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骨髓干细胞在大鼠肝纤维化形成环境中的分化 被引量：41
1
作者 展玉涛 魏来 +3 位作者 陈红松 丛旭 费然 王宇 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第11期673-675,共3页
目的 研究骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中向肝细胞定向分化。 方法 采用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化,应用流式细胞仪分选富集Thy+CD3-CD45RA-的骨髓干细胞,采用红色荧光染料PKH26-GL对其标记后进行自体移植,6周后通过免疫组织... 目的 研究骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中向肝细胞定向分化。 方法 采用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化,应用流式细胞仪分选富集Thy+CD3-CD45RA-的骨髓干细胞,采用红色荧光染料PKH26-GL对其标记后进行自体移植,6周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝组织白蛋白、ck 8、α-平滑肌肌动蛋白表达。 结果 PKH 26-GL标记的细胞在纤维化肝脏中表达白蛋白和ck8,占肝细胞总数的(0.17±0.02)％;未见表达α-平滑肌肌动蛋白。 结论 骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中可以向肝细胞定向分化,不向肌成纤维样细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 大鼠 肝纤维化 肝细胞 细胞分化
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经输血传播病毒(TTV)在血液透析患者中感染状况及基因分析 被引量：39
2
作者 陈红松 丛旭 王宇 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 1998年第3期164-166,共3页
目的研究我国血液透析患者人群中经输血传播病毒(TTV)的感染及基因变异状况。方法设计特异性引物采用半巢式 PCR 方法对北京市2所综合性大医院50例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA 的检测并将产物克隆及序列分析。结果经过半巢式 PCR... 目的研究我国血液透析患者人群中经输血传播病毒(TTV)的感染及基因变异状况。方法设计特异性引物采用半巢式 PCR 方法对北京市2所综合性大医院50例血液透析患者血清标本进行 TTV DNA 的检测并将产物克隆及序列分析。结果经过半巢式 PCR 检测,血透患者 TTV DNA 阳性率为14%。对其中4例标本中分离出的TTV 270个碱基核酸片段序列分析表明:基因同源性为99.1%～100%,推测的编码氨基酸序列同源性为100%。与国外报道的日本株比较,核苷酸同源性为88.3%～97.8%,推测的编码氨基酸同源性为96.1%～98.7%。TTV 阳性与阴性组转氨酶升高的患者比例差异无显著性。结论我国血透患者中存在较严重的 TTV 感染,其病毒部分基因及推测编码蛋白十分保守,但与日本所报道的 TTV 毒株有明显差别。未见 TTV 感染与转氨酶升高密切相关的证据。 展开更多
关键词 血液透析 基因分析 病毒 感染 输血传播病毒
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中国南北两城市乙型肝炎病毒基因型与血清型的构成差异 被引量：30
3
作者 许军 王齐欣 +7 位作者 范春蕾 蒋栋 李若冰 丛旭 费然 陈红松 魏来 王宇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期327-329,共3页
目的对我国南北两城市530份乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)进行血清型和基因型分型,以了解HBV基因型和血清型分布的特点和差异。方法 对黑龙江省哈尔滨市和广东省廉江市530份乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性血清进行HBV DNA基因扩增,并对扩增产... 目的对我国南北两城市530份乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)进行血清型和基因型分型,以了解HBV基因型和血清型分布的特点和差异。方法 对黑龙江省哈尔滨市和广东省廉江市530份乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性血清进行HBV DNA基因扩增,并对扩增产物直接测序,分析HBV血清亚型和基因型。结果 哈尔滨和廉江市HBV血清型以adrq为最多,分别为87.2％和73.5％,其次为adw2,分别为12.0％和25.7％,其分布差异有非常显著意义(P<0.001);两市HBV基因型均以C型为主,分别为87.8％,73.2％,其次为B型,分别为12.2％和26.1％,其分布差异有非常显著意义(P<0.001),在廉江市仅有1例D型,1例B、C混合型。结论我国南北两城市HBV血清亚型和基因型的构成较为单纯,均只有两个类型,其比例构成差异有非常显著意义。 展开更多
