石棉表面改性对石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度改变的抑制作用 被引量：10

1

作者 樊晶光 王起恩 《中国安全生产科学技术》 CAS 2006年第4期12-15,共4页

为了探讨研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺(HEL)细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。用Flou3/AM标记体外培养的HEL细胞内Ca2+后,将不同浓度的温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡过的... 为了探讨研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺(HEL)细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。用Flou3/AM标记体外培养的HEL细胞内Ca2+后,将不同浓度的温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡过的温石棉与HEL细胞作用1h,荧光分光光度计测定细胞内[Ca2+]i。结果显示,20、40、80μg/ml温石棉单独作用于HEL细胞1h,可使HEL细胞内[Ca2+]i浓度分别升高3.0%、53.1%和116.7%,且具有明显的剂量-效应关系(r=0·976,P=0·024)。经三种化合物预处理的温石棉组HEL细胞内[Ca2+]i浓度均明显低于未处理温石棉组。得出结论,温石棉可致人胚肺细胞内游离钙离子浓度升高,但用三种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度的升高。 展开更多

关键词 温石棉 表面改性 人胚肺细胞 细胞内游离钙离子

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LSCM观察三七总皂甙及其组分对游离钙离子影像变化的影响 被引量：8

2

作者 邓漪平 罗颖祖 +2 位作者 关超然 梁育民 张涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期437-440,共4页

用盖玻片或ＭａｔＴｅｋ培养皿培养猪主动脉内皮细胞（ａＥＣ）约１８ｈ后，以荧光探针（ｆｌｕｏ－３／ＡＭ终浓度１０μｍｏｌ·Ｌ－１）负载，当细胞内游离钙离子（Ｃａ２＋）与ｆｌｕｏ－３结合后，通过激光扫描共聚焦显微镜（... 用盖玻片或ＭａｔＴｅｋ培养皿培养猪主动脉内皮细胞（ａＥＣ）约１８ｈ后，以荧光探针（ｆｌｕｏ－３／ＡＭ终浓度１０μｍｏｌ·Ｌ－１）负载，当细胞内游离钙离子（Ｃａ２＋）与ｆｌｕｏ－３结合后，通过激光扫描共聚焦显微镜（ＩｎＳＩＧＨＴ－ｐｌｕｓＩＱ型）观察细胞的荧光影像变化。基于三七总皂甙（ｔ－ＰＮＳ）对ａＥＣ所产生的生物活性物质有明显的作用，本拟进一步探索上述药物对ａＥＣ中［Ｃａ２＋］；的影响。实验结果显示：在ＡＴＰ作用后，ｔ－ＰＮＳ可使ａＥＣ内的荧光强度在２０～８０ｓ内急剧升高至峰值。但其组分Ｒｂ１及Ｒｇ１使荧光强度有下降或无明显变化。提示ｔ－ＰＮＳ有使内皮细胞［Ｃａ２＋］；升高的作用。 展开更多

关键词 三七 总皂甙 RB1 RG1 激光 显微镜 钙离子

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三七总皂甙诱导MSCs分化为神经元样细胞时胞内钙离子浓度变化的研究 被引量：8

3

作者 项平 撒亚莲 +3 位作者 黄锦桃 陈文芳 朱永红 李海标 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期241-244,共4页

目的探讨三七总皂甙(tPNS)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞过程中细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。方法LDMEM冲洗SD大鼠股骨骨髓腔,培养大鼠MSCs。选用第5代MSCs进行诱导分化,用含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)... 目的探讨三七总皂甙(tPNS)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞过程中细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。方法LDMEM冲洗SD大鼠股骨骨髓腔,培养大鼠MSCs。选用第5代MSCs进行诱导分化,用含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的LDMEM培养液预诱导24h,加入含10μmol/LFluo3/AM的LDMEM培养液负载30min,最后更换成含三七总皂甙0.25g/L的无血清培养液,同时在波长为488nm激光下扫描观测细胞形态和荧光强度的变化。结果更换三七总皂甙诱导液后,细胞内荧光强度逐渐增加,到100s达高峰值,其后逐渐减弱,但20min时细胞荧光强度仍高于诱导前,此时可见MSCs开始向神经元样细胞分化。结论三七总皂甙在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞过程中胞内游离钙离子[Ca2+]i浓度升高。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 神经元 三七总皂甙 细胞内游离钙离子

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缬草提取物预处理对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：7

4

作者 杨淑红 陈芳 +1 位作者 马红梅 王腾 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第5期639-643,共5页

