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CD55、CD59在健康者红细胞及中性粒细胞上表达的研究 被引量:6
1
作者 欧阳红梅 张芹 +3 位作者 甸自金 毛小琴 宋建新 蒋雅先 《国际检验医学杂志》 CAS 2010年第2期109-110,112,共3页
目的探讨CD55和CD59在健康者的红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞上的表达。方法采用流式细胞技术检测健康体检者外周血红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55和CD59表达的百分率及平均荧光强度。结果 CD55在中性粒细... 目的探讨CD55和CD59在健康者的红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞上的表达。方法采用流式细胞技术检测健康体检者外周血红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55和CD59表达的百分率及平均荧光强度。结果 CD55在中性粒细胞及单核细胞上的表达率(99.50±1.987,98.63±1.629)及平均荧光强度(11.14±2.927,13.37±4.127)均高于在淋巴细胞和红细胞上的表达(P<0.01);CD59在红细胞、中性粒细胞及单核细胞上均高表达(大于98.21±1.857)且差异无统计学意义(P>0.05),在淋巴细胞上的表达及平均荧光强度均低于其他组(P<0.01),CD59在红细胞和中性粒细胞上表达的荧光强度(8.65±1.655,8.595±2.091)高于其他两组(P<0.01)。结论采用流式细胞术检测CD55、CD59表达时应选取中性粒细胞及成熟红细胞作为靶细胞。 展开更多
关键词 抗原cd55(衰变催化因子见) 抗原cd59 流式细胞术 红细胞
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CD59位点短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因caspase-3和survivin作用 被引量:5
2
作者 李先平 高美华 +2 位作者 石学香 张蓓 程颖 《青岛大学医学院学报》 CAS 2008年第3期192-194,共3页
目的检测CD59位点短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因caspase-3、survivin表达水平的影响,探讨CD59位点短肽封条促肿瘤细胞凋亡的可能机制。方法将CD59位点短肽封条作用于HeLa细胞,利用免疫组织化学方法检测短肽封条作用12 h和24 h后HeLa细... 目的检测CD59位点短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因caspase-3、survivin表达水平的影响,探讨CD59位点短肽封条促肿瘤细胞凋亡的可能机制。方法将CD59位点短肽封条作用于HeLa细胞,利用免疫组织化学方法检测短肽封条作用12 h和24 h后HeLa细胞caspase-3、survivin的表达水平。结果caspase-3表达随短肽封条剂量和作用时间的增加而增加;survivin表达随短肽封条的剂量和作用时间的增加而减少。结论CD59位点短肽封条能下调survivin的表达并活化caspase-3,从而可能导致HeLa细胞的凋亡。 展开更多
关键词 抗原 cd59 短肽封条 SURVIVIN CASPASE-3 免疫组织化学
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人CD46、CD55和CD59与肿瘤免疫逃逸及免疫治疗 被引量:3
3
作者 赵勇(综述) 张玲(审校) 李翠玲(审校) 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2009年第4期254-257,共4页
膜结合补体调节蛋白CD46、CD55和CD59在肿瘤细胞膜上表达或过表达,保护肿瘤细胞免受免疫系统的攻击,成为肿瘤细胞免疫逃逸的途径之一。如何下调肿瘤细胞表面三者表达或抑制其功能以增强其对补体依赖的细胞毒作用的敏感性备受关注。
关键词 抗原 cd55 抗原 cd59 免疫疗法 肿瘤逃逸 抗原 cd46
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CD59基因突变在肿瘤逃逸中的作用 被引量:4
4
作者 唐艳 高美华 《青岛大学医学院学报》 CAS 2008年第2期108-110,113,共4页
目的构建CD59突变的重组体,研究Hela细胞中CD59基因突变引起肿瘤凋亡相关分子caspase-3表达的变化。方法采用重组聚合酶链反应定点诱变技术,将CD59的第39~41位氨基酸突变为色氨酸,克隆入pALTER—MAX质粒,采用阳离子脂质体法将重组... 目的构建CD59突变的重组体,研究Hela细胞中CD59基因突变引起肿瘤凋亡相关分子caspase-3表达的变化。方法采用重组聚合酶链反应定点诱变技术,将CD59的第39~41位氨基酸突变为色氨酸,克隆入pALTER—MAX质粒,采用阳离子脂质体法将重组质粒转染Hela细胞。G418筛选稳定表达细胞克隆,用免疫荧光、ELISA、流式细胞术筛选出高表达突变CD59的细胞株,用免疫组化法检测转染前后Hela细胞内caspase-3表达的变化。结果酶切鉴定和序列测定均证实成功构建了CD59氨基酸突变的重组质粒。转染突变CD59后Hela细胞内caspase-3表达明显减少,与转染正常CD59的Hela细胞比较差异有显著意义(t=2.846,P〈0.01)。结论caspase-3表达变化可能是CD59引起肿瘤逃逸的另一途径。 展开更多