关键词 中国 乙型肝炎病毒 基因型 血清型 HBV 核苷酸
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黑色素瘤抗原-1基因在肝细胞癌中的表达 被引量：19
4
作者 蔡胜利 陈红松 +11 位作者 王瑜 赵海涛 彭吉润 庞学文 龚顺友 朱继业 丛旭 王宇 芮静安 冷希圣 杜如昱 陈慰峰 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期668-672,共5页
目的　检测黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,为用MAGE 1基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 4 5例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16例肝硬... 目的　检测黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,为用MAGE 1基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 4 5例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16例肝硬化组织和 12例正常肝组织的MAGE 1mRNA表达情况进行研究 ,对 6例RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA序列测定 ,并以测序证实为MAGE 1基因的cDNA片段为模板合成 [α32 P]标记的探针 ,进行Southernblot分析。同时用ELISA方法对其中 4 3例HCC患者进行人类白细胞抗原 (HLA)class1 A及B位点分型。结果　 4 5例HCC患者中 ,3 2例表达MAGE 1mRNA ,而相应癌旁组织及非HCC患者肝组织均不表达 ;DNA测序 ,6例PCR产物中的目的基因片段均证明为MAGE 1cDNA序列 ,其中 3例均有 3个相同位置碱基的点突变 ,导致 2个氨基酸残基改变 ;5例电泳阳性癌组织的RT PCR产物Southernblot结果也为阳性 ,而癌旁组织均为阴性 ;HCC患者中常见HLA类型为A2 ( 5 3 5 % ) ,A11( 2 5 6% ) ,A2 4( 2 0 9% ) ,A33( 2 0 9% ) ,B13( 2 8 3 % ) ,B35( 2 3 2 % ) ;MAGE 1的表达与肿瘤直径、α FP水平等临床指标无相关关系。结论　MAGE 1在肝细胞癌中呈高比例表达 。 展开更多
关键词 黑色素瘤 肝细胞癌 抗原1-基因 基因表达
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幽门螺杆菌、奥美拉唑及胃泌素对胃黏膜上皮细胞增生凋亡的影响 被引量：24
5
作者 蔡英 丛旭 +1 位作者 费然 王晶桐 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第36期2558-2563,共6页
目的 采用细胞实验探讨幽门螺杆菌（Hp）、奥美拉唑与胃泌素之间是否具有相互作用.方法 奥美拉唑、Hp超声粉碎物及胃泌素分别处理不同组细胞后,依次采用MTS和流式羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色定量检测胃上皮细胞低分化AG... 目的 采用细胞实验探讨幽门螺杆菌（Hp）、奥美拉唑与胃泌素之间是否具有相互作用.方法 奥美拉唑、Hp超声粉碎物及胃泌素分别处理不同组细胞后,依次采用MTS和流式羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色定量检测胃上皮细胞低分化AGS细胞和永生GES-1细胞增生的变化.另外,采用Hoechst33342染色定性分析细胞形态学的凋亡改变,并且再次运用流式膜联蛋白（Annexin）-Ⅴ/碘化丙啶（PI）定量分析细胞的凋亡.结果 （1）Hp、奥美拉唑处理的胃黏膜细胞AGS和GES-1凋亡比例均高于对照组[Hp及104 nmol/L奥美拉唑处理组凋亡比例分别为（17.20±0.90）%、（12.81±0.78）%比（7.96±1.25）%,（4.60±0.34）%、（6.60±0.76）%比（3.52±0.16）%,均P＜0.05],并且这一作用与奥美拉唑浓度有关.两种细胞增生均明显低于对照组（Hp及104 nmol/L奥美拉唑处理组细胞增生分别为13.35±0.55比37.78±1. 98、47.62±2.40比62.44±4.46,27.15±1.64比32.76±1.57、29.42±1.44比48.86±4.95,均P＜0.05）.（2）经Hp、奥美拉唑及胃泌素两两共同处理后,凋亡方面,除Hp与500 ng/L胃泌素组处理的GES-1细胞凋亡比例较高外[（7.25±0.54）%比（4.60±0.34）%,P＜0.05],其余两种因素处理组差异均无统计学意义.流式检测显示,经Hp与奥美拉唑及胃泌素两两共同处理后,两种细胞增生均低于Hp单个因素处理后（AGS：12.68±0.09、12.28±0.31比13.35±0.55,GES-1：22.06±1.61、18.59±0.09比27.15±1.64,均P＜0.05） 104 nmol/L奥美拉唑和500 ng/L胃泌素共同处理后,两种细胞增生均低于104nmol/L奥美拉唑处理组（33.23±5.98比47.62±2.40、25.97±0.74比29.42±1.44,均P＜0.05）.（3）虽然胃泌素处理后的细胞增生和凋亡改变均不明显,但经奥美拉唑与胃泌素,Hp与胃泌素的组合处理后,两种细胞增生均明显低于对照组（均P＜0.05）.（4）两种细胞改变比较,以AGS的改变更明显.结论 虽然胃泌素对体外 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 奥美拉唑 上皮细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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肿瘤特异性肿瘤/睾丸抗原在肝癌组织中的表达 被引量：11
