究表明它可能是一个凋亡相关基因(GenBank ID NM_014061)。为进一步了解该基因的功能背景,我们克隆了该基因并进行了生物信息学分析和亚细胞定位。方法利用逆转录PCR方法克隆该基因的cDNA序列,测序后利用生物信息学方法进行了基因组定位、氨基酸保守结构域搜索、同源蛋白比较和基因进化树分析;并进行了该基因的亚细胞定位。结果apr.1定位于人染色体上的Xp11.22,有两个MAGE家族结构域,基因进化上同源于MAGE.D1和Necdin,基因表达产物定位于真核细胞的细胞核。结论apr.1属于MAGE家族的一个新分子,可能属于Ⅱ类MAGE基因。 展开更多
关键词 凋亡 apr-1 mage 肿瘤
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MAGE-1基因在人食管癌中的表达及基因克隆 被引量:6
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作者 彭良平 王贵齐 +4 位作者 冉宇靓 刘海燕 孙立新 遇珑 杨治华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-99,共3页
目的研究 MAGE- 1基因在人食管癌中的表达 ,分析 MAGE- 1抗原能否作为食管癌的治疗性候选疫苗。方法采用 RT- PCR方法检测了 MAGE- 1基因在 30例食管癌组织和相应癌旁正常组织中的表达 ;并从食管癌组织中扩增了 MAGE-1c DNA全长序列 ,... 目的研究 MAGE- 1基因在人食管癌中的表达 ,分析 MAGE- 1抗原能否作为食管癌的治疗性候选疫苗。方法采用 RT- PCR方法检测了 MAGE- 1基因在 30例食管癌组织和相应癌旁正常组织中的表达 ;并从食管癌组织中扩增了 MAGE-1c DNA全长序列 ,经酶切后与 p ET- 30 a(+ )质粒载体连接 ,经初步酶切鉴定后 ,进行 DNA序列分析 ,获得克隆基因的核苷酸序列。结果 MAGE- 1基因在食管癌组织中的表达率为 43% (13/30 ) ,在 30例相应癌旁正常组织中未见表达 ;成功地克隆了MAGE- 1c DNA全长序列。结论由于 MAGE- 1基因在食管癌中高频率表达以及 MAGE- 1抗原具有 HL A- I类分子限制性CTL 识别表位 ,因此 ,MAGE- 展开更多
关键词 食管肿瘤 mage-1 反转录聚合酶链反应 基因克隆 基因疫苗治疗
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肝癌患者围手术期外周血黑色素瘤抗原-1mRNA和甲胎蛋白mRNA检测与术后复发的关系 被引量:6
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作者 杨世忠 董家鸿 +2 位作者 朱瑾 李昆 张雨 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期595-598,共4页
目的探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE1mRNA和甲胎蛋白(AFP)mRNA表达水平其与术后转移复发的关系。方法通过巢式RT PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE1mRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访。同时以22例肝炎后肝硬化... 目的探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE1mRNA和甲胎蛋白(AFP)mRNA表达水平其与术后转移复发的关系。方法通过巢式RT PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE1mRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访。同时以22例肝炎后肝硬化、11例肝血管瘤、12例肝转移癌患者和20例健康志愿者外周血标本作为对照组进行了MAGE1mRNA和AFPmRNA的对比检测。结果MAGE1mRNA在12例肝转移癌患者外周血中的检出率为33.3%(4/12);肝炎后肝硬化、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出。AFPmRNA在肝炎后肝硬化患者外周血中的检出率为13.6%(3/22),在肝转移癌、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出。45例肝细胞癌患者外周血中,MAGE1mRNA/AFPmRNA的检出率分别是术前42.2%(19/45)/51.1%(23/45),术后7d20%(9/45)/24.4%(11/45),术后28d15.6%(7/45)/22.2%(10/45)。统计分析提示,术后28d肝细胞癌患者外周血检出MAGE1mRNA/AFPmRNA预示患者近期复发。并且双标志物联合检测较单标志物检测对预测复发具有更高的敏感性。结论采用巢式RT PCR的方法联合检测肝细胞癌患者术后28d外周血中癌特异性的MAGE1mRNA和肝细胞特异性的AFPmRNA有助于预测肝细胞癌患者术后的转移复发。 展开更多
关键词 患者 外周血 mage-1 AFP 肝细胞癌 RNA 术后 RT—PCR 特异性 甲胎蛋白
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非小细胞肺癌中MAGE-A1的表达与Ki-67表达及TIL反应的相关性 被引量:2
