摘要
为比较自动化存储系统和超低温冰箱保存样本的效果,探讨反复冻融对样本的影响。通过在自动化存储系统和超低温冰箱中建立小鼠肝组织样本和人血液样本的反复冻融模型,经过1~5次冻融循环,提取小鼠肝组织的总RNA,采用安捷伦2100生物分析仪检测RNA的完整性。提取血液样本的DNA,采用实时荧光定量PCR(QPCR)技术进行DNA定量检测,计算1~5次冻融循环的β-Actin基因相对于对照组(冻融0次)的相对表达量,采用2-△△CT方法和Student’s t检验处理实验数据。结果表明,新鲜组织立即提取的RNA完整性最佳,随着冻融次数的增加,RNA的完整性(RNA integrity number,RIN值)不断降低,两存储设备的同一次冻融循环差异均无统计学意义(均P>0.05)。血液样本经1~5次冻融后,DNA含量较基线水平有轻度升高,自动化设备组和超低温冰箱组DNA含量较基线水平平均分别增加0.2%和1.7%。可见自动化存储系统与传统超低温冰箱样本保存效果无明显差异(P>0.05);当对组织RNA质量要求较高时,样本冻融不应超过3次;全血样本在反复冻融5次以内其DNA定量检测结果可基本保持稳定。
出处
《轻工科技》
2023年第3期166-170,共5页
Light Industry Science and Technology
