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以铜绿假单胞菌为例利用16S测序技术进行细菌同源基因型分析应用价值探讨 被引量：2
1
作者 郭晶晶 王慧珠 +3 位作者 滑明溪 何明 杜鹏程 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第10期1690-1693,共4页
目的以铜绿假单胞菌为例,利用16S rDNA测序技术进行细菌同源基因分析应用价值探讨,为监测院内感染提供实验室依据。方法收集首都医科大学附属北京地坛医院分离的65株铜绿假单胞菌,采用16S测序技术,PCR(polymerase chain reaction)扩增16... 目的以铜绿假单胞菌为例,利用16S rDNA测序技术进行细菌同源基因分析应用价值探讨,为监测院内感染提供实验室依据。方法收集首都医科大学附属北京地坛医院分离的65株铜绿假单胞菌,采用16S测序技术,PCR(polymerase chain reaction)扩增16S rDNA 27-1492基因片段,测序结果利用MEGA-X软件绘制65株铜绿假单胞菌16S rDNA基因之间的进化关系图来表示。结果65株铜绿假单胞菌的亲缘分析中,菌株之间均有同源性,其中来自ICU的菌株,与本科室、神经外科、消化内科和呼吸科的菌株具有更近的亲缘性;呼吸科内也在不同患者标本中发现亲缘较近的菌株,其余科室均有与ICU和呼吸科同源的菌株。结论可应用16S测序技术对铜绿假单胞菌同源相关性进行监测,监测院内感染的发生。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 16S 医院感染 同源性
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院内鲍曼不动杆菌同源基因型与耐药分析探讨 被引量：1
2
作者 郭晶晶 王慧珠 +4 位作者 滑明溪 何明 孙继云 张淑凤 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第11期1589-1594,共6页
目的了解我院鲍曼不动杆菌的分子流行特征,分析其基因同源性,为医院感染控制提供实验室依据,探讨多位点序列分型技术的应用。方法收集本院分离的50株鲍曼不动杆菌,采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,PCR(Polymer... 目的了解我院鲍曼不动杆菌的分子流行特征,分析其基因同源性,为医院感染控制提供实验室依据,探讨多位点序列分型技术的应用。方法收集本院分离的50株鲍曼不动杆菌,采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,PCR(Polymerase Chain Reaction)扩增gltA、gyrB、gdhB、recA、cpn60、gpi和rpoD七个管家基因片段,测序结果与PubMLST数据库对比分析,利用Phyloviz-2. 0软件绘制不同基因型之间的进化关系图。结果 50株鲍曼不动杆菌可被分为10个基因型,分别是ST-1696(19株)、ST-1144(14株)、ST-229(4株)、ST-191(4株)和ST-540、ST-1680、ST-208、ST-1679、ST-1145、ST-1421(分别各一株),三个新的基因型(3株),其中ST-1696与ST-1144、ST-229、ST-191、ST-540、ST-1680、ST-208、ST-1679、ST-1145、ST-1421基因型具有同源相关性。已有ST型的47株鲍曼不动杆菌中大多数菌株对临床常用抗生素表现出多重耐药性,抗生素的耐药率均在75%以上。结论我院鲍曼不动杆菌具有同源相关性,应用多位点序列分型技术对多重耐药的鲍曼不动杆菌实时监测,严加预防。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 医院感染 同源性 多位点系列分型技术
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基于多色流式细胞术研究HIV感染者外周血NK细胞亚群的变化 被引量：1
3
作者 曾永秦 杜娟 +6 位作者 郝禹 李国力 逄晓莉 汪笛 樊立娜 李蓓 赵红心 《国际病毒学杂志》 2019年第3期209-212,共4页
目的基于多色流式方法,研究人类免疫缺陷病毒感染者与未感染的正常对照外周血自然杀伤细胞(naturalkillercell,NK)数目和亚群分布差异。方法用5种细胞表面抗体CD3、CD14、CD19、CD56、CD16及7-AAD建立NK细胞各亚群染色方案,并对20例人... 目的基于多色流式方法,研究人类免疫缺陷病毒感染者与未感染的正常对照外周血自然杀伤细胞(naturalkillercell,NK)数目和亚群分布差异。方法用5种细胞表面抗体CD3、CD14、CD19、CD56、CD16及7-AAD建立NK细胞各亚群染色方案,并对20例人类免疫缺陷病毒男性感染者和20例男性正常对照外周血标本进行六色流式细胞术检测分析。结果人类免疫缺陷病毒感染者NK细胞数量(188±117.7)个/μL,低于正常对照组NK细胞(281.6±107.8)个/μL,差异有统计学意义(p<0.05);细胞毒性NK细胞百分比(64.8±20.0)%比正常对照细胞毒性NK细胞(87.9±5.5)%减少,差异有统计学意义(p<0.01);无功能型NK细胞百分比(24.1±19.4)%比正常对照细胞毒性NK细胞(5.0±3.2)%增多,差异有统计学意义(p<0.01)。以上改变与CD4^+T细胞计数、病毒载量均无相关性。结论免疫缺陷病毒感染引起NK细胞数量下降和亚群比例失调。 展开更多