6
作者 陈红松 覃柳亮 +8 位作者 丛旭 王瑜 费然 蒋栋 曹骥 苏建家 魏来 陈慰峰 王宇 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第3期145-148,共4页
目的 研究7种主要肿瘤/睾丸(CT)抗原MAGE-1、MAGE-3、MAGE-4、MAGE-10、NY-ESO-1、SSX-2、SCP-1在原发性肝细胞癌(HCC)患者癌组织中的表达、编码基因的变异状况及与临床指标的关系。 方法 收集30例肝癌患者的癌和癌旁组织,采用特异性引... 目的 研究7种主要肿瘤/睾丸(CT)抗原MAGE-1、MAGE-3、MAGE-4、MAGE-10、NY-ESO-1、SSX-2、SCP-1在原发性肝细胞癌(HCC)患者癌组织中的表达、编码基因的变异状况及与临床指标的关系。 方法 收集30例肝癌患者的癌和癌旁组织,采用特异性引物逆转录聚合酶链反应检测7种CT抗原的表达,并对PCR产物进行测序分析。结果 在30例HCC患者中,MAGE-1、MAGE-3、MAGE-4、MAGE-10、NY-ESO-1、SSX-2、SCP-1在癌组织中的表达率分别为66.7％、70.0％、20.0％、36.7％、40.0％、33.3％和33.3％,而癌旁没有表达。癌组织中至少表达1种、2种和3种CT抗原的阳性率分别为90.0％、70.0％和53.5％。我国肝癌表达的7种CT抗原编码基因与国外报道的相比,同源性非常高。MAGE-10和SCP-1的表达与甲胎蛋白的水平相关,MAGE-3和SSX-2表达与平均年龄相关。 结论 7种CT抗原在HCC患者癌组织中均有表达,阳性率为20.0％-70.0％,其编码基因序列高度保守。一些CT抗原的表达与临床指标存在相关性。 展开更多
关键词 肝细胞癌 肿瘤特异性抗原 睾丸抗原 编码基因 基因表达
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粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞促进大鼠部分肝移植物的肝再生 被引量：16
7
作者 刘峰 潘孝本 +4 位作者 陈国栋 蒋栋 丛旭 费然 魏来 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第47期3342-3345,共4页
目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体骨髓干细胞是否会促进部分肝移植物的再生,减轻肝损伤。方法建立性别交叉的大鼠(雌性→雄性)50%部分肝移植模型(PLTx),移植前动员组:移植前受体皮下注射G-CSF5d;移植后动员组:移植后3h,注射G-... 目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体骨髓干细胞是否会促进部分肝移植物的再生,减轻肝损伤。方法建立性别交叉的大鼠(雌性→雄性)50%部分肝移植模型(PLTx),移植前动员组:移植前受体皮下注射G-CSF5d;移植后动员组:移植后3h,注射G-CSF5d;未动员组:移植后3h,皮下注射生理盐水5d。分别与1、3、5、7和14d取肝脏。检测移植物内CD34干细胞标志,确定干细胞迁移入肝脏的情况,观察肝脏的有丝分裂相和溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)掺入检测肝再生情况,并检测sry+细胞确认细胞来源。结果用G-CSF动员后发现,移植后动员组14d生存率(90%)较移植前动员组(60%)和未动员组(50%)高,差异有统计学意义。与未动员组相比,移植后第3天,肝坏死灶少,有丝分裂指数高(30%±5%vs24%±6%,P<0·05),BrdU掺入高(42%±6%vs34%±4%,P<0·05),差异有统计学意义。移植后第3至14天,移植后动员组汇管区可见较多的CD34+的成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞;移植后第3天,移植前动员组见汇管区较多的CD34+细胞。移植后第5天各组在肝窦和汇管区偶见sry阳性细胞,第14天,G-CSF动员两组汇管区周围sry阳性细胞增多,未动员组较少。结论移植后用G-CSF动员自体骨髓干细胞,受体生存率高,移植肝再生明显,肝损伤轻。 展开更多
关键词 肝移植 干细胞 粒细胞集落刺激因子 肝再生
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CD4^+CD25^+调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者免疫发病机制中的作用 被引量：14
8
作者 张恒辉 郭芳 +5 位作者 费然 马慧 王雪艳 丛旭 魏来 陈红松 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第20期2225-2230,共6页
