双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠诱导粘膜与系统免疫反应 被引量：11

1

作者 舒翠莉 高杰英 +6 位作者 彭虹 徐辉 陈志华 王华 陈洁 石辛甫 邢丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期521-524,共4页

目的 :探讨双价痢疾菌苗滴鼻免疫后对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响。方法 :BALB/c小鼠随机分为3组 ,每组 2 0只 ,FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2w ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、... 目的 :探讨双价痢疾菌苗滴鼻免疫后对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响。方法 :BALB/c小鼠随机分为3组 ,每组 2 0只 ,FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2w ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP及MLN淋巴细胞 ,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化 ;收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清 ,采用ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA和IgG。结果 :两株菌苗经鼻内免疫都诱发了鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA、IgG的显著增加 (P <0 0 1) ;NALT、NP和PP淋巴细胞中CD3+ T细胞显著增加 ,其中以CD4+ T细胞增加为主 ;FSM 2 117免疫组的脾细胞中B2 2 0 + 细胞显著增加 ,而FS 5 416免疫组的脾细胞中CD3+ T细胞显著增加。结论 :两株菌苗经鼻粘膜免疫均可诱导不同粘膜部位及系统免疫反应的发生 ,鼻粘膜是一个安全有效的免疫途径。 展开更多

关键词 痢疾菌苗 滴鼻免疫 淋巴细胞表型 抗原特异性抗体 流式细胞术

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肠粘膜上皮细胞的免疫学功能 被引量：16

2

作者 石辛甫 高杰英 《国外医学（免疫学分册）》 1999年第4期203-206,共4页

肠道是人体重要的消化和吸收器官，同时也是表面积最大的免疫器官，肠粘膜上皮细胞处于机体与外界抗原接触的第一线，表面表达一系列表面分子，在生理及病理情况下能分泌一系列细胞因子，在感染防御及抗原吸收、转运、提呈等方面具有重... 肠道是人体重要的消化和吸收器官，同时也是表面积最大的免疫器官，肠粘膜上皮细胞处于机体与外界抗原接触的第一线，表面表达一系列表面分子，在生理及病理情况下能分泌一系列细胞因子，在感染防御及抗原吸收、转运、提呈等方面具有重要作用，本文重点介绍肠上皮细胞的免疫学功能。 展开更多

关键词 肠粘膜上皮细胞 免疫学功能

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双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠后粘膜免疫与系统免疫应答持续时间的观察 被引量：6

3

作者 舒翠莉 高杰英 +3 位作者 彭虹 王华 陈洁 石辛甫 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期238-240,共3页

本文探讨双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠一段时间后,粘膜免疫和系统免疫应答的变化.将BALB/c小鼠随机分为三组,每组30只.PBS、FSM-2117和FS-5416(菌量为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只/次)经滴鼻途径免疫小鼠.间隔2... 本文探讨双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠一段时间后,粘膜免疫和系统免疫应答的变化.将BALB/c小鼠随机分为三组,每组30只.PBS、FSM-2117和FS-5416(菌量为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只/次)经滴鼻途径免疫小鼠.间隔2周,4次免疫后7、30和90d活杀,收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清.采用ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内LPS IgA和IgG.结果是两株疫苗经鼻内免疫后,诱发鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内LPS IgA、IgG的显著增加(P＜0.01).特异性抗体水平虽然在免疫后的30、90 d明显下降,但仍明显高于PBS对照组水平.故认为两株双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠后能有效诱导粘膜免疫和系统免疫应答,并持续较长时间. 展开更多

关键词 志贺疫苗 滴鼻免疫 抗原特异性抗体 持续免疫应答 细菌性疾病 粘膜上皮

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双价痢疾工程疫苗经粘膜免疫动物的实验研究 被引量：6

4

作者 徐辉 高杰英 +4 位作者 舒翠莉 彭虹 石辛甫 邢丽 陈志华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期523-526,共4页