关键词 多色流式 人免疫缺陷病毒 NK细胞亚群 分布
原文传递
艾滋病合并巨细胞病毒感染的病毒学和血清学特点探讨
4
作者 郭晶晶 王雅杰 +8 位作者 方伟 刘亚楠 李韦杰 方茜 马雪瀛 张响 杨晓玲 郭杰 刘顺爱 《标记免疫分析与临床》 CAS 2022年第12期1986-1989,2057,共5页
目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染后艾滋病患者的病毒学和血清学特点。方法选取2020年8月至2021年12月于首都医科大学附属北京地坛医院诊治的1004例艾滋病患者,和其中123例艾滋病合并CMV患者,比较在实验室结果方面的差异。结果在标本类型不... 目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染后艾滋病患者的病毒学和血清学特点。方法选取2020年8月至2021年12月于首都医科大学附属北京地坛医院诊治的1004例艾滋病患者,和其中123例艾滋病合并CMV患者,比较在实验室结果方面的差异。结果在标本类型不同中,肺泡灌洗液检测巨细胞病毒核酸结果阳性率高;CD4^(+)T淋巴细胞<50 cells/μL组只在血凝检测方面的FDP显示高于CD4^(+)T淋巴细胞数>50 cells/μL组,其余方面年龄(P=0.001)、T淋巴细胞(P<0.001)、CD8^(+)T淋巴细胞(P<0.001),CD4^(+)T淋巴细胞(P<0.001)、Ratio(P<0.001)、NK细胞(P=0.007)、WBC(P=0.015)、HIV病毒载量(P=0.001),均低于CD4^(+)T淋巴细胞数>50 cells/μL组;EB病毒核酸载量<1.00×10^(3) copies/mL组的CD19^(+)B淋巴细胞112.0(59.0,142.5)高于EB病毒核酸载量>1.00×10^(3) copies/mL组的CD19^(+)B淋巴细胞92.0(27.0,111.0)。结论HIV合并CMV感染患者存在严重的免疫缺陷,及早发现患者的多种感染,加强免疫力,采集有效的标本进行检测,有助于患者病情的康复。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 艾滋病
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热休克蛋白47在肝纤维化中的研究进展
5
作者 石榴 韩铭 +3 位作者 袁晓雪 叶峰 成军 蔺淑梅 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2021年第3期30-36,共7页
肝纤维化是由胶原和非胶原在肝脏异常沉积引起,目前尚无特效治疗药物。热休克蛋白47(heat shock protein 47,HSP47)是一种存在于内质网中的胶原特异性分子伴侣,已被证实主要来源于纤维生成细胞,可协助三螺旋胶原前分子的正确折叠和稳定... 肝纤维化是由胶原和非胶原在肝脏异常沉积引起,目前尚无特效治疗药物。热休克蛋白47(heat shock protein 47,HSP47)是一种存在于内质网中的胶原特异性分子伴侣,已被证实主要来源于纤维生成细胞,可协助三螺旋胶原前分子的正确折叠和稳定。在肝纤维化进程中,细胞外基质的主要来源是肝星状细胞,体内外研究均证实HSP47在肝内主要存在于肝星状细胞中,通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号转导通路调控肝纤维化的发生,miRNA、HSP47-蛋白相互作用也参与了肝纤维化的发生发展,本文将对HSP47与肝纤维化的发病机制进行综述。 展开更多
关键词 热休克蛋白47 TGF-β1信号转导通路 miRNA HSP47蛋白相互作用 肝纤维化
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传染病教学中开设多色流式细胞术课程的实践
6
作者 杜娟 赵红心 +2 位作者 张瓃丹 王芯栎 孔雅娴 《继续医学教育》 2024年第1期138-141,共4页
多色流式细胞术是一种高效、精准、快速的细胞学检测技术,已广泛应用于传染病检测和研究中。在传染病研究生教学中,本团队建立多色流式课程体系并通过教学实践过程总结教学经验。文章阐述了传染病研究生教学中开设多色流式细胞术课程的... 多色流式细胞术是一种高效、精准、快速的细胞学检测技术,已广泛应用于传染病检测和研究中。在传染病研究生教学中,本团队建立多色流式课程体系并通过教学实践过程总结教学经验。文章阐述了传染病研究生教学中开设多色流式细胞术课程的几个方面,并进行了总结,包括确定课程目标、设计课程结构、确定课程内容、确定课程形式和确定课程大纲五个方面。笔者进一步通过重点推动多色流式细胞术实践课程并总结实践的初步经验,包括明确多色流式细胞术可以检测的样本类型、多色流式细胞术的仪器类型、染色策略和实验方案、加强流式数据分析和结果判读能力、多色流式细胞术实践过程中应强化生物安全操作五个要点。该课程的开展有助于传染病研究生对免疫学和传染病发病机制的理解,为其未来从事传染病防治和免疫学研究的教学工作提供坚实的基础。 展开更多
关键词 多色流式细胞术 传染病 研究生 教学 课程设置 教学实践
