摘要
目的：探讨骨诱导形成蛋白-2（BMP-2）诱导人牙髓细胞（DPCs）矿化的最佳条件。方法 ：将人DPCs进行体外培养稳定传代,用含不同浓度BMP-2（0μg/L、50μg/L、100μg/L、150μg/L）的诱导液培养14d,另用浓度为100μg/L BMP-2诱导细胞,分别于7d、14d、21d检测各组细胞增殖情况、矿化结节的形成情况以及诱导成牙本质过程中相关牙本质涎磷蛋白（DSPP）、牙本质基质蛋白-1（DMP-1）、碱性磷酸酶（ALP）基因的表达水平。结果：不同浓度BMP-2诱导细胞过程中,诱导液浓度的改变对细胞增殖无明显作用;一定范围内随着诱导剂剂量的增加,DPCs矿化结节形成量,DSPP、DMP-1、ALP基因表达量上调,各浓度与对照组（BMP-2为0μg/L）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,100μg/L组和50μg/L组之间的表达量比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,100μg/L组和150μg/L组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。在100μg/L浓度BMP-2诱导下,0~14d各表达明显增长,14d组与7d组各表达量差异有统计学意义（P〈0.05）,而14d组与21d组各表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：BMP-2对DPCs增殖无明显作用,但有明显诱导细胞矿化作用,最佳浓度为100μg/L,最佳天数为14d。
Objective： To investigate the optimum condition of the bone morphogenetie protein-2 （BMP 2） on the biologic activity of Human dental pulp cell （DPCs） in vitro. Methods： Human DPCs were cultured in vitro. One cell group was cultivated with different concentration of BMP-2 （0 μg/L, 50 μg/L, 100 μg/L, 150 μg/L）. Another group was cultivate in different time（7,14,21 days） with a particular concentration of BMP-2（100 μg/L）, while medium without BMP-2 served as the control group. The proliferation of the cells was examined by MTT assay. The quantity of calcified nodules and expression of ALP,DMP-1 and DSPP were quantified by RT-PCR. Results： BMP-2 show no effect on the proliferation of DPCs. The calcified nodules （ P 〈0.05） and the expression of DSPP （ P 〈0. 05） ,DMP-1（ P 〈0.05） and ALP（P〈0.05） in- creased in both dose and time dependent manner. Conclusion： BMP-2 shows no significant effect on the proliferation of human DPCs, but can promote odontoblast differentiation. The optimum condition is 100μg/L at 14 days.
出处
《广西医科大学学报》
CAS
2015年第6期879-883,共5页
Journal of Guangxi Medical University
基金
广西自然科学基金资助项目(No.2011GXNSFA018216)
广西医疗卫生适宜技术研究与开发课题资助项目(No.S201305-02)
广西高校科学技术研究课题资助项目(No.2013YB042)
关键词
牙髓细胞
骨诱导形成蛋白-2
矿化
dental pulp cells
bone morphogenetic protein-2
differentiation
