摘要
以21份番茄品种为材料,应用正交试验设计对影响番茄SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适于番茄的SSR反应体系和扩增程序。在15μl体系中各反应的最适合含量为:2.5μl ddH2O,1μl 40 ng模板DNA,3μl 200μmol/L dNTP,3μl 0.8μmol/LSSR引物,0.1μl 0.5 U/μlTaqDNA聚合酶,1.5μl 10×PCR Buffer,0.9μl 1.5 mmol/LMgCl2。PCR适宜扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性1 min,45℃退火25 s,共35个循环;68℃延伸25 s,68℃延伸10 min,然后4℃保存。利用此反应体系对21个番茄品种进行PCR扩增并电泳检测,扩增结果清晰且有较高的多态性,表明该体系适合番茄的遗传多样性研究。
出处
《江苏农业科学》
CSCD
北大核心
2009年第2期48-50,共3页
Jiangsu Agricultural Sciences
基金
辽宁省教育厅项目(编号:05L412)