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传染病研究生教学中生物安全教育体系的构建与实践 被引量：1
7
作者 赵红心 杜娟 +2 位作者 张瓃丹 王芯栎 孔雅娴 《继续医学教育》 2023年第12期129-132,共4页
传染病的暴发和流行常常给社会带来严重的影响,包括社会经济、政治稳定和人类健康等方面。国际航线的飞速发展,虽然带来国际旅游、交通和贸易的加速发展,但传染病的传播速度将更加迅速,危害更大。因此,在传染病研究的过程中,生物安全是... 传染病的暴发和流行常常给社会带来严重的影响,包括社会经济、政治稳定和人类健康等方面。国际航线的飞速发展,虽然带来国际旅游、交通和贸易的加速发展,但传染病的传播速度将更加迅速,危害更大。因此,在传染病研究的过程中,生物安全是一个至关重要的方面。如何建立安全教育体系,如何提高研究生的安全意识和实践技能,是笔者研究组一直关注的问题。因此,文章详细地阐述传染病研究生教学中生物安全必要性的三个方面,包括传染病研究的特点和风险、生物安全教学的重要性和传染病研究生的特点。文章还将传染病研究生教学生物安全教育体系的构建与实践分享给大家,包括本单位生物安全教育体系的构建、实验室技能培训强化生物安全操作流程、强化导师在生物安全操作中的责任和通过实践考核规范生物安全操作这四个方面。 展开更多
关键词 研究生教学 传染病 实验室安全风险 生物安全教育 体系构建 实践初探
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氧化苦参碱调节NS5ATP13对人肝母细胞瘤HepG2细胞系增殖及凋亡的作用机制 被引量：4
8
作者 尹玥 韩铭 +3 位作者 朱晓宁 张玉蓉 成军 汪静 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2019年第2期1-9,共9页
目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)与HCV NS5A蛋白反式激活基因13(HCV NS5A trans-regulated protein 13,NS5ATP13)的关系及对人肝母细胞瘤细胞系HepG2增殖凋亡的影响及其作用机制.方法在HepG2细胞中分别加入OMT、转染NS5ATP13过表达... 目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)与HCV NS5A蛋白反式激活基因13(HCV NS5A trans-regulated protein 13,NS5ATP13)的关系及对人肝母细胞瘤细胞系HepG2增殖凋亡的影响及其作用机制.方法在HepG2细胞中分别加入OMT、转染NS5ATP13过表达载体(pNS5ATP13)和小干扰RNA(siNS5ATP13)及各自的阴性对照,检测细胞活力、愈合速度、迁移及侵袭程度、Caspase-3/7表达水平及增殖凋亡相关蛋白的表达.结果①OMT能抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,下调NS5ATP13;②过表达NS5ATP13能促进HepG2细胞的增殖、迁移;干扰NS5ATP13能促进HepG2细胞凋亡;③将NS5ATP13干扰后加入OMT能显著抑制细胞增殖、迁移,并抑制AKT/GSK/mTOR信号转导通路.结论 OMT可能通过下调NS5ATP13抑制AKT/GSK/mTOR信号转导通路,诱导人肝母细胞瘤HepG2细胞系的凋亡. 展开更多
关键词 氧化苦参碱 NS5ATP13 HEPG2 增殖 凋亡
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巨噬细胞对小鼠活化肝星状细胞凋亡的影响及机制 被引量：2
9
作者 麦维利 陈琦琪 +4 位作者 杨晓宇 曹颖 朱镠娈 李蕊 闫杰 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2018年第4期59-65,共7页
目的探讨不同极化方向巨噬细胞对小鼠活化的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡的影响及机制。方法体内构建CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型和橄榄油对照组小鼠模型,采用流式细胞术检测不同极化方向巨噬细胞在两组小鼠肝脏中的比例... 目的探讨不同极化方向巨噬细胞对小鼠活化的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡的影响及机制。方法体内构建CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型和橄榄油对照组小鼠模型,采用流式细胞术检测不同极化方向巨噬细胞在两组小鼠肝脏中的比例。体外诱导骨髓来源的巨噬细胞极化(M0、M1、M2巨噬细胞),分别收集上清与活化的LX-2细胞共培养。采用CCK-8法、Caspase-3/7活性检测、流式细胞术和Western Blot检测LX-2细胞的凋亡。结果 CCl_4组小鼠肝脏巨噬细胞比例显著高于对照组(t=10.86,P <0.0001),其中M1、M2巨噬细胞的比例均显著高于对照组(t值分别为4.62、5.28,P值分别为0.0036、0.0007)。与M0和M2巨噬细胞共培养组相比,M1巨噬细胞上清可显著抑制LX-2细胞的增殖、诱导LX-2细胞的凋亡、增加Caspase-3/7酶活性并上调凋亡蛋白Bax的表达(P均<0.05)。此外,M1巨噬细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的表达水平显著高于M0和M2巨噬细胞(t值分别为17.15、17.20,P均<0.0001)。TRAIL重组蛋白可显著抑制活化的LX-2细胞增殖、促进其凋亡、增强Caspase-3/7酶活性并诱导Bax表达上调。结论 M1巨噬细胞通过表达TRAIL促进小鼠活化的HSC凋亡。 展开更多
