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表皮生长因子样重复系列和盘状蛋白Ⅰ样结构域3对宫颈癌细胞增殖和迁移的作用研究 被引量:3
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作者 王慧娟 李杨杨 +5 位作者 郭炳轩 宋树言 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期498-502,共5页
目的 探讨表皮生长因子样重复系列和盘状蛋白I样结构域3(EDIL3)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞的增殖、迁移能力与上皮-间质转化的作用。方法 将SiHa、HeLa细胞分为2组:对照组(转染空质粒)和实验组(转染过表达EDIL3质粒)。用噻唑蓝(M... 目的 探讨表皮生长因子样重复系列和盘状蛋白I样结构域3(EDIL3)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞的增殖、迁移能力与上皮-间质转化的作用。方法 将SiHa、HeLa细胞分为2组:对照组(转染空质粒)和实验组(转染过表达EDIL3质粒)。用噻唑蓝(MTT)法和细胞划痕实验分别评估宫颈癌细胞的增殖和迁移能力;用蛋白质印迹法、实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定EDIL3和上皮-间质转化相关分子在细胞中的表达水平。结果 HaCaT、SiHa、HeLa、C33A细胞中EDIL3蛋白表达水平为0.86±0.08,0.59±0.10,0.40±0.02和0.45±0.07。SiHa对照组、SiHa实验组、HeLa对照组、HeLa实验组细胞96 h的增殖活性分别为3.86±0.44,4.69±0.44,3.39±0.37和4.69±1.28;划痕愈合率分别为0.21±0.02,0.29±0.02,0.32±0.01和0.43±0.04;钙黏蛋白E表达水平分别1.09±0.13,0.64±0.17,0.87±0.03和0.62±0.11;β-连环蛋白表达水平分别为0.28±0.06,0.45±0.02,0.67±0.02和0.89±0.07;波形蛋白表达水平分别为0.27±0.03,0.43±0.07,0.43±0.03和0.54±0.05;锌指转录因子表达水平分别为0.27±0.03,0.47±0.02,0.42±0.04和0.61±0.08。上述指标,同种细胞实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 EDIL3在宫颈癌中低表达,而过表达EDIL3可促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间质转化
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HPV16 E6-295T/G和E6-350T/G变异位点影响IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的研究
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作者 李杨杨 辛慧珍 +5 位作者 郭柄轩 王慧娟 宋树言 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期223-231,共9页
目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV23... 目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV230作为实验组,以NC-GV230作为对照组。通过免疫组织化学法、Western blot方法检测HPV16 E6295T/G、350T/G不同变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。通过IBM SPSS Statistics 26软件对实验结果进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义,免疫组织化学法定量采用image J软件进行阳性细胞计数。结果Western blot结果显示,免疫分子干扰素κ(Interferon Kappa,IFNκ)的表达,HPV16 E6-295G/350G变异组较HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组降低(P<0.01,P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的免疫分子主要组织相容性复合体I类(Major Histocompatibility Complex Class I,MHC-I)的表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的信号转导子和转录激活子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05,P<0.01)。变异组HPV16 E6-295G/350G与HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G变异组相比,干扰素调节因子9(Interferon Regulatory Factor 9,IRF9)表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论HPV16病毒E6蛋白质可以降低IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9的蛋白质表达水平,E6基因T295G/T350G变异降低这些分子的表达作用最强。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16 E6基因 基因变异 蛋白质表达