目的　探讨不同粘膜免疫途径对 2株痢疾工程疫苗免疫效果的影响。方法　用FSM 2 1 1 7或FS 54 1 6以 4× 1 0 7CFU/只分别经滴鼻、灌胃和小肠内免疫小鼠 ,3次免疫后 7d分离小鼠脾、派伊尔结 (PP)、肠系膜中心淋巴结 (MLN)、小肠淋... 目的　探讨不同粘膜免疫途径对 2株痢疾工程疫苗免疫效果的影响。方法　用FSM 2 1 1 7或FS 54 1 6以 4× 1 0 7CFU/只分别经滴鼻、灌胃和小肠内免疫小鼠 ,3次免疫后 7d分离小鼠脾、派伊尔结 (PP)、肠系膜中心淋巴结 (MLN)、小肠淋巴细胞固有层 (LPL)、鼻通道 (NP)及NALT淋巴细胞 ,用BA ELISASPOT法检测其特异性抗FSM 2 1 1 7或FS 54 1 6全菌抗原的IgA、IgG ASC(抗体分泌细胞 )数量。结果　 2株疫苗经鼻内免疫都诱发了鼻粘膜相关淋巴组织、胃肠粘膜相关淋巴组织以及代表系统免疫反应的脾淋巴细胞全菌抗原特异性IgA、IgG ASC的显著增加 (P <0 .0 5和 0 .0 1 )。小肠内免疫后 ,可有效诱发肠粘膜局部以及脾淋巴细胞全菌抗原特异性IgA、IgG ASC的显著增加 (P <0 .0 1 ) ,但不能刺激鼻粘膜局部淋巴细胞的特异性ASC反应。结论　 2株疫苗经鼻粘膜免疫均可诱导NALT和GALT及系统免疫反应的发生 ,是一个可行的免疫途径。 展开更多

关键词 痢疾疫苗 滴鼻免疫 灌胃免疫 肠内免疫 抗体分泌细胞

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双价志贺菌苗滴鼻免疫对小鼠NALT、GALT和脾淋巴细胞的影响 被引量：9

5

作者 舒翠莉 高杰英 +3 位作者 彭虹 徐辉 邢丽 石辛甫 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期199-203,共5页

本文是探讨滴鼻免疫对NALT、GALT和脾淋巴细胞中特异性抗体分泌细胞及淋巴细胞表型变化的影响。将Balb/c小鼠随机分为 3组 ,每组 2 0只。FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d活杀 ,分离N... 本文是探讨滴鼻免疫对NALT、GALT和脾淋巴细胞中特异性抗体分泌细胞及淋巴细胞表型变化的影响。将Balb/c小鼠随机分为 3组 ,每组 2 0只。FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP及MLN淋巴细胞 ,采用BA ELISPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内LPSIgA和IgG分泌细胞 ;采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果是两株菌苗经鼻内免疫都诱发了NALT、NP、GALT内 (PP、MLN、LPL )以及代表系统免疫反应的脾淋巴细胞中特异性抗福氏、宋内LPSIgA、IgG ASC的显著增加 (P <0 0 1) ;NALT、NP和PP淋巴细胞中CD3+T细胞显著增加 ,其中以CD4+T细胞增加为主 ;FSM 2 117免疫组的脾细胞中B2 2 0 +细胞显著增加 (P <0 0 1) ,而FS 5 416免疫组的脾细胞中CD3+T细胞显著增加 (P <0 0 1)。说明两株菌苗经鼻粘膜免疫均可诱导鼻粘膜局部、GALT及系统免疫反应的发生 。 展开更多

关键词 双价志贺菌苗 滴鼻免疫 NALT GALT 脾淋巴细胞

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肠上皮间淋巴细胞的研究进展 被引量：3

6

作者 石辛甫 高杰英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期270-273,共4页

肠上皮间淋巴细胞（ｉｎｔｅｓｔｉｎｅｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｉＩＥＬ）是位于肠上皮细胞间基侧膜表面的一类淋巴细胞，在粘膜免疫防御、口服免疫耐受形成等方面起着十分重要的作用，它们无论在结构、功... 肠上皮间淋巴细胞（ｉｎｔｅｓｔｉｎｅｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｉＩＥＬ）是位于肠上皮细胞间基侧膜表面的一类淋巴细胞，在粘膜免疫防御、口服免疫耐受形成等方面起着十分重要的作用，它们无论在结构、功能上还是在起源、发育、回归上都与一... 展开更多

关键词 肠上皮 淋巴细胞 分型 表型

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两株双价痢疾工程菌苗不同粘膜免疫途径的免疫原性 被引量：4

7

作者 徐辉 高杰英 +4 位作者 石辛甫 邢丽 彭虹 舒翠莉 陈志华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期181-184,共4页