目的:观察缬草提取物(VOL)预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤和相关生化指标以及细胞内游离钙的影响,探讨VOL抗I/R损伤的机制。方法:利用Langendorff建立大鼠离体心脏I/R模型,观察左心室发展压(LVDP)恢复和再灌注痉挛度。用生化... 目的:观察缬草提取物(VOL)预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤和相关生化指标以及细胞内游离钙的影响,探讨VOL抗I/R损伤的机制。方法:利用Langendorff建立大鼠离体心脏I/R模型,观察左心室发展压(LVDP)恢复和再灌注痉挛度。用生化技术检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)的活性以及心肌细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、ATP酶(ATPase)活性和丙二醛(MDA)含量,并用激光扫描共聚焦显微镜,借用Fluo-3/AM荧光染色技术观察心肌细胞内Ca2+强度。结果:①VOL预处理对心肌I/R损伤具有明显保护作用,并随浓度增加,对心脏保护作用逐渐增强,再灌注痉挛度明显减弱,心脏从缺血后恢复跳动更迅速,心律失常的发生越来越少,与I/R组相比,100mg/L VOL使LVDP的恢复从(20.35±2.81)%增加到(91.87±6.52)%(P<0.01),再灌注痉挛度从(89.27±9.31)mmHg减轻为(12.23±3.51)mmHg(P<0.01)。②VOL预处理明显降低LDH、CK活性和MDA含量,显著增加SOD、GSHPx、ATPase的活性,且随VOL浓度增高,上述作用更加明显,100mg/L VOL预处理组各项生化指标与对照组无明显差异。③VOL使I/R损伤后心室肌细胞内Ca2+荧光强度明显减少,随着VOL浓度增高,减少细胞内Ca2+的作用更加强烈。与I/R组相比,100mg/L的VOL使心肌细胞内Ca2+荧光强度从144.85±16.41减少到了51.83±11.61(P<0.01)。结论:VOL预处理能明显抵抗I/R损伤,可能机制与VOL减少心脏I/R时心肌细胞内游离钙浓度的增加和抗脂质过氧化有密切关系。 展开更多

关键词 缬草提取物 缺血再灌注 细胞内游离钙离子 脂质过氧化 心脏保护 大鼠

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缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的肥大心肌细胞胞内钙的影响 被引量：3

5

作者 程冕 张存泰 +6 位作者 宋玉娥 王琳 吕家高 王岚 刘念 阮燕菲 白融 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期695-697,共3页

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对AngⅡ诱导的肥大心肌细胞胞内钙([Ca2+]i)变化的影响,并探讨其机制。方法:原代培养的大鼠心肌细胞,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率,利用共聚焦显微镜技... 目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对AngⅡ诱导的肥大心肌细胞胞内钙([Ca2+]i)变化的影响,并探讨其机制。方法:原代培养的大鼠心肌细胞,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率,利用共聚焦显微镜技术测定[Ca2+]i。结果:AngⅡ诱导心肌细胞肥大48h后[Ca2+]i明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);缬沙坦预处理后,[Ca2+]i与肥大组相比下降,差异有统计学意义(P<0.01),与空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AngⅡ诱导肥大心肌细胞[Ca2+]i增加,缬沙坦通过阻断AT1受体,抑制肥大心肌细胞[Ca2+]i增加。 展开更多

关键词 缬沙坦 心肌细胞 肥大 细胞内游离钙 血管紧张素Ⅱ

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大黄对内毒素刺激巨噬细胞分泌和细胞[Ca^(2+)]_i的抑制作用特征 被引量：2

6

作者 杨文修 王辉 +2 位作者 刘曼 余奕 吴咸中 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第S1期216-219,共4页

目的:研究大黄影响正常的及内毒素细菌脂多糖(LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的特征及其与细胞[Ca^(2+)]_i 的变化关系。方法:利用 TNF-α敏感细胞系 L929,用 MTT法检测 PMφ分泌的 TNF-α量;用荧光探针和... 目的:研究大黄影响正常的及内毒素细菌脂多糖(LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的特征及其与细胞[Ca^(2+)]_i 的变化关系。方法:利用 TNF-α敏感细胞系 L929,用 MTT法检测 PMφ分泌的 TNF-α量;用荧光探针和荧光光谱法分别测定多细胞和单细胞的[Ca^(2+)]_i。结果:适宜浓度的大黄可轻度活化正常的 PMφ分泌 TNF-α和升高[Ca^(2+)]_i,大黄对 LPS 刺激的 PMφ分泌 TNF-α和升高[Ca^(2+)]_i 有剂量依赖性的抑制效应,1.0%大黄分别抑制了 LPS 刺激的 PMφTNF-α分泌量的92.5%和[Ca^(2+)]_i升高的90.5%。其抑制作用主要表现在给药的早期阶段。结论:大黄对 PMφ分泌 TNF-α有双向调节作用,降低细胞[Ca^(2+)]_i 是其抑制 LPS 刺激作用的细胞内信号传导的关键环节。 展开更多

