摘要
目的:应用基因芯片技术研究未知功能基因NS5ATP11的表达对于肝细胞基因表达谱的影响. 方法:从HepG2细胞RNA中用反转录聚合酶链反应法(RT- PCR)扩增出NS5ATP11编码区DNA,常规分子生物学技术构建NS5ATP11的真核表达载体pcDNA3.1(-)- NS5ATP11,利用脂质体转染技术转染HepG2细胞, NS5ATP11的表达以Western blot杂交技术证实.从转染和非转染细胞HepG2种提取总mRNA,逆转录为cDNA, 并进行基因芯片技术分析. 结果:证实构建pcDNA3.1(-)-NS5ATP11在HepG2细胞中表达正确.NS5ATP11重组表达载体和空白载体转染的HepG2细胞的基因表达改变进行分析.结果表明,8种基因的表达水平上调,10种基因的表达水平下调. 结论:NS5ATP11对于肝细胞基因表达谱存在一定影响;基因芯片技术是分析蛋白反式调节基因表达谱的重要技术途径,有助于了解NS5ATP11对肝细胞和其他生物学功能的调节作用.
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
2004年第11期2749-2752,共4页
World Chinese Journal of Digestology
基金
国家自然科学基金攻关项目
No.C03011402
No.C30070689军队"九
五"科技公关项目
No 98D063军队回国留学人员启动基金项目
No.98H038军队"十
五"科技面上项目
N0.01MB135
