目的观察推拿㨰法对骨骼肌损伤模型大鼠的机械敏感性离子通道Piezo1及细胞凋亡的影响,探讨推拿㨰法治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、㨰法组、㨰法+抑制剂组,每组8只。采用肌内注射200μL虎蛇毒素(notexin,...目的观察推拿㨰法对骨骼肌损伤模型大鼠的机械敏感性离子通道Piezo1及细胞凋亡的影响,探讨推拿㨰法治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、㨰法组、㨰法+抑制剂组,每组8只。采用肌内注射200μL虎蛇毒素(notexin,NTX)(10μg/mL)制备大鼠腓肠肌损伤模型。造模24 h后,㨰法组使用实验动物㨰法器模拟㨰法治疗,滚动频率为140次/min,每天2次,每次3 min,连续治疗3 d;㨰法+抑制剂组在实施㨰法治疗前,给予腹腔注射Piezo1抑制剂GsMTx4(270μg/kg),每天1次,连续注射3 d;正常组和模型组腹腔注射等体积生理盐水。采用平衡木测试进行行为学评估,HE染色观察腓肠肌组织显微结构变化,TUNEL染色计算腓肠肌组织细胞凋亡率,Western blot法检测大鼠腓肠肌组织Piezo1、B淋巴细胞瘤-2(B-lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白质(B-lymphoma-2 related X protein,Bax)、胱天蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3)表达。结果与正常组比较,模型组和㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增加(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率升高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),肌细胞破裂、坏死、大小不一,排列稀疏、无规律,周围有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。与模型组比较,㨰法组平衡木行走时间缩短(P<0.01),滑爪次数减少(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率降低(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),肌细胞病理情况好转,有少量细胞破裂、萎缩、坏死,细胞间隔缩小,轻度局灶性炎性细胞浸润。与㨰法组比较,㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增多(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率增高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),见较多肌细胞萎缩、坏死�展开更多
文摘目的观察推拿㨰法对骨骼肌损伤模型大鼠的机械敏感性离子通道Piezo1及细胞凋亡的影响,探讨推拿㨰法治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、㨰法组、㨰法+抑制剂组,每组8只。采用肌内注射200μL虎蛇毒素(notexin,NTX)(10μg/mL)制备大鼠腓肠肌损伤模型。造模24 h后,㨰法组使用实验动物㨰法器模拟㨰法治疗,滚动频率为140次/min,每天2次,每次3 min,连续治疗3 d;㨰法+抑制剂组在实施㨰法治疗前,给予腹腔注射Piezo1抑制剂GsMTx4(270μg/kg),每天1次,连续注射3 d;正常组和模型组腹腔注射等体积生理盐水。采用平衡木测试进行行为学评估,HE染色观察腓肠肌组织显微结构变化,TUNEL染色计算腓肠肌组织细胞凋亡率,Western blot法检测大鼠腓肠肌组织Piezo1、B淋巴细胞瘤-2(B-lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白质(B-lymphoma-2 related X protein,Bax)、胱天蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3)表达。结果与正常组比较,模型组和㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增加(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率升高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),肌细胞破裂、坏死、大小不一,排列稀疏、无规律,周围有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润。与模型组比较,㨰法组平衡木行走时间缩短(P<0.01),滑爪次数减少(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率降低(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),肌细胞病理情况好转,有少量细胞破裂、萎缩、坏死,细胞间隔缩小,轻度局灶性炎性细胞浸润。与㨰法组比较,㨰法+抑制剂组平衡木行走时间延长(P<0.01),滑爪次数增多(P<0.01),腓肠肌细胞凋亡率增高(P<0.01),腓肠肌组织Piezo1蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),见较多肌细胞萎缩、坏死�
