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切割海马伞海马中56kD差异蛋白的质谱分析 被引量：8
1
作者 朱蕙霞 秦建兵 +2 位作者 田美玲 陈蓉 金国华 《南通大学学报（医学版）》 2006年第6期408-410,413,共4页
目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功... 目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了33组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、核酸水解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割海马伞海马中56kD差异蛋白中含有功能涉及神经干细胞迁移、分化的蛋白质。 展开更多
关键词 56 kD蛋白 切割海马伞 海马 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 质谱分析
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NOV蛋白在切割海马伞大鼠海马中表达的变化 被引量：4
2
作者 秦建兵 朱蕙霞 +3 位作者 王磊 谭雪锋 田美玲 金国华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期624-628,共5页
通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白... 通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白在切割海马伞后3d表达开始上升,14d达高峰后缓慢下降。切割海马伞后14d切割侧和正常侧相比较,海马CA1-CA3区的锥体细胞层及齿状回颗粒层NOV阳性细胞数目无显著性差异(P>0.05),但切割侧NOV阳性细胞明显比正常侧深染,两侧比较平均灰度值有显著性差异(P<0.01)。结合本课题组以往的工作,本研究结果提示,切割海马伞后海马中高表达的NOV蛋白可能参与了诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的过程。 展开更多
关键词 肾母细胞瘤过度表达基因蛋白 蛋白质印迹 免疫组化 切割海马伞 海马 大田
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体外模拟海马神经再生微环境下的NSCs增殖和向神经元分化
3
作者 秦建兵 金国华 +3 位作者 朱培培 李浩明 田美玲 杨伟伟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期573-577,共5页
目的:探讨用切割穹窿海马伞海马提取液在体外模拟体内海马神经再生微环境下,对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和向神经元分化的影响。方法:分别制备正常侧和切割穹窿海马伞侧海马提取液。实验分为对照组、正常组和切割组,... 目的:探讨用切割穹窿海马伞海马提取液在体外模拟体内海马神经再生微环境下,对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和向神经元分化的影响。方法:分别制备正常侧和切割穹窿海马伞侧海马提取液。实验分为对照组、正常组和切割组,分别在海马NSCs中加入DMEM/F12培养基、含正常侧海马提取液及切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基。用WST-8和Ki67/Sox2免疫荧光检测NSCs的增殖,用DCX免疫荧光检测NSCs向神经元的分化情况。结果:切割组与正常组及对照组相比,WST-8检测OD450比值明显增高(P<0.05);Ki67阳性细胞和Sox2阳性细胞的比例均明显增高(P<0.001)。结论:用切割穹窿海马伞侧海马提取液在体外模拟海马神经再生微环境,可以促进海马NSCs的增殖和向神经元的分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 切割海马伞 海马提取液 大鼠
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PEBP在切割穹窿海马伞大鼠海马中的表达变化 被引量：5
4
作者 李浩明 张蕾 +3 位作者 金国华 秦建兵 朱蕙霞 田关玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期619-624,共6页
切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水... 切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水平,随后缓慢下降,28 d时降至正常。免疫组化结果显示:术后各时间点切割侧海马CA1～CA3区的锥体细胞层和齿状回颗粒层的PEBP阳性细胞数与正常侧相比无显著性差异(P>0.05),但切割侧PEBP阳性细胞染色加深,7 d时最为明显,两侧比较灰度值有显著性差异(P<0.01)。切割侧齿状回门区和颗粒下层中可见较多深染的PEBP阳性细胞,其细胞数和灰度值与正常侧相比均有显著性差异(P<0.05)。结合本课题组以往的工作,本结果提示切割穹窿海马伞后PEBP的高表达可能与海马神经再生有关。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 切割穹窿海马伞 海马 大鼠
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实时聚合酶链反应检测切割穹窿海马伞大鼠海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白mRNA的表达变化 被引量：1
5
作者 秦建兵 张蕾 +3 位作者 李浩明 朱蕙霞 田美玲 金国华 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期867-870,共4页
目的探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA的表达差异。方法42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹隆海马伞后1、3、7、14、21及28d组,每组6只。提取各组大鼠的海马组织总RNA,应用实时PCR技术观察切... 目的探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA的表达差异。方法42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹隆海马伞后1、3、7、14、21及28d组,每组6只。提取各组大鼠的海马组织总RNA,应用实时PCR技术观察切割穹窿海马伞后海马中PEBPmRNA的表达变化。结果PEBPmRNA在切割后3d表达开始上升,7d达最高水平,随后缓慢下降,21d时降至正常。结论切割穹窿海马伞后海马中PEBP的高表达可能与诱导神经干细胞向胆碱能神经元分化的海马神经再生有关。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 切割穹隆海马伞 海马 实时聚合酶链反应 大鼠
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磷酸化细胞外信号调节激酶在海马提取液诱导神经干细胞向神经元分化过程中的表达
6
作者 朱蕙霞 金国华 +3 位作者 田美玲 秦建兵 谭雪锋 金淑仪 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期857-861,共5页
