生动讲解生物化学绪论,激发学生学习热情 被引量：7

1

作者 高敏 肖梦 +2 位作者 李蓉芬 彭家和 何凤田 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2007年第3期249-250,共2页

讲好生物化学的绪论可以帮助学生树立学习生化的信心和激发他们的学习热情,可以从三个方面改进对它的讲解：一是定义＂生物化学＂时,变抽象的定义为具体的例子;二是简化＂生物化学发展简史＂的讲解,引导学生课后阅读,增强他们的学习主动... 讲好生物化学的绪论可以帮助学生树立学习生化的信心和激发他们的学习热情,可以从三个方面改进对它的讲解：一是定义＂生物化学＂时,变抽象的定义为具体的例子;二是简化＂生物化学发展简史＂的讲解,引导学生课后阅读,增强他们的学习主动性;三是提出学习方法,强调生化实验的重要性。 展开更多

关键词 生物化学 教学方法 绪论

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疯牛病与新变异型克雅氏病 被引量：7

2

作者 张艳 《国外医学（流行病学．传染病学分册）》 2001年第6期249-252,共4页

疯牛病是一种慢性致死性中枢神经系统变性病,其致病因子朊毒可由动物传染给人类,导致新变异型克雅氏病(即人类疯牛病),因此对该病的防治已成为全世界普遍关注的焦点。本文就疯牛病的流行情况、致病因子、疯牛病与新变异型克雅氏病的相... 疯牛病是一种慢性致死性中枢神经系统变性病,其致病因子朊毒可由动物传染给人类,导致新变异型克雅氏病(即人类疯牛病),因此对该病的防治已成为全世界普遍关注的焦点。本文就疯牛病的流行情况、致病因子、疯牛病与新变异型克雅氏病的相关性及防治措施作了综述。 展开更多

关键词 疯牛病 新变异型克雅氏病 阮毒 防治措施

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Pol■与移行细胞癌发生关系的实验研究 被引量：3

3

作者 赵谦 杨劲 +7 位作者 金锡御 陈志文 宋波 曾益军 位全芳 季惠翔 李劲 周虎传 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第10期1513-1516,共4页

目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正... 目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正常组织、临床膀胱肿瘤和肾盂癌的移行细胞癌组织标本,利用RT-PCR方法检测组织标本中Pol■的表达。结果:Pol■在膀胱肿瘤细胞株中丰富表达,显著高于膀胱正常粘膜组织(P<0.01);Pol■在膀胱肿瘤及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常粘膜组织的表达(P<0.01),且与移行细胞癌的分级相关。结论:Pol■在移行细胞癌组织中的高表达可能与膀胱肿瘤的发生、发展相关,为进一步研究Pol■在膀胱肿瘤中表达的意义打下基础。 展开更多

关键词 DNA聚合酶 Polι 移行细胞癌

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生物化学教学中的马克思主义哲学思想 被引量：4

4

作者 高敏 肖梦 +2 位作者 李蓉芬 彭家和 何凤田 《医学教育探索》 2006年第10期917-918,共2页

许多生物化学的理论,其发展充满了曲折性,是进行马克思主义哲学思想教育的好例子。本文以逆转录和核酶的发现为例,说明在生物化学的教学中是如何向学生传授马克思主义的哲学思想。

关键词 马克思主义哲学 生物化学 教学

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HMGB1:一种新的感染后期致炎因子 被引量：3

5

作者 张艳 何凤田 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第2期172-173,共2页

高迁移率族蛋白B1(high mobilitygroupbox 1,HMGB1)是一种DNA结合蛋白 ,可作为细胞因子参与炎症反应。HMGB1作为炎症后期的致炎因子可导致败血症 ,而针对HMGB1的抑制剂能有效抑制败血症的发生。因此 ,HMGB1有望成抗炎治疗的一种新的的... 高迁移率族蛋白B1(high mobilitygroupbox 1,HMGB1)是一种DNA结合蛋白 ,可作为细胞因子参与炎症反应。HMGB1作为炎症后期的致炎因子可导致败血症 ,而针对HMGB1的抑制剂能有效抑制败血症的发生。因此 ,HMGB1有望成抗炎治疗的一种新的的靶分子。 展开更多

