三氧化二砷诱导血管平滑肌细胞凋亡的实验研究 被引量：9

1

作者 邵建伟 吴宗贵 +3 位作者 李莉 张玲珍 仲人前 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期330-333,共4页

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ_２Ｏ_３）诱导大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）调亡的作用。方法：建立大鼠ＶＳＭＣｓ增生模型。用四甲基偶氮唑蓝还原反应（ＭＴＴ法）、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法观察 Ａｓ_２Ｏ_３诱... 目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ_２Ｏ_３）诱导大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）调亡的作用。方法：建立大鼠ＶＳＭＣｓ增生模型。用四甲基偶氮唑蓝还原反应（ＭＴＴ法）、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法观察 Ａｓ_２Ｏ_３诱导 ＶＳＭＣｓ凋亡的作用。结果：经Ａｓ_２Ｏ_３作用后ＶＳＭＣｓ出现典型的凋亡变化，透射电镜下可见细胞核仁消失，染色质浓缩聚集于核膜下。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形电泳条带。流式细胞术检测出现典型的凋亡峰，并随ＡＳ_２Ｏ_３浓度的增加和作用时间的延长而增高。对照组均不见上述变化。结论： Ａｓ_２Ｏ_３可有效诱导 ＶＳＭＣｓ凋亡。 展开更多

关键词 三氧化二砷 血管平滑肌细胞 细胞凋亡 大鼠

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负极性聚四氟乙烯驻极体对成纤维细胞凋亡的影响 被引量：4

2

作者 江键 宋诚荣 +4 位作者 崔黎丽 王小平 方影 李莉 叶熙亭 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期409-411,共3页

目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。 方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤... 目的 :研究负电晕充电的聚四氟乙烯 (PTFE)驻极体对成纤维细胞凋亡的影响及其调控机制。 方法 :选用 - 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V PTFE驻极体作用于成纤维细胞 2 4、48和 72 h,利用流式细胞仪和透射电子显微镜研究负极性驻极体对成纤维细胞凋亡的影响。结果 :- 30 0、- 5 0 0和 - 10 0 0 V驻极体作用成纤维细胞 2 4、48和 72 h以后 ,与对照组相比 ,成纤维细胞的凋亡量从 0 .5 %增至 10 % (部分可达 15 % ) ;驻极体作用成纤维细胞 48～ 72 h,出现细胞凋亡特有的形态学特征 ,即 :细胞异染色质边集 ,细胞裂解 ,可见凋亡小体。驻极体诱导成纤维细胞凋亡的效应与作用时间和场强呈正相关性 (P<0 .0 5 )。 结论 :负极性驻极体有促进成纤维细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 驻极体 成纤维细胞 细胞凋亡 负极性聚四氟乙烯

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血清ALP和LDH两种同工酶在不同组织学类型胃癌时的变化 被引量：7

3

作者 翁维明 牛华 《上海医学检验杂志》 1998年第1期4-5,共2页

本文对不同组织学类型的胃癌的血清标本进行了碱性磷酸酶（ALP）同工酶实验研究。结果表明：管状腺癌和乳头状腺癌患者血清有异常的碱性磷酸酶同工酶表达，并发现血清中乳酸脱氢酶（LD）同工酶的LD3和LD5的升高与胃癌的淋巴结转移和肝... 本文对不同组织学类型的胃癌的血清标本进行了碱性磷酸酶（ALP）同工酶实验研究。结果表明：管状腺癌和乳头状腺癌患者血清有异常的碱性磷酸酶同工酶表达，并发现血清中乳酸脱氢酶（LD）同工酶的LD3和LD5的升高与胃癌的淋巴结转移和肝转移密切相关。 展开更多

关键词 胃癌 碱性磷酸酶 同工酶 乳酸脱氢酶 淋巴结肿瘤

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流式细胞术测定淋巴细胞的分裂 被引量：7

4

作者 李红梅 田甜 +2 位作者 钱晓萍 孔宪涛 陈慰峰 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期120-122,共3页

