摘要
目的研究干扰素调节因子4(IRF-4)在Toll样受体3(TLR-3)介导的小鼠流产过程中的作用机制。方法选取SPF级近交系Balb/C雌鼠、C57BL/6雄鼠,将孕鼠随机分为TLR-3抗体阻断组、CXCL12抗体阻断组、血清对照组,于孕4.5、5.5、6.5 d连续腹腔注射TLR-3抗体/CXCL12抗体/血清,孕6.5、7.5 d连续腹腔注射多聚次黄苷酸胞苷酸Poly(I∶C)或PBS。孕9.5、13.5、17.5 d时处死小鼠,计算胚胎吸收率,收集外周血、脾脏、子宫胎盘组织。利用小鼠淋巴细胞分离液分离外周血、脾脏、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞,实时PCR法检测外周血、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞中IRF-4 mRNA转录水平,流式细胞法检测外周血、脾脏来源的小鼠淋巴细胞中Th17细胞比例及子宫胎盘淋巴细胞中CXCR4阳性细胞比例,免疫组化法检测子宫胎盘组织中IRF-4蛋白表达水平。结果在外周血淋巴细胞中,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5、17.5 d时显著高于对照组(P<0.05),且孕13.5 d时两组转录水平差异达到最高;给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.867、0.931、0.953)。在子宫胎盘来源的淋巴细胞中,IRF-4 mRNA转录水平的变化趋势与PBMCs类似,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5 d时显著高于对照组(P<0.01),在孕17.5 d时无显著差异(P=0.504);给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.081、0.219、0.178)。流式细胞法检测Th17细胞(CD4阳性、IL-17A阳性)比例。在PBMCs中,三个孕期时间点时,Poly(I∶C)诱导流产组的CD4阳性、IL-17A阳性比例显著高于对照组(P<0.05);TLR-3抗体预先阻断后,CD4阳性IL-17A阳性比例在两组中无明显差异(P=0.612、0.320、0.167)。在脾脏淋巴细胞中,Poly(I∶C)诱导流产组的CD4阳性IL-17A阳性比例在孕9.
出处
《中国妇幼保健》
CAS
2018年第10期2344-2348,共5页
Maternal and Child Health Care of China