目的探讨免疫途径、接种剂量及侵袭蛋白表达对两株双价痢疾工程菌苗免疫效果的影响。方法小鼠分为滴鼻、灌胃和对照组 ,分别以不同剂量免疫 3次 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d收集血清、小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,EL ISA法检测其中特异性... 目的探讨免疫途径、接种剂量及侵袭蛋白表达对两株双价痢疾工程菌苗免疫效果的影响。方法小鼠分为滴鼻、灌胃和对照组 ,分别以不同剂量免疫 3次 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d收集血清、小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,EL ISA法检测其中特异性福氏、宋内氏 L PS- Ig A和 Ig G。结果 4× 10 7CFU菌苗经鼻途径免疫即可诱导多个粘膜部位以及血清双价特异性抗体显著增高 ;菌苗剂量增加 2 0、2 0 0倍时经灌胃免疫诱发较为局限的粘膜特异性抗体增高。结论鼻粘膜免疫不仅诱导多个粘膜部位 (特别是生殖道 )以及系统免疫的抗体反应 ,是一个安全有效的免疫途径。 展开更多

关键词 痢疾菌苗 侵袭蛋白 滴鼻免疫 灌胃免疫 细菌性痢疾

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免疫途径及侵袭蛋白表达对痢疾疫苗免疫效果影响的实验研究 被引量：3

8

作者 徐辉 高杰英 +4 位作者 石辛甫 邢丽 彭虹 舒翠莉 陈志华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期527-530,共4页

目的　探讨免疫途径及侵袭蛋白表达对 2株痢疾疫苗免疫效果的影响。方法　FSM 2 1 1 7或FS 54 1 6以 4× 1 0 7CFU/只分别经滴鼻、灌胃、肠内注射 3种途径免疫小鼠 ,三免后 7d收集血清、小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,ELISA法检测其... 目的　探讨免疫途径及侵袭蛋白表达对 2株痢疾疫苗免疫效果的影响。方法　FSM 2 1 1 7或FS 54 1 6以 4× 1 0 7CFU/只分别经滴鼻、灌胃、肠内注射 3种途径免疫小鼠 ,三免后 7d收集血清、小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,ELISA法检测其中特异性福氏、宋内LPSIgA和IgG抗体 (Ab)水平。结果　滴鼻和肠内免疫都能够诱生血清中双价IgA、IgGAb显著升高 ,但仅滴鼻免疫组Ipa+株较Ipa- 株升高显著 (P <0 .0 1 )。滴鼻免疫组同时诱生鼻咽、肺、小肠内特异性抗体升高 ,尤其是生殖道冲洗液内抗体升高极为明显 ;而肠内免疫组诱生小肠、肺冲洗液内特异性抗体升高 ,但鼻咽及生殖道冲洗液内抗体未见明显升高。结论　鼻粘膜免疫不仅诱导多个粘膜部位 (特别是生殖道 )的抗体反应 ,且能诱导系统免疫反应。是一个安全有效的免疫途径。研究中发现侵袭蛋白表达在鼻粘膜部位能够显著加强系统特异性抗体生成 ,但在胃肠粘膜却无此作用。 展开更多

关键词 痢疾疫苗 侵袭蛋白 滴鼻免疫 灌胃免疫 肠内免疫

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减毒活细菌在肿瘤治疗中的作用 被引量：5

9

作者 石辛甫 《国外医学（肿瘤学分册）》 2003年第1期64-67,共4页

减毒活细菌在作为感染疫苗用于预防感染性疾病的同时 ,某些细菌抗肿瘤特性及作为粘膜疫苗载体的研究近来受到了空前的重视。综述几种减毒活细菌在肿瘤治疗中的应用 ,包括卡介苗、梭状芽孢杆菌、伤寒杆菌。

关键词 减毒活细菌 肿瘤 治疗

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双价痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的观测 被引量：6

10

作者 石辛甫 高杰英 +2 位作者 彭红 陈志华 邢丽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期231-232,237,共3页