关键词 抗原 cd59 点突变 肿瘤逃逸 基因重组 HELA细胞 CASPASE-3
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激活补体引起离体豚鼠工作心脏的损伤及CD_(59)的保护作用 被引量:2
5
作者 吴素华 马虹 +2 位作者 黄守坚 吴楚昆 王锦群 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第3期186-189,共4页
【目的】探讨激活补体是否会引起心肌缺血损伤 ,以及膜结合型补体调节蛋白CD59对补体引起的心肌缺血损伤有无保护作用。【方法】 18只豚鼠离体工作心脏随机分为 :A组 (对照组 ) ,在灌注液中加入体积分数为 3%灭活人血浆 +酵母多糖 ;B组 ... 【目的】探讨激活补体是否会引起心肌缺血损伤 ,以及膜结合型补体调节蛋白CD59对补体引起的心肌缺血损伤有无保护作用。【方法】 18只豚鼠离体工作心脏随机分为 :A组 (对照组 ) ,在灌注液中加入体积分数为 3%灭活人血浆 +酵母多糖 ;B组 ,在灌注液中加入 3%人血浆 +酵母多糖 ;C组 :在灌注液中加入CD59(45 0 μg) +3%人血浆 +酵母多糖。记录各组处理前及处理后 15、30、45和 6 0min的心外膜心电图ST段变化、冠脉流量 (CF)、心输出量 (CO)、左心室最大内压 (LVPmax)、左心室内压最大上升速率 (dp/dtmax)和心率 (HR)。【结果】A组处理前后各项观察指标无明显变化 ;B组在接受处理后心外膜心电图出现ST段抬高、HR增加 ,CF、CO、LVPmax和dp/dtmax均下降 ,这些变化以处理后 45min最明显 ;C组除处理后 45~ 6 0min时心率稍增快外 ,其余指标处理前后无明显变化。【结论】 激活补体可直接引起豚鼠工作心脏心肌缺血损伤 ,CD59对补体介导的心肌缺血损伤有保护作用。 展开更多
关键词 补体激活 心肌缺血 心脏功能试验 抗原 cd59
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人CD59 RNAi逆转录病毒载体系统的构建与鉴定 被引量:3
6
作者 石学香 高美华 臧金林 《青岛大学医学院学报》 CAS 2009年第1期1-3,共3页
目的利用siRNA表达载体法构建并筛选携带针对CD59基因pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆。方法用DNA重组技术,将3条60bp能转录产生靶向CD59小发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸序列定向克隆入逆转录病毒载体pSUPER retro,脂... 目的利用siRNA表达载体法构建并筛选携带针对CD59基因pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆。方法用DNA重组技术,将3条60bp能转录产生靶向CD59小发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸序列定向克隆入逆转录病毒载体pSUPER retro,脂质体法转染包装细胞系Phoenix A,建立产生逆转录病毒的细胞克隆。结果重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后测序序列正确;重组载体转染包装细胞,可表达绿色荧光蛋白,表明包装成功。结论特异性沉默CD59基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体以及稳定产毒的细胞系构建成功,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础,可望为肿瘤治疗开辟新途径。 展开更多
关键词 RNA 双链 抗原 cd59 转染 逆转录病毒载体
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CD55、CD59在特发性血小板减少性紫癜发病中的研究 被引量:2
7
作者 和迎春 宋建新 张群智 《国际检验医学杂志》 CAS 2010年第3期238-239,共2页
目的探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中血小板表面CD55、CD59抗原表达在其发病中的作用。方法应用流式细胞仪检测30例ITP患者及30例健康对照者外周血血小板表面CD55、CD59抗原表达。结果 ITP患者血小板表面CD55、CD59抗原表... 目的探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中血小板表面CD55、CD59抗原表达在其发病中的作用。方法应用流式细胞仪检测30例ITP患者及30例健康对照者外周血血小板表面CD55、CD59抗原表达。结果 ITP患者血小板表面CD55、CD59抗原表达率均明显低于健康对照组(P<0.01)。结论血小板膜上CD55、CD59的缺陷在ITP发病中起着重要的作用。 展开更多
关键词 血小板 抗原 cd55 抗原 cd59 紫癜 血小板减少性 特发性
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CD59蛋白表达在外周神经损伤型神经病理性疼痛中的意义 被引量:3
8
作者 王金保 王姝媛 +1 位作者 王琪 汤龙信 《临床误诊误治》 2011年第12期1-4,共4页
