摘要
目的观察硫酸镍(NiSO4)诱导体外培养大鼠睾丸间质细胞凋亡及其c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化,探讨镍致睾丸间质细胞损伤的可能机制。方法体外提取和纯化大鼠睾丸间质细胞,用0、250、500和1 000μmol/L NiSO4分别处理睾丸间质细胞,染毒时间分别为6、12和24 h。采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测睾丸间质细胞的凋亡发生率,实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平。结果(1)AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测结果显示,间质细胞凋亡主要发生于NiSO41 000μmol/L染毒12 h和NiSO4 250、500、1 000μmol/L染毒24 h组。(2)实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,染毒6 h NiSO4 250μmol/L、染毒12 hNiSO4 250和500μmol/L c-kit mRNA相对表达量上调(P<0.05);染毒24 h NiSO4 500和1 000μmol/L c-kit mRNA相对表达量下降(P<0.05)。NiSO4各浓度和各时间组caspase-3 mRNA相对表达量均上调(P<0.05)。(3)Western blotting结果显示:与对照组比较,NiSO4各浓度c-kit蛋白表达逐渐减弱,caspase-3蛋白表达逐渐上调,主要见于NiSO41 000μmol/L染毒6 h以及NiSO4各浓度分别染毒12和24 h。结论 NiSO4可诱导体外大鼠睾丸间质细胞凋亡,且与基因c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白异常表达有关。
出处
《毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期376-379,共4页
Journal of Toxicology
基金
国家大学生创新性实验计划项目资助(091073052)
中央高校基本科研业务费专项资金(Lzujbky-2009-89)
