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脂多糖刺激RAW264.7和Ana-1形态改变及细胞因子表达的差异 被引量:2
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作者 石榴 方怡 +2 位作者 袁伟锋 李理 黄文杰 《国际呼吸杂志》 2009年第13期772-776,共5页
目的比较两株小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7和Ana-1经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后在形态及细胞因子表达等方面的差异。方法MTT法检测不同终浓度(0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L)LPS作用后两株细胞增殖活力,确... 目的比较两株小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7和Ana-1经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后在形态及细胞因子表达等方面的差异。方法MTT法检测不同终浓度(0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L)LPS作用后两株细胞增殖活力,确定最佳作用浓度。选择1mg/L.LPS刺激RAw264.7和Ana-1细胞,ELISA法分别于0h、4h、8h、12h、24h检测两株细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-10的表达量。结果LPS终浓度为1mg/L时两株细胞存活率分别为(162.05±28.14)%、(159.92±20.43)%,显著大于同细胞其他浓度组别(P〈0.01);1mg/L LPS刺激后,两株细胞各细胞因子表达均为随时间呈先增多后减少趋势,峰值出现时间RAW264.7细胞早于Ana-1细胞。TNF—α的表达4h时RAW264.7细胞高于Ana-1(P〈0.01),8h、12h时低于后者(P〈0.05);IL-18的表达各时间点比较RAW264.7均高于Ana-1(P〈0.05);IL-6的表达各时间点比较RAW264.7均低于Ana-1(P〈0.05);IL-10的表达于刺激后4h,RAW264.7细胞高于Ana-1细胞(P〈0.05)。结论当LPS浓度为1mg/L时,Ana-1与RAW264.7细胞存活率均最强;经LPS刺激后,RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、IL—1β、IL-10表达高峰早于Ana-1细胞,各细胞因子表达量各有侧重。研究者进行炎症相关实验时对Ana-1和RAW264.7的选择需考虑两者之间的差异。 展开更多
关键词 脂多糖 小鼠巨噬细胞 RAW264.7 ana- 1 细胞因子
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卡介苗胞壁脂聚糖诱导鼠巨噬细胞增殖后凋亡的研究
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作者 李娅莎 鲍朗 +2 位作者 李岩 张会东 赵明才 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期667-671,共5页
研究卡介苗胞壁脂聚糖提取物对小鼠巨噬细胞株Ana-1的影响.采用超声波破碎细菌、Triton X-114相分离和酒精沉淀等方法分离得到卡介苗胞壁总脂聚糖的提取物;采用苯酚-硫酸法检测提取物中多糖含量,用不同浓度梯度的提取物刺激后,采用XTT... 研究卡介苗胞壁脂聚糖提取物对小鼠巨噬细胞株Ana-1的影响.采用超声波破碎细菌、Triton X-114相分离和酒精沉淀等方法分离得到卡介苗胞壁总脂聚糖的提取物;采用苯酚-硫酸法检测提取物中多糖含量,用不同浓度梯度的提取物刺激后,采用XTT法检测24h后Ana-1细胞增殖的情况,选择40×10-6g/mL胞壁脂聚糖刺激细胞48h,72h后,用流式细胞仪检测Ana-1细胞凋亡的结果.卡介苗胞壁脂聚糖提取物对Ana-1细胞的增殖活力有促进作用,而继续作用后诱导了细胞凋亡.卡介苗胞壁脂聚糖促进了鼠巨噬细胞的增殖,可能引起巨噬细胞的细胞因子的分泌而诱导了细胞凋亡,有较强的免疫活性. 展开更多
关键词 BCG 胞壁脂聚糖 ana-1细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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鼠巨噬细胞Ana-1培养弓形虫RH株速殖子的特性研究
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作者 郝永新 李雪莲 +2 位作者 刘群 丁隽 张维 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期196-203,共8页