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宫颈癌细胞中RNA干扰SNX 10基因对细胞增殖和凋亡影响的研究 被引量:5
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作者 张春贺 付少伟 +5 位作者 王芳 王露月 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第6期728-733,共6页
目的探讨分拣蛋白SNX 10基因在宫颈癌组织及细胞中的表达水平及其与HPV感染的关系,探讨SNX 10基因对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用组织芯片法分析SNX10蛋白在正常宫颈及宫颈癌组织中表达情况。设计SNX 10基因的ShRNA干扰片段分... 目的探讨分拣蛋白SNX 10基因在宫颈癌组织及细胞中的表达水平及其与HPV感染的关系,探讨SNX 10基因对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用组织芯片法分析SNX10蛋白在正常宫颈及宫颈癌组织中表达情况。设计SNX 10基因的ShRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞和HeLa细胞,实验组包括:转染Sh-SNX10-303和Sh-SNX10-647的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。Western blot及qRT-PCR方法检测SNX 10基因在宫颈癌细胞中蛋白质及mRNA表达水平,通过第二代杂交俘获技术(hybrid capture system-2,HC-2)检测宫颈组织中HPV感染情况,CCK-8实验检测细胞增殖情况,流式细胞术分析干扰SNX 10基因表达后细胞凋亡率的变化。结果组织芯片实验发现宫颈癌组织细胞中,SNX10基因高表达,差异显著(P<0.05);其表达与HPV感染尚未发现明显关联(P>0.05);在干扰SNX10基因的表达之后,宫颈癌SiHa和HeLa细胞的增殖受到抑制,并且其凋亡率也升高(P<0.05)。结论SNX10基因对HPV感染没有影响,但在宫颈癌组织和细胞中高表达,SNX10基因可能作为一个靶标用于宫颈癌的预防和治疗。 展开更多
关键词 宫颈癌 SNX10基因 HPV shRNA干扰 增殖和凋亡
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基于生物信息学分析EDIL3基因在宫颈癌中的表达及临床意义
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作者 王慧娟 郭炳轩 +5 位作者 宋树言 李杨杨 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期93-99,共7页
目的探讨表皮生长因子样重复序列和盘状蛋白I样结构域3(EDIL3基因)在宫颈癌中表达及其对宫颈癌细胞SiHa、HeLa迁移的作用。方法运用GEPIA、UALCAN、OncoLnc数据库分析EDIL3基因mRNA在宫颈癌组织中的表达水平、基因启动子甲基化状态和预... 目的探讨表皮生长因子样重复序列和盘状蛋白I样结构域3(EDIL3基因)在宫颈癌中表达及其对宫颈癌细胞SiHa、HeLa迁移的作用。方法运用GEPIA、UALCAN、OncoLnc数据库分析EDIL3基因mRNA在宫颈癌组织中的表达水平、基因启动子甲基化状态和预后的意义;采用免疫组织化学染色、Western blot、qRT-PCR分别检测宫颈癌组织和细胞中EDIL3蛋白及EDIL3基因mRNA表达水平;构建EDIL3-pcDNA3.1过表达质粒,转染分为实验组(转染过表达EDIL3-pcDNA3.1质粒)和对照组NC(转染空质粒),transwell实验检测宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移。结果生物信息学数据库分析显示EDIL3基因mRNA在宫颈癌组织中低表达并且存在启动子高甲基化(P<0.05),在宫颈癌不同分期中EDIL3基因的表达无差异(P>0.05),EDIL3高表达与宫颈癌患者不良预后相关(P<0.05);免疫组织化学染色、Western blot、qRT-PCR与数据库分析结果一致,在宫颈癌组织和细胞中EDIL3基因均低表达(P<0.05),且其表达水平与HPV感染无明显相关性(P>0.05);Transwell实验显示过表达EDIL3后增强宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移能力(P<0.05)。结论EDIL3基因在宫颈癌组织和细胞中低表达并不受HPV感染的影响,而EDIL3高表达影响患者预后且促进宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移能力。 展开更多