目的观察CD59蛋白在大鼠3种外周神经损伤模型脊髓背角的表达情况,以探讨其在神经病理性疼痛(neu-ropathic pain,NPP)发病机制中的作用。方法选择80只健康雄性SD大鼠分为假手术组、慢性坐骨神经缩窄性损伤模型(chronic constriction inju... 目的观察CD59蛋白在大鼠3种外周神经损伤模型脊髓背角的表达情况,以探讨其在神经病理性疼痛(neu-ropathic pain,NPP)发病机制中的作用。方法选择80只健康雄性SD大鼠分为假手术组、慢性坐骨神经缩窄性损伤模型(chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI)组、坐骨神经分支选择性损伤模型(spared nerve injury,SNI)组和选择性脊神经结扎模型(spinal nerve ligation,SNL)组等4组,按分组制作模型,分别于术前、术后1、3、7 d用热刺激和机械刺激法测定大鼠的痛阈值变化,评估其可靠性后,于术后7 d处死大鼠,取腰4~腰6段脊髓背角,用Western-blot和流式细胞两种技术测定CD59蛋白含量。结果 CCI组、SNI组、SNL组大鼠于术后1、3、7 d痛阈值降低,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),模型制作成功。Western-blot检测显示,3组模型大鼠脊髓背角CD59蛋白表达均不同程度降低,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞检测显示假手术组大鼠脊髓背角细胞CD59阳性表达率为93.92%,而CCI组、SNI组和SNL组CD59阳性表达率分别为86.78%、85.68%和85.70%,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NPP大鼠脊髓背角细胞CD59蛋白表达下降,可能是此处发生补体级联反应的重要原因,CD59蛋白在NPP的形成中发挥一定作用。 展开更多
关键词 抗原 cd59 大鼠 模型 动物 神经痛
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人CD59/MCP双基因对人血灌注转基因小鼠离体心脏功能的保护作用 被引量:2
9
作者 谢林 朱珉 +8 位作者 王树森 李荣 曾梦华 黄亚冰 王璐 郭晖 魏庆信 李文鑫 陈实 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第42期3001-3004,共4页
目的研究转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性反应、延长体外灌注小鼠心脏功能的作用。方法利用显微注射法建立转hCD59/hMCP双基因小鼠的模型,其子代中hCD59单基因阳性小鼠8只、hMCP单基因阳性小... 目的研究转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性反应、延长体外灌注小鼠心脏功能的作用。方法利用显微注射法建立转hCD59/hMCP双基因小鼠的模型,其子代中hCD59单基因阳性小鼠8只、hMCP单基因阳性小鼠11只和hCD59/hMCP双基因阳性小鼠8只分别为3个实验组,同窝非转基因小鼠10只为对照组。用新鲜人血浆体外灌注小鼠心脏,研究小鼠表达抑制人补体激活的人补体调节蛋白后,对补体介导的异种移植超急性排斥反应的抑制作用。结果转双基因组心脏搏动时间(138min±25min)明显长于单基因组(hCD59组78min±27min,hMCP组43min±21min)及非转基因组(20min±12min)(Dunnett′s T检验,均P<0.01);免疫荧光染色及免疫酶组织化学染色显示转双基因组心脏内补体C3c及C9沉积也明显减少。结论转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因能够有效地抑制补体介导的异种移植超急性排斥反应。 展开更多
关键词 小鼠 转基因 移植 异种 血液灌注 抗原 cd59
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PPARγ在外源性保护素D1减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用 被引量:3
10
作者 孔繁丽 罗婷 +1 位作者 吴裕超 孙志鹏 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期878-881,共4页
目的 评价过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)在外源性保护素D1(PD1)减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 清洁级健康雄性BABL∕C小鼠32只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(S组)小鼠经口气管插管滴入... 目的 评价过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)在外源性保护素D1(PD1)减轻小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 清洁级健康雄性BABL∕C小鼠32只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(S组)小鼠经口气管插管滴入生理盐水,1 h后尾静脉注射生理盐水;急性肺损伤组(ALI组)小鼠经口气管插管滴入脂多糖(LPS)3 mg∕kg,1 h后尾静脉注射生理盐水;PD1组小鼠经口气管插管滴入 LPS 3 mg∕kg, 1 h 后尾静脉注射 PD1 200 ng;PPARγ拮抗剂组(GW9662组)小鼠经口气管插管滴入 LPS 3 mg∕kg,1 h后尾静脉注射 GW9662 1 mg∕kg及PD1 200 ng.