关键词 HMGB1 致炎因子

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肽核酸的研究现状 被引量：2

6

作者 张艳 何凤田 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第4期274-276,共3页

关键词 肽核酸 反义药物 反基因药物

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膀胱癌及其正常组织染色体缺失研究及其临床意义 被引量：1

7

作者 赵友光 李莹 +2 位作者 杨劲 李杰 陈志文 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期853-855,共3页

目的探讨膀胱癌患者9号染色体及p53等位基因的杂合性缺失(LOH)与膀胱移行细胞癌(TCC)形成、进展之间的关系及其在早期诊断膀胱癌及复发检测中的价值。方法选取9、17号染色体的5个微卫星位点D9S283、D9S303、D9S304、D9S1751和TP53,采用... 目的探讨膀胱癌患者9号染色体及p53等位基因的杂合性缺失(LOH)与膀胱移行细胞癌(TCC)形成、进展之间的关系及其在早期诊断膀胱癌及复发检测中的价值。方法选取9、17号染色体的5个微卫星位点D9S283、D9S303、D9S304、D9S1751和TP53,采用特异引物进行PCR扩增及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色方法对40例TCC患者手术切除的癌组织及癌旁正常组织进行微卫星分析。结果 40例癌组织中,36例(90%)分别有1～5个微卫星位点发生LOH,其中微卫星改变发生最高的位点是TP53,发生率为62.5%,其次为D9S283,发生率为42.5%。结论 9、17号染色体上的5个微卫星位点LOH参与了膀胱癌的发生,通过检测这5个位点的LOH,可以为膀胱癌的早期诊断提供一定的线索。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 等位基因 基因 p53 聚合酶链反应

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转录因子与疾病 被引量：1

8

作者 钟小林 周建新 +1 位作者 杨卫华 廖荣霞 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第1期29-30,共2页

在真核基因表达调控中起重要作用的转录因子与许多疾病的关系近来已得到证实 ,本文综述了某些这类疾病的临床表现 ,受累的转录因子基因、转录因子结合的启动子及转录因子调节的靶基因在疾病发病过程中可能的作用 。

关键词 转录因子 疾病 发病机理 靶基因 基因表达 研究进展

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DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立

9

作者 周虎传 杨劲 +6 位作者 曾益军 位全芳 何凤田 赵谦 李劲 刘洋 李杰 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第7期1267-1269,共3页

目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polt)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。方法:用脂质体200... 目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polt)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆。结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系。结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 DNA聚合酶iota HEK-293细胞 DNA损伤 DNA修复

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重组人PCNA突变体的克隆与稳定表达

10

作者 位全芳 杨劲 +4 位作者 曾益军 周虎传 李劲 刘洋 李杰 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第4期653-655,666,共4页

目的:构建重组人PCNA突变体(mutant PCNA,mPCNA)的真核表达质粒,并建立稳定高表达该目的蛋白的宫颈癌细胞系Hela,为进一步研究PCNA在DNA损伤修复中重要的生物学功能奠定基础。方法:将含有定点突变的PCNA cDNA序列克隆到T栽体中,然后再... 目的:构建重组人PCNA突变体(mutant PCNA,mPCNA)的真核表达质粒,并建立稳定高表达该目的蛋白的宫颈癌细胞系Hela,为进一步研究PCNA在DNA损伤修复中重要的生物学功能奠定基础。方法:将含有定点突变的PCNA cDNA序列克隆到T栽体中,然后再亚克隆到真核表达栽体pCDNA3.1/V5-His A上,构建真核表达载体质粒pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA,稳定转染到Hela细胞中;Western B1otting法检测蛋白的表达情况;白细胞记数法测定细胞的生长速率。结果:真核表达质粒pCDNA3.1/V5-His A-mPCNA经酶切、测序分析与实验设计的序列完全一致;稳定建系后,Western Blotting结果显示在相应位置可见清楚的目的条带;稳定高表达mPCNA的细胞系与野生型细胞相比两者的生长速率基本一致。结论:成功构建了真核表达质粒pCD- NA3.1/V5-His A-mPCNA;建立了稳定高表达该突变体的Hela细胞系;PCNA突变体的高表达不影响Hela细胞的正常生长。 展开更多