目的:探探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory T Cell,Treg)在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者免疫发病机制中的作用以及其可能在治疗中的应用前景.方法:收集未经抗病毒治疗的CHB患者34例和健康对照18例外周血单个核细胞(p... 目的:探探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory T Cell,Treg)在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者免疫发病机制中的作用以及其可能在治疗中的应用前景.方法:收集未经抗病毒治疗的CHB患者34例和健康对照18例外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)标本,以三色/四色流式分析法对PBMC中CD4^+CD25^+ Treg的频率及表面分子表达进行分析,并同时通过磁珠分选去除CHB患者PBMC中的CD4^+CD25^+Treg,分别以MHC-肽-五聚体法和酶联斑点计数法(enzyme-linked immunospot assay,Elispot)检测HBV core18-27抗原肽刺激的对HBV特异性的CTL(cytotoxic T lymphocyte)频率的升高以及IFN-γ的分泌.结果:CHB患者外周血中CD4^+CD25^+ CD45RO^+CTLA4^+T细胞群以及CD4^+CD127^(lo)CD25^(hi-int)T细胞群所占CD4^+T细胞群的比例与健康对照相比均明显上升(3.78%±1.87%.4.40%±2.11%vs 1.58%±0.76%,2.11%±1.26%;t=4.86,t=5.96;P<0.01)去除CHB患者中CD4^+CD25^+Treg后,特异性CTL的频率以及其分泌IFN-γ的频数与未去除组比出现显著上调(0.94%±0.38%,26±13 vs 0.20%±0.18%,119±30;t=5.25,t= 9.886;P<0.01).结论:CHB患者循环中增多的Treg可能参与抑制抗HBV的免疫应答抑制,去除Treg以及联合病毒抗原肽刺激的进一步研究可能为CHB的免疫治疗提供新的思路. 展开更多
关键词 调节性T细胞 乙型肝炎 慢性
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慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞免疫抑制功能的研究 被引量：16
9
作者 张恒辉 郭芳 +4 位作者 费然 马慧 丛旭 魏来 陈红松 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期511-515,共5页
目的探讨慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）免疫抑制功能。方法收集北京大学人民医院22例慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）以及18名健康对照的PBMC标本，以流式分析对PBMC中CD4＋CD25＋Treg的频率进行分... 目的探讨慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）免疫抑制功能。方法收集北京大学人民医院22例慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）以及18名健康对照的PBMC标本，以流式分析对PBMC中CD4＋CD25＋Treg的频率进行分析；5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入法评价CIM＋CD25＋Treg的免疫抑制功能；并同时通过磁珠分选去除CHB患者PBMC中的CIM＋CD25＋Treg，分别以MHC-肽-五聚体法和酶联斑点免疫法（Elispot）检测HBVcore18-27抗原肽刺激对HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）的频率以及IFN-γ的分泌。结果CHB患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞群所占CIM＋T细胞群的比例明显高于健康对照（t=3．74，P〈0．01）；CHB患者CD4＋CD25＋Treg细胞可非特异抑制自身活化的CIM＋CD25。T细胞，并呈剂量依赖的特点，且抑制能力与健康对照相比无明显差异；在经HBVcore18-27抗原肽诱导条件下，去除CD4＋CD25＋TregCHB患者，HBVcore18-27特异性CTLs的频率以及CTLs分泌IFN-1的频数与未去除CD4＋CI）25＋Treg组比出现显著上调（t=4．75，t=7．828，P〈0．01）。结论CHB患者循环中CD4＋CD25＋Treg细胞频率升高。在体外去除CHB患者PBMC的CIM＋CD25＋Treg后可显著地增强HBV抗原诱导的抗HBV细胞免疫应答。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 T淋巴细胞 抗原 CD4
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黑色素瘤抗原-3基因在肝细胞癌中的研究 被引量：10
10
作者 蔡胜利 赵海涛 +9 位作者 冷希圣 程继华 龚顺友 彭吉润 丛旭 王宇 芮静安 回允中 杜如昱 陈慰峰 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期693-696,I037,共5页
