酒精对骨髓基质细胞成脂与成骨分化的影响 被引量：26

1

作者 李杰 李月白 +3 位作者 王义生 殷力 许建中 熊腾滨 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期493-495,共3页

目的观察酒精对小鼠骨髓基质细胞中脂肪细胞特异性基因422(aP2)和Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法采用原代骨髓基质细胞体外培养技术,取小鼠双侧股骨骨髓细胞,通过细胞贴壁、分离,获取骨髓基质细胞。以0.09mol/L的酒精浓度作为诱导剂处理... 目的观察酒精对小鼠骨髓基质细胞中脂肪细胞特异性基因422(aP2)和Ⅰ型胶原基因表达的影响。方法采用原代骨髓基质细胞体外培养技术,取小鼠双侧股骨骨髓细胞,通过细胞贴壁、分离,获取骨髓基质细胞。以0.09mol/L的酒精浓度作为诱导剂处理细胞。采用完整细胞斑点印迹分子杂交方法检测实验组和对照组细胞中422(aP2)mRNA和Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果对实验组和对照组的422(aP2)mRNA的完整细胞斑点印迹扫描值进行比较,实验组中422(aP2)基因杂交信号明显增强,斑点印迹扫描值为7207.8±331.3,对照组斑点印迹扫描值为652.2±62.6,实验组为对照组的11倍,两组比较差异有非常显著性意义(P<0.001)。对实验组和对照组Ⅰ型胶原mRNA的完整细胞斑点印迹扫描值进行比较,实验组基因杂交信号较对照组明显减弱,斑点印迹扫描值为3 567.3±300.9,对照组斑点印迹扫描值为7487.0±488.4,为实验组的2倍,两组比较差异有非常显著性意义(P<0.001)。结论酒精能诱导骨髓基质细胞向脂肪细胞分化,而减少骨髓基质细胞向成骨细胞分化。这可能与酒精性骨坏死的发生机制有关。 展开更多

关键词 斑点印迹 对照组 骨髓基质细胞 Ⅰ型胶原 实验 酒精 成骨分化 RNA 分子杂交 杂交信号

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酸枣仁皂甙A对血管平滑肌细胞增殖及sis基因表达的影响 被引量：18

2

作者 王雁萍 魏重琴 《心肺血管病杂志》 CAS 2002年第1期43-45,共3页

目的 :进一步明确酸枣仁皂甙A抗动脉粥样硬化机制。方法 :运用体外培养兔血管平滑肌细胞的方法 ,研究酸枣仁皂甙A对细胞增殖及sis基因表达的影响。结果 :发现酸枣仁皂甙A(180mg·L- 1 ～ 5 80mg·L- 1 )具有抑制巨噬细胞条件培... 目的 :进一步明确酸枣仁皂甙A抗动脉粥样硬化机制。方法 :运用体外培养兔血管平滑肌细胞的方法 ,研究酸枣仁皂甙A对细胞增殖及sis基因表达的影响。结果 :发现酸枣仁皂甙A(180mg·L- 1 ～ 5 80mg·L- 1 )具有抑制巨噬细胞条件培养液 ,促进血管平滑肌细胞增殖、RNA合成及sis基因表达的作用。结论 展开更多

关键词 酸刺仁皂甙A 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 基因表达 As 作用机制

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前列腺癌及良性前列腺增生组织中MnSOD基因的mRNA表达水平研究 被引量：12

3

作者 王明臣 郭茂锋 +3 位作者 赵国强 赵勤 赵卫星 董子明 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期164-165,共2页

目的分析MnSOD(SOD2)基因在前列腺癌(PCa)及良性前列腺增生(BPH)组织中的mRNA表达情况,揭示氧化应激损伤在PCa发生过程中的作用。方法应用RT-PCR法分别扩增12例PCa组织及20例BPH组织中的SOD2基因片段,半定量分析其表达情况。结果与BPH... 目的分析MnSOD(SOD2)基因在前列腺癌(PCa)及良性前列腺增生(BPH)组织中的mRNA表达情况,揭示氧化应激损伤在PCa发生过程中的作用。方法应用RT-PCR法分别扩增12例PCa组织及20例BPH组织中的SOD2基因片段,半定量分析其表达情况。结果与BPH组织相比,PCa组织中SOD2基因的mRNA表达水平显著低下(P<0.05)。结论SOD2基因表达低下导致氧化应激加剧在PCa的发生中可能起重要作用。 展开更多