于气管给予LPS后24 h时处死小鼠,以PBS行左侧支气管肺泡灌洗,肺泡灌洗液(BALF)行中性粒细胞计数,ELISA法测定IL-1β、TNF-α及IL-6浓度;取右肺组织行HE染色,光镜下观察,行肺损伤评分,Western blot法检测PPARγ的表达.结果 与S组比较,ALI组小鼠BALF中性粒细胞计数、IL-1β、TNF-α、IL-6浓度和肺损伤评分升高,肺组织PPARγ表达下调( P<0. 01);与ALI组比较,PD1组小鼠BALF中性粒细胞计数、IL-1β、TNF-α、IL-6浓度和肺损伤评分降低,肺组织PPARγ表达上调(P<0. 01);与PD1组比较,GW9662组小鼠BALF中性粒细胞计数、IL-1β、TNF-α、IL-6浓度和肺损伤评分升高,肺组织PPARγ表达下调(P<0. 01).结论 PPARγ激活参与了外源性PD1减轻小鼠内毒素性急性肺损伤的过程. 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体 抗原 cd95 保护素D1 呼吸窘迫综合征 成人
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CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用 被引量:1
11
作者 张臣青 祝先进 +1 位作者 林萌 曹颖平 《福建医科大学学报》 2011年第6期442-444,共3页
目的探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原的表... 目的探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原的表达。结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性贫血80例,病因不明PCP 13例)。外周血红细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失诊断PNH合并PCP敏感度和特异度分别为93.75%和82.80%,粒细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失诊断的敏感度和特异度分别为100%和81.72%。随访中,非PNH病例中有13例转化为PNH;这些病例的红细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失率分别为84.62%和92.31%,粒细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失率分别为92.31%和100%。结论利用流式细胞术同时检测患者红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原对PNH合并PCP的的诊断及鉴别诊断具有重要的价值。 展开更多
关键词 cd59 cd55 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 全血细胞减少症 流式细胞术
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CD59与CD55锚固蛋白对T细胞活化信号转导的作用 被引量:1
12
作者 聊菲 高美华 +1 位作者 张蓓 解西河 《青岛大学医学院学报》 CAS 2011年第2期98-101,共4页
目的研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固蛋白CD59、CD55在脂筏介导T细胞信号转导通路中的作用。方法应用siRNA技术,构建针对CD55与CD59基因的重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59。实验分为未转染的Jurkat细胞组(Ⅰ组)、转染pSUPER-siC... 目的研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固蛋白CD59、CD55在脂筏介导T细胞信号转导通路中的作用。方法应用siRNA技术,构建针对CD55与CD59基因的重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59。实验分为未转染的Jurkat细胞组(Ⅰ组)、转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅱ组)及转染pSUPER-siCD55重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅲ组)。RT-PCR方法检测转染细胞中CD55和CD59基因mRNA的表达。噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦扫描显微镜分别检测CD55与CD59联合作用对3组Jurkat细胞的增殖效应以及细胞内钙离子的变化。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞CD59和Ⅲ组细胞CD55 mRNA的表达均明显减少(F=595.14、699.06,q=45.70~47.25,P〈0.05)。Ⅰ组细胞CD55与CD59联合作用后增殖能力和钙离子浓度均明显高于Ⅱ组、Ⅲ组(F=97.02、189.47,q=13.69~26.39,P〈0.01),Ⅱ组低于Ⅲ组(q=5.43、6.42,P〈0.05)。结论 CD59和CD55在T细胞活化信号转导通路中存在协同效应,其中CD59起到重要作用。 展开更多