关键词 增殖细胞核抗原 突变体 稳定转染 HELA细胞

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膀胱癌患者着色性干皮病F蛋白的表达水平及其临床意义

11

作者 赵友光 杨劲 +5 位作者 曾益军 位全芳 徐志刚 刘洋 袁方 陈志文 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期303-306,共4页

目的检测膀胱癌患者着色性干皮病F蛋白(XPF)的表达水平,并探讨其临床意义。方法Trizol法提取25份膀胱癌组织及10份癌旁正常组织总RNA,经RT-PCR扩增后,以扩增产物为模板,经实时荧光定量PCR法检测XPF的表达水平。结果各基因扩增效率近似相... 目的检测膀胱癌患者着色性干皮病F蛋白(XPF)的表达水平,并探讨其临床意义。方法Trizol法提取25份膀胱癌组织及10份癌旁正常组织总RNA,经RT-PCR扩增后,以扩增产物为模板,经实时荧光定量PCR法检测XPF的表达水平。结果各基因扩增效率近似相等,且具有很好的特异性,膀胱癌组织中XPF基因的表达水平明显低于癌旁正常组织。结论XPF可能参与了膀胱癌的发生和发展过程,对膀胱癌的转移潜能及预后具有一定意义。 展开更多

关键词 膀胱癌 着色性干皮病F蛋白 实时荧光定量PCR

原文传递

探索教学法在分子生物学教学中的实践研究

12

作者 钟小林 周建新 +3 位作者 江渝 李蓉芬 彭家和 何凤田 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2003年第2期113-114,共2页

近年来,我校在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的分子生物学教学中进行了"探索教学法"尝试.通过对300名学生进行问卷调查,结果表明:有90%的学生认为探索教学法能激发学生的学习兴趣,提高思维能力,并能引导... 近年来,我校在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的分子生物学教学中进行了"探索教学法"尝试.通过对300名学生进行问卷调查,结果表明:有90%的学生认为探索教学法能激发学生的学习兴趣,提高思维能力,并能引导同学们将分子生物学理论和临床实际相联系.进一步分析发现,上述结果在不同专业的五年制学生之间没有显著差异. 展开更多

关键词 探索教学法 分子生物学 教学 实践 临床医学 预防医学 检验医学 课堂教学

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变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段的纯化及葡聚糖结合功能实验 被引量：7

13

作者 苏凌云 吴补领 +1 位作者 李福洋 卫克文 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2002年第7期358-360,共3页

目的 :纯化变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段。 方法 :蛋白质技术 :金属螯合亲和层析 ,葡聚糖结合实验。结果 :通过蛋白质技术及金属螯合亲和层析 ,纯化出可融性融合蛋白GBD。此蛋白可与α - 1,6键葡聚糖结合。结论 :通过基因重组... 目的 :纯化变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段。 方法 :蛋白质技术 :金属螯合亲和层析 ,葡聚糖结合实验。结果 :通过蛋白质技术及金属螯合亲和层析 ,纯化出可融性融合蛋白GBD。此蛋白可与α - 1,6键葡聚糖结合。结论 :通过基因重组技术成功纯化出变形链球菌 展开更多