为了观测两株菌苗ＦＳＭ－２１１７（Ｉｐａ－）、ＦＳ－５４１６（Ｉｐａ＋）免疫后所引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的免疫反应，以小鼠灌胃免疫为模型，应用ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法检测了ＧＡＬＴ中诱导部位派伊尔小结（Ｐ... 为了观测两株菌苗ＦＳＭ－２１１７（Ｉｐａ－）、ＦＳ－５４１６（Ｉｐａ＋）免疫后所引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的免疫反应，以小鼠灌胃免疫为模型，应用ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法检测了ＧＡＬＴ中诱导部位派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）和抗原特异性抗体分泌细胞（ＡＳＣ），发现两菌苗株免疫小鼠后，ＰＰ结、ＭＬＮ中福氏、宋内氏抗原ＳＩｇＡ、ＩｇＧ抗体分泌细胞明显增加，尤以ＳＩｇＡ－ＡＳＣ为甚。株间差别无统计学意义。两株菌苗与对照组相比。 展开更多

关键词 痢疾 双价痢疾菌苗 ASCS 肠粘膜 相关淋巴组织

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质粒表达型siRNA对SARS-CoV复制与感染干扰的初步研究 被引量：5

11

作者 李阳 倪兵 +6 位作者 石辛甫 王希良 何仰东 肖宇 姜曼 黎万玲 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期91-94,共4页

目的　构建针对SARS CoV的特异性siRNA质粒 ,利用RNA干扰技术抑制该病毒复制与感染。方法　根据SARS CoV的全长基因序列 ,以 4个不同的部位为靶点 ,分别设计、合成含有 19nt干扰序列的一段寡核苷酸 ,将两两互补的寡核苷酸经退火后所形... 目的　构建针对SARS CoV的特异性siRNA质粒 ,利用RNA干扰技术抑制该病毒复制与感染。方法　根据SARS CoV的全长基因序列 ,以 4个不同的部位为靶点 ,分别设计、合成含有 19nt干扰序列的一段寡核苷酸 ,将两两互补的寡核苷酸经退火后所形成的序列克隆到pSilencer 3 .1 H1载体中 ,构建表达siRNA的质粒。采用脂质体法将质粒转染VeroE6细胞 ,经潮霉素抗性筛选后 ,再对稳定表达的细胞进行细胞病变、病毒空斑形成和MTT实验 ,以观察干扰效应。结果　对所构建的质粒分别测序 ,确定其含有siRNA的序列与预期的特异性干扰序列一致。用不同浓度的SARS CoV感染转染质粒后的细胞 ,与阴性对照相比 ,其细胞病变减轻、活细胞显著增加 ,病毒空斑明显减少。结论　利用RNA干扰能有效的抑制SARS CoV在细胞中的复制 ,并对细胞有保护作用 ,为预防、治疗SARS提供了新的思路和方法。 展开更多

关键词 SARS病毒 RNA干扰 小干扰RNA 基因治疗

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不同表型双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后黏膜和系统记忆反应观测 被引量：3

12

作者 石辛甫 邢丽 +1 位作者 彭虹 高杰英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期421-425,共5页

目的　观测 5株 2类不同表型的双价痢疾菌苗滴鼻免疫后所引起的黏膜和系统的记忆反应 ,为痢疾菌苗的构建提供理论依据。方法　以小鼠滴鼻免疫为模型 ,3次免疫 (间隔 2周 )后 ,2 0周再次免疫 ,分别于 3次免疫及 2 0周加强免疫后第 7天 ,... 目的　观测 5株 2类不同表型的双价痢疾菌苗滴鼻免疫后所引起的黏膜和系统的记忆反应 ,为痢疾菌苗的构建提供理论依据。方法　以小鼠滴鼻免疫为模型 ,3次免疫 (间隔 2周 )后 ,2 0周再次免疫 ,分别于 3次免疫及 2 0周加强免疫后第 7天 ,收取鼻咽、肺、小肠及阴道冲洗液和血清 ,应用ELISA方法检测福氏、宋内氏特异性抗体。结果　 2类双价菌苗株滴鼻免疫 3次后 ,多个黏膜部位及血清均产生了抗原特异性sIgA、IgG ,较PBS对照组有明显升高 ;2 0周后再次加强免疫 ,仍可诱导黏膜及系统的免疫反应 ,但较 3次免疫后水平明显降低。结论　 2株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后可诱导多个黏膜及系统的特异性抗体产生 ,并可产生一定时间的记忆反应 。 展开更多

关键词 双价痢疾菌苗 特异性抗体 滴鼻免疫 记忆反应 小鼠

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两株双价痢疾菌苗免疫小鼠后GALT中CD4^+、CD8^+ T细胞亚群的反应 被引量：3