关键词 肝纤维化 巨噬细胞极化 肝星状细胞 凋亡 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
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人参皂苷Rh2通过调控AsTP3及p-AKT/FoxO1通路对肝脏葡萄糖代谢的作用及机制 被引量：2
10
作者 张玉蓉 韩铭 +3 位作者 朱晓宁 尹玥 成军 汪静 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2019年第1期30-36,共7页
目的探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)与三氧化二砷反式激活蛋白3(arsenictransactivatedprotein3,AsTP3)间的关系及其对HepG2细胞糖代谢的影响和作用机制。方法将G-Rh2、AsTP3基因的过表达载体(pAsTP3)、小干扰RNA(siAsTP3)及... 目的探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)与三氧化二砷反式激活蛋白3(arsenictransactivatedprotein3,AsTP3)间的关系及其对HepG2细胞糖代谢的影响和作用机制。方法将G-Rh2、AsTP3基因的过表达载体(pAsTP3)、小干扰RNA(siAsTP3)及其各自的阴性对照分别作用于HepG2细胞,通过检测细胞内葡萄糖水平、ROS水平及糖代谢相关基因的表达探讨G-Rh2与AsTP3的关系以及对HepG2细胞糖代谢的影响。结果 (1)G-Rh2可降低HepG2细胞内葡萄糖和ROS水平,并下调叉头转录因子1(forkheadboxproteinO1,FoxO1)的表达、上调磷酸化蛋白激酶B(phosphoprotein kinase B,p-PKB,又称p-AKT)的表达,从而使磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PEPCK1)mRNA和蛋白表达水平上升,6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD) mRNA和蛋白表达水平下降;(2)与G-Rh2类似,过表达AsTP3后HepG2细胞内葡萄糖和ROS水平降低,FoxO1蛋白表达下降,p-AKT蛋白表达上升,PEPCK1 mRNA表达上升,G6PD mRNA表达下降,而干扰AsTP3表达后结果则相反;(3)G-Rh2可上调AsTP3基因表达,在干扰AsTP3表达的情况下加用G-Rh2,其促进肝葡萄糖产生的作用减弱。结论 G-Rh2具有减少肝脏糖异生的作用,其机制可能是通过调控AsTP3及p-AKT/FoxO1信号转导通路调节肝脏糖代谢相关基因的表达而实现。 展开更多
关键词 AsTP3基因 人参皂苷RH2 HEPG2细胞 肝脏糖代谢
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乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4与肿瘤发生发展的关系
11
作者 邓秀娟 韩铭 +1 位作者 成军 梁跃东 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2017年第3期18-21,共4页
乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4是近年来发现的与肿瘤发生发展相关的新基因。众多研究显示XTP4基因表达异常与乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌和肝细胞肝癌等肿瘤密切相关。XTP4基因在肿瘤过度增殖和转移... 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4是近年来发现的与肿瘤发生发展相关的新基因。众多研究显示XTP4基因表达异常与乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌和肝细胞肝癌等肿瘤密切相关。XTP4基因在肿瘤过度增殖和转移侵袭、肿瘤分级与分期以及化疗耐药等过程中发挥作用。本文将对XTP4基因的结构、功能以及与肿瘤发生发展的关系进行综述,以利于后期对其功能进行深入研究。 展开更多
关键词 XTP4基因 肿瘤细胞 转移侵袭 过度增殖
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肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎133例的危险因素分析 被引量：36
12
