目的:探讨乳腺癌MDA-MB-231细胞中,Y性别决定区基因7(SOX7)基因启动子甲基化水平对细胞的体外迁移和侵袭的影响。方法:脂质体转染pcDNA3.0-DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)质粒至MDA-MB-231细胞中,并于24h、48h及72h后,采用蛋白质免疫印迹实验(...目的:探讨乳腺癌MDA-MB-231细胞中,Y性别决定区基因7(SOX7)基因启动子甲基化水平对细胞的体外迁移和侵袭的影响。方法:脂质体转染pcDNA3.0-DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)质粒至MDA-MB-231细胞中,并于24h、48h及72h后,采用蛋白质免疫印迹实验(WB)检测细胞内DNMT3a蛋白表达水平;甲基化特异性定量PCR(Q-MSP)检测DNMT3a处理组、5-aza-C处理组及对照(Control)组MDA-MB-231细胞中的SOX7基因启动子DNA甲基化水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及WB实验检测各组MDA-MB-231细胞中的SOX7 m RNA和蛋白表达水平;细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测各组MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力。结果:pcDNA3.0-DNMT3a质粒转染MDA-MB-231细胞24h时,细胞内的DNMT3a蛋白表达水平最高。DNMT3a能够显著提高SOX7基因启动子DNA甲基化水平,而5-aza-C则抑制了SOX7基因启动子DNA甲基化水平(P<0.05)。与Control组相比,DNMT3a处理组的MDA-MB-231细胞中,SOX7的m RNA及蛋白表达水平均明显下降,而5-aza-C处理组SOX7的m RNA及蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)。与Control组相比,DNMT3a处理组的MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力均显著增强(P<0.05),而5-aza-C处理组的MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力变化不大(P>0.05)。结论:在恶性肿瘤中,SOX7低表达表受其基因启动子高甲基化调节,且乳腺癌MDA-MB-231细胞中低表达的SOX7能够影响细胞的外迁移和侵袭能力。展开更多
目的应用超声造影(Contrast-enhanced Ultrasound,CEUS)技术定量分析失血性休克(Hemorrhagic Shock,HS)复苏早期肾血流灌注的变化。方法将32只健康实验兔随机分为4组,随机选择1组为正常对照组,其余3组按照Wiggers改良法建立HS模型,选择...目的应用超声造影(Contrast-enhanced Ultrasound,CEUS)技术定量分析失血性休克(Hemorrhagic Shock,HS)复苏早期肾血流灌注的变化。方法将32只健康实验兔随机分为4组,随机选择1组为正常对照组,其余3组按照Wiggers改良法建立HS模型,选择1组为休克组,其余2组根据复苏时间的不同分为复苏2 h组、复苏6 h组;建立模型后行CEUS检查,观察肾皮质血流灌注情况,获取时间-强度曲线,对比各组峰值强度幅度(A)、达峰时间(Time to Peak,TTP)、曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)、曲线上升支斜率(Gradient Between Start Frame to Peak Frame,Grad),并分析上述参数与肾功能及病理结果的相关性。结果与正常对照组比较,休克组TTP延长,A、AUC、Grad降低,差异有统计学意义(P<0.05),成功建立HS模型,肌酐(Creatinine,Cr)及尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)升高,提示肾功能受损。复苏2 h组A、AUC增加,Grad升高,TTP减少,BUN、Cr稍降低,与休克组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示液体复苏后各参数逐渐恢复;但是与正常对照组比较,TTP、Grad、BUN、Cr仍有统计学意义(P<0.05);复苏6 h组与休克组比较,所有参数均有统计学差异(P<0.05),与正常对照组比较参数差异不显著,且AUC与实验室指标BUN、Cr的相关性最高,与病理结果相符。结论CEUS可定量分析失血性休克复苏早期肾皮质血流灌注改变,其中AUC可作为一项敏感指标,与肾功能指标相关性较好,可作为一种无创性的监测方法。展开更多
目的探讨优化动脉灌注策略在急性A型主动脉夹层(acute type A aortic dissection,AAAD)伴灌注不良综合征(malperfusion syndrome,MPS)行全弓置换术中的疗效。方法2017—2019年,解放军南部战区总医院应用优化动脉灌注策略完成主动脉全弓...目的探讨优化动脉灌注策略在急性A型主动脉夹层(acute type A aortic dissection,AAAD)伴灌注不良综合征(malperfusion syndrome,MPS)行全弓置换术中的疗效。方法2017—2019年,解放军南部战区总医院应用优化动脉灌注策略完成主动脉全弓置换手术的51例AAAD伴MPS患者纳入优化灌注组,其中男40例、女11例,平均年龄(47.43±13.39)岁。以前期我院采用传统孙氏手术行全弓置换术的40例AAAD伴MPS患者为对照组,其中男31例、女9例,平均年龄(50.66±12.05)岁。