为比较鼠巨噬细胞Ana-1(吞噬细胞)和Vero细胞(非吞噬细胞)培养弓形虫RH株后虫体以及虫体和宿主细胞间的表现,采用一般形态学观察、流式细胞术检测弓形虫接种后Ana-1细胞和Vero细胞的凋亡和坏死情况,并用NO检测试剂盒检测Ana-1细胞... 为比较鼠巨噬细胞Ana-1(吞噬细胞)和Vero细胞(非吞噬细胞)培养弓形虫RH株后虫体以及虫体和宿主细胞间的表现,采用一般形态学观察、流式细胞术检测弓形虫接种后Ana-1细胞和Vero细胞的凋亡和坏死情况,并用NO检测试剂盒检测Ana-1细胞的NO分泌量。结果显示,弓形虫能够在两种细胞上大量发育和繁殖,而且两种细胞凋亡和坏死并存,Ana-1细胞以坏死为主(坏死率为58.6%,凋亡率为12.6%),Vero细胞则以凋亡为主(坏死率为28.7%,凋亡率为56.0%)。对NO的检测显示,含100mL/L小牛血清培养的Ana-1 NO分泌浓度为0.16-0.17μmol/mL;而感染弓形虫速殖子的Ana-1 NO分泌浓度为0.18-0.46μmol/mL,两者差异显著(P〈0.05)。证实,应用Ana-1和Vero细胞培养弓形虫均可获得大量虫体;弓形虫感染后吞噬细胞和非吞噬细胞的凋亡率和坏死率不同,差异极显著(P〈0.01);弓形虫感染能够诱导Ana-1分泌NO。 展开更多
关键词 弓形虫 ana-1细胞 流式细胞术 细胞凋亡 坏死
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基于两种细胞的卷烟烟气体外免疫毒性评价 被引量:1
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作者 赵俊伟 杨陟华 +5 位作者 李翔 谢复炜 潘秀颉 朱茂祥 刘惠民 谢剑平 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期51-56,共6页
为评价卷烟烟气总粒相物(TPM)的体外免疫毒性,选择小鼠淋巴瘤细胞(EL-4细胞)和小鼠巨噬细胞(Ana-1细胞)两种细胞,采用CCK-8法检测肯塔基3R4F参比卷烟烟气TPM染毒后细胞的存活率,采用Luminex液相芯片技术检测细胞上清液中20种细胞因子(FG... 为评价卷烟烟气总粒相物(TPM)的体外免疫毒性,选择小鼠淋巴瘤细胞(EL-4细胞)和小鼠巨噬细胞(Ana-1细胞)两种细胞,采用CCK-8法检测肯塔基3R4F参比卷烟烟气TPM染毒后细胞的存活率,采用Luminex液相芯片技术检测细胞上清液中20种细胞因子(FGF-basic、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、IL-13、IL-17、KC、IP-10、MCP-1、MIP-1α、VEGF、MIG、TNF-α)的分泌量。结果表明:两种细胞经烟气TPM染毒后,随着染毒剂量的增加,EL-4细胞中GM-CSF、IL-10和VEGF的分泌量均下调;Ana-1细胞中MCP-1、MIP-1α和TNF-α的分泌量均上调;两种细胞中其余17种细胞因子的分泌量无明显变化。不同类型/来源的细胞对烟气的毒性效应有不同的反应,因此采用两种细胞有助于更好地评价卷烟烟气的体外免疫毒性。该方法具有快速、灵敏、高通量等特点,适用于卷烟烟气体外免疫毒性评价。 展开更多
关键词 Luminex液相芯片 卷烟烟气 总粒相物 EL-4细胞 ana-1细胞 体外免疫毒性
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浓缩^(235)U诱发免疫细胞凋亡的电镜和琼脂糖凝胶电泳研究 被引量:1
5
作者 朱寿彭 张澜生 付强 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第5期284-288,共5页
研究了浓缩235U内照射诱发人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞的细胞调亡。估算了浓缩235U在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过电镜对免疫细胞的形态观察,发现Molt-4和Ana-1细胞在受235U内照射作用... 研究了浓缩235U内照射诱发人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞的细胞调亡。估算了浓缩235U在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过电镜对免疫细胞的形态观察,发现Molt-4和Ana-1细胞在受235U内照射作用下可呈现核染质边聚,DNA链断裂和膜包裹的凋亡小体形成。对Molt-4和Ana-1细胞的DNA抽提,进行DNA琼脂糖凝胶电泳也显示出阶梯状条带形成的细胞调亡特征。从而证实了浓缩235U内照射可导致免疫细胞Molt-4和Ana-1细胞的凋亡发生。 展开更多
关键词 ana-1细胞 琼脂糖凝胶电泳 浓缩铀235 白血病
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赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA的表达及其促细胞增殖效应 被引量:1