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作者 岳君秋 刁路明 +5 位作者 李蓓芸 邹祖玉 肖静 陈道平 樊利芳 官静 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期219-222,共4页
背景与目的:已有研究指出肿瘤特异性抗原———MAGE(melanomaantigen)家族中某些成员的表达可能与增殖旺盛的幼稚细胞关系密切,但鲜见与肿瘤细胞的增殖及宿主局部免疫反应关系的报道。本研究旨在探讨非小细胞肺癌(non-smallcelllungcarc... 背景与目的:已有研究指出肿瘤特异性抗原———MAGE(melanomaantigen)家族中某些成员的表达可能与增殖旺盛的幼稚细胞关系密切,但鲜见与肿瘤细胞的增殖及宿主局部免疫反应关系的报道。本研究旨在探讨非小细胞肺癌(non-smallcelllungcarcinoma,NSCLC)中MAGE-A1表达与Ki-67表达、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltratinglymphocytes,TIL)反应以及组织学分级和病理类型的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测甲醛固定、石蜡包埋的30例NSCLC标本中MAGE-A1、Ki-67表达水平及TIL反应状况。结果:MAGE-A1阳性率为80.00%(24/30),高表达和低表达分别为58.33%(14/24)和41.67%(10/24)。Ki-67阳性率为93.33%(28/30),高表达和低表达分别为57.14%(16/28)和42.86%(12/28)。TIL反应阳性22例。MAGE-A1阳性率的高低与Ki-67阳性表达的高低及肿瘤TIL反应强度之间均呈正相关(rs分别为0.578和0.505,P<0.005),其表达状况在不同组织学分级和病理类型之间的差异无显著性(P>0.05)。结论:NSCLC中MAGE-A1阳性表达的肿瘤细胞具有高增殖活性;同时MAGE-A1表达上调显示肿瘤细胞抗原性增强,引起局部TI反应相应增强。提示对此类患者,有望利用MAGE-A1作为免疫治疗的攻击靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mage-A1 KI-67 肿瘤浸润淋巴细胞 免疫组织化学
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直肠癌中肿瘤/睾丸抗原相关基因的表达 被引量:6
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作者 梁爽 王晓华 +1 位作者 赵艳明 杨华 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第1期91-93,共3页
目的检测MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1基因在直肠癌中的表达情况,探索其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法应用MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1单克隆抗体,对68例直肠癌组织进行免疫组织化学法(SP法)检测,SPSS统计软件分析所得数据。结果在检测... 目的检测MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1基因在直肠癌中的表达情况,探索其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法应用MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1单克隆抗体,对68例直肠癌组织进行免疫组织化学法(SP法)检测,SPSS统计软件分析所得数据。结果在检测的68例直肠癌标本中,MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1的阳性表达率分别为30.9%(21/68)、23.5%(16/68)、17.6%(12/68)。多个CTA基因可在直肠癌中同时表达,至少表达一种CTA的频率为67.7%(46/68),同时表达两种或两种以上CTA的频率是20.6%(14/68),同时表达三种CTA的频率为5.9%(4/68)。阳性颗粒均位于细胞质。MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1基因的表达主要集中在肿瘤细胞分化较好Ⅰ级直肠腺癌,阳性率有显著性差异(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、Dukes分期和淋巴结转移无显著相关性(P>0.05)。结论 CT抗原(MAGE-1、NY-ESO-1、SCP-1)在直肠癌组织中有高特异的表达,这使得用这些CTA编码的蛋白作为疫苗用于直肠癌的免疫治疗成为可能。 展开更多
关键词 肿瘤/睾丸抗原 mage-1 NY-ESO-1 SCP-1 直肠癌 免疫疗法
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黑色素瘤抗原-1,-3基因在脑胶质瘤中的表达及意义 被引量:4
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作者 赵时雨 楚胜华 +2 位作者 袁先厚 江普查 李志强 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2005年第9期908-910,共3页