关键词 锰超氧化物歧化酶 前列腺癌 良性前列腺增生 基因表达 逆转录-聚合酶链反应

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酒精诱导鼠骨髓基质细胞成脂分化的实验研究 被引量：12

4

作者 王义生 李杰 +4 位作者 李月白 殷力 许建中 皮国富 翟福英 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期697-698,共2页

关键词 酒精 诱导 骨髓基质细胞 成脂分化 实验研究 动物实验 骨坏死

原文传递

煤工尘肺患者血清CuZn-SOD和铜蓝蛋白活性研究 被引量：5

5

作者 王明臣 胡婵丽 +3 位作者 董子明 杨丽萍 张善锋 陈勤 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第4期357-358,共2页

[目的]探讨煤工尘肺发生发展过程中血清含Cu抗氧化酶CuZn-SOD和铜蓝蛋白(CP)的活性及Cu含量的变化。[方法]分别采用亚硝酸盐形成法、对苯二胺盐酸盐法及原子吸收分光光度法,测定70例不同期别煤工尘肺患者(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)及30例健康对照... [目的]探讨煤工尘肺发生发展过程中血清含Cu抗氧化酶CuZn-SOD和铜蓝蛋白(CP)的活性及Cu含量的变化。[方法]分别采用亚硝酸盐形成法、对苯二胺盐酸盐法及原子吸收分光光度法,测定70例不同期别煤工尘肺患者(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)及30例健康对照者的血清CuZn-SOD活性、铜蓝蛋白(CP)活性及Cu的含量。[结果]对照组、Ⅰ期尘肺组、Ⅱ期尘肺组及Ⅲ期尘肺组的血清CuZn-SOD活性分别为(15.96±2.26)、(17.24±2.28)、(19.81±3.01)、(21.63±3.52) NU/ml;血清CP活性分别为(2.26±0.52)、(2.68±0.67)、(2.97±0.79)、(3.36±0.88)U/ml;血清Cu含量分别为(12.68 ±3.87)、(14.96±4.42)、(17.84±5.12)、(19.38±5.89)μmol/L。与对照组相比,各期别尘肺患者血清与CuZn-SOD和CP 活性及其Cu的含量均显著升高。[结论]煤工尘肺的发生发展涉及含Cu抗氧化酶活性的上调,且其活性的改变与Cu含量变化有平行关系。 展开更多

关键词 煤工尘肺 铜蓝蛋白 CUZN-SOD CU

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煤工尘肺患者血清白细胞介素6及其可溶性受体含量的变化 被引量：5

6

作者 王明臣 刘红春 +3 位作者 王俊萍 赵勤 肖培义 陈勤 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2004年第1期25-26,共2页

目的　探讨煤工尘肺患者血清白细胞介素 6(IL 6)和可溶性IL 6受体 (sIL 6R)水平的变化。方法　用酶联免疫吸附试验法 (ELISA法 )检测 14 8例不同期别煤工尘肺患者 [无尘肺 (0 + )→Ⅰ→Ⅱ ]及 40例健康对照者血清的IL 6及sIL 6R水平。... 目的　探讨煤工尘肺患者血清白细胞介素 6(IL 6)和可溶性IL 6受体 (sIL 6R)水平的变化。方法　用酶联免疫吸附试验法 (ELISA法 )检测 14 8例不同期别煤工尘肺患者 [无尘肺 (0 + )→Ⅰ→Ⅱ ]及 40例健康对照者血清的IL 6及sIL 6R水平。结果　对照组、无尘肺 (0 + )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组人群血清IL 6平均水平分别为 :(7 1± 6 8)、(7 9± 6 8)、(12 6± 11 7)、(2 4 6± 2 1 5)ng/L ,统计学处理差异有显著性 (P <0 0 5)。但煤工尘肺患者血清sIL 6R水平与对照组的差异无显著性意义 (P >0 0 5)。结论　IL 6介入了煤工尘肺的发生和发展过程 ,血清IL 6检测可能对煤工尘肺的早期诊断。 展开更多

关键词 煤工尘肺 白细胞介素6(IL-6) 可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R)

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一氧化氮和抗氧化酶活性与动脉粥样硬化关系的研究 被引量：7

