摘要
采用正交设计与单因素结合法,对国兰ISSR-PCR反应体系中的4个因素(dNTPs、引物浓度、Mg2+、Taq DNA聚合酶)进行优化试验,结果用DPS软件进行分析。结果表明:各因素对PCR结果均有显著影响,其中Taq DNA聚合酶对反应的影响最大;筛选出了各反应因素的最佳水平,建立国兰ISSR-PCR的最佳反应体系(25μL)为:dNTPs 0.2mmol/L、引物1.0μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、Taq DNA聚合酶1U。
Using the orthogonal design and single factor experiment to optimize ISSR-PCR amplification system of four factors(dNTPs,primer,Mg2+ and Taq DNA polymerase,) respectively.PCR results showed that each factor in different levels has significant effect on the result of PCR,the most remarkable factor was the quantity of Taq DNA polymerase.The optimum level of ISSR-PCR system for jujube was established.The total reaction system was 25 μL and contained 0.2 mmol/L dNTPs,1.0 μmol/L Primer,2.5 mmol/L Mg2+,1 U Taq DNA polymerase.
出处
《北方园艺》
CAS
北大核心
2011年第17期136-139,共4页
Northern Horticulture
基金
四川省科技支撑计划资助项目(09ZC1745)
四川省育种工程花卉资助项目
四川省财政厅“草本花卉”资助项目