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IL-17信号通路在高原低氧诱导小鼠脾脏炎症反应的作用机制
1
作者 永胜 郭玉静 +2 位作者 陈晓晨 许玉珍 胡英 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期118-124,共7页
目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)... 目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)高原环境,构建高原低氧动物模型。第30天取脾脏组织检测脾脏指数,HE染色观察小鼠脾脏组织病理学改变,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测小鼠脾脏组织白细胞介素(IL)-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量;使用RNA测序(RNA-sequencing,RNA-seq)技术进行高通量转录组学测序,将差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行KEGG富集分析,对关键通路中的DEGs进行RT-qPCR验证。结果与平原常氧组相比,高原低氧环境下,小鼠脾脏指数降低(P<0.05),并出现白髓减少,生发中心扩大,边缘模糊,静脉充血等病理学改变;高原低氧组小鼠脾脏组织IL-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量均上调(P<0.05)。经转录组测序,KEGG通路富集分析示,4218个DEGs共富集到178个富集通路(P<0.05),DEGs在T细胞受体信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路等多个与免疫、炎症相关通路中显著富集(P<0.05);其中,IL-17信号通路和下游炎症因子高度上调表达(P<0.05);与平原常氧组相比,高原低氧组小鼠脾脏组织IL-17信号通路中关键基因IL-17、IL-17R、MAPKs(mitogen-activated protein kinase genes)等和下游炎症因子MMP9(matrix metallopeptidase 9)、S100A8(S100 calcium binding protein A8 gene)、S100A9(S100 calcium binding protein A9 gene)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factorα,TNF-α)等基因的mRNA表达量均出现上调或下调差异表达(P<0.05)。经RT-qPCR验证,DEGs的mRNA表达量与RNA-seq结果一致。结论高原低氧环境可通过激活IL-17信号通路,促进下游炎症因子释放,诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生。 展开更多
关键词 高原低氧 转录组学 IL-17信号通路 脾脏组织 炎症 RNA测序 生物信息学
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基于脂质组学分析揭示高原低氧对小鼠脾组织磷脂代谢的调控机制
2
作者 王昕 郭玉静 +2 位作者 王嘉阳 汪晓筠 胡英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1289-1299,共11页
脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。... 脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。将C57BL/6小鼠分别置于海拔4200 m(高原低氧组,HST组)和400 m(平原常氧组,PSC组),30 d取脾组织。使用超高效液相色谱-Orbitrap质谱系统进行脂质组学分析。30 d时在高原低氧环境下,小鼠脾指数降低,并出现白髓减少,生发中心扩大,边缘模糊,静脉充血等病理学改变。脂质组学分析结果显示,共鉴定到41种脂质亚类和2473种脂质分子,甘油三酯(triacylglycerides,TGs)和磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PCs)为脂质分子鉴别到最多的2种。使用单变量和多变量分析,鉴定到44个差异脂质分子,它们主要集中于磷脂代谢。随后,对磷脂代谢途径中的关键酶进行RT-qPCR检测,发现其mRNA表达量均有差异(P<0.05)。提示高原低氧环境主要影响小鼠脾组织磷脂代谢,并通过减少PC和磷脂酸(phosphatidic acid,PA)含量,促进其转化为磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)和心磷脂(cardiolipin,CL)并通过CDP-乙醇胺(CDP-Ethanolamine,CDP-Etn)途径促进PE生成。该研究为高原低氧环境下脾组织中磷脂代谢异常提供新的实验依据。 展开更多
关键词 低氧 脾 脂质组学 磷脂酰乙醇胺 心磷脂
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IL-17和Th17细胞信号通路参与高原低氧环境小鼠肾脏组织炎症发生的作用机制 被引量：1
3
作者 永胜 高玉杰 +3 位作者 许玉珍 胡英 贾茹涵 龙启福 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第6期791-799,共9页