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作者 朱庆平 鲍朗 +4 位作者 张会东 赵计林 龙洋 吴悦涵 赵明才 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期866-869,共4页
目的 在大肠杆菌中表达赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA ,并观察该蛋白对ANA 1细胞的增殖作用。方法 将invA基因克隆于pET32a(+)载体 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达带组氨酸标签的Trx InvA融合蛋白 ,经亲和层析获得纯化Trx InvA蛋白。... 目的 在大肠杆菌中表达赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA ,并观察该蛋白对ANA 1细胞的增殖作用。方法 将invA基因克隆于pET32a(+)载体 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达带组氨酸标签的Trx InvA融合蛋白 ,经亲和层析获得纯化Trx InvA蛋白。以不同浓度的Trx InvA融合蛋白作用于ANA 1细胞 ,以四氮唑复合物 [2 ,3 bis(2 methoxy 4 nitro sulfophenyl) 5 〔(Phenylamino)carbonyl〕 2H tetrazoiumhydrixide,XTT]法检测细胞增殖的变化 ,分析InvA蛋白的细胞功能。结果 成功构建pETIN VA原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达了相对分子质量 (Mr)约为 35× 10 3的Trx InvA融合蛋白 ,该蛋白能促进ANA 1细胞的增殖。结论 表达并纯化的Trx 展开更多
关键词 原核表达载体 细胞增殖 相关蛋白 ana 钩端螺旋体 融合蛋白 大肠杆菌 纯化 亲和层析 基因克隆
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丙泊酚对脂多糖引起的Ana-1巨噬细胞炎症损伤的影响 被引量:1
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作者 王雪冬 李民 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期590-593,共4页
目的研究丙泊酚对脂多糖(LPS)引起的小鼠巨噬细胞Ana-1炎症损伤的影响。方法用脂多糖处理Ana-1细胞作为细胞损伤模型,将培养的Ana-1细胞分成六组:对照组(C组)、LPS处理组(L组)、LPS+丙泊酚10μmol/L处理组(LP1组)、LPS+丙泊酚20μmol/L... 目的研究丙泊酚对脂多糖(LPS)引起的小鼠巨噬细胞Ana-1炎症损伤的影响。方法用脂多糖处理Ana-1细胞作为细胞损伤模型,将培养的Ana-1细胞分成六组:对照组(C组)、LPS处理组(L组)、LPS+丙泊酚10μmol/L处理组(LP1组)、LPS+丙泊酚20μmol/L处理组(LP2组)、LPS+丙泊酚40μmol/L处理组(LP3组)、LPS+丙泊酚80μmol/L处理组(LP4组)。采用MTT法测定细胞的存活率,并测定丙泊酚作用前后IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果 L组Ana-1细胞的存活率明显低于C组,而LP1、LP2、LP3、LP4组可明显提高Ana-1细胞的存活率,且对细胞存活率的提高程度呈剂量递增的效应关系(P<0.01);L组IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显高于C组,而LP1、LP2、LP3、LP4组可明显降低损伤细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的含量(P<0.01),且其降低的程度呈剂量效应关系(P<0.01)。在本实验所选择剂量范围内,LP4组的保护效果最佳。结论丙泊酚通过降低炎症损伤来减轻LPS诱导的Ana-1细胞损伤。 展开更多
关键词 脂多糖 丙泊酚 ana-1细胞 炎症损伤
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电镜及DNA凝胶电泳研究荧光涂料^(147)Pm诱发免疫细胞凋亡
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作者 朱寿彭 张澜生 付强 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 1998年第4期193-196,共4页