关键词 变形链球菌 gbpA 蛋白质纯化 葡聚糖结合 龋齿 疾病预防

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稳定转染NDRG2基因对人肝癌细胞HepG2的作用 被引量：6

14

作者 吴国强 李开宗 +2 位作者 窦科峰 药立波 刘新平 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2127-2130,共4页

目的观察NDRG2基因（N—myc downstream regulated gene2）对肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响。方法采用脂质体法将正义及反义NDRG2基因稳定转染HepG2及QZG细胞，采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学及Western blot法进... 目的观察NDRG2基因（N—myc downstream regulated gene2）对肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响。方法采用脂质体法将正义及反义NDRG2基因稳定转染HepG2及QZG细胞，采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学及Western blot法进行鉴定；比较观察其生物学特性的变化。结果NDRG2基因在NDRG2-HepG2细胞中得到了稳定表达；NDRG2-HepG2与HepG2细胞在细胞计数（1、2、3、4、5、6、7d分别为3×10^5／6×10^5、4×10^5／12×10^5、5×10^5／13×10^5、6．0×10^5／13．5×10^5、6．5×10^5／15．0×10^5、6．8×10^5／16．5×10^5、7×10^5／17×10^5）、细胞集落形成（32．4±4．7／56．5±5．6）及成瘤重量（0．0462g／0．2120g）差异有统计学意义（P〈0．05）；而Anti—QZG与QZG细胞的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NDRG2基因可抑制肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 NDRG2 转染

原文传递

NDRG2基因在原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中的表达研究 被引量：5

15

作者 吴国强 张健 +2 位作者 李开宗 窦科峰 刘新平 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2012年第3期266-270,共5页

目的探讨NDRG2基因在人原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中的表达及其临床意义。方法收集原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本,采用免疫组化ABC法、Western blot法及Real-time PCR法检测原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本中NDRG2蛋白和mRNA... 目的探讨NDRG2基因在人原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中的表达及其临床意义。方法收集原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本,采用免疫组化ABC法、Western blot法及Real-time PCR法检测原发性肝细胞肝癌及正常肝组织标本中NDRG2蛋白和mRNA的表达情况,并结合图像分析,比较两者表达的差异。结果 NDRG2蛋白在肝癌组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为16.67%(5/30)和100%(30/30),2组差异有统计学意义(P<0.05),且阳性表达呈现在细胞质中,细胞核中未见有表达。图像分析结果显示,NDRG2蛋白在肝癌组织中表达的相对含量为0.029 0±0.005 9,在正常肝组织中为0.109 2±0.002 8,前者低于后者,其差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测结果与免疫组化染色结果相一致,在肝癌组织及正常肝组织中均检测到NDRG2蛋白,肝癌组织中NDRG2蛋白相对表达量为1.13±0.15,低于正常肝组织的1.57±0.18(P<0.05)。Real-time PCR分析结果显示肝癌组织中NDRG2 mRNA表达量为0.89±0.15,低于正常肝组织的1.48±0.17(P<0.05),但肝癌Edmondson-Steiner分级的各级肝癌组织之间NDRG2 mRNA表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 NDRG2基因在原发性肝细胞肝癌及正常肝组织中可能存在差异性表达,提示该基因可能参与了肝细胞肝癌的发生和发展,但其具体作用及调控机理有待进一步研究。 展开更多

关键词 NDRG2基因 原发性肝细胞肝癌 免疫组化 蛋白印迹 实时定量PCR

原文传递

来氟米特对HaCaT细胞分泌α-肿瘤坏死因子、白介素-6和8的影响 被引量：3

16

作者 郭志丽 顾军 +2 位作者 唐玲 球谊 米庆胜 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期9-10,共2页