关键词 宫颈癌 EDIL3基因 HPV 迁移
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HPV16 E6-295T/G、E7-647A/G多态性位点在子宫颈鳞状细胞癌中的分布及对IRF9的影响 被引量:1
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作者 郭柄轩 李杨杨 +5 位作者 王慧娟 宋树言 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期6-11,共6页
目的分析HPV16 E6-295T/G、E7-647A/G多态性位点在子宫颈鳞状细胞癌、CIN1中的分布及其在维吾尔族与汉族之间分布的特点,探讨其对IRF9表达的影响。方法运用TCGA数据库及GEPIA数据库分析子宫颈癌组织中IRF9的表达及其与子宫颈癌肿瘤分级... 目的分析HPV16 E6-295T/G、E7-647A/G多态性位点在子宫颈鳞状细胞癌、CIN1中的分布及其在维吾尔族与汉族之间分布的特点,探讨其对IRF9表达的影响。方法运用TCGA数据库及GEPIA数据库分析子宫颈癌组织中IRF9的表达及其与子宫颈癌肿瘤分级的关系;收集67例维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌标本、21例维吾尔族CIN1标本,68例汉族子宫颈鳞状细胞癌标本和28例汉族CIN1标本,从收集的标本中提取DNA,PCR扩增E6和E7基因,PCR产物纯化后测序。将HPV16感染阳性标本进行免疫组化检测。结果维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295T/G、E7-647A/G变异分别为31例(46.27%)和7例(10.45%),CIN1标本中变异均为7例(33.33%)。汉族子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295T/G、E7-647A/G变异分别为12例(17.65%)和37例(54.41%),CIN1变异分别为8例(28.57%)和13例(46.43%)。维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌中E6-295T/G的变异率高于汉族,汉族子宫颈鳞状细胞癌中E7-647A/G的变异率高于维吾尔族,差异有统计学意义(P<0.05)。CIN1标本中两民族间E6-295T/G和E7-647A/G的变异,差异无显著性(P>0.05)。免疫组化结果显示,IRF9在子宫颈鳞状细胞癌中的表达高于CIN1(P<0.05),子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295G/E7-647A变异组IRF9的表达高于E6-295T/E7-647G变异组和E6-295T/E7-647A未变异组(P<0.05)。E6-295T/E7-647G变异组与E6-295T/E7-647A未变异组的IRF9蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。结论维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌中HPV16 E6-295T/G变异高于汉族,汉族E7-647A/G变异高于维吾尔族。HPV16 E6-295T/G变异的子宫颈鳞状细胞癌组织中IRF9蛋白表达水平增高,可能在子宫颈癌的发生中起作用。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 鳞状细胞癌 HPV16 基因多态性 IRF9
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新疆维吾尔自治区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒16型E4和L2的遗传变异分析
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作者 程豪政 妥静 +5 位作者 董杨柳 王乐 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第11期1884-1889,共6页
目的探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)E4、L2基因变异及氨基酸变化,分析HPV16的进化特征。方法从医院收集40例HPV16感染阳性的宫颈脱落细胞样本和40例宫颈组织细胞样本,提取样本的病毒DNA,对40例宫颈脱落细胞的DNA进行HPV16 E4和L2 Sanger测... 目的探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)E4、L2基因变异及氨基酸变化,分析HPV16的进化特征。方法从医院收集40例HPV16感染阳性的宫颈脱落细胞样本和40例宫颈组织细胞样本,提取样本的病毒DNA,对40例宫颈脱落细胞的DNA进行HPV16 E4和L2 Sanger测序及对40例宫颈组织细胞DNA高通量测序,构建HPV16 E4和L2基因系统进化树,分析HPV16 E4和L2基因的变异特征。结果有72个HPV16 E4变异样本,10个核苷酸变异位点(4种错义变异和7种同义变异),74个HPV16 L2变异样本,40个核苷酸变异位点(23种错义变异和18种同义变异)。宫颈癌(CC)中T4177C、A4288C、A4654C变异频率明显高于非宫颈癌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论①新疆维吾尔自治区主要流行病毒株为欧洲株,少数为亚洲株。②HPV16 L2基因中T4177C、A4288C、A4654C在宫颈癌中的变异频率高于非宫颈癌,且G4181A与亚洲株相关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 基因变异 宫颈癌 E4和L2基因 单核苷酸多态性