关键词 大黄 内毒素 巨噬细胞 肿瘤坏死因子 细胞内自由钙离子

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ET-1对人视网膜色素上皮细胞内游离钙浓度的影响 被引量：1

7

作者 王建洲 惠延年 +5 位作者 王海燕 白建伟 徐渊 王雨生 胡丹 马吉献 《眼科新进展》 CAS 2008年第12期886-889,共4页

目的观察内皮素(endothelin-1,ET-1)对体外培养视网膜色素上皮(retinal pig-mental epithelium,RPE)细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法用共聚焦显微镜观察1×10-12～0.1×10-6mol.L-1ET-1作用后fluo-3/AM负载的RPE细胞... 目的观察内皮素(endothelin-1,ET-1)对体外培养视网膜色素上皮(retinal pig-mental epithelium,RPE)细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法用共聚焦显微镜观察1×10-12～0.1×10-6mol.L-1ET-1作用后fluo-3/AM负载的RPE细胞[Ca2+]i的变化和地塞米松(dexamethasone,DEX)与染料木黄酮对其作用的影响。结果含钙溶剂DMEM液溶解的ET-1,RPE细胞[Ca2+]i随着ET-1浓度的增加,反应敏感(F=8.228,P<0.01)。无钙溶剂D-Hank液溶解的ET-1,RPE细胞[Ca2+]i随着ET-1浓度的增加,反应较差(F=1.843,P>0.05),而DEX和染料木黄酮抑制了1×10-9mol.L-1ET-1诱导的[Ca2+]i的升高(F=9.945,P<0.01;F=17.864,P<0.01)。结论ET-1刺激使[Ca2+]i升高,ET-1使[Ca2+]i升高可能主要来自细胞外Ca2+的内流;DEX和染料木黄酮抑制ET-1的作用。 展开更多

关键词 内皮素 胞内游离钙 视网膜色素上皮细胞 地塞米松 染料木黄酮

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槲皮素诱导Hep G2自噬与胞内游离Ca^(2+)浓度的变化相关 被引量：1

8

作者 罗亚男 崔晓东 +2 位作者 白崇智 李玉英 王转花 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期264-269,共6页

槲皮素具有诱导细胞自噬、抑制肿瘤细胞增殖等抗癌功能,但其诱导细胞自噬的分子机制还不太清楚.本文通过激光共聚焦显微镜观察槲皮素对Hep G2细胞自噬的影响;Fluo-3 AM和Cyto-IDTM Green Detection Reagent染色标记,流式细胞术测定了槲... 槲皮素具有诱导细胞自噬、抑制肿瘤细胞增殖等抗癌功能,但其诱导细胞自噬的分子机制还不太清楚.本文通过激光共聚焦显微镜观察槲皮素对Hep G2细胞自噬的影响;Fluo-3 AM和Cyto-IDTM Green Detection Reagent染色标记,流式细胞术测定了槲皮素对Hep G2细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i及Ca2+螯合剂BAPTA-AM对自噬水平的影响.探讨了槲皮素诱导人肝癌细胞Hep G2自噬过程中[Ca2+]i的变化.结果表明,在槲皮素较低浓度范围内(0～50μg/mL),可明显抑制Hep G2细胞增殖,并以剂量依赖方式诱导细胞自噬.同时发现,槲皮素刺激Hep G2细胞可使[Ca2+]i明显增加,进而促进自噬.而当胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM存在时,细胞的自噬水平受到一定的抑制.这些结果表明,细胞内[Ca2+]i的升高可促进自噬,[Ca2+]i的降低可能会抑制自噬.Hep G2细胞自噬与细胞内游离钙离子浓度的变化有关系. 展开更多

关键词 槲皮素 HEP G2细胞 细胞内游离钙离子 钙离子螯合剂BAPTA-AM

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hβ-CGRP预孵育对H_2O_2致心肌细胞内游离钙离子浓度增加的影响 被引量：1

9

作者 汤强 胡本容 +4 位作者 谭艳 马嵘 付琴 陈建国 向继洲 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期570-572,579,共4页