目的:研究来氟米特活性代谢产物A771726对角质形成细胞分泌α-肿瘤坏死因子TNF-α,白介素IL-6及IL-8的影响。方法:以体外培养的角质形成细胞株HaCaT为对象,以不同浓度A771726处理正常及TNF-α刺激后细胞,用生物活性法及ELISA方法测定培... 目的:研究来氟米特活性代谢产物A771726对角质形成细胞分泌α-肿瘤坏死因子TNF-α,白介素IL-6及IL-8的影响。方法:以体外培养的角质形成细胞株HaCaT为对象,以不同浓度A771726处理正常及TNF-α刺激后细胞,用生物活性法及ELISA方法测定培养上清中TNF-α、IL-6及IL-8的分泌变化情况。结果:正常情况下,HaCaT细胞可自发分泌TNF-α、IL-6和IL-8;药物作用后分泌水平下降;TNF-α诱导下,HaCaT细胞IL-6及IL-8表达量均增加,加入来氟米特后则表达量均受到抑制。结论:来氟米特可抑制角质形成细胞分泌TNF-α、IL-6及IL-8。 展开更多

关键词 角质形成细咆HaCaT株 来氯米特 细胞因子

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suc2基因的克隆及在酵母基因组中的定位突变 被引量：2

17

作者 孙强 王冀姝 +4 位作者 陈萍 柳天平 牛利国 韩骅 苏成芝 《第四军医大学学报》 2000年第12期1447-1450,共4页

目的　克隆酿酒酵母的蔗糖转换酶基因 (suc2 ) ,并定位突变酵母基因组中的 suc2基因以获得无蔗糖转换酶表达的酵母品系 .方法　用 PCR法从酵母 Y190基因组中扩增出suc2的成熟肽基因片段 ,克隆后测序 .将色氨酸合成酶 (TRP)基因片段插入 ... 目的　克隆酿酒酵母的蔗糖转换酶基因 (suc2 ) ,并定位突变酵母基因组中的 suc2基因以获得无蔗糖转换酶表达的酵母品系 .方法　用 PCR法从酵母 Y190基因组中扩增出suc2的成熟肽基因片段 ,克隆后测序 .将色氨酸合成酶 (TRP)基因片段插入 suc2基因中 ,构建成用于同源重组的 suc2基因定位突变载体 .导入酵母 Y190 ,用营养缺陷筛选出 suc2基因突变的克隆 .用 PCR扩增并克隆突变后的 suc2基因 ,用序列分析确定同源重组的发生 .结果　用 PCR从酵母基因组DNA中扩增出大小约 1.5 kb的 suc2基因片段 ,序列测定表明除 5 85位有一点突变 (AAC变为 AAT)外 ,所得 suc2基因与文献报道相同 ;构建的定位突变载体导入酵母细胞后 ,得到4株营养型符合的突变体 ;PCR表明这些突变体中均有 suc2基因的同源重组 ;取其中 1株的 PCR产物进行序列测定证实了同源重组的发生 .结论　克隆了正确的编码蔗糖转换酶成熟肽的 suc2基因片段 ;用同源重组方法在酵母 Y190的基因组中定位突变了 展开更多

关键词 蔗糖转换酶 同源重组 suc2基因 克隆 定位突变

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变形链球菌葡聚糖结合蛋白A真核表达质粒pcDNA3.1/GBD在哺乳动物细胞中的表达 被引量：1

18

作者 苏凌云 吴补领 +1 位作者 李福洋 陆群 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期10-12,共3页

目的　观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白A(GbpA)的葡聚糖结合区 (GBD)真核表达质粒pcDNA3 1 GBD在哺乳动物细胞COS_7的表达情况。方法　通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3 1 GBD ,通过脂质体转染法将其转染至COS_7细胞 ,通过免疫组化... 目的　观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白A(GbpA)的葡聚糖结合区 (GBD)真核表达质粒pcDNA3 1 GBD在哺乳动物细胞COS_7的表达情况。方法　通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3 1 GBD ,通过脂质体转染法将其转染至COS_7细胞 ,通过免疫组化SABC法检测其在COS_7细胞的表达。结果　pcDAN3 1 GBD质粒转染的细胞质呈棕黄色染色 ,胞核无着色 ,pcDAN3 1空载体转染的细胞质及胞核无着色 ,空白对照组也无着色。结论　质粒pcDAN3 1 GBD转染COS_7后能够在细胞内翻译、表达 ,表达的蛋白质位于细胞质中 ,可与抗GbpA抗体特异性结合 ,具有抗原性 。 展开更多