目的　检测黑色素瘤抗原 3(melanomaantigen 3 ,MAGE 3)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,探讨用MAGE 3基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗在理论上的可行性。　方法　用RT PCR方法对 45例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16... 目的　检测黑色素瘤抗原 3(melanomaantigen 3 ,MAGE 3)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,探讨用MAGE 3基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗在理论上的可行性。　方法　用RT PCR方法对 45例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16例肝硬化组织和 12例正常肝组织的MAGE 3mRNA表达情况进行研究 ,对 3例RT PCR扩增产物中目的基因片段进行DNA序列测定 ,并以测序证实为MAGE 3基因的cDNA片段为模板合成 [α32 P]标记的探针 ,进行Southern杂交。同时用ELISA方法对其中 43例HCC患者进行HLA 1 A及B位点分型。　结果　 45例HCC患者中 ,35例 (78% )MAGE 3mRNA表达阳性 ,癌旁组织有 6例阳性 (13% ) ,病理检查证实这 6例癌旁组织中都有明显的异型增生 ,而非HCC患者的肝硬化及正常肝组织均不表达 ;DNA测序 ,3例PCR产物中的目的基因片段均证明为MAGE 3cDNA序列 ;Southern杂交结果和RT PCR电泳结果完全一致 ;HCC患者中常见HLA类型为A2 (5 3 5 % ) ,A11(2 5 6 % ) ,A2 4 (2 0 9% ) ,A33(2 0 9% ) ,B13(2 8 3% ) ,B35(2 3 2 % ) ;MAGE 3的表达与肿瘤直径 ,AFP水平等临床指标无相关关系。　结论　MAGE 3在肝细胞癌中呈高比例表达 ,这使得以此抗原用于HCC患者的免疫治疗成为可能 ;一些细胞有异型增生的癌旁组织中表? 展开更多
关键词 肝细胞癌 黑色素瘤抗原-3 序列分析 DNA
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慢性乙型肝炎病人外周血树突状细胞功能的研究 被引量：12
11
作者 李若冰 陈红松 +4 位作者 费然 丛旭 孙婧 魏来 王宇 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第13期887-890,共4页
目的　体外培养慢性乙型肝炎病人的树突状细胞 ,并从细胞表型和功能方面与正常人树突状细胞进行比较。方法　从慢性乙型肝炎病人及正常人外周血分离单个核细胞 ,加入含 10 0 0U/mlGM CSF和 5 0 0U/mlIL 4的无血清培养基AIM V体外培养 ,... 目的　体外培养慢性乙型肝炎病人的树突状细胞 ,并从细胞表型和功能方面与正常人树突状细胞进行比较。方法　从慢性乙型肝炎病人及正常人外周血分离单个核细胞 ,加入含 10 0 0U/mlGM CSF和 5 0 0U/mlIL 4的无血清培养基AIM V体外培养 ,获得树突状细胞。利用流式细胞仪检测细胞因子TNF α对树突状细胞培养的影响 ,IL 12ELISA试剂盒检测树突状细胞分泌IL 12的水平 ,并采用MLR方法检测树突状细胞刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力。结果　 1.慢性乙型肝炎病人的外周血单个核细胞用AIM V培养及细胞因子诱导后 ,可获得成熟的具有典型形态的树突状细胞 ,加入TNF α后 ,IL 12分泌增高 ,CD83表达增加 ;2 .病人树突状细胞与正常人比较 ,CD80表达较正常人的低 (P <0 .0 5 ) ,刺激同种异体T细胞增殖能力低于正常人。结论　 1.慢性乙型肝炎病人的树突状细胞与正常人一样可用AIM V无血清培养基及特定的细胞因子诱导在体外大量获得 ;2 .慢性乙型肝炎病人的树突状细胞与正常人相比较在功能上降低 ,在形态数量上差异无显著意义。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 树突细胞 细胞培养 细胞功能
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乙型肝炎病毒前S基因区缺失突变发生机制的探讨 被引量：12
12
作者 蒋栋 许军 +5 位作者 李若冰 丛旭 费然 陈红松 魏来 王宇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期317-324,共8页