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TCP11基因在宫颈癌中表达的意义 被引量:2
7
作者 王芳 王露月 +4 位作者 付少伟 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第1期93-99,共7页
目的探讨TCP11基因在宫颈癌组织和细胞中的表达水平以及与HPV感染、患者临床特征和预后之间的关系。方法运用UALCAN数据库及GEPIA数据库分析TCP11基因在宫颈癌中的表达及其与宫颈癌患者年龄和肿瘤分级的关系;运用The Human Protein Atla... 目的探讨TCP11基因在宫颈癌组织和细胞中的表达水平以及与HPV感染、患者临床特征和预后之间的关系。方法运用UALCAN数据库及GEPIA数据库分析TCP11基因在宫颈癌中的表达及其与宫颈癌患者年龄和肿瘤分级的关系;运用The Human Protein Atlas(HPA)数据库、UALCAN数据库及Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)数据库分析TCP11基因的表达与宫颈癌患者生存率的关系;运用UALCAN数据库分析在宫颈癌中TCP11基因启动子甲基化状态。运用组织芯片分析TCP11基因在正常宫颈及宫颈癌组织中表达水平。利用第二代杂交捕获技术(HC-2)检测所收集样本HPV感染情况。体外培养HaCaT细胞(一种永生化的上皮细胞)及宫颈癌SiHa、HeLa、C33A细胞,利用Western blot、qRT-PCR分别检测宫颈癌细胞中TCP11蛋白和mRNA表达水平。结果运用HPA、UALCAN、GEPIA数据库分析发现TCP11基因在宫颈癌组织中高表达,且与宫颈癌患者生存率显著相关(P<0.05);TCP11基因表达与宫颈癌患者的年龄及肿瘤分级无显著相关性(P>0.05)。组织芯片结果统计发现TCP11基因在宫颈癌组织中高表达(P<0.05)。与HaCaT细胞相比,TCP11蛋白和mRNA在宫颈癌SiHa、HeLa、C33A细胞系中均显著升高(P<0.05)。HC-2结果显示TCP11基因的表达可能不受HPV感染的影响(P>0.05)。结论 TCP11基因在宫颈癌组织及细胞中高表达,其表达水平与患者预后相关且可能不受HPV感染的影响。 展开更多
关键词 TCP11基因 宫颈癌 HPV 表达意义 预后
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WISP2基因在细胞核高表达对宫颈癌细胞增殖、迁移的影响 被引量:1
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作者 付少伟 王露月 +5 位作者 王芳 张春贺 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第2期236-243,共8页
目的 探讨宫颈癌组织和细胞中WISP2(Wnt-1 inducible secreted protein 2)基因的表达情况并分析WISP2基因是否与HPV感染有关,检测WISP2基因在细胞核中高表达对宫颈癌细胞增殖以及迁移的影响。方法 采用正常宫颈组织37例、CIN(宫颈上皮... 目的 探讨宫颈癌组织和细胞中WISP2(Wnt-1 inducible secreted protein 2)基因的表达情况并分析WISP2基因是否与HPV感染有关,检测WISP2基因在细胞核中高表达对宫颈癌细胞增殖以及迁移的影响。方法 采用正常宫颈组织37例、CIN(宫颈上皮内瘤变)组织27例及宫颈癌组织35例制作组织芯片,采用免疫组织化学染色(Immunohistochemical staining, IHC)对所收集样本中WISP2蛋白质表达情况进行分析。运用HC-2(第二代杂交俘获技术)检测所收集样本HPV(Human papillomavirus)感染情况。构建WISP2过表达质粒,实验组和对照组分别为过表达WISP2组和空质粒组(NC组)。Western blot实验和qRT-PCR实验分别检测目的基因在宫颈癌细胞中的表达水平;MTT实验和划痕实验分别对SiHa、HeLa细胞增殖能力以及迁移能力进行测定。结果 WISP2基因在宫颈癌细胞质与核内均有表达,且WISP2基因在CIN 3和宫颈癌组织的细胞质中低表达,在细胞核中高表达(P<0.05);WISP2基因表达与HPV感染具有相关性(P<0.05);WISP2基因在细胞核表达量升高后,细胞增殖、迁移能力均明显增强(P<0.05);WISP2基因细胞核中表达量的升高导致β-catenin、Vimentin、Slug蛋白质表达量升高,Claudin-1蛋白质表达量降低(P<0.05)。结论 WISP2在细胞核表达量增加对促进宫颈癌细胞增殖、迁移和EMT(Epithelial-mesenchymal transformation)的发生具有重要作用,WISP2基因细胞核中高表达可能是导致宫颈癌发生发展。 展开更多