目的探讨肿瘤特异性黑色素瘤抗原(MAGE)-1、-3基因作为胶质瘤的免疫检测和治疗、基因治疗分子标志物的可行性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测52例胶质瘤、6例正常脑组织、5例脑脓肿、10例脑膜瘤组织标本中MAGE-1、MAGE-3mRN... 目的探讨肿瘤特异性黑色素瘤抗原(MAGE)-1、-3基因作为胶质瘤的免疫检测和治疗、基因治疗分子标志物的可行性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测52例胶质瘤、6例正常脑组织、5例脑脓肿、10例脑膜瘤组织标本中MAGE-1、MAGE-3mRNA的表达。结果脑胶质瘤中MAGE-1、MAGE-3mRNA阳性表达率分别为64.5%、55.8%,MAGE-1及MAGE-3mRNA同时表达22例(42.3%)。正常脑组织、脑脓肿和脑膜瘤均不表达MAGE-1和MAGE-3mRNA。在胶质瘤组织中MAGE-1、MAGE-3mRNA的表达均与病理级别和病人生存时间有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤部位及肿瘤直径无关(P>0.05)。MAGE-1的表达与MAGE-3的表达有关(P<0.05)。结论基于MAGE-1和MAGE-3基因在胶质瘤中的高表达率,可利用这两种蛋白作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种临床有用的随访指标。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 mage-1 mage-3 基因表达
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MAGE-3基因的表达检测和重组MAGE抗原的制备及其应用 被引量:4
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作者 彭良平 刘海燕 +2 位作者 冉宇靓 王贵齐 杨治华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期107-111,共5页
目的克隆MAGE-3基因并检测其在人食管癌组织中的表达情况;重组表达MAGE-1和MAGE-3抗原,用于食管癌的治疗性蛋白疫苗的免疫原性研究。方法RT-PCR法检测了MAGE-3在人食管癌组织中的表达情况。采 用DNA重组技术将MAGE-1和MAGE-3全长cDNA... 目的克隆MAGE-3基因并检测其在人食管癌组织中的表达情况;重组表达MAGE-1和MAGE-3抗原,用于食管癌的治疗性蛋白疫苗的免疫原性研究。方法RT-PCR法检测了MAGE-3在人食管癌组织中的表达情况。采 用DNA重组技术将MAGE-1和MAGE-3全长cDNA 克隆至pET30a(+)载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE 和 wes-tern blot鉴定后,制备其可溶性蛋白,研究其对人T细胞增殖能力的影响。结果MAGE-3基因 在食管癌组织中的表达率为50%(15/30);在30例相应癌旁正常组织中未见表达。成功获得了MAGE-1和MAGE-3可溶性蛋白;人 T细胞能够对自身抗原递呈细胞加工处理的MAGE-1和MAGE-3蛋白产生应答。结论MAGE-1和MAGE-3蛋白可能是用于食管癌免疫治疗的免疫原性较强的靶抗原。 展开更多
关键词 食管肿瘤 RTP-PCR mage-1 mage-3 重组蛋白 T淋巴细胞 免疫原性研究
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MAGE-A1和MAGE-A3在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义 被引量:6
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作者 国丽茹 王淑彬 +3 位作者 桑梅香 陈丽 孟令振 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期402-408,共7页
目的:探讨黑色素瘤抗原基因-A1(MAGE-A1)和MAGE-A3在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:选取2006年1月至2010年1月河北医科大学第四医院神经外科手术切除的78例脑胶质瘤组织标本和15例车祸死亡捐献者的正常脑组织标本。用RT-PCR... 目的:探讨黑色素瘤抗原基因-A1(MAGE-A1)和MAGE-A3在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:选取2006年1月至2010年1月河北医科大学第四医院神经外科手术切除的78例脑胶质瘤组织标本和15例车祸死亡捐献者的正常脑组织标本。用RT-PCR法检测胶质瘤组织中MAGE-A1和MAGE-A3的表达,分析其表达水平与患者预后的关系;用MSP-PCR术检测MAGE-A1和MAGE-A3基因启动子区的甲基化状态,分析两者表达与甲基化之间的关系;用RT-PCR法检测胶质瘤U251和U87细胞中MAGE-A1和MAGE-A3表达以及经DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)联合作用后两者的表达水平。结果:78例胶质瘤组织中MAGE-A1和MAGE-A3 mRNA阳性表达率分别为65.34%和38.46%,而在15例正常脑组织中未发现2种m RNA表达。MAGE-A1阳性组患者5年生存率较阴性组低(P<0.05)。MAGE-A1和MAGE-A3基因启动子区去甲基化水平与其在mRNA水平上的表达均有显著的相关性(均P<0.01)。未经5-Aza-CdR和TSA处理的U87细胞未见MAGE-A1和MAGE-A3 mRNA的表达,U251细胞则有少量表达。单独给予TSA不能引起MAGE-A1和MAGE-A3基因的表达激活,单独给予5-Aza-CdR或与TSA合用可以引起该2个基因的表达激活,且两者合用的作用优于单独给药。结论:脑胶质瘤组织中有不同程度的MAGE-A1和MAGE-A3基因表达,MAGE-A1基因表达与患者的预后不良相关。DNA启动子区甲基化和组蛋白乙酰化是MAGE-A1和MAGE-A3基因表达激活的重要机制。 展开更多