检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者和患者外周血内HBV前S区基因缺失突变的分子结构特点,探讨其发生机理。用聚合酶链反应方法从慢性乙肝患者和携带者血清中扩增出前S区基因片段,克隆、测序,分析缺失发生的结构特点,从而推测这些前S区基... 检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者和患者外周血内HBV前S区基因缺失突变的分子结构特点,探讨其发生机理。用聚合酶链反应方法从慢性乙肝患者和携带者血清中扩增出前S区基因片段,克隆、测序,分析缺失发生的结构特点,从而推测这些前S区基因缺失突变的产生机制。从262例慢性乙肝患者和103例无症状HBV携带者体内扩增出前S区片段,共在30例患者和携带者中检测出多种前S区基因缺失突变,主要集中于前S1区的3′端和前S2区的5′端。其中有9例患者和携带者体内存在完全一样的nt3019～nt3201183bp的缺失突变,该缺失突变符合真核细胞mRNA剪接机制,在此位置上各基因型的序列高度保守。同时有另外两种缺失突变,即nt3019～nt3147129bp缺失、nt3019～nt310991bp缺失也符合该剪接机制。有23种缺失突变部分于重复序列之间,符合逆转录过程中的模板转换机制所导致的缺失。根据前基因组RNA预测出二级结构,仅部分缺失突变在RNA二级结构中对应于局部的结构。此结果表明:HBV在外界因素mRNA的剪接机制和内在因素聚合酶蛋白的功能特点的共同作用下,产生各种突变,不同的机制将导致不同类型的缺失突变。除真核细胞mRNA剪接机制外,逆转录过程中的模板转换是主要机制之一。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 前S基因区 缺失突变 发生机制 剪接机制 逆转录 模板转换
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乙型肝炎病毒基本核心启动子及前C区突变与基因型的关系 被引量：11
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作者 房继莲 魏来 +6 位作者 李若冰 丛旭 许军 Erwin Sablon 孙焱 王豪 王宇 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期421-425,共5页
目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基本核心启动子 (BCP)及前C区突变与基因型之间的关系。方法　随机选取 113例慢性HBV感染者外周血 ,采用INNO LiPA法测定BCPT176 2 A176 4双突变及前C区A1896突变 ,测定HBVS基因序列明确基因型。结果　在... 目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基本核心启动子 (BCP)及前C区突变与基因型之间的关系。方法　随机选取 113例慢性HBV感染者外周血 ,采用INNO LiPA法测定BCPT176 2 A176 4双突变及前C区A1896突变 ,测定HBVS基因序列明确基因型。结果　在C基因型感染者中BCPT176 2 A176 4双突变率明显高于B基因型感染者 ,差异有显著性 (34.2 %∶10 % ,χ2 =6 .74 ,P <0 .0 1) ,而前C区A1896突变率在B基因型和C基因型感染者中差异无显著性 (2 .5 %∶4 .1% ,χ2 =0 .0 0 ,P >0 .0 5 )。结论　与B基因型相比 ,C基因型感染者更易发生BCPT176 2 A176 4双突变。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心启动子 前C区突变 基因型 HBV 前C基因 BCP
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人工林刺槐木材物理力学性质研究 被引量：12
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作者 孙恒 冀晓东 +2 位作者 赵红华 杨茂林 丛旭 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期104-112,共9页
【目的】刺槐作为我国重要的速生用材树种,被广泛应用于北方人工林种植,深入研究刺槐木材的物理力学性质,为刺槐人工林建设经营以及木材的高效精细化利用提供科学依据。【方法】本文对采自于山东省东营市刺槐林场的4株不同树龄人工林刺... 【目的】刺槐作为我国重要的速生用材树种,被广泛应用于北方人工林种植,深入研究刺槐木材的物理力学性质,为刺槐人工林建设经营以及木材的高效精细化利用提供科学依据。【方法】本文对采自于山东省东营市刺槐林场的4株不同树龄人工林刺槐沿树干等分成0.65 m长若干小段并顺序编号,测定和分析每段木材的物理性质(气干密度、全干密度、基本密度)、力学性质(顺纹抗压强度、横纹径向全部抗压强度、横纹弦向全部抗压强度、抗弯强度、抗弯弹性模量)以及化学组分(纤维素、半纤维素、木质素)含量,并通过SEM电镜扫描图对各段木材的微观构造进行对比分析。【结果】刺槐木材的气干密度、全干密度、基本密度、顺纹抗压强度、横纹全部抗压强度(径向、弦向)、抗弯强度、抗弯弹性模量均随树龄的增大而增加,随树干位置增高呈现先增大后减小的规律。将木材气干密度与顺纹抗压强度、横纹(径向、弦向)全部抗压强度、抗弯强度、抗弯弹性模量分别进行线性和幂函数拟合,两种模型均能很好地拟合试验结果,拟合度R2值为0.865~0.895。各段木材化学组分中纤维素含量随树龄及树干高度位置的变化规律与木材各项力学性质的变化规律相似。木材的微观构造中导管占比率随树龄增大而减少,随树干高度位置增加呈现出先减后增的变化规律。【结论】10年生、15年生、20年生、25年生刺槐木材的气干密度、顺纹抗压强度、抗弯强度、抗弯弹性模量均为中级以上,是良好的家具和建筑用材。在利用时应充分考虑不同树龄木材和树干不同位置的差别。密度作为影响木材力学性质的直接要素,可根据相关方程通过刺槐木材的密度值估算部分力学性质的数值。刺槐木材纤维素含量与木材各项宏观力学性质相关度很高,而木材导管占比率的差异则从微观构造上揭 展开更多
关键词 刺槐 密度 力学性质 化学组分 微观构造
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中国株丙型肝炎病毒(HCV)结构区蛋白在昆虫细胞中的表达及加工 被引量：4
