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绿原酸抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症及机制探索
1
作者 周云鑫 刘柯 丁军颖 《医学研究杂志》 2024年第1期70-74,79,共6页
目的明确绿原酸对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7炎症的抗炎作用,揭示其可能的分子机制。方法以CCK-8法检测不同浓度绿原酸干预后RAW264.7的细胞活性;采用LPS刺激巨噬细胞RAW264.7,预制细胞炎性状态,设置空白对... 目的明确绿原酸对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7炎症的抗炎作用,揭示其可能的分子机制。方法以CCK-8法检测不同浓度绿原酸干预后RAW264.7的细胞活性;采用LPS刺激巨噬细胞RAW264.7,预制细胞炎性状态,设置空白对照组(K组,n=3)、模型对照组(L组,n=3)和实验组(S组,n=3)分别给药,动态观察细胞形态;分别于24h及48h获取细胞沉淀及上清,以酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞上清中炎性细胞因子白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的浓度;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)、转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)及核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)的mRNA表达。结果1μg/ml的LPS成功预制RAW264.7细胞炎性状态;12.5~200.0μg/ml的绿原酸对RAW264.7无明显毒性,50μg/ml及200μg/ml的绿原酸对RAW264.7细胞有明显的增殖作用(P<0.05);与模型对照组比较,实验组上清中IL-1β蛋白含量明显降低,Arg-1的含量明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,50μg/ml的绿原酸显著降低LPS诱导的炎性细胞中NF-κB、TGF-β1、PTGS2及HMGB1的mRNA表达(P<0.05)。结论绿原酸对LPS诱导的RAW264.7炎性反应有明确抑制作用,可能与调控HMGB1介导的NF-κB相关通路分子表达有关。 展开更多
关键词 绿原酸 脂多糖 RAW264.7 抗炎
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基于网络药理学探究虎杖苷通过SIRT1/HMGB1对炎性巨噬细胞RAW264.7极化的调控机制 被引量：2
2
作者 刘柯 周云鑫 丁军颖 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期369-378,共10页
目的基于网络药理学和体外实验,验证巨噬细胞RAW264.7的极化调变规律,探究虎杖苷(PD)防治细菌性肺炎的可能作用机制。方法利用PharmMapper、SwissTargetPrediction、SEA和TCMSP数据库预测药物靶点,在GeneCards和DiseNET数据库里获取细... 目的基于网络药理学和体外实验,验证巨噬细胞RAW264.7的极化调变规律,探究虎杖苷(PD)防治细菌性肺炎的可能作用机制。方法利用PharmMapper、SwissTargetPrediction、SEA和TCMSP数据库预测药物靶点,在GeneCards和DiseNET数据库里获取细菌性肺炎靶点,采用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析,以STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络,再以体外实验予以验证。将细胞分为3组:以LPS刺激的为模型对照组(Model,M),同时予以虎杖苷干预的为PD实验组(PD),另设空白对照组(Control,C)。以CCK8法检测不同浓度虎杖苷对细胞活力的影响;以ELISA法检测细胞上清SIRT1/HMGB1信号通路终末效应分子NF-κB、IL-1β及巨噬细胞极化因子MCP-1、Arg1的分泌水平;以qPCR法检测细胞沉淀SIRT1/HMGB1信号通路相关分子SIRT1、HMGB1、TLR4及TRAF6的mRNA表达。结果网络药理学分析共得到61个虎杖苷与细菌性肺炎的交集靶点,结合GO和KEGG富集分析及蛋白质相互作用网络构建结果,确定了SIRT1、HMGB1、TLR4、TRAF6、NF-κB为后续实验靶点。体外实验进一步证实,PD组NF-κB、IL-1β及MCP-1分泌水平较M组显著降低,Arg1则明显升高;PD组SIRT1的mRNA表达较M组显著上调,但HMGB1、TLR4及TRAF6的mRNA表达显著下调。结论虎杖苷可通过SIRT1/HMGB1调控TLR4、NF-κB等信号通路分子及极化因子MCP-1、Arg1的表达,调变巨噬细胞极化,可能是治疗细菌性肺炎的潜在药物。 展开更多
关键词 虎杖苷 细菌性肺炎 巨噬细胞极化 网络药理学 SIRT1/HMGB1/NF-κB信号通路
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肺类器官模型在感染性肺系病研究中的应用及展望
3
作者 石瑾 刘柯 丁军颖 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期30-37,共8页
肺是病毒、细菌等病原体感染和损伤的重要靶器官。近年新冠疫情让我们认识到,感染性肺系病严重威胁人类健康,甚至生命。基于肺系病发病机制及防治机制研究的迫切性,肺类器官以其精准模拟、高适用性和无伦理困扰等特点,日益成为该领域研... 肺是病毒、细菌等病原体感染和损伤的重要靶器官。近年新冠疫情让我们认识到,感染性肺系病严重威胁人类健康,甚至生命。基于肺系病发病机制及防治机制研究的迫切性,肺类器官以其精准模拟、高适用性和无伦理困扰等特点,日益成为该领域研究的得力工具。在追溯其研发轨迹的基础上,综述其构建及在不同感染肺系病中的应用,并预期其未来发展前景。 展开更多
关键词 多能干细胞 肺类器官 感染性肺系病 病原体
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白藜芦醇调控细菌耐药性研究进展 被引量：2
4
作者 刘柯 石瑾 丁军颖 《中医学报》 CAS 2022年第10期2116-2121,共6页
白藜芦醇对革兰氏阴性及阳性菌、病毒、真菌及衣原体等抑制作用明确,可通过干扰细菌生物膜的形成、抑制药物外排泵的功能、增加细胞的通透性及修饰药物作用靶点等方面参与细菌耐药的调控。此外,白藜芦醇还可作为抗菌增效剂增加细菌对抗... 白藜芦醇对革兰氏阴性及阳性菌、病毒、真菌及衣原体等抑制作用明确,可通过干扰细菌生物膜的形成、抑制药物外排泵的功能、增加细胞的通透性及修饰药物作用靶点等方面参与细菌耐药的调控。此外,白藜芦醇还可作为抗菌增效剂增加细菌对抗生素的敏感性,提高抗生素的疗效。白藜芦醇治疗耐药菌感染有多重优势,如不易引起细菌耐药、成分较为明确、易获取、抑菌谱广泛、抑菌机制多样、可协同增效抗生素等。然而,结合中药免疫调理特点阐释白藜芦醇对细菌耐药机制改变的报道尚不多见,可进一步加强结合HMGB1这一免疫网络核心调控分子的研究。此外,白藜芦醇及虎杖苷胃肠道吸收良好,为其给药方式及临床口服剂型的探索提供了保障,提示基于病原体/机体免疫,全面揭示了白藜芦醇调控细菌耐药机制的单体中药研发的迫切必要及潜在可能。 展开更多
关键词 白藜芦醇 细菌耐药性 生物膜 外排泵系统 细胞通透性 抗菌增效剂
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