作者 周小兵 李玉鑫 +2 位作者 高方媛 曾辉 王宪波 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期268-270,共3页
自发性细菌性腹膜炎(SBP)是在无腹腔内邻近器官直接细菌感染来源(如肠穿孔、肠脓肿)的情况下发生于腹腔的感染,是失代偿期肝硬化患者常见的严重并发症之一。SBP若早期未得到有效治疗,病死率高达30%~50%。及时识别相关危险因素、早期诊... 自发性细菌性腹膜炎(SBP)是在无腹腔内邻近器官直接细菌感染来源(如肠穿孔、肠脓肿)的情况下发生于腹腔的感染,是失代偿期肝硬化患者常见的严重并发症之一。SBP若早期未得到有效治疗,病死率高达30%~50%。及时识别相关危险因素、早期诊治对改善SBP预后有重要意义。本研究回顾性分析291例肝硬化合并腹水患者的病历资料,探讨SBP的危险因素,为正确评估病情、早期合理使用抗生素提供指导。 展开更多
关键词 自发性细菌性腹膜炎 相关危险因素 肝硬化合并 肝硬化患者 早期诊治 感染来源 严重并发症 SBP
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升麻的研究进展 被引量：32
13
作者 孙慧娟 朱鏐娈 +2 位作者 王宪波 曾辉 马雅銮 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期837-840,849,共5页
探讨临床使用升麻替代黑升麻治疗围绝经期综合征。升麻是一种多年生草本植物,在我国资源丰富,分布广泛,品种繁多。已知的升麻有15种,其中《中华人民共和国药典》收载药用升麻3种为升麻、兴安升麻和大三叶升麻。升麻化学成分复杂,目前已... 探讨临床使用升麻替代黑升麻治疗围绝经期综合征。升麻是一种多年生草本植物,在我国资源丰富,分布广泛,品种繁多。已知的升麻有15种,其中《中华人民共和国药典》收载药用升麻3种为升麻、兴安升麻和大三叶升麻。升麻化学成分复杂,目前已经分离出200多种化合物,主要含有三萜皂苷类化合物、酚酸类物质、色原酮和挥发油类等成分,具有抗肿瘤、镇痛消炎、抗病毒、免疫调节、抗骨质疏松和调节神经-内分泌功能紊乱等药理作用。升麻是我国常用的中药,其药用历史已有两千多年,临床升麻多用于组方配伍,单味升麻可以治疗妇女更年期综合征和炎症性疾病。本文综述了升麻化学成分、药理作用及临床应用,以期为升麻的进一步研究和开发提供参考。 展开更多
关键词 升麻 化学成分 药理作用 临床应用
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四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型的建立和优化 被引量：32
14
作者 朱安妮 李蕊 +4 位作者 刘三海 乔艳雪 冯时 苑少欣 张剑平 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2014年第1期27-31,共5页
目的：通过单次腹腔注射不同剂量的四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤，检测小鼠血浆转氨酶水平的变化，建立适合本研究的小鼠模型。方法采用6～8周龄雄性C57BL/6小鼠单次腹腔注射CCl4诱导急性肝损伤。比较不同剂量的CCl4诱导急性肝损... 目的：通过单次腹腔注射不同剂量的四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤，检测小鼠血浆转氨酶水平的变化，建立适合本研究的小鼠模型。方法采用6～8周龄雄性C57BL/6小鼠单次腹腔注射CCl4诱导急性肝损伤。比较不同剂量的CCl4诱导急性肝损伤小鼠的血浆转氨酶水平。将182只小鼠随机分出32只。32只小鼠随机分为3组CCl4实验组（每组8只）和正常对照组（8只），分别腹腔注射0.1%、0.2%、0.3%的CCl4橄榄油溶液（10 ml/kg）或等体积橄榄油。注射12小时后取血，检测血浆丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）的水平。比较0.1%和0.2%剂量组小鼠不同时间点血浆转氨酶水平的变化。将剩余150只小鼠随机分为正常对照组（10只）、实验Ⅰ组（0.1%剂量，70只）、实验Ⅱ组（0.2%剂量，70只），实验组小鼠在造模6、12、16、20、24、48、72小时后取血，检测血浆ALT、AST的水平。结果与正常对照组相比，分别用0.1%、0.2%、0.3% CCl4处理后12小时小鼠血浆ALT、AST均明显升高（P ＜0.05），并呈剂量依赖性。与正常对照组相比，0.1%和0.2%剂量组小鼠血浆ALT、AST的水平在早期均呈上升趋势，并分别在16小时和20小时达到高峰，随后逐渐下降，在72小时接近至正常水平。结论单次腹腔注射CCl4诱导小鼠急性肝损伤呈剂量依赖性。0.1%剂量的CCl4以及该剂量处理后16小时是建立C57BL/6小鼠急性轻度肝损伤的合适剂量与检测转氨酶水平的合适时间点。 展开更多
关键词 四氯化碳 急性肝损伤 C57BL 6小鼠
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肝纤维化研究进展 被引量：32
15
作者 张梦然 成军 《国际消化病杂志》 CAS 2014年第6期374-379,共6页
