目的探讨微小RNA(miRNA)-3126-5p抑制靶基因LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1.LASP1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株(HT-29、HCT116、LoVo、SW480)和正常肠黏...目的探讨微小RNA(miRNA)-3126-5p抑制靶基因LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1.LASP1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株(HT-29、HCT116、LoVo、SW480)和正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)中miR-3126-5p的表达水平。选择表达水平最低的细胞株作为实验对象,实验分为2组:阴性对照组(转染miR-NC)和miR-3126-5p组(转染miR-3126-5p),转染48 h后收集各组细胞。qRT-PCR法检测各组细胞miR-3126-5p的表达水平。采用MTS法和划痕愈合实验分别检测各组细胞的增殖水平和迁移能力。采用生物信息学软件microRNA.org和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-3126-5p的靶基因。采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞靶基因的表达水平。计量资料以均数土标准差(Mean±SO)表示,两两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析结果与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)相比,结直肠癌细胞株miR-3126-5p的表达水平显著降低(P<0.05),表达水平最低的细胞株是HCT116细胞(P<0.01)。阴性对照组和miR-3126-5P组HCT116细胞中miR-3126-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异具有统计学意义(t=5.40,P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-3126-5p组HCT116细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),迁移能力显著下降(t=4.52,F<0.01)。microRNA.org显示miR-3126-5p与LIM和SH3蛋白1(LASP1)基因mRNA存在互补结合位点。miR-3126-5p和L4SP/mRNA能够靶向结合(P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-3126-5p组H CT116细胞中L4SP/基因表达显著降低(t=4.56,P<0.01)。结论结直肠癌细胞株中miR-3126-5p呈低表达,miR-3126-5p能够通过抑制靶基因LASP1降低结直肠癌HCT116细胞的增殖和迁移能力。展开更多
目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29...目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29细胞miR-4731-5p的相对表达量。采用集落形成实验和流式细胞术分别检测HT-29细胞的增殖水平和凋亡情况。生物信息学软件miRTarBase预测miR-4731-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测HT-29细胞靶基因的相对表达量。结果miR-NC组和miR-4731-5p组HT-29细胞中miR-4731-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞增殖能力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。miR-4731-5p的靶基因可能是富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)基因。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞中PRR11基因表达明显降低[(0.28±0.11)比(1.02±0.12)](P<0.01)。结论过表达miR-4731-5p可抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能是通过抑制PRR11基因表达实现。展开更多
目的观察微小RNA(microRNA,miR)-6886-5p对LIM和SH3蛋白1(LIMandSH3 protein 1,LASP1)表达的调控作用及对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法2019年10月至2021年1月,使用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细...目的观察微小RNA(microRNA,miR)-6886-5p对LIM和SH3蛋白1(LIMandSH3 protein 1,LASP1)表达的调控作用及对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法2019年10月至2021年1月,使用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中miR-6886-5p表达。以表达最低的细胞为实验对象,分为miR-6886-5p组(转染miR-6886-5p)和对照组(转染miR-NC)。使用淋巴细胞增殖检测(MTS)法和划痕愈合实验分别检测miR-6886-5p对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。使用生物信息学软件microRNA.org及双荧光素酶报告基因实验预测和验证miR-6886-5p的靶基因。使用qRT-PCR和Westernblot检测miR-6886-5p对靶基因表达的调控作用。结果与正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)相比,胃癌细胞株miR-6886-5p表达明显下降(P<0.05),表达最低的细胞是HS-746T细胞(P<0.01)。对照组和miR-6886-5p组HS-746T细胞中miR-6886-5p表达分别为(1.17±0.40)和(9.48±1.10),差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,miR-6886-5p组细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),迁移能力明显降低(P<0.01)。miR-6886-5p可能与LASP1基因的信使RNA(mRNA)存在结合位点。miR-6886-5p可靶向结合LASP1 mRNA(P<0.05)。与对照组相比,miR-6886-5p组LASP1基因表达明显下降(P<0.01)。结论miR-6886-5p在胃癌细胞株中呈低表达,miR-6886-5p能够通过调控LASP1基因表达,降低胃癌HS-746T细胞增殖和迁移能力。展开更多