关键词 抗原 cd59 抗原 cd55 JURKAT细胞 信号传导 协同作用
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阵发性睡眠性血红蛋白尿症的补体通路抑制药物研究进展 被引量:1
13
作者 任翔 郑以州 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2017年第4期361-364,共4页
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种获得性造血干细胞基因突变引起的溶血性疾病,其溶血机制主要是由于红细胞表面抑制补体通路活化蛋白CD55、CD59缺失,导致红细胞对补体的敏感性增加,进而发生补体介导的血管内溶血。鉴于此,抑... 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种获得性造血干细胞基因突变引起的溶血性疾病,其溶血机制主要是由于红细胞表面抑制补体通路活化蛋白CD55、CD59缺失,导致红细胞对补体的敏感性增加,进而发生补体介导的血管内溶血。鉴于此,抑制补体通路活化成为控制PNH发生的治疗策略之一。笔者拟就PNH的病因及溶血机制,以及新型补体通路抑制药物的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 血红蛋白尿 阵发性 抗原 cd55 抗原 cd59 补体途径 旁路 补体途径 经典 补体灭活剂
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COULTER流式细胞仪采用自配试剂在CD55、CD59水平检测中的应用探讨 被引量:1
14
作者 徐明辉 陈智平 +6 位作者 莫武宁 王立秋 林发全 李若林 黄军强 秦雪 李山 《国际检验医学杂志》 CAS 2009年第4期336-338,共3页
目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度、稳定性与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂测定15份患者标本CD55、CD59水平并与原装试剂对... 目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度、稳定性与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂测定15份患者标本CD55、CD59水平并与原装试剂对比,差异无统计学意义(P>0.05),两者呈高度正相关(r>0.95)。自配试剂稳定性好,放置1年后,用原装试剂分别测定15份标本,结果差异无统计学意义(P>0.05),两者呈高度正相关(r>0.95)。结论自配美国COULTER流式细胞仪试剂完全可以代替原装进口试剂进行CD55、CD59的检测。 展开更多
关键词 流式细胞术 指示剂和试剂 抗原 cd55 抗原 cd59 临床实验室技术
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CD59 prevents human complement-mediated injuries in isolated guinea pig hearts 被引量:1
15
作者 吴素华 马虹 +3 位作者 黄守坚 董吁钢 吴楚昆 孙家钧 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期175-178,146,共4页
OBJECTIVE: To assess complement-mediated myocardial injury on isolated guinea pig working hearts and cardioprotective effects of CD59. METHODS: Using a modified Langendorff apparatus, isolated guinea-pig working heart... OBJECTIVE: To assess complement-mediated myocardial injury on isolated guinea pig working hearts and cardioprotective effects of CD59. METHODS: Using a modified Langendorff apparatus, isolated guinea-pig working hearts were perfused with a modified Krebs Henseleit buffer containing 3% heat-inactivated human plasma and zymosan (IPZ) (control) (n = 10), 3% normal human plasma and zymosan (NPZ) (n = 10), or 3% normal human plasma and zymosan and 1.5 microg/ml CD59 (NPZC) (n = 10), respectively. Epicardial electrocardiogram (ECG), cardiac output (CO), coronary arterial flow (CF), maximum left ventricular developed pressure (LVP(max)), maximum left ventricular developed pressure increase rate (+ dp/dt(max)), maximum left ventricular