肝纤维化是各种病因所引起的慢性肝脏疾病的共同病理过程,是肝脏中细胞外基质(ECM)增生与降解失衡,进而导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积的结果。近年来肝纤维化也是国内外学者研究的热点,但其发生、发展机制尚未完全阐明。各种因素所导... 肝纤维化是各种病因所引起的慢性肝脏疾病的共同病理过程,是肝脏中细胞外基质(ECM)增生与降解失衡,进而导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积的结果。近年来肝纤维化也是国内外学者研究的热点,但其发生、发展机制尚未完全阐明。各种因素所导致的肝星状细胞激活、趋化和增殖,引起一系列促纤维化细胞因子的分泌,从而导致胶原合成增加被认为是肝纤维化过程中重要的病理过程。因此肝星状细胞的活化被认为是肝纤维化过程中的始动因素。此文对近年来肝纤维化发生、发展的分子生物学研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 细胞外基质 TGF-Β 信号通路
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桂枝汤调控免疫和肠道菌群抗动脉粥样硬化的作用 被引量：30
16
作者 袁晓雯 姜楠 +4 位作者 柏冬 陈冰 李玉梅 曾辉 马雅銮 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期24-29,共6页
目的:观察桂枝汤对高脂饮食导致的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞、肠道菌群和主动脉血管动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法:40只12周龄雌性ApoE^(-/-)小鼠采用配对比较法随机分为普食组(ApoE^(-/-)+CD),高脂组(A... 目的:观察桂枝汤对高脂饮食导致的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞、肠道菌群和主动脉血管动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法:40只12周龄雌性ApoE^(-/-)小鼠采用配对比较法随机分为普食组(ApoE^(-/-)+CD),高脂组(ApoE^(-/-)+WD),桂枝汤组(ApoE^(-/-)+WD+GZT,7.83 g·kg^(-1))和阿托伐他汀组(ApoE^(-/-)+WD+Atr,3.33 mg·kg^(-1)),10只匹配的C57BL/6小鼠为野生普食组(C57BL/6+CD)。除普食组外,其余给予高脂饮食诱导AS模型。治疗组于高脂饮食同时分别给予口服灌胃桂枝汤和阿托伐他汀,正常组和模型组采用同时间、同体积双蒸水灌胃对照。干预4周,每组取5只小鼠,取眼球血,采用全自动生化分析仪检测血浆血脂水平、流式细胞仪检测外周血单核细胞及其亚型比例、表面受体Toll样受体4(TLR4)和CD36表达水平;取回肠内容物采用16S rRNA相对应的DNA序列(16S rDNA)测序检测小鼠肠道菌群。每组余下的5只小鼠干预12周后,取胸腹主动脉采用油红O染色检测主动脉血管斑块形成情况。结果:干预4周,与C57BL/6+CD组比较,ApoE^(-/-)+CD组血浆总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)水平升高(P<0.01),ApoE^(-/-)+WD组血浆TC和LDL水平进一步升高(P<0.01);ApoE^(-/-)+WD组外周血单核细胞及其炎症亚型Ly6C比例升高,TLR4表达上升(P<0.05);ApoE^(-/-)+WD组回肠菌群的厚壁菌门增加,疣微球菌门减少。与ApoE^(-/-)+WD组比较,ApoE^(-/-)+WD+GZT组血脂水平没有明显改变,但炎症亚型单核细胞Ly6C++比例降低,单核细胞表面受体TLR4和CD36表达降低(P<0.05);回肠菌群的厚壁菌门比例减少,拟杆菌门和疣微球菌门增加。干预12周,ApoE^(-/-)+WD组主动脉血管AS斑块形成,ApoE^(-/-)+WD+GZT组AS斑块病变程度减轻。结论:桂枝汤可以改善高脂饮食饲喂ApoE^(-/-)小鼠的单核细胞免疫异常以及肠道菌群失衡,抑制AS斑块形成。 展开更多
关键词 桂枝汤 高脂血症/动脉粥样硬化 肠道菌群 免疫损伤
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黄连解毒汤调控单核、巨噬细胞及泡沫细胞分化的实验研究 被引量：23
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作者 李彤 韩俊燕 +8 位作者 王蓓蓓 陈冰 李玉梅 于志静 薛欣 张剑平 王宪波 曾辉 马雅銮 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1096-1102,共7页