为确立流式细胞仪检测淋巴细胞的分裂的新方法 ,利用CFSE标记新鲜分离外周及胸腺淋巴细胞后 ,加入PMA、ConA、抗TCR抗体等培养 3d ,染色进行FACS分析。结果 ,诱导T细胞活化分裂的 3种刺激剂 ,以PMA刺激作用最强 ,ConA次之 ,抗TCR抗体最... 为确立流式细胞仪检测淋巴细胞的分裂的新方法 ,利用CFSE标记新鲜分离外周及胸腺淋巴细胞后 ,加入PMA、ConA、抗TCR抗体等培养 3d ,染色进行FACS分析。结果 ,诱导T细胞活化分裂的 3种刺激剂 ,以PMA刺激作用最强 ,ConA次之 ,抗TCR抗体最弱。表明CFSE标记细胞 ,流式细胞仪分析法不仅可以检测单细胞水平上细胞的分裂 ,还可根据荧光强度判断细胞的分裂次数。 展开更多

关键词 淋巴细胞分裂 CFSE 流式细胞仪

原文传递

年龄、性别在幼鼠胸腺T细胞增殖中的作用 被引量：3

5

作者 李红梅 仲人前 +3 位作者 钱晓萍 张玲珍 孔宪涛 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期297-299,共3页

目的 :分析年幼小鼠性别、年龄与CD3、CD4、CD8免疫参数表达的关系。方法 :分离 3～ 9周小鼠胸腺、脾脏T淋巴细胞 ,FACS分析细胞表面CD3、CD4、CD8的表达 ;CFSE标记后细胞 ,加入ConA、抗TCR抗体、PMA +IONO刺激剂培养 72小时 ,流式细胞... 目的 :分析年幼小鼠性别、年龄与CD3、CD4、CD8免疫参数表达的关系。方法 :分离 3～ 9周小鼠胸腺、脾脏T淋巴细胞 ,FACS分析细胞表面CD3、CD4、CD8的表达 ;CFSE标记后细胞 ,加入ConA、抗TCR抗体、PMA +IONO刺激剂培养 72小时 ,流式细胞仪分析的方法比较不同刺激剂作用下雌、雄小鼠T细胞的增殖。结果 :结果胸腺和脾脏表面CD3、CD4、CD8的表达与性别无明显关系 ,6～ 9周小鼠脾脏CD3+细胞明显多于 3～ 4周小鼠 ;胸腺细胞的增殖与年龄、性别无关 ,而 3周雌性小鼠脾细胞对PMA +IONO刺激后的增殖应答比雄性明显 ,4～ 6周雄性小鼠脾细胞的增殖能力强于雌性小鼠 ,7～ 8周雌性小鼠脾细胞对抗TCR抗体的应答能力明显减小。结论 展开更多

关键词 性别 年龄 T淋巴细胞

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CEA、AFP、TPA及HBsAg联检在肝癌诊断中的意义 被引量：4

6

作者 李红梅 敬华 +3 位作者 仲人前 刘春雷 于嘉屏 孔宪涛 《标记免疫分析与临床》 CAS 2005年第1期57-58,共2页

关键词 诊断 HCC AFP TPA HB CEA 联检 意义 局限性

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血清CEA、CA15.3监测乳腺癌患者病情变化 被引量：3

7

作者 李红梅 敬华 +3 位作者 仲人前 刘春雷 于嘉屏 孔宪涛 《中国实验诊断学》 2004年第5期496-498,共3页

目的　建立监测乳腺癌患者病情变化的有效指标 ,探讨影响患者血清CEA、CA15 3浓度的机制。方法　用IRMA和酶免疫法检测 2 0 0例未处置乳腺癌患者血清CEA、CA15 3含量。结果　乳癌患者血清CEA、CA15 3异常含量分别为 14 %和 2 0 % ,... 目的　建立监测乳腺癌患者病情变化的有效指标 ,探讨影响患者血清CEA、CA15 3浓度的机制。方法　用IRMA和酶免疫法检测 2 0 0例未处置乳腺癌患者血清CEA、CA15 3含量。结果　乳癌患者血清CEA、CA15 3异常含量分别为 14 %和 2 0 % ,两种肿瘤标志物与肿瘤的大小及淋巴结的浸润有关 ,大肿瘤和淋巴结浸润患者的CEA、CA15 3浓度明显增高 ,CEA还与组织型别有关。单变量预后评价显示 :肿瘤的大小、淋巴结浸润、组织型别、CEA、CA15 3等是无病存活的预后要素。结论　肿瘤标志物CEA、CA15 展开更多