developed pressure decrease rate (- dp/dt(max)) and heart rate (HR) were recorded at 0, 15, 30, 45 and 60 min of treatment. After the experiment, immunohistochemical examination was performed to detect the presence of C3a or C5b-9 in the myocardium of the isolated hearts. RESULTS: Compared the IPZ group, hearts treated with NPZ showed a slight depression on ST segments of epicardial ECG at 15 min, a significant elevation between 30 min to 60 min, a decrease in CF, CO, LVP(max), + dp/dt(max) and - dp/dt(max), and an increase in HR at 15 min. The observed alterations in CF, CO, LVP(max), + dp/dt(max) and - dp/dt(max) remained decreased, while the HR remained increased until the end of the protocol. The all above parameters of hearts treated with NPZC were similar to the control group (IPZ) at any given time. Immunohistochemical examination showed positive signals of C3a and C5b-9 in the myocardium of hearts treated with NPZ. C3a was positive in NPZC, and C3a and C5b-9 were negative in IPZ. CONCLUSIONS: Activated human complements directly damage isolated guinea pig working hearts, and CD59 offers a significant protection against the injuries. 展开更多
关键词 Animals antigens cd59 Complement C3a Complement Inactivator Proteins ELECTROCARDIOGRAPHY Guinea Pigs Heart Immunohistochemistry In Vitro Male MYOCARDIUM Research Support Non-U.S. Gov't Time Factors
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CD59基因的突变并真核表达载体的构建 被引量:2
16
作者 朱新红 高美华 +3 位作者 任书荣 王秋波 王静 林存智 《青岛大学医学院学报》 CAS 2008年第2期95-98,共4页
目的构建两种活性位点相关性CD59突变基因,并重组入真核表达载体。方法选取物种间高度保守W40位点及相邻位置为突变位点,重叠延伸PCR(Overlap extension PCR)法构建两种CD59基因点突变,一种是编码W40的密码子TGG缺失突变,另一种是C39W40... 目的构建两种活性位点相关性CD59突变基因,并重组入真核表达载体。方法选取物种间高度保守W40位点及相邻位置为突变位点,重叠延伸PCR(Overlap extension PCR)法构建两种CD59基因点突变,一种是编码W40的密码子TGG缺失突变,另一种是C39W40K41→W39W40W41的相应基因突变,各设计两条常规引物和两条反向互补突变引物,以已构建CD59 cDNA为模板,三重PCR定点诱变扩增突变基因,重组入克隆载体PMD18-T-Vector,EcoRⅠ单酶切获得目的基因,重组入真核表达载体pIRES。结果通过PCR定点诱变成功获得两种目的CD59突变基因,序列测定及酶切鉴定结果均证实成功构建了pIRES-m1CD59、pIRES-m2CD59重组真核表达载体系统,突变CD59基因长度约500 bp。结论重叠延伸PCR法诱变经济可靠,重组质粒的构建为进一步研究CD59的抗补体活性奠定了基础。 展开更多
关键词 抗原 cd59 点突变 真核表达
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膜反应性溶解抑制因子在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 赵伟鹏 朱波 +2 位作者 彭伟 段玉忠 陈正堂 《中国基层医药》 CAS 2009年第4期577-579,769,共4页