文摘目的探讨微小RNA(miRNA)-3126-5p抑制靶基因LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1.LASP1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株(HT-29、HCT116、LoVo、SW480)和正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)中miR-3126-5p的表达水平。选择表达水平最低的细胞株作为实验对象,实验分为2组:阴性对照组(转染miR-NC)和miR-3126-5p组(转染miR-3126-5p),转染48 h后收集各组细胞。qRT-PCR法检测各组细胞miR-3126-5p的表达水平。采用MTS法和划痕愈合实验分别检测各组细胞的增殖水平和迁移能力。采用生物信息学软件microRNA.org和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-3126-5p的靶基因。采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞靶基因的表达水平。计量资料以均数土标准差(Mean±SO)表示,两两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析结果与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)相比,结直肠癌细胞株miR-3126-5p的表达水平显著降低(P<0.05),表达水平最低的细胞株是HCT116细胞(P<0.01)。阴性对照组和miR-3126-5P组HCT116细胞中miR-3126-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异具有统计学意义(t=5.40,P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-3126-5p组HCT116细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),迁移能力显著下降(t=4.52,F<0.01)。microRNA.org显示miR-3126-5p与LIM和SH3蛋白1(LASP1)基因mRNA存在互补结合位点。miR-3126-5p和L4SP/mRNA能够靶向结合(P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-3126-5p组H CT116细胞中L4SP/基因表达显著降低(t=4.56,P<0.01)。结论结直肠癌细胞株中miR-3126-5p呈低表达,miR-3126-5p能够通过抑制靶基因LASP1降低结直肠癌HCT116细胞的增殖和迁移能力。
文摘目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29细胞miR-4731-5p的相对表达量。采用集落形成实验和流式细胞术分别检测HT-29细胞的增殖水平和凋亡情况。生物信息学软件miRTarBase预测miR-4731-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测HT-29细胞靶基因的相对表达量。结果miR-NC组和miR-4731-5p组HT-29细胞中miR-4731-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞增殖能力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。miR-4731-5p的靶基因可能是富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)基因。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞中PRR11基因表达明显降低[(0.28±0.11)比(1.02±0.12)](P<0.01)。结论过表达miR-4731-5p可抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能是通过抑制PRR11基因表达实现。
文摘目的观察微小RNA(microRNA,miR)-6886-5p对LIM和SH3蛋白1(LIMandSH3 protein 1,LASP1)表达的调控作用及对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法2019年10月至2021年1月,使用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中miR-6886-5p表达。以表达最低的细胞为实验对象,分为miR-6886-5p组(转染miR-6886-5p)和对照组(转染miR-NC)。使用淋巴细胞增殖检测(MTS)法和划痕愈合实验分别检测miR-6886-5p对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。使用生物信息学软件microRNA.org及双荧光素酶报告基因实验预测和验证miR-6886-5p的靶基因。使用qRT-PCR和Westernblot检测miR-6886-5p对靶基因表达的调控作用。结果与正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)相比,胃癌细胞株miR-6886-5p表达明显下降(P<0.05),表达最低的细胞是HS-746T细胞(P<0.01)。对照组和miR-6886-5p组HS-746T细胞中miR-6886-5p表达分别为(1.17±0.40)和(9.48±1.10),差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,miR-6886-5p组细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),迁移能力明显降低(P<0.01)。miR-6886-5p可能与LASP1基因的信使RNA(mRNA)存在结合位点。miR-6886-5p可靶向结合LASP1 mRNA(P<0.05)。与对照组相比,miR-6886-5p组LASP1基因表达明显下降(P<0.01)。结论miR-6886-5p在胃癌细胞株中呈低表达,miR-6886-5p能够通过调控LASP1基因表达,降低胃癌HS-746T细胞增殖和迁移能力。
