摘要
重组大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ） 含有携带聚羟基烷酸（ＰＨＡ） 合成基因（ ｐｈａＣＡＢ）＊＊ 的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ，是很有潜力的ＰＨＡ 生产菌，但存在着质粒不稳定和不能合成３羟基丁酸（３ＨＢ） 与３羟基戊酸（３ＨＶ） 共聚物［Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ）］ 的缺陷。将ＲＫ２ 质粒上的ｐａｒ ＤＥ 基因引入ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ 构成质粒ｐＪＭＣ２ ，该质粒可以在宿主Ｅ．ｃｏｌｉＨＭＳ１７４ 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至１８ ｍ ｍｏｌ／Ｌ，发现Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） 能够以丙酸为前体合成Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） ，其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为５ ％ ～８ ％ 。在５Ｌ自动发酵罐中分批补料培养Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） ，培养基初始磷酸盐浓度为１５ ｍ ｍｏｌ／Ｌ，３０ ｈ 后每升培养液中干菌体可达４２－５ ｇ，Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） 占干重的７０ ％ ，其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为４－９ ％ 。
Plasmid pJMC2 was constructed by cloning the parDE fragment of RK2 into pTZ18U PHB which harbored phaCAB from Alcaligenes eutrophus and was transferred into E.coli HMS174 and E.coli JM107 separately. It is very stable in its hosts cultured in medium without ampicillin. E.coli HMS 174(pTZ18U PHB) and E.coli JM107(pTZ18U PHB)produced P(3HB co 3HB) in a low phosphate concentration medium(18mmol/L). The proportion of 3 hydroxyvalerate(3HV) in the polymer was 5%～8%. A fed batch culture of E.coli HMS174(pJMC2)was conduct in a 5L automatically controlled fermentor, the final dry cell weight, P(3HB co 3HV)content, and th 3HV proportion were 42 5g/L, 70% and 4 9% respectively.
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第1期26-31,共6页
Acta Microbiologica Sinica
基金
国家863 计划资助
