摘要
为检测鸭IL-8细胞因子表达,设计鸭IL-8基因特异性引物,以鸭组织总RNA为模板,建立了鸭IL-8 SYBR Green I荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,应用该法检测了基因A型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus genotype A,DHAV-A)弱毒疫苗免疫SPF雏鸭肝、脾和脑组织中鸭IL-8 m RNA的动态表达。结果鸭IL-8基因RRT-PCR扩增标准曲线相关系数0.993,溶解曲线呈特异性单峰,线性范围10^-2-10^-9,Ct值范围7.81-30.71,最低检测量99.17 copies/μL,扩增效率1.08,组内和组间变异系数范围分别为0.67%-0.94%和0.96%-1.27%;鸭IL-8 m RNA在免疫鸭肝、脾和脑组织表达水平分别在第3天、第5天和第2天时间点达峰值,分别为对照组的2.75、35.29倍和10.79倍(P〈0.01)。本试验建立的鸭IL-8 RRT-PCR特异、敏感、稳定,能够快速、准确检测鸭体内IL-8细胞因子的表达水平。
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第4期54-57,共4页
Chinese Journal of Veterinary Medicine
基金
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2014ZYXS53
2014NZYQN58)
四川省教育厅创新团队项目(13TD0057)