目的观察黄连解毒汤体内调控载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞亚型分化,黄连解毒汤含药血清体外调控巨噬细胞和泡沫细胞亚型分化的作用。方法将15只ApoE^(-/-)小鼠随机分为ApoE^(-/-)普食组、ApoE^(-/-)高脂组及ApoE^(-... 目的观察黄连解毒汤体内调控载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞亚型分化,黄连解毒汤含药血清体外调控巨噬细胞和泡沫细胞亚型分化的作用。方法将15只ApoE^(-/-)小鼠随机分为ApoE^(-/-)普食组、ApoE^(-/-)高脂组及ApoE^(-/-)高脂加中药治疗组,每组5只,分别给予普食及高脂饮食4周。5只C57BL/6野生型小鼠作为野生普食对照组,ApoE^(-/-)高脂加中药组给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,其他组给予等量纯净水灌胃。4周后流式细胞仪检测外周血单核细胞亚型。另选30只SD大鼠给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,每12 h 1次,共5次,制备黄连解毒汤含药血清。采用5%黄连解毒汤含药血清对体外原代骨髓衍生的巨噬细胞(bone marroW-derived macrophage,BMDM)和泡沫细胞分化进行干预,流式细胞仪检测巨噬细胞和泡沫细胞表面受体CD206表达(CD206+M2型)比例;实时定量PCR检测巨噬细胞和泡沫细胞M1型因子Nos2和M2型因子Arg1的表达。结果 ApoE^(-/-)小鼠高脂饮食喂养4周后,外周血炎症型单核细胞(Ly6C^(high))比例增高;黄连解毒汤干预可显著降低炎症型单核细胞比例(P<0.05)。与对照血清比较,5%黄连解毒汤含药血清可显著增加CD206+M2型BMDM的比例(P=0.034)。实时定量PCR结果 显示,含药血清可上调巨噬细胞M2亚型基因Arg1的表达水平(P<0.05),抑制巨噬细胞M1亚型基因Nos2的表达水平(P=0.017)。在ox-LDL促进M2型泡沫细胞分化的基础上,黄连解毒汤含药血清可进一步提高CD206+M2型泡沫细胞比例及Arg1的表达(P<0.01)。黄连解毒汤含药血清抑制Th1因子作用下的M2型泡沫细胞向M1型逆转,显著提高Arg1表达水平,降低Nos2表达水平(P<0.01)。结论黄连解毒汤能降低高脂导致的ApoE^(-/-)小鼠外周血炎症性单核细胞亚群比例;黄连解毒汤含药血清体外促进M2型巨噬、泡沫细胞分化。黄连解毒汤可能通过调节单核、巨噬、泡沫细胞的功能性分 展开更多
关键词 黄连解毒汤 高脂血症/动脉粥样硬化 单核细胞 巨噬细胞 分化
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黄连解毒汤对高脂饮食apoE^(-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应影响的研究 被引量：23
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作者 马雅銮 王蓓蓓 +7 位作者 韩俊燕 李蕊 张卫梅 李彤 陈冰 苏静 王宪波 曾辉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1520-1525,共6页
目的观察黄连解毒汤对高脂饮食喂养的apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应的影响。方法以8只野生型C57BL6小鼠为野生普食组,24只apoE-/-小鼠随机分为apoE-/-普食组、apoE-/-高脂组、apoE-/-高脂加中药组,每组8只。... 目的观察黄连解毒汤对高脂饮食喂养的apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应的影响。方法以8只野生型C57BL6小鼠为野生普食组,24只apoE-/-小鼠随机分为apoE-/-普食组、apoE-/-高脂组、apoE-/-高脂加中药组,每组8只。普食组与高脂组分别给予普食和高脂饮食4周。ApoE-/-高脂加中药组同时给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,其他小鼠采用等量纯净水灌胃。4周后,检测血脂水平、外周血单核细胞比例及其表面Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和清道夫受体CD36的表达;检测主动脉病理变化和主动脉血管局部细胞因子表达水平;进一步采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激检测血浆细胞因子的水平。结果 (1)与野生普食组比较,apoE-/-普食组TC、TG和LDL-C水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与apoE-/-普食组比较,apoE-/-高脂组TC和LDL-C水平显著增高(P<0.05);apoE-/-高脂组与apoE-/-高脂加中药组血脂各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与野生普食组比较,apoE-/-普食组外周血单核细胞比例无明显变化,TLR4表达水平显著增多(P<0.05);与apoE-/-普食组比较,apoE-/-高脂组小鼠外周血单核细胞比例及TLR4表达水平显著增多(P<0.05);与apoE-/-高脂组比较,apoE-/-高脂加中药组外周血单核细胞比例及其表面TLR4表达显著降低,清道夫受体CD36表达水平亦显著降低(P<0.05)。(3)LPS刺激3 h后,与野生普食组比较,apoE-/-普食组血浆TNF-α和IL-10表达显著增加(P<0.05);与apoE-/-普食组比较,apoE-/-高脂组小鼠血浆IL-12、TNF-α、MCP-1和IL-10表达增加,但差异无统计学意义(P>0.05);黄连解毒汤干预4周后,与apoE-/-高脂组比较,apoE-/-高脂加中药组MCP-1表达显著下调,而IL-10水平进一步显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与野生普食组比较,apoE-/-普食组主动脉血管壁炎症因子IFN-γ、MCP-1、TNF-α和IL-1βmRNA水平显著升高,抑炎因子IL-10亦显著升高(P<0 展开更多