7

作者 傅蕾 李良晨 +4 位作者 贾陆 姬生国 黄九锋 贾素霞 刘伟 《河南医学研究》 CAS 2001年第4期301-305,共5页

目的 :从整体及细胞水平上对一氧化氮 (NO)、抗氧化酶活性与动脉粥样硬化的关系作一初步探讨 ,同时观察阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对其的保护作用。方法 :以实验性动脉粥样硬化 (atherosclerosis ,AS)鹌鹑做为动物模型 ,动态观察其... 目的 :从整体及细胞水平上对一氧化氮 (NO)、抗氧化酶活性与动脉粥样硬化的关系作一初步探讨 ,同时观察阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对其的保护作用。方法 :以实验性动脉粥样硬化 (atherosclerosis ,AS)鹌鹑做为动物模型 ,动态观察其血中NO的生成和抗氧化酶活性的变化以及SF的影响 ;以高脂血清培养的人脐静脉内皮细胞作为细胞模型 ,观察其脂质过氧化水平、NO产生的情况以及SF的保护作用 ;以氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)抑制巨噬细胞NO的产生 ,同时观察SF对其抑制作用的影响。结果 :①高胆固醇血症可显著升高血浆脂质过氧化物(LPO)水平 ,降低血浆NO水平和显著降低红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH px)比活性的作用。②SF有清除自由基、减轻膜脂质过氧化、提高抗氧化酶活性的作用。③高脂血清 (HRS)可使培养的人脐静脉内皮细胞中LPO含量升高 ,并随着HRS浓度的增加 ,LPO含量逐渐升高 ;VitE可阻止HRS引起的内皮细胞中LPO含量的增加。④SF具有与抗氧化剂VitE相似的保护内皮细胞释放NO的作用。⑤OX LDL对脂多糖 (LPS)诱导的巨噬细胞NO的产生具有抑制作用。⑥SF对OX LDL抑制巨噬细胞NO的产生具有明显的保护作用。结论 :提示SF在保护血管内皮细胞。 展开更多

关键词 阿魏酸钠 动脉粥样硬化 抗氧化酶 一氧化氮

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尘肺患者血清唾液酸、透明质酸及总巯基含量的变化 被引量：6

8

作者 张善锋 张济敏 +3 位作者 王明臣 董子明 陈琴 耿敏学 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2004年第6期33-34,共2页

目的　探讨尘肺发生发展过程中唾液酸 (SA)、透明质酸 (HA)及总巯基 (T SH )含量的变化。方法　系统测定14 8例不同期别尘肺患者及 40例健康对照组血清的SA、HA、及T SH的含量。结果　对照组、无尘肺 (0 + )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组... 目的　探讨尘肺发生发展过程中唾液酸 (SA)、透明质酸 (HA)及总巯基 (T SH )含量的变化。方法　系统测定14 8例不同期别尘肺患者及 40例健康对照组血清的SA、HA、及T SH的含量。结果　对照组、无尘肺 (0 + )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组人群的SA分别为 (1 2 9± 0 2 2 )、(1 87± 0 2 7)、(2 3 6± 0 82 )、(2 65± 0 80 )mmol/L ;HA分别为 (10 6±69)、(12 9± 88)、(15 8± 10 6)、(172± 12 1) μg/L ;T SH分别为 (5 846± 1 12 1)、(5 184± 1 0 98)、(4 792± 0 60 5 )、(4 175±0 80 4) μmol/L ,与对照组相比 ,无尘肺 (0 + )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组人群血清SA、HA水平显著升高 ,而T SH含量则明显下降。结论　尘肺的发生发展与SA、HA及T SH含量的变化有密切关系。检测其含量对于尘肺的诊断及肺纤维化程度的判断具有一定的实用意义。 展开更多

关键词 尘肺 唾液酸 透明质酸 巯基

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酒精对骨髓多能干细胞PPARγ及骨钙素mRNA表达的影响 被引量：2

9

作者 李月白 王义生 +2 位作者 Quanjun Cui Gwo-Jaw Wang Gary Balian 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第5期815-817,共3页