关键词 WISP2基因 宫颈癌 HPV 增殖和迁移 EMT
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真核延伸因子-1A2基因在宫颈癌侵袭和迁移中的作用研究 被引量:1
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作者 靳馥源 潘泽民 +6 位作者 辛慧珍 者湘漪 张春贺 李洪涛 潘贞贞 李冬妹 郑威楠 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第3期353-358,共6页
目的探讨真核延伸因子-1A2(eEF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法设计eEF1A2基因的siRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞、HeLa细胞和C33A细胞,实验组包括:转染Si-eEF1A2-1和SieEF1A2-2的细胞组,未转染的细胞和非干扰... 目的探讨真核延伸因子-1A2(eEF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法设计eEF1A2基因的siRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞、HeLa细胞和C33A细胞,实验组包括:转染Si-eEF1A2-1和SieEF1A2-2的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。采用Western blot方法检测eEF1A2和E-cadherin在宫颈癌细胞中蛋白质表达水平,通过划痕实验和基质胶包被transwell实验分析细胞迁移能力,通过CCK-8实验和平板克隆实验检测细胞增殖。结果宫颈癌细胞中,siRNA干扰的细胞与对照组相比eEF1A2蛋白质表达水平降低,E-cadherin蛋白质表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验si-eEF1A2转染的细胞与对照组相比较,愈合间隙宽,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移实验,RNA干扰的细胞与对照组相比,穿过小室基底膜的细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);si-eEF1A2干扰的细胞CCK8增殖实验、细胞克隆形成实验中可以抑制宫颈癌细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。结论降低宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞eEF1A2基因表达水平,可以抑制癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 宫颈癌 eEF1A2基因 SIRNA干扰 侵袭 迁移
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新疆地区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒16型E1、E2的遗传变异分析
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作者 王露月 王芳 +6 位作者 付少伟 张春贺 刘依萌 者湘漪 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第6期741-747,共7页
目的新疆是宫颈癌高发的地区之一,人乳头瘤病毒的基因变异可能会增加其感染人体的风险并增强该病毒介导的免疫逃逸能力,HPV(Human Papillomavirus)16 E1、E2是病毒在转录及复制过程中的重要蛋白质,E1、E2核苷酸位点的突变可能导致蛋白... 目的新疆是宫颈癌高发的地区之一,人乳头瘤病毒的基因变异可能会增加其感染人体的风险并增强该病毒介导的免疫逃逸能力,HPV(Human Papillomavirus)16 E1、E2是病毒在转录及复制过程中的重要蛋白质,E1、E2核苷酸位点的突变可能导致蛋白质的改变,从而影响宫颈癌的发生发展。方法收集80例HPV16感染阳性宫颈粘液样本,提取DNA后进行PCR扩增,将纯化后的PCR产物进行一代测序,并对E1、E2基因进行进化学分析,了解HPV16在新疆地区的基因多态性,统计病理信息分析相关突变位点与宫颈癌的进展关系。结果80个HPV16阳性样本中,E1发生突变的样本有34个,发生核苷酸突变的位点有25个,(11个错义突变,14个同义突变)。HPV16 E2发生突变的样本有53个,发生核苷酸突变的位点有14个,(11个错义突变,3个同义突变)。在HPV16 E1上常见的核苷酸突变位点为A978G(14/80)、G1473A(10/80)所对应的氨基酸改变为I326M、M491I,在HPV16 E2上常见的核苷酸突变位点为C2295A(14/80)、C2546T(20/80),所对应的氨基酸改变为T135K、P219S。结论由系统发育树结果可看出有77个样本属于欧洲株,3个样本属于亚洲株。没有发现非洲株和北美/亚裔株。 展开更多
关键词 宫颈脱落细胞 人乳头瘤病毒 E1和E2基因 基因多态性 一代测序
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