关键词 黄连解毒汤 APO E基因敲除小鼠 高脂血症 单核细胞 细胞因子
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雌二醇对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区平滑肌细胞游离Ca^2＋调节模式的初步研究 被引量：20
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作者 王丽平 汪沙 +5 位作者 张颖 王永军 张恒辉 常亚楠 李国力 段华 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期351-354,共4页
目的观察雌二醇对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区（EMI）平滑肌细胞游离Ca^2＋浓度的影响，并探索其作用模式。方法选择2011年3月至10月在首都医科大学附属北京妇产医院因子宫腺肌病行子宫全切除术的患者16例，其中子宫内膜增殖期9... 目的观察雌二醇对子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层交界区（EMI）平滑肌细胞游离Ca^2＋浓度的影响，并探索其作用模式。方法选择2011年3月至10月在首都医科大学附属北京妇产医院因子宫腺肌病行子宫全切除术的患者16例，其中子宫内膜增殖期9例、分泌期7例。取其EMI平滑肌组织进行原代细胞培养，以Ca^2＋荧光探针负载平滑肌细胞，用激光共聚焦显微镜观察1×10^2、1×10^3、1×10^4、1×10^5pmol／L浓度的雌二醇作用后平滑肌细胞内Ca^2＋浓度（以Ca^2＋荧光强度表示）的变化，选择最佳浓度雌二醇。以最佳浓度雌二醇分别联合17β雌二醇-牛血清白蛋白复合物（17β-E2-BSA）、ER拮抗剂——氟维司群（ICI182780）、蛋白合成抑制剂——放线菌酮（CHX）、G蛋白活化抑制剂——百日咳毒素（PTX）处理者分别为17β-E2-BSA组、ICI182780组、CHX组和PTX组，以仅用最佳浓度雌二醇处理者为上述各组的相应对照组，观察雌二醇作用后增殖期、分泌期EMI平滑肌细胞以及各组EMI平滑肌细胞内Ca^2＋荧光强度的变化。结果（1）EMI平滑肌细胞培养24h后即贴壁生长，状态良好。（2）1×10^2～1×10^5pmoL／L浓度的雌二醇均能在1min内引起细胞内Ca^2＋荧光强度迅速升高，分别为275±16、449±18、615±36、641±47，其中1×10^4pmo]／L与1×10^5pmol／L浓度的雌二醇作用下细胞中Ca^2＋荧光强度增幅最明显，但两者比较，差异无统计学意义（P〉0．05），因此选择1×10^4pmol／L为最佳雌二醇浓度。（3）1×10^4pmol／L浓度雌二醇作用于增殖期与分泌期EMI平滑肌细胞，两者Ca^2＋荧光强度比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；17β-E2-BSA组与CHX组细胞内Ca^2＋荧光强度分别为646±32和602±31，与各自相应对照组（分别为513±26和617±35）比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；而PTX组与ICI182780组分别为188±20和302±11，与各自 展开更多
关键词 雌二醇 子宫内膜异位症 子宫内膜 子宫肌层 钙
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肠道菌群影响动脉粥样硬化免疫机制研究进展 被引量：20
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作者 姜楠 孙慧娟 +1 位作者 张媛媛 马雅銮 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第5期531-535,共5页
动脉粥样硬化（As）与脂质代谢紊乱和炎症密切相关。目前研究发现,肠道菌群也参与As过程,是As独立的危险因素之一。人体肠道是机体最大的消化器官和＂最大的免疫器官＂。正常的肠道菌群参与胆汁酸代谢,菌群代谢产生的短链脂肪酸抑制炎症... 动脉粥样硬化（As）与脂质代谢紊乱和炎症密切相关。目前研究发现,肠道菌群也参与As过程,是As独立的危险因素之一。人体肠道是机体最大的消化器官和＂最大的免疫器官＂。正常的肠道菌群参与胆汁酸代谢,菌群代谢产生的短链脂肪酸抑制炎症,从而抑制As。失衡的菌群通过影响宿主三甲胺代谢途径,扰乱机体胆固醇代谢,引发固有免疫应答和适应性免疫应答,减弱抗炎保护作用,从而促进As。因此,调节失衡的肠道菌群成为治疗As的新靶点。本文将对肠道菌群影响As的免疫机制进行综述。 展开更多
关键词 肠道菌群 炎症反应 脂代谢 动脉粥样硬化
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