目的 :观察酒精对骨髓多能干细胞 (D1细胞 )成脂转录因子 (PPARγ)mRNA和成骨基因骨钙素mRNA表达的影响。方法 :以不同浓度 (0 (对照组 ) ,0 .0 9,0 .15 ,0 .2 1mol/L)酒精处理D1细胞 14d ,苏丹ⅠV染色 ,采用计算机图像分析软件确定脂... 目的 :观察酒精对骨髓多能干细胞 (D1细胞 )成脂转录因子 (PPARγ)mRNA和成骨基因骨钙素mRNA表达的影响。方法 :以不同浓度 (0 (对照组 ) ,0 .0 9,0 .15 ,0 .2 1mol/L)酒精处理D1细胞 14d ,苏丹ⅠV染色 ,采用计算机图像分析软件确定脂肪细胞百分比 ,采用RT PCR技术检测细胞中PPARγ及骨钙素mRNA表达。结果 :对照组脂肪细胞生成很少 ,酒精处理组脂肪细胞生成显著增多 ,脂肪细胞百分比随酒精浓度增大而增多 (P <0 .0 0 1)。各组与对照组PPARγmRNA表达差异无统计学意义。 0 .0 9,0 .15 ,0 .2 1mol/L酒精组骨钙素mRNA表达降低 ,分别比对照组减少 38%、4 3%和 5 4 % (P <0 .0 0 1)。结论 :酒精能够导致骨髓多能干细胞大量分化为脂肪细胞 ,可能是酒精在脂肪酸旁路代谢下游所起的作用 ,这可能与酒精性骨坏死的发生机制有关。 展开更多

关键词 酒精 基因 多能干细胞 骨坏死

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不稳定心绞痛患者介入治疗的临床研究 被引量：5

10

作者 刘乃瑞 单杰 《中外医疗》 2013年第7期3-4,共2页

目的对不稳定心绞痛患者介入治疗的临床效果进行分析及研究。方法选取2010年1月—2012年1月在该院就诊的64例不稳定性心绞痛的患者为研究对象,随机对患者进行分组,分别为观察组及对照组,两组患者各32例,其中观察组患者行介入性治疗,对... 目的对不稳定心绞痛患者介入治疗的临床效果进行分析及研究。方法选取2010年1月—2012年1月在该院就诊的64例不稳定性心绞痛的患者为研究对象,随机对患者进行分组,分别为观察组及对照组,两组患者各32例,其中观察组患者行介入性治疗,对照组患者非血管介入治疗,观察两组患者的心肌梗死、心绞痛、猝死及症状缓解时间、症状缓解率等情况。结果观察组患者临床显效率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者术后平均康复时间为(18.5±3.8)d,对照组患者临床平均康复时间为(30.5±8.5)d,两组患者在临床康复时间上经比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用介入性治疗不稳定性心绞痛具有创伤小、临床治愈效果理想及临床康复时间快等特点,值得在临床上应用推广。 展开更多

关键词 不稳定性 心绞痛 介入治疗

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RNA斑点印迹法检测人食管癌DNA聚合酶β的基因表达 被引量：2

11

作者 金戈 张婷 +3 位作者 赵勤 赵继敏 吴景兰 董子明 《河南医学研究》 CAS 2003年第4期304-306,共3页

目的 :探讨人食管癌组织DNA聚合酶 β(polβ)RNA水平的表达。 方法 :提取 5 1例食管癌患者的手术标本组织 ,包括 :17例癌灶组织 ,17例癌旁组织 ,17例“正常”组织细胞总RNA ,以生物素标记的polβcDNA探针进行RNA斑点印迹。结果 :DNApol... 目的 :探讨人食管癌组织DNA聚合酶 β(polβ)RNA水平的表达。 方法 :提取 5 1例食管癌患者的手术标本组织 ,包括 :17例癌灶组织 ,17例癌旁组织 ,17例“正常”组织细胞总RNA ,以生物素标记的polβcDNA探针进行RNA斑点印迹。结果 :DNApolβRNA水平的表达癌组织高于癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,癌旁组织高于“正常”组织 (P <0 .0 5 ) ,癌组织高于“正常”组织 (P <0 .0 1)。结论 :人食管癌组织及癌旁组织的DNApolβ基因RNA水平表达显著高于“正常”组织 ,提示DNApolβ的过表达可能在食管癌的发生、发展中起 作用。 展开更多

关键词 RNA斑点印迹法 食管癌 DNA聚合酶Β 基因表达 肿瘤发生

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人骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达 被引量：1

12

作者 王义生 李月白 +3 位作者 张岩 许建中 殷力 卢中道 《中国骨肿瘤骨病》 CAS 2004年第2期125-128,共4页

目的 探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果 在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0... 目的 探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果 在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0％,两者差异显著(P<0.05)。而且,两组中P27蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的cyclinE蛋白阳性表达率分别为93.3％和30.0％,两者差异显著(P<0.05)。两组中cyclinE蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达强度呈显著负相关(r_s=-0.432,P<0.05)。结论 P27蛋白在骨肉瘤中低表达,cyclinE蛋白在骨肉瘤中高表达,两者有相关性,均与骨肉瘤发生、发展有关。 展开更多

