数字PCR在食源性致病微生物检测中的应用研究进展 被引量：12

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作者 杨纯佳 张娟 +3 位作者 周臣清 霍丽斯 崔海萍 王力清 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第12期4726-4730,共5页

大多数食源性疾病由食源性致病微生物引发,研究和建立食源性致病微生物的快速有效检测方法对于食品安全风险监控及保障人们的身体健康具有重要意义。相对于传统PCR,数字PCR具有较好的准确度和重现性,可实现绝对定量分析,为快速准确地进... 大多数食源性疾病由食源性致病微生物引发,研究和建立食源性致病微生物的快速有效检测方法对于食品安全风险监控及保障人们的身体健康具有重要意义。相对于传统PCR,数字PCR具有较好的准确度和重现性,可实现绝对定量分析,为快速准确地进行食品安全检测提供了一种崭新的技术平台。本文主要介绍了数字PCR中微滴式数字PCR和芯片式数字PCR的基本原理、种类、应用及其研究进展,深入探讨了数字PCR技术在沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单核细胞增生李斯特氏菌、阴沟杆菌和金黄色葡萄球菌等食源性致病微生物检测中的应用。数字PCR技术目前在转基因成分和动物源性成分定量检测中都得到了较好的应用,在食源性致病微生物中的应用技术还有待更好的发展。 展开更多

关键词 数字PCR 微滴式数字PCR 芯片式数字PCR 食源性致病微生物

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3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数的结果分析 被引量：8

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作者 黄玲玲 刘辉 +4 位作者 黄宝莹 赵玲 杨纯佳 周臣清 严家俊 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第10期2446-2450,共5页

目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落... 目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落测试片检测样品。运用配对t检验法评价4种不同方法对水溶性化妆品中菌落总数计数结果一致性的影响。结果在10~2、10~3 CFU/m L 2种不同浓度,平板计数琼脂法结果波动性最大,无法抑制菌落蔓延,而TTC营养琼脂和菌落测试片相对卵磷脂吐温80营养琼脂,具有抑制菌落蔓延生长、提高计数结果准确性的作用。结论在一定浓度下,可根据实际情况来选择相应培养基检测水溶性化妆品中菌落总数以提高检测效率和质量。 展开更多

关键词 化妆品 菌落总数 计数 配对T检验

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广州市蔬菜类凉拌菜中微生物污染状况调查及大肠埃希氏菌耐药现象研究 被引量：6

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作者 周臣清 张娟 +3 位作者 黄宝莹 赵玲 杨纯佳 佘之蕴 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第6期2485-2490,共6页

目的了解广州市蔬菜类凉拌菜的微生物污染状况及大肠埃希氏菌耐药情况。方法从广州市的超市、集贸摊点采集300份凉拌菜,依据GB 4789—2016进行微生物检验,用VETIK对检出的大肠埃希氏菌进行药敏实验, PCR法检测致泻性大肠埃希氏菌毒力基... 目的了解广州市蔬菜类凉拌菜的微生物污染状况及大肠埃希氏菌耐药情况。方法从广州市的超市、集贸摊点采集300份凉拌菜,依据GB 4789—2016进行微生物检验,用VETIK对检出的大肠埃希氏菌进行药敏实验, PCR法检测致泻性大肠埃希氏菌毒力基因。结果 300份样品中大肠菌群、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的不合格率分别为40.0%、6.7%、1.3%和0.0%。药敏结果显示大肠埃希氏菌对头孢唑啉的抗性最高(40.0%)、其次为氨苄西林(30.0%),对其他受试抗生素不具有耐药性,且无多重耐药菌株。20株大肠埃希氏菌中检出3株致泻大肠埃希氏菌。结论广州地区蔬菜类凉拌菜中存在较为严重的微生物污染,食源性大肠埃希氏菌具有一定的耐药现象,应加大卫生监督力度,保障食品安全。 展开更多

关键词 蔬菜类凉拌菜 微生物污染 大肠菌群 大肠埃希氏菌 抗生素耐药性

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重组酶介导扩增技术在生物安全检测中的应用研究 被引量：4

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作者 张娟 綦艳 +3 位作者 严家俊 杨纯佳 佘之蕴 周臣清 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第11期14-19,共6页

重组酶介导扩增(RAA)是重组酶等温扩增技术中极具代表性和前沿性的检测技术,弥补了现有核酸体外扩增技术需要热循环的局限性,使得核酸体外扩增更加简便快捷。RAA技术利用重组酶、脱氧核糖核酸(DNA)聚合酶和单链结合蛋白替代了传统的聚... 重组酶介导扩增(RAA)是重组酶等温扩增技术中极具代表性和前沿性的检测技术,弥补了现有核酸体外扩增技术需要热循环的局限性,使得核酸体外扩增更加简便快捷。RAA技术利用重组酶、脱氧核糖核酸(DNA)聚合酶和单链结合蛋白替代了传统的聚合酶链式反应(PCR)热循环解链过程,可在常温下完成扩增过程,同时兼具特异性强、灵敏度高、操作简单、耗时短等特点。该文在简述RAA技术的基础上,重点阐述了其在寄生虫、病毒、细菌、动物源性成分、植物病原等生物安全检测领域的应用,并对其未来发展前景予以展望,以期为拓展该技术的应用领域提供理论参考。 展开更多