关键词 患者 血清CEA 乳腺癌 病情变化 肿瘤 CA1 淋巴结 大小 存活

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CFSE标记分析小鼠胸腺及末梢T淋巴细胞的活化分裂 被引量：1

8

作者 李红梅 田甜 +2 位作者 钱晓萍 孔宪涛 陈慰峰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期688-689,共2页

关键词 CFSE标记分析 胸腺 T淋巴细胞 活化分裂 流式细胞仪分析

原文传递

IDDM患者T细胞受体介导的信号通路受损 被引量：1

9

作者 李红梅 仲人前 +3 位作者 于嘉屏 曹鲁宁 孔宪涛 陈慰峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期222-224,共3页

目的 :进一步研究IDDM患者T细胞应答改变的机制。方法 :用抗TCR抗体激活患者外周血T细胞 ,分析TCR介导的信号通路的水平。结果 :与正常对照组相比较 ,抗TCR抗体诱导的增殖性应答较弱 (P <0 .0 5) ;rIL 2能部分恢复对抗TCR抗体应答的... 目的 :进一步研究IDDM患者T细胞应答改变的机制。方法 :用抗TCR抗体激活患者外周血T细胞 ,分析TCR介导的信号通路的水平。结果 :与正常对照组相比较 ,抗TCR抗体诱导的增殖性应答较弱 (P <0 .0 5) ;rIL 2能部分恢复对抗TCR抗体应答的缺乏 ;抗CD2 8抗体刺激不能恢复TCR介导的增殖性应答 (P =0 .0 3 )。结论 :IDDM患者的T细胞对抗TCR抗体应答的缺乏与TCR介导的信号通路受损有关 ,但协同刺激信号通路正常。 展开更多

关键词 IDDM TCR信号通路 缺陷

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CD3TCR复合物抗体诱导不成熟胸腺细胞亚群的凋亡

10

作者 李红梅 王宏程 +2 位作者 张华刚 孔宪涛 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期232-235,共4页

目的 :采用AnnexinV ,PI染色 ,流式细胞仪分析的方法、DNA琼脂糖电泳法检测不同CD3 TCR复合物抗体对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的促凋亡作用。方法 :新鲜分离胸腺细胞 ,加入PMA、anti TCR +anti CD2 8mAb ,anti TCRmAb等培养 2 0小时 ,Annex... 目的 :采用AnnexinV ,PI染色 ,流式细胞仪分析的方法、DNA琼脂糖电泳法检测不同CD3 TCR复合物抗体对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的促凋亡作用。方法 :新鲜分离胸腺细胞 ,加入PMA、anti TCR +anti CD2 8mAb ,anti TCRmAb等培养 2 0小时 ,AnnexinV ,PI ,CD4 ,CD8细胞染色以及TCR三染 ,进行FACS分析 ,同时抽提培养细胞DNA进行琼脂糖电泳。结果 :PMA +IONO诱导胸腺T细胞的凋亡作用最强 ,anti TCR +anti CD2 8mAb次之 ,anti TCRmAb最弱。结论 :AnnexinV ,PI细胞染色 ,流式细胞仪分析的方法可以灵敏检测T淋巴细胞的凋亡 ;anti TCR +anti CD2 8mAb能明显增强anti TCRmAb促不成熟的CD4 + CD8+TCR+ 和CD4 + TCR+ 细胞的凋亡作用 ;不成熟T细胞经TCR与自身抗原结合的活性过程能产生克隆删除从而产生自我耐受。 展开更多