目的研究人降钙素基因相关肽(hβ-CGRP)预孵育对过氧化氢(H2O2)致培养乳鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度增加的影响。方法采用离子荧光数字成像技术,分别测定在有钙和无钙环境中细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。结果H2O2(0.3、0.5、1.0 mm... 目的研究人降钙素基因相关肽(hβ-CGRP)预孵育对过氧化氢(H2O2)致培养乳鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度增加的影响。方法采用离子荧光数字成像技术,分别测定在有钙和无钙环境中细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。结果H2O2(0.3、0.5、1.0 mmo/L)于10 min内呈浓度依赖性地引起细胞内游离钙离子浓度的增加(P<0.01),但在有钙或无钙条件下增加幅度的差异无显著性意义(P>0.05)。hβ-CGRP(1、10、100 nmol/L)预孵育对静息状态细胞内钙离子浓度无明显影响(P>0.05),但能够呈剂量依赖性使H2O2引起的细胞内游离钙离子浓度的增加幅度降低(P<0.05),且在有钙环境和无钙环境中,其抑制作用差异无显著性意义(P>0.05)。结论hβ-CGRP预孵育能抑制H2O2引起的细胞内钙的增加,这可能与抑制胞内钙库的释放有关。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 过氧化氢 细胞内钙

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葱白提取物预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤和心肌细胞内游离钙浓度的影响 被引量：7

10

作者 王腾 夏豪 +2 位作者 唐其柱 郝建军 张介眉 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1659-1662,共4页

目的:探讨葱白提取物(FOB)抗大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤和减少心肌细胞内Ca2+的增加。方法:利用Langendorff心脏灌流系统建立大鼠离体心脏I/R模型,采用激光扫描共聚焦显微镜,借用Fluo-3/AM荧光染色技术观察心肌细胞内Ca2+强度。结... 目的:探讨葱白提取物(FOB)抗大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤和减少心肌细胞内Ca2+的增加。方法:利用Langendorff心脏灌流系统建立大鼠离体心脏I/R模型,采用激光扫描共聚焦显微镜,借用Fluo-3/AM荧光染色技术观察心肌细胞内Ca2+强度。结果:①FOB对大鼠离体心脏I/R损伤具有明显的保护作用,随FOB剂量的增加,使左室发展压(LVDP)的恢复更加接近缺血之前的水平,再灌注痉挛度更加减轻,心脏从缺血后恢复跳动更迅速,心律失常的发生越来越少,与I/R组相比,100g/LFOB使LVDP的恢复从(20.3±2.8)%增加到(94.8±6.4)%(P<0.01),再灌注痉挛度从(89.2±9.7)mmHg减轻为(10.2±3.1)mmHg(P<0.01)。②FOB使I/R损伤后心室肌细胞内Ca2+染色荧光强度明显减少,随着FOB浓度增高,减少细胞内Ca2+的作用更加强烈。与I/R组相比,100g/L的FOB使心肌细胞内Ca2+染色荧光强度从(144.8±16.4)减少到了(50.8±11.61)(P<0.01),表明FOB具有减少I/R中细胞内钙超载作用。结论:FOB能抗大鼠离体心脏I/R损伤,可能原因是FOB减轻I/R后心肌细胞内游离钙浓度的增加。 展开更多

关键词 缺血再灌注 葱白提取物 细胞内游离钙离子 心脏保护 钙超载 大鼠 实验研究

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电磁脉冲对海马神经元的损伤效应及其对[Ca^(2+)]_i的影响 被引量：3

11

作者 李玉红 王德文 +4 位作者 高亚兵 王水明 胡文华 彭瑞云 李杨 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期193-196,共4页

目的　观察电磁脉冲(EMP)对海马神经元的损伤效应及其对[Ca2+ ]i的影响,以深入探讨EMP致脑损伤的机制。方法　EMP辐射条件为6×104V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率为2. 5脉冲/min,作用2min。原代培养的海马神经元经EMP辐射... 目的　观察电磁脉冲(EMP)对海马神经元的损伤效应及其对[Ca2+ ]i的影响,以深入探讨EMP致脑损伤的机制。方法　EMP辐射条件为6×104V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率为2. 5脉冲/min,作用2min。原代培养的海马神经元经EMP辐射后,采用MTT法对细胞活力进行测定;FACS法检测细胞凋亡和坏死;Fluo 3 AM荧光探针负载、激光共聚焦显微镜扫描测定神经元胞内游离钙离子浓度,即[Ca2+ ]i。结果　细胞被EMP辐射后0~6h活力明显下降(P<0. 05), 12h开始回升, 24h基本接近正常水平;EMP辐射后0~12h细胞凋亡率显著升高,坏死也有增加;EMP辐射后即刻引起神经元内的Ca2+荧光强度明显增加。结论　EMP致海马神经元活力下降、凋亡增加、胞内钙超载。 展开更多

关键词 [CA^2+]I 海马神经元 损伤效应 电磁脉冲 Fluo-3-AM 胞内游离钙离子浓度 激光共聚焦显微镜 EMP FACS法 细胞凋亡率 辐射条件 上升时间 原代培养 细胞活力 MTT法 荧光探针 荧光强度 脑损伤 min 24h 钙超载 测定 坏死 下降

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