摘要
目的构建22型人类血小板抗原(HPA)基因分型参考品(质控DNA),并对其进行测序鉴定。方法提取人血液基因组DNA,以其为模板,通过特异性引物扩增出各HPA(1a^16a)基因片段,胶回收后克隆至pUCm-T载体,随后转化E.coliDH5α,提取质粒酶切鉴定并测序;再以构建成功的HPA-1a^16a质粒为模板,通过定点突变获得HPA-1b^16bw基因片段,经克隆、转化后,作酶切鉴定并测序。结果获得了HPA-1a^16a、HPA-1b^16bw基因片段,克隆出各型HPA基因分型参考品质粒,其序列与GenBank中公布的数据完全一致。结论各型HPA基因分型参考品质粒的成功构建,解决了基因频率较低型别(HPA-1b^16bw)质控DNA难以获得的实际问题,为HPA基因分型方法的研究奠定了基础。
出处
《中国输血杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期411-413,共3页
Chinese Journal of Blood Transfusion
基金
第四军医大学第一附属医院学科助推计划资助项目(XJZT09M09)