关键词 CD3/TCR复合物抗体 诱导 不成熟胸腺细胞亚群 凋亡

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抗鼠T细胞受体抗体抑制胸腺细胞的迁出

11

作者 李红梅 田甜 +3 位作者 钱晓萍 贺学英 孔宪涛 陈慰峰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期352-354,359,共4页

目的 通过检测抗仓鼠T细胞受体抗体对胸腺T细胞输出的影响,进一步研究胸腺是提供外周免疫细胞输出的有关机理。方法 体内注射抗TCR抗体48 h后FACS分析新迁出细胞在胸腺、淋巴结的表达。结果 小鼠成熟髓质区高表达T细胞受体的单阳性细胞... 目的 通过检测抗仓鼠T细胞受体抗体对胸腺T细胞输出的影响,进一步研究胸腺是提供外周免疫细胞输出的有关机理。方法 体内注射抗TCR抗体48 h后FACS分析新迁出细胞在胸腺、淋巴结的表达。结果 小鼠成熟髓质区高表达T细胞受体的单阳性细胞数目成倍增加,同时皮质区低表达T细胞受体的不成熟双阳性细胞数目减少。成熟的单阳性胸腺细胞高表达归巢受体L-Selectin,表型分析(TCRαβ、CD69、HAS、Vβ7-integrin、Qa-2)显示增加的这群细胞为胸腺的新迁出细胞,此群成熟细胞的高表达,表明胸腺的细胞迁出受到了抑制。胸腺内注射异硫氰酸荧光素16 h后,抗TCR抗体注射小鼠外周淋巴结及脾脏CD4^+、CD8^+新迁出细胞数量减少。结论 抗TCR抗体能抑制胸腺T细胞向外周迁移。 展开更多

关键词 抗TCR抗体 胸腺细胞迁移 L-SELECTIN

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羊成骨蛋白体外诱导小鼠肌肉内成骨的研究

12

作者 唐国民 孔宪涛 +5 位作者 屠开元 徐印坎 张文明 祝念林 区士欢 蒋计生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第6期511-514,共4页

取昆明种新生小鼠后肢肌肉1 mm^3置于普通培养皿内,在含羊成骨蛋白(sBMP)1、5、10、50 μg/ml的1640培养基内培养10 d,sBMP各浓度组均有成软骨反应,10μg/ml组成骨反应最好,成骨率达80％,有4个肌肉块完全转化成软骨团。本实验建立了一... 取昆明种新生小鼠后肢肌肉1 mm^3置于普通培养皿内,在含羊成骨蛋白(sBMP)1、5、10、50 μg/ml的1640培养基内培养10 d,sBMP各浓度组均有成软骨反应,10μg/ml组成骨反应最好,成骨率达80％,有4个肌肉块完全转化成软骨团。本实验建立了一个体外诱导成骨的实验模型,为骨诱导的深入研究提供了一个简便的组织培养方法。 展开更多

关键词 成骨蛋白 诱导成骨 组织培养

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分析系数对检验质量评价的意见 被引量：1

13

作者 李乃义 《上海医学检验杂志》 1989年第2期112-115,共4页

生化质控评价的统计指标中,常用变异系数CV值表示不精密度,变异指数VI值表示不准确度或偏离度(CB)。Louderback(1980)介绍了他们用分析系数(CAn)对生化测定方法作比较。