13

作者 石辛甫 高杰英 +4 位作者 彭红 邢丽 刘育红 陈志华 曾关富 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期29-32,共4页

目的ＦＳＭ－２１１７和ＦＳ－５４１６是两株具有不同生物表型的福氏、宋内氏双价痢疾菌苗株，ＦＳＭ－２１１７无侵袭表型，无溶血活性，不表达侵袭蛋白抗原（Ｉｐａ－），ＦＳ－５４１６则为Ｉｐａ＋，本实验是为了观测两株菌苗（Ｉ... 目的ＦＳＭ－２１１７和ＦＳ－５４１６是两株具有不同生物表型的福氏、宋内氏双价痢疾菌苗株，ＦＳＭ－２１１７无侵袭表型，无溶血活性，不表达侵袭蛋白抗原（Ｉｐａ－），ＦＳ－５４１６则为Ｉｐａ＋，本实验是为了观测两株菌苗（Ｉｐａ－，Ｉｐａ＋）免疫后引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的细胞免疫反应，以探明痢疾菌苗在肠粘膜的免疫保护机制。方法以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分成两组，每组２５只，灌胃免疫ＦＳＭ－２１１７及ＦＳ－５４１６，８×１０８ＣＦＵ／只，分别在１，４，７，１０，１３天随机取各组小鼠５只分离ＧＡＬＴ淋巴细胞；同时设一组ＰＢＳ对照组，以间接免疫荧光法检测ＧＡＬＴ中诱导部位〔派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）〕及效应部位〔上皮间淋巴细胞（ＩＥＬ）、粘膜固有层（ＬＰＬ）〕Ｔ细胞亚群的变化，荧光显微镜计数２００个细胞计算阳性率。结果用ＳＡＳ软件，单因素方差分析，表明两株双价菌苗株均可引起肠粘膜ＧＡＬＴ中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞亚群改变，不同粘膜部位免疫反应不同。诱导部位（派氏小结、肠系膜淋巴结）ＣＤ４＋细胞亚群明显升高，末次免疫后第７天达峰值，而后迅速下降；在效应部位，粘膜固有层表现为ＣＤ４＋细胞亚群明显? 展开更多

关键词 痢疾菌苗 肠粘膜 淋巴组织 T淋巴细胞亚群

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双价痢疾菌苗不同途径免疫小鼠对脾细胞及GALT中ASC影响的实验研究 被引量：1

14

作者 徐辉 高杰英 +3 位作者 彭虹 舒翠莉 邢丽 石辛甫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期633-635,639,共4页

目的：观察侵袭蛋白表达阴性（FSM-2117）和阳性（FS-5416）的两株双价痢疾菌苗经不同途径免疫小鼠后，脾细胞和粘膜相关淋巴组织（gut associated lymphoid tissues，GALT）中抗体分泌细胞（antibody secreting cell，ASC）的变化，以... 目的：观察侵袭蛋白表达阴性（FSM-2117）和阳性（FS-5416）的两株双价痢疾菌苗经不同途径免疫小鼠后，脾细胞和粘膜相关淋巴组织（gut associated lymphoid tissues，GALT）中抗体分泌细胞（antibody secreting cell，ASC）的变化，以探讨免疫途径及侵袭蛋白表达与否对痢疾菌苗免疫效果的影响。方法： BALB／c小鼠随机分为 3组，每组 20只， FSM－2ll7或 FS-5416 4 x10^7CFU分别经滴鼻、灌胃及肠内注射3种途径免疫小鼠，间隔2w，第3次免疫后7d活杀分离脾、小肠pp及MIN淋巴细胞，采用BA－ELISASPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA和IgG分泌细胞。结果：滴鼻途径及小肠内免疫都能够诱生脾细胞特异性IgA-ASC、IgG-ASC显著升高（P＜0．01）；仅滴鼻免疫组Ipa+株较Ipa-株升高显著（P＜0．01）。滴鼻和小肠内免疫同时诱生肠GALT中派伊尔小结（Payer's patch,PP)和肠系膜淋巴结（mesenteric lymph node,MLN)淋巴细胞ASC显著升高（P＜0．05，P＜0．01），但株间比较无统计学差异。而同等剂量的灌胃免疫未能诱发脾细胞及GALT特异性ASC升高。结论：鼻粘膜和小肠内免疫可以有效地诱导脾脏和GALT淋巴细胞的免疫反应，且显著降低免疫原用量（本实验滴鼻剂量为常规灌胃的1/20），是一个安全有效的免疫途径。研? 展开更多