目的基于转录组学测序技术研究高原低氧条件下IL-17与Th17细胞信号通路诱导小鼠肾脏组织炎症发生机制。方法C57BL/6小鼠分别饲养于海拔4200 m(高原组)和海拔400 m(平原组)的环境下30 d,无菌取小鼠肾脏组织采用转录组测序技术(RNA-Seq)测... 目的基于转录组学测序技术研究高原低氧条件下IL-17与Th17细胞信号通路诱导小鼠肾脏组织炎症发生机制。方法C57BL/6小鼠分别饲养于海拔4200 m(高原组)和海拔400 m(平原组)的环境下30 d,无菌取小鼠肾脏组织采用转录组测序技术(RNA-Seq)测序,对差异表达基因(DEGs)进行KEGG通路富集分析与GO注释分析;采用HE染色法观察小鼠肾脏组织病理学改变;分析AmiGO数据库获得炎症反应基因;RT-qPCR法验证通路中炎症因子的mRNA表达量。结果转录组学测序结果显示,高原低氧环境共鉴定出3007个DEGs,相比于平原组,高原组中1349个DEGs上调(P<0.05),1658个DEGs下调(P<0.05)。HE染色结果显示,与平原组小鼠相比,高原组小鼠肾间质中炎细胞浸润,肾小管上皮细胞不规则排列,部分肾小管上皮细胞肿胀。KEGG富集分析显示,DEGs主要富集于IL-17信号通路、Th17细胞信号通路、B细胞受体信号通路、T细胞受体信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、麻疹信号通路等多个炎症相关通路,其中IL-17信号通路和Th17细胞信号通路显著富集。RT-qPCR结果显示,高原组IL-17信号通路和Th17细胞信号通路中TGFβ-R、RoRyt、TRAF6、MAPK9、mTOR、CHUK等关键基因均出现上调或下调差异表达(P<0.05),下游炎症因子S100A8、S100A9和MMP9发生显著上调(P<0.01)。结论高原低氧条件通过促进IL-17信号通路和Th17细胞信号通路下游炎症因子的表达从而诱导小鼠肾脏组织炎症反应发生。 展开更多
关键词 高原低氧 转录组学 IL-17信号通路 Th17细胞信号通路 炎症反应 差异表达基因 肾脏
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低氧暴露对小鼠脾淋巴细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3
4
作者 郭玉静 胡英 +3 位作者 龙启福 许玉珍 李积东 永胜 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第10期1014-1020,共7页
目的研究低氧暴露诱导淋巴细胞数量减少与细胞增殖和凋亡的关系。方法从C57BL/6小鼠脾中分离淋巴细胞,将淋巴细胞分别在低氧(1%O2)和常氧(21%O2)环境中培养12、24、48 h。用流式细胞术检测T、B淋巴细胞数量;羧基荧光素乙酰乙酸和Annexin... 目的研究低氧暴露诱导淋巴细胞数量减少与细胞增殖和凋亡的关系。方法从C57BL/6小鼠脾中分离淋巴细胞,将淋巴细胞分别在低氧(1%O2)和常氧(21%O2)环境中培养12、24、48 h。用流式细胞术检测T、B淋巴细胞数量;羧基荧光素乙酰乙酸和AnnexinⅤ-FITC/PI方法分别检测淋巴细胞的增殖和凋亡;扫描电镜观察淋巴细胞形态;实时荧光定量逆转录PCR和Western blot检测凋亡相关因子鼠源B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2同源拮抗剂-杀伤蛋白(Bak)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的mRNA和蛋白表达水平。结果低氧暴露12、24、48 h,可降低T、B淋巴细胞数量,抑制淋巴细胞增殖,促进细胞凋亡;扫描电镜观察显示,同一时间下,低氧组淋巴细胞更早出现凋亡特征形态学变化;低氧暴露12、24、48 h,淋巴细胞Bak和caspase-3的mRNA和蛋白表达水平均上调,而bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均下调。结论低氧暴露通过抑制淋巴细胞增殖、促进凋亡,从而介导淋巴细胞数量下降。 展开更多
关键词 缺氧 淋巴细胞减少 细胞增殖 细胞凋亡 bcl-2同源对抗杀伤蛋白 胱天蛋白酶-3
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c-FLIP在胃癌中的表达及其对凋亡的影响
5
作者 刘燕 赵珺 +2 位作者 刘彦平 永胜 耿排力 《青海医学院学报》 CAS 2013年第1期20-24,共5页
目的检测c-FLIP在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞凋亡的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测6株胃癌细胞系和32例配对的胃癌组织及癌旁形态学正常组织中c-FLIP的表达;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞... 目的检测c-FLIP在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞凋亡的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测6株胃癌细胞系和32例配对的胃癌组织及癌旁形态学正常组织中c-FLIP的表达;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测下调c-FLIP表达对细胞凋亡的影响。结果 6个胃癌细胞系中存在c-FLIP的差异表达,其中BGC823高表达c-FLIP基因。在32例胃癌组织中有27例(84.4%)高表达c-FLIP基因,而在32例配对的癌旁形态学正常组织中仅有13例(40.6%)表达且表达水平明显低于胃癌组织。shR-NA干扰c-FLIP表达后明显抑制了细胞的凋亡。结论胃癌组织和细胞中存在c-FLIP的高表达,且其与细胞的凋亡相关,提示c-FLIP可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多
关键词 c—FLIP 基因 胃癌 凋亡
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