关键词 胶质瘤 U87细胞 U251细胞 黑色素瘤抗原基因-A1 黑色素瘤抗原基因-A3 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
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RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究 被引量:5
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作者 程光 章翔 +5 位作者 鲍炜 张赟 张新海 曹卫东 高大宽 宋蕾 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期292-297,i0011,共7页
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上... 目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。 展开更多
关键词 PSUPER 短片段双链核糖核酸 核糖核酸干扰 mage1 胶质瘤
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Mage-D1对敲除小鼠骨髓间充质干细胞的矿化调控作用
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作者 陆明洁 袁洪燕 +5 位作者 徐丹 彭雪莲 邹续强 谢波 毛靖雯 温秀杰 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期2069-2080,共12页
目的探讨黑色素瘤相关抗原D1(melanoma associated antigen D1,Mage-D1)对小鼠股骨骨量和对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stromal cells,BMSCs)矿化能力的影响及潜在分子机制。方法以雌性Mage-D1基因敲除杂合子小鼠和雄性野生... 目的探讨黑色素瘤相关抗原D1(melanoma associated antigen D1,Mage-D1)对小鼠股骨骨量和对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stromal cells,BMSCs)矿化能力的影响及潜在分子机制。方法以雌性Mage-D1基因敲除杂合子小鼠和雄性野生型(wide type,WT)小鼠作为亲本小鼠,繁育Mage-D1基因敲除纯合子(Mage-D1 knock out,Mage-D1 KO)小鼠。PCR和琼脂糖凝胶电泳鉴定雄性Mage-D1基因敲除纯合子小鼠和同窝雄性野生型小鼠,micro-CT扫描用于分析小鼠股骨骨量,ELISA和化学法用于检测小鼠血清钙离子、磷离子、降钙素和甲状旁腺素水平。原代培养BMSCs并进行流式细胞术鉴定,免疫荧光染色观察Mage-D1在BMSCs中的表达。构建Mage-D1沉默慢病毒感染BMSCs,分为阴性对照组(sh-NC)和沉默组(sh-Mage-D1);细胞划痕实验检测BMSCs的迁移能力,流式细胞术和CCK-8检测BMSCs周期变化和增殖能力;矿化诱导后行碱性磷酸酶染色、茜素红染色;RT-qPCR和Western blot检测ALP、Runx2、Col1表达水平;RT-qPCR检测矿化相关基因p75NTR及MSX1以探讨潜在机制。结果与野生型小鼠相比,Mage-D1敲除纯合子小鼠股骨皮质骨厚度减小、皮质骨矿物含量降低、松质骨骨矿物含量降低、骨小梁数减少、松质骨骨表面密度降低、骨小梁分离度增大(P<0.05);敲除Mage-D1后,小鼠血钙、血磷、降钙素和甲状旁腺素水平无明显变化。Mage-D1表达于整个BMSCs内,在细胞核及胞核周围区域高表达。与sh-NC相比,sh-Mage-D1组细胞增殖能力降低(P<0.01),细胞迁移能力增强(P<0.01);矿化诱导后,sh-Mage-D1组ALP、Runx2、Col1基因(P<0.05)和蛋白(P<0.01)表达下降,碱性磷酸酶染色和茜素红染色更浅;sh-Mage-D1组细胞中p75NTR、Msx1表达水平比sh-NC组低。结论Mage-D1基因敲除可明显降低小鼠股骨骨量。Mage-D1可促进BMSCs增殖、抑制其迁移,正向调控其体外矿化,p75NTR-Dlx1/Msx1信号轴可能参与Mage-D1对骨代谢活动的调控。 展开更多
关键词 mage-D1 骨髓间充质干细胞 基因敲除 矿化调控
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MAGE-1与IL-18共表达DNA疫苗的构建与体外表达 被引量:6
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作者 时阳 杨广民 +2 位作者 李首庆 马寅芙 谭岩 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期1865-1868,共4页