对荧光涂料激发能源147Pm辐照人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡进行了研究。实验中估算了147Pm在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过透射电镜的形态观察,发现Molt-4和Ana-1两株免疫... 对荧光涂料激发能源147Pm辐照人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡进行了研究。实验中估算了147Pm在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过透射电镜的形态观察,发现Molt-4和Ana-1两株免疫细胞在受147Pm辐照时,可诱发明显的核断裂,核染质边聚,以及呈现膜包裹着的凋亡小体形成为特征的细胞凋亡。进而抽提了Molt-4和Ana-1两株免疫细胞的DNA,进行琼脂糖凝胶电泳也显示出阶梯状条带形成的细胞凋亡特征。并且观察到147Pm诱发的免疫细胞凋亡与147Pm辐照的时间和累积吸收剂量相关。 展开更多
关键词 电镜 DNA凝胶电泳 ^147PM 细胞凋亡 免疫细胞
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荧光显微镜及放射自显影观察 ^(147)Pm 内照射诱发免疫细胞凋亡
9
作者 朱寿彭 张澜生 付强 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 1997年第11期663-666,共4页
对荧光涂料147Pm内照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株ANA-1细胞诱发细胞凋亡进行了研究。估算了147Pm在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过荧光显微镜的形态观察,发现免疫细胞Mlt-... 对荧光涂料147Pm内照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株ANA-1细胞诱发细胞凋亡进行了研究。估算了147Pm在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过荧光显微镜的形态观察,发现免疫细胞Mlt-4和ANA-1细胞在受147Pm内照射作用后,可诱发明显的核断裂和核固缩,以及凋亡小体形成为特征的细胞凋亡。微观放射自显影研究表明,147Pm可通过免疫细胞膜,在细胞内呈亲膜性积聚,并在膜包裹的凋亡小体周围呈现。从而证明了147Pm内照射可导致免疫细胞Molt-4和ANA-1细胞的凋亡发生。 展开更多
关键词 荧光显微镜 放射自显影 免疫细胞 凋亡 147
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环孢素A对Th1细胞转录因子T-bet的影响
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作者 樊海波 张秀莲 +4 位作者 张伟华 范星火 陈玮 侯素敏 刘晨 《山西医药杂志(上半月)》 CAS 2008年第3期214-216,共3页
目的研究环孢素A(CsA)对小鼠骨髓型正常巨噬细胞株Ana-1诱导Th1细胞转录因子T-bet的影响,探讨CsA在再生障碍性贫血(再障)治疗中的免疫抑制作用。方法①反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ana-1细胞株培养上清作用后正常小鼠外周血单个... 目的研究环孢素A(CsA)对小鼠骨髓型正常巨噬细胞株Ana-1诱导Th1细胞转录因子T-bet的影响,探讨CsA在再生障碍性贫血(再障)治疗中的免疫抑制作用。方法①反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ana-1细胞株培养上清作用后正常小鼠外周血单个核细胞(PBMC)T-betmRNA的表达。②RT-PCR方法检测Ana-1细胞株培养上清加CsA作用后正常小鼠PBMCT-betmRNA的表达。结果①加入Ana-1细胞株培养上清后,T-betmRNA的表达水平为1.54±0.03,较对照组(1.03±0.06)增多(P<0.05);②加入Ana-1细胞株培养上清和CsA后,T-betmRNA的表达为0.66±0.02,较加入Ana-1细胞株培养上清组(1.54±0.03)减少(P<0.05)。结论CsA抑制巨噬细胞诱导T-bet的生成,可能是其在再障治疗中发挥免疫抑制作用的途径之一。 展开更多
关键词 亲环素A 贫血 再生障碍性 小鼠 巨噬细胞株ana-1
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浓缩铀诱发培养免疫细胞凋亡的电镜观察及CHX和ActD的防护作用
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作者 朱寿彭 张澜生 付强 《中国辐射卫生》 1997年第4期193-195,共3页