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作者 苗季 谭文杰 +4 位作者 丛旭 丛郁 陈刚 毕胜利 詹美云 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期289-295,共7页
利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达了完整的中国河北株丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构蛋白。免疫印迹实验结果显示，表达产物中有一系列分子量不同、可以与ＨＣＶ抗体阳性病人血清反应的蛋白，表明结构蛋白被宿主细胞蛋白酶切割与加工... 利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达了完整的中国河北株丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构蛋白。免疫印迹实验结果显示，表达产物中有一系列分子量不同、可以与ＨＣＶ抗体阳性病人血清反应的蛋白，表明结构蛋白被宿主细胞蛋白酶切割与加工，相应分别为２０ｋＤ的核心蛋白、３２ｋＤ糖基化的Ｅ１蛋白、４０ｋＤ的未糖化的Ｅ２蛋白和７０ｋＤ糖基化的Ｅ２蛋白，另有８０ｋＤ及１００ｋＤ的两组前体蛋白。利用表达产物检测慢性ＨＣＶ感染者血清，发现Ｅ２抗体检出率很高，而其中一部分核心抗体为阴性。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 结构基因 蛋白表达 杆状病毒
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干扰素β对肝星状细胞活化调控机制的影响 被引量：9
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作者 饶慧瑛 魏来 +4 位作者 费然 王江华 蒋栋 张权 丛旭 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期550-552,共3页
以往的研究已经证实干扰素β（IFNβ）不仅具有抗肝炎病毒的作用，还具有抗肝纤维化的作用，但其作用机制尚不明确。本研究旨在探讨能否经过调控转化生长因子β1（TGFβ1）、Smad4、Smad7、血小板衍生生长因子（PDGF）-BB等细胞因子的... 以往的研究已经证实干扰素β（IFNβ）不仅具有抗肝炎病毒的作用，还具有抗肝纤维化的作用，但其作用机制尚不明确。本研究旨在探讨能否经过调控转化生长因子β1（TGFβ1）、Smad4、Smad7、血小板衍生生长因子（PDGF）-BB等细胞因子的表达而影响肝星状细胞（HSC）的激活。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 干扰素Β 转化生长因子Β 血小板源性生长因子
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人脐血间充质干细胞来源的外泌体:分离鉴定及生物学特性 被引量：10
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作者 张娟 刘峰 +3 位作者 张薇 丛旭 王彩生 魏来 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第37期5955-5960,共6页
背景:外泌体是间充质干细胞分泌的膜性小囊泡,越来越多的研究表明,间充质干细胞可能通过旁分泌外泌体而发挥对组织损伤的修复作用,目前人脐血间充质干细胞来源的外泌体分离鉴定尚未见报道。目的:分离纯化人脐血间充质干细胞来源的外泌体... 背景:外泌体是间充质干细胞分泌的膜性小囊泡,越来越多的研究表明,间充质干细胞可能通过旁分泌外泌体而发挥对组织损伤的修复作用,目前人脐血间充质干细胞来源的外泌体分离鉴定尚未见报道。目的:分离纯化人脐血间充质干细胞来源的外泌体,并鉴定其生物学特性。方法:收集人脐血间充质干细胞培养上清,采用超滤及梯度离心法分离并纯化外泌体,通过透射电镜观察其形态,流式细胞术检测其表面标志CD63、CD81、CD90、CD73、CD105、CD29、CD166。结果与结论:人脐血来源的间充质干细胞能够分泌外泌体,电镜下呈椭圆或碟状的囊泡结构,直径40-100 nm。外泌体表达其共性表达标志CD63、CD81及间充质干细胞表面黏附分子CD90、CD73、CD105、CD29、CD166。结果表明采用超滤及梯度离心法可以成功从间充质干细胞培养上清中分离纯化外泌体,间充质干细胞分泌的外泌体具有外泌体的胞膜蛋白组分。 展开更多
关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 外泌体 人脐血间充质干细胞 分离鉴定 活性
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小麦面筋蛋白可食膜的制备及其在调料包中的应用 被引量：10
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作者 丛旭 刘锐 +2 位作者 刘砚 吴涛 张民 《天津科技大学学报》 CAS 2018年第3期9-17,共9页