关键词 生化质控 检验 质量 分析系数

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用Arsenazo Ⅲ比色法测定血清钙 被引量：5

14

作者 许绍辉 王志红 《上海医学检验杂志》 1991年第1期11-12,15,共3页

在pH 5.5条件下,钙与过量的ArsenazoⅢ以1:2结合形成蓝紫色复合物,在650nm处有一吸收峰,籍以比色测定之,此法重复性得CV 1.2%～1.3%,回收率在94.2～104.0%。用Beckman 700型自动分析仪测定血清钙线性范围在0～6 mmol/L。高胆红素血,高... 在pH 5.5条件下,钙与过量的ArsenazoⅢ以1:2结合形成蓝紫色复合物,在650nm处有一吸收峰,籍以比色测定之,此法重复性得CV 1.2%～1.3%,回收率在94.2～104.0%。用Beckman 700型自动分析仪测定血清钙线性范围在0～6 mmol/L。高胆红素血,高游离血红蛋白和高脂血对此法干扰较小。150名正常人参考位为2.39±0.14 mmol/L,正常范围定为2.11～2.67mmol/L。只要测定条件控制得当,此法可以信赖。 展开更多

关键词 ArsenazoⅢ 血清钙 比色法

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LDH同工酶电泳图型在几种疾病时的典型变化 被引量：4

15

作者 许绍辉 杨宗岳 +3 位作者 王爱华 顾军 于嘉屏 密庆梅 《上海医学检验杂志》 1992年第1期9-10,共2页

乳酸脱氢酶(LDH,EC1.1.1.27),有五种同工酶存在于人体组织中,其浓度与糖代谢的方式有关,主要以需氧代谢为主的心肌LDH_1占优势。

关键词 乳酸脱氢酶 同功酶 电泳图型 疾病

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中国东部汉族人群原发性胆汁性肝硬化与HLA-DRB1相关性分析 被引量：3

16

作者 陈燕 周晔 +3 位作者 邓安梅 陈波 蒋天舒 仲人前 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1143-1145,共3页

目的:探讨组织相容性抗原Ⅱ类HLA-DRB1等位基因与原发性肝汁性肝硬化(Primarybiliarycirrhosis,PBC)患者人群的相关性。方法:采用序列特异性引物PCR(SSP-PCR)对105例确诊PBC患者,400例健康人群进行HLA-DRB1等位基因及相关亚型基因分析... 目的:探讨组织相容性抗原Ⅱ类HLA-DRB1等位基因与原发性肝汁性肝硬化(Primarybiliarycirrhosis,PBC)患者人群的相关性。方法:采用序列特异性引物PCR(SSP-PCR)对105例确诊PBC患者,400例健康人群进行HLA-DRB1等位基因及相关亚型基因分析。结果:PBC患者组DRB1*07的频率为37·26%,与正常人组的13·8%相比存在显著性差异(P<0·05,比数比为2·7),所有阳性患者经亚型分析均为DRB1*0701;其余DRB1的等位基因频率与正常对照组比较无显著性差异。DRB1*0701阳性与阴性患者群体的疾病进程、临床指征、实验室指征等无显著性差异。结论:中国人群PBC患者可能与DRB1*0701易感性相关,为临床治疗提供了一定线索。 展开更多

关键词 原发性胆汁性肝硬化(PBC) HLA-DRB1 序列特异性引物聚合酶链反应

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脑脊液肌酸激酶及其B亚基活力测定 被引量：1

17

作者 顾军 许绍辉 +2 位作者 于嘉屏 王爱华 密庆梅 《上海医学检验杂志》 1993年第2期76-78,共3页

本文测定了26例脑外伤术后,24例脑肿瘤术后病人CSF的总CK及CK-B亚基活力并与30例无神经系统疾病的脑脊液CK及CK-B亚基活力进行比较,相差非常显著(p<0.01)。还测定16例多发性脑梗塞等神经内科系统疾病,5例白血病,4例脑膜炎脑脊液的总... 本文测定了26例脑外伤术后,24例脑肿瘤术后病人CSF的总CK及CK-B亚基活力并与30例无神经系统疾病的脑脊液CK及CK-B亚基活力进行比较,相差非常显著(p<0.01)。还测定16例多发性脑梗塞等神经内科系统疾病,5例白血病,4例脑膜炎脑脊液的总CK,与对照组相比较也有统计学意义(p<0.05)。这表明测定脑脊液CK及CK-B亚基活力对了解脑损伤是一个有用的指标。 展开更多

关键词 脑脊液 肌酸激酶 B亚基活力

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