关键词 重组酶介导扩增 生物安全检测 应用

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2种新方法与国标法检测蜡样芽胞杆菌计数结果的比较研究 被引量：3

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作者 杨纯佳 黄宝莹 +2 位作者 金佳佳 佘之蕴 张娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第5期2026-2031,共6页

目的探寻一种操作简便、结果精确的蜡样芽胞杆菌计数方法。方法选用3种不同方法[分别为国标法、蜡样芽胞杆菌显色培养基法和BACARA(蜡样芽胞杆菌选择性培养基)法]对乳粉中蜡样芽胞杆菌质控样品及标准菌株菌悬液进行定量检验。运用配对t... 目的探寻一种操作简便、结果精确的蜡样芽胞杆菌计数方法。方法选用3种不同方法[分别为国标法、蜡样芽胞杆菌显色培养基法和BACARA(蜡样芽胞杆菌选择性培养基)法]对乳粉中蜡样芽胞杆菌质控样品及标准菌株菌悬液进行定量检验。运用配对t检验法分别比较显色培养基法、BACARA法与国标法检测蜡样芽胞杆菌计数结果一致性。结果 2种新方法与国标法计算检验结果在统计学上并无明显差异(P>0.05),一致性较好。结论 BACARA法具有快速、简便等优点。 展开更多

关键词 蜡样芽胞杆菌 计数 配对T检验

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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法在婴幼儿食品蜡样芽胞杆菌检测中的应用 被引量：1

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作者 杨纯佳 蒋轩 +1 位作者 张娟 黄翠莉 《中国乳业》 2022年第11期81-84,共4页

[目的]探讨3种不同检测方法测定婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染情况。[方法]运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法对婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染情况进行检测,并与国标法、VITEK 2 Compact和实时荧光PCR法进行检测结... [目的]探讨3种不同检测方法测定婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染情况。[方法]运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法对婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染情况进行检测,并与国标法、VITEK 2 Compact和实时荧光PCR法进行检测结果比对。[结果]MALDI-TOF MS法与上述3种方法的定性结果一致,且具有准确度高、耗时短、灵敏度高等特点,适用于样品的快速鉴定。[结论]通过研究发现,婴幼儿食品存在蜡样芽胞杆菌污染的风险,应加强对该类产品的监测和监管。 展开更多

关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 婴幼儿食品 蜡样芽胞杆菌

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高分辨色谱/质谱联用法测定猪肉中二噁英的方法检出限研究 被引量：2

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作者 杨纯佳 张莉娜 +1 位作者 李晓明 牟靖芳 《广东化工》 CAS 2016年第8期175-176,共2页

文章阐述了检出限的相关概念,讨论了影响检出限的各种因素,并对高分辨色谱/质谱联用法测定猪肉中二噁英的方法检出限进行研究。

关键词 方法检出限 猪肉 高分辨色谱/质谱联用

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3种常用消毒剂对沙门氏菌抑菌效果的研究 被引量：2

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作者 周臣清 黄宝莹 +5 位作者 黄玲玲 杨纯佳 赵玲 苏妙仪 严家俊 张娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第12期4745-4748,共4页

目的探讨3种常用消毒剂对沙门氏菌的抑菌效果,明确沙门氏菌对这3种消毒剂耐受效果,为消毒剂的科学使用提供参考。方法按照国家标准GB 4789.4-2010分离沙门氏菌和确定血清分型,用VITEK 2COMPACT鉴定菌株,选用抑菌环检测洗必泰、新洁尔灭... 目的探讨3种常用消毒剂对沙门氏菌的抑菌效果,明确沙门氏菌对这3种消毒剂耐受效果,为消毒剂的科学使用提供参考。方法按照国家标准GB 4789.4-2010分离沙门氏菌和确定血清分型,用VITEK 2COMPACT鉴定菌株,选用抑菌环检测洗必泰、新洁尔灭、84消毒液3大类消毒剂对沙门氏菌的抑菌效果,确定最优消毒浓度。结果 10株沙门氏菌共获得3种血清型,其中肠炎沙门氏菌6株,鼠伤寒沙门氏菌3株,舒卜拉沙门氏菌1株;常规浓度的新洁尔灭对沙门氏菌具有完全的抑制作用,有效氯含量为0.4%的84消毒液对沙门氏菌具有完全抑制作用,而洗必泰需达0.4%浓度或以上才表现出对沙门氏菌完全抑制。结论不同的消毒场所应科学选择不同消毒剂浓度及消毒剂种类。 展开更多