关键词 痢疾菌苗 滴鼻免疫 肠内免疫 GALT ASC 小鼠

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2006～2007年流行流感病毒减毒疫苗株的构建(英文) 被引量：3

15

作者 杨鹏辉 叶艺 +8 位作者 石辛甫 罗德炎 张钰 颜艳 张鹏飞 段跃强 邢丽 刘秀梵 王希良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期312-319,共8页

选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株作为骨架病毒,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入5个氨基酸突变(PB1-391E,581G,661T,PB2-265S,NP-34G).HA和NA来源于2006～2007当年流行株A/New Caledoni... 选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株作为骨架病毒,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入5个氨基酸突变(PB1-391E,581G,661T,PB2-265S,NP-34G).HA和NA来源于2006～2007当年流行株A/New Caledonia/20/99(H1N1).8个基因片段通过与改造后的转录载体pAD3000连接,构建8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒:pMDV-A-PB2、pMDV-A-PB1、pMDV-A-PA、pMDV-A-NP、pMDV-A-M、pMDV-A-NS、pMDV-A-HA、pMDV-A-NA.6质粒与当年流行株的表面基因HA和NA进行"6+2"组合的病毒拯救,8个重组质粒共转染COS-1细胞,成功拯救出了具有血凝性的冷适应减毒的重组A型人流感病毒.鸡胚尿囊液中重组病毒的血凝效价为1∶29～1∶210.构建的A/AA/6/606个内部基因的病毒骨架拯救系统,为深入研究冷适应减毒人流感病毒的基因功能和新型疫苗研发奠定了基础. 展开更多

关键词 流感病毒 反向遗传学 8质粒拯救系统 重组流感病毒

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双价志贺菌苗灌胃免疫小鼠后肠粘膜的免疫应答 被引量：1

16

作者 石辛甫 彭红 +3 位作者 徐辉 邢丽 陈志华 高杰英 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期36-38,25,共4页

为了观察两株福氏、宋内双价志贺菌苗 (Ipa ,Ipa+ )免疫后所引起的肠粘膜诱导部位的免疫应答及为研制有效腹泻疫苗提供理论基础。应用小鼠灌胃免疫为模型 ,以间接免疫荧光法和BA ELISPOT方法 ,检测了肠粘膜相关淋巴组织 (gutasso ciated... 为了观察两株福氏、宋内双价志贺菌苗 (Ipa ,Ipa+ )免疫后所引起的肠粘膜诱导部位的免疫应答及为研制有效腹泻疫苗提供理论基础。应用小鼠灌胃免疫为模型 ,以间接免疫荧光法和BA ELISPOT方法 ,检测了肠粘膜相关淋巴组织 (gutasso ciatedlymphoidtissues ,GALT )中诱导部位派伊尔小结 (Payer’spatches ,PP )、肠系膜淋巴结 (mesentericlymphoidnode ,MLN )T淋巴细胞亚群和特异性抗体分泌细胞的变化 (ASC )及小肠局部和系统的特异性抗体变化。发现两株双价菌苗株均可引起肠粘膜GALT诱导部位CD4+ 淋巴细胞亚群、抗体分泌细胞明显升高 ;同时局部及血清中特异性抗体明显升高。说明双价志贺菌苗灌胃免疫小鼠后 ,诱导部位的免疫应答早期以体液免疫为主 ,灌胃不仅可诱导局部特异性抗体免疫应答也可诱导系统的抗体免疫应答。 展开更多

关键词 双价志贺菌苗 GALT T细胞亚群 ASC 特异性抗体分泌细胞 灌胃 肠粘膜 免疫应答

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小鼠Semcap2分子的克隆、表达与抗血清制备 被引量：1

17

作者 王华 高杰英 +3 位作者 彭虹 易绍琼 石辛甫 舒翠莉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期414-417,共4页