关键词 人骨肉瘤 P27 CYCLINE蛋白 基因表达 肿瘤 免疫组化

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阿魏酸钠对硝普钠诱导的原代培养海马神经元凋亡的保护作用 被引量：1

13

作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 安玉会 李道明 单杰 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1129-1133,共5页

目的：探讨阿魏酸钠（sodium ferulate，SF）对NO供体硝普钠（SNP）引起的大鼠海马神经元凋亡保护作用的可能机制。方法：原代培养的大鼠海马神经元，经终浓度为10～160μmol·L^-1的SF预处理6h后，用50μmol-L^-1的SNP处理24h，采... 目的：探讨阿魏酸钠（sodium ferulate，SF）对NO供体硝普钠（SNP）引起的大鼠海马神经元凋亡保护作用的可能机制。方法：原代培养的大鼠海马神经元，经终浓度为10～160μmol·L^-1的SF预处理6h后，用50μmol-L^-1的SNP处理24h，采用MTT法检测细胞存活率，Hochest 33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡，Western blot及RT-PCR检测bcl-2基因表达。结果：不同浓度SF（10～160μmol·L^-1）预处理6h可显著提高神经元的存活率，减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象；DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变；增加bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结论：SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用，其机制可能与增加抗凋亡基因bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡 BCL-2

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硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响 被引量：1

14

作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 单杰 安玉会 李道明 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期847-850,共4页

目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258... 目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3 mRNA表达变化;Western印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化。结果SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度。随着SNP剂量的增加,NF-κB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/LSNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值。结论SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关。 展开更多

关键词 硝普钠(SNP) 体外培养 海马神经元 凋亡 NF-ΚBP65 CASPASE-3

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阿魏酸钠对一氧化碳供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用

15

作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 单杰 安玉会 李道明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期2601-2604,2608,共5页

目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果不同剂量SF(10～160μmol/mL)预处理... 目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果不同剂量SF(10～160μmol/mL)预处理海马神经元6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡,提高神经元的存活率;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯子状"改变。结论SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用。 展开更多

关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡

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超氧化物歧化酶同工酶活性及含量在食管癌和癌前增生患者中的变化

16

作者 王明臣 王红钢 +4 位作者 董子明 杨鲲鹏 赵勤 王俊萍 蔡祥生 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期155-156,共2页

关键词 增生 食管癌 自由基 患者 分子机制 含量 癌肿 生物分子 生物体内 DNA

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人降钙素基因在大鼠成肌细胞中的表达与鉴定

17

作者 王义生 杨恺 +1 位作者 李晓林 李月白 《医药论坛杂志》 2007年第6期1-3,6,F0004,共5页

目的建立稳定表达人降钙素(hCT)基因的细胞株(L6),观察人降钙素基因在大鼠成肌细胞中的表达和分泌情况。方法采用自行构建的5'端融合小鼠抗体轻链基因Igκ的信号肽序列的人降钙素基因分泌性真核表达载体pcDNA3.0-Igκ-hCT,采用脂质... 目的建立稳定表达人降钙素(hCT)基因的细胞株(L6),观察人降钙素基因在大鼠成肌细胞中的表达和分泌情况。方法采用自行构建的5'端融合小鼠抗体轻链基因Igκ的信号肽序列的人降钙素基因分泌性真核表达载体pcDNA3.0-Igκ-hCT,采用脂质体介导方法将人降钙素基因导入大鼠成肌细胞;对照组用pcD-NA3.0空质粒转染。经G418筛选后,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测人降钙素基因在大鼠成肌细胞中的表达,并用放免法检测细胞培养上清液降钙素的分泌。结果RT-PCR法和免疫细胞化学法均能检测到人降钙素基因在大鼠成肌细胞中的表达;并在连续传代的细胞培养上清液中检测到每106个细胞24h培养液中降钙素分泌量的平均值42.22ng。结论成功转染人降钙素基因真核表达载体pcDNA3.0-Igκ-hCT于大鼠成肌细胞中;该载体可在细胞中持续稳定表达,建立了稳定的人降钙素基因表达系统。 展开更多

关键词 降钙素 成肌细胞 基因治疗

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