关键词 消毒剂 沙门氏菌 抑菌效果

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环境样品中二噁英的方法检出限研究 被引量：1

9

作者 张莉娜 李晓明 +1 位作者 牟靖芳 杨纯佳 《广东化工》 CAS 2015年第16期210-211,共2页

检出限是评价一个分析方法的重要依据。文章给出了检出限的定义,并对环境样品中二噁英的检出限进行讨论。

关键词 方法检出限 环境样品

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玉米变性淀粉两种不同DNA提取方法的比较研究 被引量：1

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作者 张娟 杨纯佳 +1 位作者 周臣清 綦艳 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第8期53-56,共4页

采用两种不同方法对玉米变性淀粉基因组DNA提取比较,并经特异性引物进行实时荧光定量-聚合酶联反应(qRT-PCR)检测,从中选择出更适合玉米变性淀粉后续转基因成分检测的DNA提取方法。通过采用磁珠法和试剂盒法提取玉米变性淀粉基因组DNA,... 采用两种不同方法对玉米变性淀粉基因组DNA提取比较,并经特异性引物进行实时荧光定量-聚合酶联反应(qRT-PCR)检测,从中选择出更适合玉米变性淀粉后续转基因成分检测的DNA提取方法。通过采用磁珠法和试剂盒法提取玉米变性淀粉基因组DNA,比较不同方法的提取效果。结果表明,试剂盒法的提取效果优于磁珠法。实时荧光定量PCR结果显示,试剂盒法提取的基因组DNA均可扩增出标准的S形曲线,而磁珠法提取的基因组DNA则无任何扩增信号。该研究为检测玉米变性淀粉中的转基因成分奠定了基础。 展开更多

关键词 玉米变性淀粉 DNA提取 转基因成分 检测

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液相色谱法测定猪肝中喹乙醇残留量的不确定度评估

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作者 蒋轩 吴治将 +1 位作者 李锦清 杨纯佳 《广东化工》 CAS 2016年第12期236-237,241,共3页

建立了液相色谱法测定喹乙醇的不确定度评定的数学模型,全面考虑了测量过程中的不确定度来源,同时对各不确定度分量进行合成和扩展。得出其主要的不确定度因素来源于重复测定、非线性范围以及移液器引入的不确定度。

关键词 猪肝 喹乙醇 液相色谱法 不确定度

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61株水源性铜绿假单胞菌耐药分析及其16S rRNA系统发育学研究 被引量：4

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作者 张娟 綦艳 +4 位作者 周臣清 赵玲 黄宝莹 杨纯佳 佘之蕴 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第13期4150-4156,共7页

目的 了解铜绿假单胞菌的分子多样性和耐药性,采用16SrRNA基因序列分析法对2018—2020年间分离自广东地区桶装水中的61株铜绿假单胞菌进行同源性分析,并探讨其对11种不同抗生素的耐药性。方法 采用27F/1492R通用引物对目标菌的16SrRNA... 目的 了解铜绿假单胞菌的分子多样性和耐药性,采用16SrRNA基因序列分析法对2018—2020年间分离自广东地区桶装水中的61株铜绿假单胞菌进行同源性分析,并探讨其对11种不同抗生素的耐药性。方法 采用27F/1492R通用引物对目标菌的16SrRNA基因序列扩增,测序后,采用ClustalX软件进行序列比对,利用MEGA 7.0软件构建系统发生树;药敏实验应用微生物全自动鉴定及药敏系统检测。结果 系统发育分析结果表明:61株共可分为3个分支,分别包含16株一支、1株一支、44株和铜绿假单胞菌标准菌株ATCC27853一支;药敏结果显示61株铜绿假单胞菌处于较低耐药水平,对所有测试抗生素的耐药率均低于2%,但仍发现一株6重耐药菌株。结论 本研究初步建立了广东地区水源性铜绿假单胞菌的菌株资源库及药敏数据库,为之后的污染溯源工作提供了数据支持,从而保障广大消费群众的饮水安全。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 16S rRNA 系统发生树 抗生素耐药

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一种检测β溶血性链球菌的荧光环介导等温扩增方法的建立 被引量：2

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作者 周勇 周臣清 +4 位作者 张娟 赵玲 黄宝莹 杨纯佳 佘之蕴 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第10期3936-3941,共6页

目的建立荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法用于β溶血性链球菌的快速检测。方法针对β溶血性链球菌spy1258基因设计4对特异性引物,对建立的LAMP体系优化其反应扩增条件,对该方法特异性和灵敏... 目的建立荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法用于β溶血性链球菌的快速检测。方法针对β溶血性链球菌spy1258基因设计4对特异性引物,对建立的LAMP体系优化其反应扩增条件,对该方法特异性和灵敏度评价,并将该方法和国标法分别应用于10份牛奶样品的检测。结果该方法特异性强,内外引物比为3:1,反应温度为63℃时达到最佳反应条件,检测灵敏度达100fg/μL,检出限低至9.8CFU/mL,且10种样品的LAMP法与传统国标法检测结果一致。结论本研究建立的荧光LAMP法具有快速、直观、灵敏度高和特异性强等优点,可应用于食品β溶血性链球菌的初步筛选。 展开更多

关键词 Β溶血性链球菌 环介导等温扩增法 荧光

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