目的观察膜反应性溶解抑制因子(MIRL,CD59)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,分析其表达与临床分期、化疗用药及预后的关系。方法免疫组织化学法检测8例NSCLC癌旁组织和36例NSCLC手术标本中MIRL的表达,分析临床资料。结果36例NSCL... 目的观察膜反应性溶解抑制因子(MIRL,CD59)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,分析其表达与临床分期、化疗用药及预后的关系。方法免疫组织化学法检测8例NSCLC癌旁组织和36例NSCLC手术标本中MIRL的表达,分析临床资料。结果36例NSCLC标本中,共有10例(27.8%)表达MIRL,其中18例肺鳞癌中有4例(22.2%)表达,而16例肺腺癌中有6例(37.5%)表达,两者差异有统计学意义(P〉0.05),而2例大细胞肺癌不表达;MIRL的表达与无病生存期无相关关系(P〉0.05);术前行新辅助化疗的患者的MIRL表达率低于未行新辅助化疗组(P〈0.05)。结论NSCLC中有MIRL的表达,提示在NSCLC抗体治疗中应同时阻断MIRL的免疫抑制效应。 展开更多
关键词 抗原 cd59 细胞毒性试验 免疫 非小细胞肺
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CD59-siRNA对人卵巢癌细胞裸鼠移植瘤的作用 被引量:1
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作者 冯翠萍 高美华 《青岛大学医学院学报》 CAS 2010年第4期289-291,294,共4页
目的探讨针对CD59的siRNA(CD59-siRNA)对人卵巢癌裸鼠移植瘤CD59的沉默效应及其抑瘤作用。方法采用脂质体转染法将CD59干扰质粒(T组)和空质粒(V组)转染A2780细胞,获得稳定表达细胞株,将T组、V组A2780细胞和未转染(C组)的A2780... 目的探讨针对CD59的siRNA(CD59-siRNA)对人卵巢癌裸鼠移植瘤CD59的沉默效应及其抑瘤作用。方法采用脂质体转染法将CD59干扰质粒(T组)和空质粒(V组)转染A2780细胞,获得稳定表达细胞株,将T组、V组A2780细胞和未转染(C组)的A2780细胞分别接种于裸鼠皮下建立肿瘤模型,通过绘制肿瘤生长曲线、RT-PCR和免疫组织化学法研究其抑瘤效应和对CD59基因及蛋白的沉默效应。结果与V组和C组比较,T组肿瘤体积和质量明显减小(F=301.88、5.39,q=4.01~30.41,P〈0.05),CD59基因及蛋白表达减少(F=817.77、247.71,q=26.59~52.25,P〈0.05)。结论特异性沉默CD59基因的siRNA表达载体可以明显抑制CD59的表达及卵巢癌在体内的生长。 展开更多
关键词 抗原 cd59 卵巢肿瘤 RNA干扰 小鼠
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CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响 被引量:1
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作者 李伟伟 高美华 +1 位作者 张蓓 解西河 《青岛大学医学院学报》 CAS 2010年第4期301-303,306,共4页
目的研究CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响。方法构建CD59配体肽基因的真核表达重组体(CD59配体-pIRES),转染人卵巢癌细胞A2780,G418筛选稳定表达细胞克隆;RT-PCR及Westernblot方法检测细胞表面CD59 mRNA及蛋白的表达;MTT法测... 目的研究CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响。方法构建CD59配体肽基因的真核表达重组体(CD59配体-pIRES),转染人卵巢癌细胞A2780,G418筛选稳定表达细胞克隆;RT-PCR及Westernblot方法检测细胞表面CD59 mRNA及蛋白的表达;MTT法测定细胞增殖抑制率。结果成功构建了CD59配体肽基因真核表达重组体,转染后的A2780 CD59 mRNA及蛋白的表达水平与WT-A2780比较均明显下降(t=9.217、.20,P<0.05);细胞增殖抑制率明显增高(F=5.417,q=3.93,P<0.05)。结论CD59配体肽基因可影响人卵巢癌细胞A2780表面CD59的表达,有望用于肿瘤治疗。 展开更多
关键词 抗原 cd59 A2780细胞 重组融合蛋白质类
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CD59特异位点短肽封条对T细胞封闭作用 被引量:1
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作者 孙庆燕 高美华 《青岛大学医学院学报》 CAS 2009年第2期95-96,100,共3页
目的探讨含有CD59特异位点的短肽封条对T细胞的封闭作用及其可能机制。方法建立HeLa肿瘤小鼠模型,眼球取血分离血清测定补体C3、C4,分离培养鼠胸腺T淋巴细胞、分别加入CD59-mAb、CD59特异位点短肽封条作用48h后,MTT法检测T细胞增殖情况... 目的探讨含有CD59特异位点的短肽封条对T细胞的封闭作用及其可能机制。方法建立HeLa肿瘤小鼠模型,眼球取血分离血清测定补体C3、C4,分离培养鼠胸腺T淋巴细胞、分别加入CD59-mAb、CD59特异位点短肽封条作用48h后,MTT法检测T细胞增殖情况。结果肿瘤小鼠补体C3、C4含量明显降低(t=30.970、16.789,P<0.01);CD59-mAb对T细胞增殖起促进作用,而含有CD59特异位点的短肽封条能抑制T细胞增殖,两者的作用与正常对照相比差异有显著性(t=5.428、4.726,P<0.01)。结论CD59参与T细胞信号转导而与补体抑制作用无关,含有CD59特异位点的短肽封条对T细胞起封闭作用。 展开更多
关键词 抗原 cd59 短肽封条 肿瘤 T淋巴细胞 细胞增殖
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