以小麦面筋蛋白(WG)为成膜基料制备可食蛋白膜,以蛋白膜阻隔性能(氧气透过率)和机械性能(抗拉强度)为考核指标,采用响应面实验设计方法优化确定了最佳成膜工艺条件为:p H 11.4、蛋白添加量10.7%,、乙醇体积分数57%,.在此条件下,WG膜氧... 以小麦面筋蛋白(WG)为成膜基料制备可食蛋白膜,以蛋白膜阻隔性能(氧气透过率)和机械性能(抗拉强度)为考核指标,采用响应面实验设计方法优化确定了最佳成膜工艺条件为:p H 11.4、蛋白添加量10.7%,、乙醇体积分数57%,.在此条件下,WG膜氧气透过率为20.74,meq/kg,抗拉强度为12.98,MPa.利用扫描电子显微镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和热重分析仪(TG)对WG可食膜进行观察和表征.结果表明:WG可食膜表面较光滑、致密性好,可进一步应用于模拟方便面调料包实验.经保藏45,d,油包、粉包和蔬菜包均能保持完整外观,过氧化值和酸价均未超过国家标准要求,粉包、蔬菜包中水分含量均低于文献报道. 展开更多
关键词 小麦面筋蛋白 可食膜 机械性能 阻隔性能 调料包
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自密实清水混凝土在装配式桥梁预制墩柱中的应用研究 被引量：11
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作者 周杰 闫兴非 +2 位作者 宗霏 张彦 丛旭 《混凝土与水泥制品》 北大核心 2019年第6期38-40,共3页
对自密实清水混凝土原材料选取、配合比设计、试配调整及中试等环节进行了试验,分析了自密实清水混凝土构件表观效果影响因素,对比了不同种类脱模剂的表观效果,最终成型的装配式桥梁预制墩柱各方面性能均满足设计要求,并成功应用于成都... 对自密实清水混凝土原材料选取、配合比设计、试配调整及中试等环节进行了试验,分析了自密实清水混凝土构件表观效果影响因素,对比了不同种类脱模剂的表观效果,最终成型的装配式桥梁预制墩柱各方面性能均满足设计要求,并成功应用于成都市三环路羊犀立交扩能改造项目。 展开更多
关键词 自密实清水混凝土 成型对比 预制墩柱 工程应用
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大鼠肝脏再生过程中细胞标志物演变与骨髓细胞增生 被引量：7
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作者 潘孝本 刘峰 +5 位作者 王松霞 丛旭 费然 陈红松 高燕 魏来 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第5期612-616,共5页
目的:为研究大鼠在部分肝切除术后肝再生过程中是否存在骨髓细胞的增生与动员以支持肝脏再生过程,以及肝卵圆细胞(hepatic oval cells,HOC)在体内细胞标志物的演变过程. 方法:SD(Sprague-Dawley)大鼠81只,随机分为3组: 2/3部分肝切除组(... 目的:为研究大鼠在部分肝切除术后肝再生过程中是否存在骨髓细胞的增生与动员以支持肝脏再生过程,以及肝卵圆细胞(hepatic oval cells,HOC)在体内细胞标志物的演变过程. 方法:SD(Sprague-Dawley)大鼠81只,随机分为3组: 2/3部分肝切除组(partial hepatectomy,PHx)、2/3部分肝切除加2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluorene, 2AAF)预处理组(PHx+2AAF)及假手术组,每组分为9小组(n=3),分别于术后1,2,4,6,8,12,16, 20,24 d采集大鼠骨髓细胞及再生肝组织;采用percoll密度梯度液分离骨髓细胞中的单个核细胞,并用流式细胞分析技术检测单个核细胞中CD34+,CD45+细胞比例; 采用冰冻组织切片技术进行再生肝组织切片,并用免疫荧光组织化学染色检测再生组织中与CD34共表达的部分造血干细胞、肝卵圆细胞及肝细胞的细胞标志物Thy1.1,CD45,CK19,vimentin,AFP,Alb. 结果:在PHx模型中,流式细胞检测结果显示大鼠骨髓单个核细胞中CD34+及CD45+细胞在术后2,4, 6 d与对照组相比增高(分别为2.774±0.166 vs 1.903±0.044,P=0.016<0.05;3.164±0.056 vs 1.862±0.057, P=0.002<0.01;2.708±0.160 vs 1.897±0.149,P= 0.032<0.05),免疫荧光组织化学染色结果示在肝组织中第4 d发现少量CD34,CD45共表达细胞,但未检出其他共表达的细胞标志物.在PHx+2AAF模型中, 流式细胞仪检测结果示CD34+及CD45+细胞于术后2, 4 d与对照组相比增高(分别为2.472±0.141 vs 1.903±0.044,P=0.020<0.05;2.985±0.120 vs 1.862±0.057, P=o.008<0.01),荧光免疫组织化学染色显示其再生肝组织中与CD34共表达的抗原Thy1.1,CK19,Alb, AFP,vimentin等存在动态演变:在标志物出现过程中,Thy1.1最早出现,随后可检出AFP,vimentin, CK19,而Alb最后检出;在标志物的消失过程,则Thy1.1, Alb,CK19最早消失,随后AFP,vimentin未检出. 结论:大鼠在急性肝损时的肝再生过程中存在骨髓CD34+与CD45+的细胞增生现象,再生肝组织中与CD34共表达抗原的动态演变可能反映肝卵� 展开更多
关键词 细胞标志物 再生过程 骨髓细胞增生 vimentin 大鼠肝脏 免疫荧光组织化学 CD34+ 免疫组织化学染色 肝卵圆细胞 2-乙酰氨基芴 骨髓单个核细胞 部分肝切除 CK19 流式细胞分析 组织切片技术 演变过程 CD45 检测结果 0.05
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