比较两组患者的围术期临床数据。结果两组患者术前基线资料基本一致。优化灌注组和传统对照组手术数据比较显示,优化灌注组的体外循环时间、主动脉阻断时间、停循环脑灌注时间均明显短于传统对照组[(223.64±65.13)min vs.(266.77±87.04)min,(114.48±27.28)min vs.(138.20±39.89)min,(8.28±3.81)min vs.(50.53±23.60)min,P均≤0.05];优化灌注组的术中最低鼻咽温度要明显高于传统对照组[(27.10±1.18)℃vs.(23.60±3.30)℃,P=0.000]。优化灌注组的术后清醒时间较传统对照组短[(4.50±1.35)h vs.(5.27±1.15)h,P=0.019],优化灌注组的输血量明显少于传统对照组[(13.25±9.06)U vs.(16.95±7.53)U,P=0.046]。两组ICU时间和有创通气时间差异无统计学意义(P均>0.05)。优化灌注组术后连续肾脏替代治疗发生率较传统对照组明显降低(21.6%vs.42.5%,P=0.032);优化灌注组术后谵妄、昏迷、低心排血量综合征、肢体缺血发生率较传统对照组低,但差异无统计学意义(P均>0.05);优化灌注组术后偏瘫、脓毒症、二次开胸发生率高于传统对照组,差异无统计学意义(P均>0.05)。最后,优化灌注组的术后死亡率低于传统对照组(13.7%vs.27.5%),但差异无统计学意义(P=0.102)。结论优化动脉灌注策略及其相关综合手术技术减轻了手术创伤,缩短了手术时间,围术期临床用血量少,患者术后清醒快,神经系统、肾脏和肢体缺血并发症发�展开更多
文摘目的:探讨乳腺癌MDA-MB-231细胞中,Y性别决定区基因7(SOX7)基因启动子甲基化水平对细胞的体外迁移和侵袭的影响。方法:脂质体转染pcDNA3.0-DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)质粒至MDA-MB-231细胞中,并于24h、48h及72h后,采用蛋白质免疫印迹实验(WB)检测细胞内DNMT3a蛋白表达水平;甲基化特异性定量PCR(Q-MSP)检测DNMT3a处理组、5-aza-C处理组及对照(Control)组MDA-MB-231细胞中的SOX7基因启动子DNA甲基化水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及WB实验检测各组MDA-MB-231细胞中的SOX7 m RNA和蛋白表达水平;细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测各组MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力。结果:pcDNA3.0-DNMT3a质粒转染MDA-MB-231细胞24h时,细胞内的DNMT3a蛋白表达水平最高。DNMT3a能够显著提高SOX7基因启动子DNA甲基化水平,而5-aza-C则抑制了SOX7基因启动子DNA甲基化水平(P<0.05)。与Control组相比,DNMT3a处理组的MDA-MB-231细胞中,SOX7的m RNA及蛋白表达水平均明显下降,而5-aza-C处理组SOX7的m RNA及蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)。与Control组相比,DNMT3a处理组的MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力均显著增强(P<0.05),而5-aza-C处理组的MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力变化不大(P>0.05)。结论:在恶性肿瘤中,SOX7低表达表受其基因启动子高甲基化调节,且乳腺癌MDA-MB-231细胞中低表达的SOX7能够影响细胞的外迁移和侵袭能力。
文摘目的应用超声造影(Contrast-enhanced Ultrasound,CEUS)技术定量分析失血性休克(Hemorrhagic Shock,HS)复苏早期肾血流灌注的变化。方法将32只健康实验兔随机分为4组,随机选择1组为正常对照组,其余3组按照Wiggers改良法建立HS模型,选择1组为休克组,其余2组根据复苏时间的不同分为复苏2 h组、复苏6 h组;建立模型后行CEUS检查,观察肾皮质血流灌注情况,获取时间-强度曲线,对比各组峰值强度幅度(A)、达峰时间(Time to Peak,TTP)、曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)、曲线上升支斜率(Gradient Between Start Frame to Peak Frame,Grad),并分析上述参数与肾功能及病理结果的相关性。结果与正常对照组比较,休克组TTP延长,A、AUC、Grad降低,差异有统计学意义(P<0.05),成功建立HS模型,肌酐(Creatinine,Cr)及尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)升高,提示肾功能受损。复苏2 h组A、AUC增加,Grad升高,TTP减少,BUN、Cr稍降低,与休克组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示液体复苏后各参数逐渐恢复;但是与正常对照组比较,TTP、Grad、BUN、Cr仍有统计学意义(P<0.05);复苏6 h组与休克组比较,所有参数均有统计学差异(P<0.05),与正常对照组比较参数差异不显著,且AUC与实验室指标BUN、Cr的相关性最高,与病理结果相符。结论CEUS可定量分析失血性休克复苏早期肾皮质血流灌注改变,其中AUC可作为一项敏感指标,与肾功能指标相关性较好,可作为一种无创性的监测方法。