关键词 变形链球菌 葡聚糖结合蛋白A GbpA 真核表达 质粒 哺乳动物 基因表达

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人破骨细胞形成抑制因子活性域片段在大肠杆菌中的融合表达

19

作者 张兴群 王梁华 +1 位作者 焦炳华 袁勤生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期85-88,共4页

目的　在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子 (Osteoclastogenesisinhibitoryfactor,OCIF)活性域片段。方法　从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA ,利用RT PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA ,将其与pMD18 T连接 ,转化大肠杆菌... 目的　在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子 (Osteoclastogenesisinhibitoryfactor,OCIF)活性域片段。方法　从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA ,利用RT PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA ,将其与pMD18 T连接 ,转化大肠杆菌K80 2 ,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18 OCIFAD ,经双酶切得到OCIF活性域编码片段 ,将其插入pMAL c2载体中 ,转化大肠杆菌TB1。筛选得到阳性重组表达子后进行诱导表达。结果　所获得的OCIF活性结构域编码序列片段经测序与GenBank报道的完全一致。所表达的产物经SDS PAGE分析可见在相对分子质量 6 0 0 0 0处出现一条特殊条带 ,与预期的相对分子质量一致。Westernblot证实了表达产物能与抗人OCIF单抗发生特异性反应。结论　已成功地获得了人OCIF活性结构域编码片段的克隆 ,并实现了其在大肠杆菌中的融合表达。表达产物对体外培养破骨细胞的骨吸收功能有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 破骨细胞 大肠杆菌 融合表达 阳性 抑制因子 活性结构 肝细胞系 片段 诱导表达 SDS-PAGE分析

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远源链球菌可能与细胞分裂相关的新基因ftsK的克隆与序列分析

20

作者 苏凌云 吴补领 +2 位作者 李福洋 张文红 范继红 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期379-382,共4页

目的　克隆并分析远源链球菌(S .sobrinus)可能与细胞分裂相关的新基因ftsK。方法采用“genomewalkingsystem(基因组步移系统)”克隆远源链球菌可能与细胞分裂相关的新基因ftsK ,与GenBank进行同源性分析,并用蛋白质分析软件分析ftsK的... 目的　克隆并分析远源链球菌(S .sobrinus)可能与细胞分裂相关的新基因ftsK。方法采用“genomewalkingsystem(基因组步移系统)”克隆远源链球菌可能与细胞分裂相关的新基因ftsK ,与GenBank进行同源性分析,并用蛋白质分析软件分析ftsK的氨基酸序列。结果　所克隆的新基因由2 10 0个碱基组成,编码6 99个氨基酸。用GOR4软件对S .sobrinusftsK的二级结构预测,显示其主要由α螺旋和无规卷曲组成,另有小部分伸展线,但无β折叠,在其N末端有一跨膜区。对氨基酸序列进行保守区分析,氨基酸335～5 30序列具有ftsK SpoⅢE保守序列,同源性分析,除N末端2 2 6个氨基酸外,其余氨基酸序列与大肠杆菌细胞分裂蛋白FtsK的C末端2 3序列同源,2 17～6 35氨基酸与枯草杆菌SpoⅢE的C末端同源。结论　通过“基因组步移系统”克隆出的新基因可能与远源链球菌细胞分裂蛋白FtsK相关。 展开更多

关键词 远源链球菌 细胞分裂 ftsK基因 克隆 序列分析

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