目的　获得小鼠Semcap 2蛋白 ,并对其功能进行初步研究。方法　用DNA重组法构建了mSemcap 2cDNA的原核表达质粒pGEX KG mSemcap 2。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α,经 0 .3mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 3 .5h,行SDS PAGE检测。用 8mol L... 目的　获得小鼠Semcap 2蛋白 ,并对其功能进行初步研究。方法　用DNA重组法构建了mSemcap 2cDNA的原核表达质粒pGEX KG mSemcap 2。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α,经 0 .3mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 3 .5h,行SDS PAGE检测。用 8mol L尿素溶解的包涵体作为免疫原免疫家兔制备多抗。结果　蛋白表达量约占细菌总蛋白的 1 5 %。多抗效价达 1∶1 0 2 4 0 0 ,此多抗可以与重组蛋白及真核转染细胞中的蛋白发生很好的抗原抗体反应。结论　小鼠Semcap 2在大肠杆菌中得到高效表达 ,其抗体的制备为深入研究mSemcap 展开更多

关键词 小鼠 Semcap2分子 克隆 抗血清 原核表达 GST融合蛋白

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中和性马抗体对SARS-CoV感染的防治作用 被引量：3

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作者 倪兵 王希良 +12 位作者 王莉 赵光宇 石辛甫 张松乐 张良艳 罗德炎 黎万玲 姜曼 毛丽伟 何仰东 肖宇 高闻达 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期433-437,共5页

目的探讨马抗SARSCoV中和性抗体是否对SARSCoV感染有防治作用。方法用SARSCoV(BJ01株)免疫马匹,从免疫马血清中制备IgGs及其F(ab’)2片段。通过细胞病变法(CPE)、MTT法和空斑形成实验(PFU)等方法,在体外培养的VeroE6细胞中检测F(ab’)2... 目的探讨马抗SARSCoV中和性抗体是否对SARSCoV感染有防治作用。方法用SARSCoV(BJ01株)免疫马匹,从免疫马血清中制备IgGs及其F(ab’)2片段。通过细胞病变法(CPE)、MTT法和空斑形成实验(PFU)等方法,在体外培养的VeroE6细胞中检测F(ab’)2片段对SARSCoV感染的预防性和治疗性作用。再在Balb/c小鼠体内模型中,用CPE法和定量RTPCR方法检测该抗体的保护性效应。结果CPE、MTT和PFU三种方法证实来自三匹马的血清F(ab’)2的中和滴度均达到1∶1600以上。体内实验证实,50μg的F(ab’)2片段可以完全中和1×104TCID50SARSCoV。结论马抗SARSCoV抗体在体内外均能有效地中和SARSCoV和预防其感染宿主细胞,为马抗体将来在大的灵长类动物或人体内进行实验提供实验依据。 展开更多

关键词 马抗血清 免疫 中和抗体 SARS-COV

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增强DNA疫苗效果的几种策略 被引量：2

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作者 石辛甫 高杰英 《微生物学免疫学进展》 2003年第2期32-36,共5页

近年来DNA疫苗的研究成为疫苗研究领域的热点 ,集预防性疫苗、治疗性疫苗 ,抗感染疫苗与非抗感染类疫苗于一身 ,开创了人类与疾病斗争的疫苗研究新篇章 ,许多科学家将DNA疫苗称为第三次疫苗革命。目前 ,包括艾滋病DNA疫苗在内的 10余种... 近年来DNA疫苗的研究成为疫苗研究领域的热点 ,集预防性疫苗、治疗性疫苗 ,抗感染疫苗与非抗感染类疫苗于一身 ,开创了人类与疾病斗争的疫苗研究新篇章 ,许多科学家将DNA疫苗称为第三次疫苗革命。目前 ,包括艾滋病DNA疫苗在内的 10余种DNA疫苗已经进入Ⅰ～Ⅱ期临床试验。但DNA疫苗本身存在着自身的缺点 ,本文就几种增强DNA疫苗免疫或治疗效果的策略进行综述。 展开更多

关键词 减毒活细菌 肿瘤治疗

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冷适应减毒B型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定(英文) 被引量：2

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作者 杨鹏辉 安文琪 +8 位作者 石辛甫 段跃强 罗德炎 张鹏飞 唐冲 邢丽 张玉静 刘秀梵 王希良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期358-363,共6页

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB1... 以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB123-PA,pAB124-HA,pAB125-NP,pAB126-NA,pAB127-M和pAB128-NS.在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B.该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006～2007年当年流行株B/Malaysia/2506/2004.rMDV-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64～1∶512.实验结果暗示:从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型. 展开更多

关键词 B型流感病毒 反向遗传学 8质粒拯救系统 重组流感病毒

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