目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路在海马提取液诱导神经干细胞向神经元分化过程中的作用。方法切割12只SD大鼠右侧穹隆海马伞,14d后分别取切割侧和正常侧海马制成匀浆,离心收集上清液,蛋白定量后备用。将获取的鼠胚海马源... 目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路在海马提取液诱导神经干细胞向神经元分化过程中的作用。方法切割12只SD大鼠右侧穹隆海马伞,14d后分别取切割侧和正常侧海马制成匀浆,离心收集上清液,蛋白定量后备用。将获取的鼠胚海马源性神经干细胞培养在24孔板中,分成3组,每组8孔,于无血清条件下,切割组加切割侧海马提取液;正常组加正常侧海马提取液;对照组不加上述海马提取液。培养14d后进行微管相关蛋白2(MAP-2)与p-ERK的免疫荧光双标检测。结果MAP-2阳性神经元数量、胞体面积和细胞周长在切割组、正常组和对照组中依次减少,3组之间均有显著性差异。MAP-2、p-ERK免疫荧光双标细胞数量在切割组、正常组、对照组中也依次下降,但双标记细胞数占MAP-2阳性神经元数的百分比却反而依次增加,两者3组之间均有显著性差异,双标细胞大多为欠成熟细胞。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液较正常海马提取液有明显促使神经干细胞向成熟神经元分化的作用;形态学初步证实ERK信号转导通路可能与神经干细胞向神经元分化有关。 展开更多
关键词 切割穹隆海马伞 海马 神经干细胞 分化 微管相关蛋白2 磷酸化细胞外信号调节激酶 免疫 荧光双标 大鼠
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切割穹隆海马伞后大鼠海马中83ku差异蛋白的质谱分析
7
作者 朱蕙霞 秦建兵 +3 位作者 金国华 田美玲 张新化 黄镇 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2009年第4期277-280,共4页
目的:探讨切割穹隆海马伞海马中具有诱导神经干细胞向神经元分化生物活性的83 ku差异蛋白的组成成分及其功能。方法:切割SD大鼠穹隆海马伞后14 d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文... 目的:探讨切割穹隆海马伞海马中具有诱导神经干细胞向神经元分化生物活性的83 ku差异蛋白的组成成分及其功能。方法:切割SD大鼠穹隆海马伞后14 d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对83 ku差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了17组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割穹隆海马伞海马83 ku差异蛋白可以通过参与Rho信号通路,调控神经干细胞向神经元分化。 展开更多
关键词 83 KU蛋白 切割穹隆海马伞 海马 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 质谱分析
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海马放射状胶质细胞体外诱导激活后的PEBP mRNA表达变化
8
作者 秦建兵 李浩明 +3 位作者 赵荷艳 朱蕙霞 田美玲 金国华 《交通医学》 2009年第5期453-455,458,共4页
目的:探讨切割穹窿海马伞侧海马提取液对海马放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA表达的影响。方法:将培养的海马胶质细胞接种于培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液... 目的:探讨切割穹窿海马伞侧海马提取液对海马放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA表达的影响。方法:将培养的海马胶质细胞接种于培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液。培养7d后,提取总RNA,然后逆转录合成cDNA,用real-timePCR观察诱导组及切割组中PEBPmRNA的表达情况。结果:PEBPmRNA在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:表达增加的PEBPmRNA可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向胆碱能神经元分化有关。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 放射状胶质细胞 切割穹窿海马伞 荧光实时定量聚合酶链反应 大鼠
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海马放射状胶质细胞体外诱导激活后PEBP蛋白的表达变化
9
作者 秦建兵 李浩明 +5 位作者 金国华 赵荷艳 杨伟伟 田美玲 朱蕙霞 邹琳清 《南通大学学报（医学版）》 2010年第6期420-422,F0002,共4页
目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组... 目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液。培养7 d后,通过免疫荧光标记法观察PEBP在放射状胶质细胞中的表达,并提取总蛋白,采用Western blot的方法观察对照组及诱导组中PEBP蛋白的表达变化。结果:PEBP蛋白在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:PEBP的表达增加可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向神经元分化有关。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 放射状胶质细胞 切割穹窿海马伞 免疫印迹 免疫荧光
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大鼠海马去神经支配术后急性期内神经营养因子mRNA的表达变化
10
作者 陈赓 张新化 +6 位作者 金国华 成翔 张蕾 卢晓慧 郭静静 王林美 惠易 《南通大学学报（医学版）》 2015年第3期182-186,共5页
目的 :观察去神经损伤后海马中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2),碱性成纤维细胞生长因子2(basic fibroblastic growth factor 2,FGF-2),神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和睫状神经营养因子(ciliary neuro... 目的 :观察去神经损伤后海马中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2),碱性成纤维细胞生长因子2(basic fibroblastic growth factor 2,FGF-2),神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)等神经营养因子在急性期内各时间点的基因表达变化。方法 :将28只SD大鼠随机分成双侧穹窿海马伞切割后0.5、1、2、6、12及24 h组和假手术组,在穹窿海马伞切割上述各时间点后,分别取各组大鼠海马组织,并提取总RNA,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法分析切割穹窿海马伞后海马内IGF-2、FGF-2、NGF、CNTF的m RNA表达变化情况。结果:在切割大鼠穹窿海马伞后急性期的早期阶段,0.5 h组CNTF m RNA的表达量与假手术组相比明显增加(P<0.05);NGF m RNA的表达水平在12 h和24 h时与假手术组相比明显下降(P<0.05);IGF-2 m RNA的表达水平在24 h时与假手术组相比显著减少(P<0.05);FGF-2m RNA从海马伞切割后1、2、6、12和24 h均较假手术组下降(P<0.05)。结论 :切割穹窿海马伞后CNTF m RNA急性期极早期表达较假手术组上调,可能与急性期海马对应激性损伤的保护作用有关,这将为更深层次地研究海马在去神经支配损伤后神经再生与神经修复提供新的思路。 展开更多
关键词 切割大鼠穹窿海马伞 海马 神经营养因子 半定量逆转录-聚合酶链反应 神经再生 大鼠
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