对浓缩铀235U内照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡及其防护因子进行了研究。实验中估算了235U在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过透射电镜的形态观察,发现Mo... 对浓缩铀235U内照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡及其防护因子进行了研究。实验中估算了235U在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过透射电镜的形态观察,发现Molt-4和Ana-1两株免疫细胞在受235U内照射作用下,可诱发核断裂,核染质边聚,以及呈现膜包裹着的凋亡小体形成为特征的细胞凋亡。而蛋白质合成抑制剂CHX和RNA合成抑制剂ActD可显著抑制由核素235U诱发免疫细胞DNA链断裂的作用,从而呈现出明显的对235U内照射诱发免疫细胞凋亡的防护作用。 展开更多
关键词 MOLT-4细胞 ana-1细胞 CHX 防护 浓缩铀
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^(147)Pm 诱发免疫细胞凋亡的电镜观察及 CHX 和 Act D 的防护作用 被引量:4
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作者 朱寿彭 张澜生 付强 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期134-138,共5页
对裂变产物147Pm照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡及其防护因子进行了研究。通过透射电镜的形态观察,发现147Pm可诱发Molt-4和Ana-1两株免疫细胞核断裂,核... 对裂变产物147Pm照射人淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞和巨噬细胞株Ana-1细胞诱发的细胞凋亡及其防护因子进行了研究。通过透射电镜的形态观察,发现147Pm可诱发Molt-4和Ana-1两株免疫细胞核断裂,核染质边聚,以及呈现膜包裹着的凋亡小体形成为特征的细胞凋亡。研究表明,蛋白质合成抑制剂CHX和RNA合成抑制剂ActD可显著抑制由147Pm诱发的免疫细胞DNA链断裂,对147Pm照射诱发的免疫细胞凋亡有明显的防护作用。 展开更多
关键词 CHX 防护 辐射损伤 免疫细胞 细胞凋亡 147
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Apoptosis in immune cells induced by fission fragment ^(147)Pm 被引量:1
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作者 Zhu Shou Peng, Zhang Lan Sheng and Fu Qiang ( Suzhou Medical College, Suzhou 215007 ) 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期229-231,共3页
Apoptosisinimmunecelsinducedbyfisionfragment147PmZhuShouPeng,ZhangLanShengandFuQiang(SuzhouMedicalColege,Suz... Apoptosisinimmunecelsinducedbyfisionfragment147PmZhuShouPeng,ZhangLanShengandFuQiang(SuzhouMedicalColege,Suzhou215007)Abst... 展开更多
关键词 147Pm 裂变碎片 免疫细胞
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Chromatin and DNA chain fragmentation studies on apoptosis in immune cells induced by ^(235)U and radioprotection of IL-2 or IL-6
14
作者 Zhu Shou Peng, Zhang Lan Sheng and Fu Qiang ( Suzhou Medical College, Suzhou 215007 ) 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期49-51,共3页
ChromatinandDNAchainfragmentationstudiesonapoptosisinimmunecelsinducedby235UandradioprotectionofIL2orIL6ZhuS... ChromatinandDNAchainfragmentationstudiesonapoptosisinimmunecelsinducedby235UandradioprotectionofIL2orIL6ZhuShouPeng,Zhang... 展开更多
关键词 DNA 染色质 免疫细胞 ^235U
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