目的构建MAGE-1与IL-18共表达质粒pcIL-18-MAGE并进行体外验证表达。方法设计合成MAGE-1与IL-18引物,PCR扩增其基因片段,分别构建以pcDNA3为载体的小鼠IL-18重组质粒和人MAGE-1重组质粒,pcCMV-IL-18与MAGE-1的PCR产物酶切连接构建共表... 目的构建MAGE-1与IL-18共表达质粒pcIL-18-MAGE并进行体外验证表达。方法设计合成MAGE-1与IL-18引物,PCR扩增其基因片段,分别构建以pcDNA3为载体的小鼠IL-18重组质粒和人MAGE-1重组质粒,pcCMV-IL-18与MAGE-1的PCR产物酶切连接构建共表达质粒pcIL-18-MAGE。脂质体法将构建的重组质粒转染293细胞,RT-PCR和Western印迹法验证MAGE-1和IL-18在转化细胞中的表达。结果成功获得共表达质粒pcIL-18-MAGE,RT-PCR可见目的条带,Western印迹显示转染MAGE-1与IL-18的细胞在蛋白质水平上均有表达。结论成功地构建出既表达mIL-18又表达MAGE-1的共表达质粒pcIL-18-MAGE。 展开更多
关键词 共表达DNA疫苗 mage-1 IL-18
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MAGE-A1、NY-ESO-1和KK-LC-1表达与胃癌临床病理特征的关系 被引量:4
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作者 陈美丽 张全安 +4 位作者 杨艳 禹立霞 刘宝瑞 钱晓萍 杨觅 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期1124-1129,共6页
目的检测MAGE-A1、NY-ESO-1、KK-LC-1在胃癌组织中的表达,并探讨其表达与胃癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测70例胃癌患者胃镜或手术切除标本中MAGE-A1、NY-ESO-1、KK-LC-1的表达,并比较它们的表达与胃癌临床病理特征的关... 目的检测MAGE-A1、NY-ESO-1、KK-LC-1在胃癌组织中的表达,并探讨其表达与胃癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测70例胃癌患者胃镜或手术切除标本中MAGE-A1、NY-ESO-1、KK-LC-1的表达,并比较它们的表达与胃癌临床病理特征的关系。结果MAGE-A1、NY-ESO-1和KK-LC-1在胃癌组织的阳性表达率分别为70.0%、44.3%和32.9%。MAGE-A1表达与年龄、肿瘤分期有关(P<0.05);KK-LC-1表达与肿瘤分期有关(P<0.05)。在Ⅰ~Ⅲ期患者中,NYESO-1表达与肿瘤的T分期有关(P<0.05)。结论MAGE-A1、NY-ESO-1、KK-LC-1在胃癌中呈不同程度表达,MAGE-A1阳性表达率最高,且年龄越大、肿瘤分期越晚阳性表达率越高,MAGE-A1可能可成为胃癌患者免疫治疗潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤-睾丸抗原 mage-A1 NY-ESO-1 KK-LC-1
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荧光定量PCR法扩增MAGE-1、MAGE-3及AFP基因联合检测肝癌病人外周血微小转移 被引量:3
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作者 李强 刘宁 +4 位作者 李慧 任秀宝 马维东 张毓青 郝希山 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2007年第1期13-17,共5页
目的探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA联合检测肝癌病人外周血中微小转移的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测86例原发性肝癌病人肝癌组织和外周血中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果86例原发性肝癌病人肝癌组织... 目的探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA联合检测肝癌病人外周血中微小转移的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测86例原发性肝癌病人肝癌组织和外周血中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果86例原发性肝癌病人肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的阳性率分别为34.9%(30/86)、60.5%(52/86)和69.8%(60/86);所有病人肝癌组织至少表达其中一种mRNA。外周血中阳性率分别为14.0%(12/86)、20.1%(18/86)和33.7%(29/86)。52.3%(45/86)的病人外周血至少检测到一种mRNA,较单一AFP mRNA检测阳性率明显提高(P〈0.05)。25例肝炎肝硬化病人及28例健康志愿者中未见阳性。阳性率与肿瘤TNM分期、门脉瘤栓、远处转移有关(P〈0.05)。与肿瘤大小、数目、分化程度、血清AFP水平无关(P〉0.05)。结论MAGE-1、MAGE-3结合AFP mRNA联合检测肝癌血行微小转移较单一AFP mRNA检测灵敏度高。 展开更多
关键词 肝细胞 荧光定量聚合酶链反应 mage-1 mage-3 AFP 微转移
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