目的:通过观察阿魏酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症及自噬水平的影响,探讨阿魏酸对糖尿病肾病的保护作用及其可能机制。方法:将SV40 MES 13细胞进行传代培养,随机分为:正常组(Control,5.6 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(Man,30 mmol/L甘露...目的:通过观察阿魏酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症及自噬水平的影响,探讨阿魏酸对糖尿病肾病的保护作用及其可能机制。方法:将SV40 MES 13细胞进行传代培养,随机分为:正常组(Control,5.6 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(Man,30 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,30 mmol/L葡萄糖)、阿魏酸组(FA,30 mmol/L葡萄糖+12.5、25、50、100、200μmol/L阿魏酸)。采用MTT法观察各组系膜细胞增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白介素-1β(IL-1β)的含量;免疫印迹法(Western blot)检测系膜细胞NLRP3、IL-1β、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62蛋白的表达水平。结果:①与Control组相比,HG组肾小球系膜细胞增殖活力显著升高(P<0.01),与HG组相比,不同浓度FA组的肾小球系膜细胞增殖活力则有不同程度的下降(P<0.05~0.01);②与Control组相比,HG组细胞上清液中TNF-α、MCP-1和IL-1β含量均显著增加(P<0.01),与HG组相比,FA组TNF-α、MCP-1和IL-1β含量均显著减少(P<0.01);③与Control组相比,HG组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ比值减小,p62、NLRP3和IL-1β蛋白表达则均显著升高(P<0.01),与HG组比较,FA组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ比值明显增大(P<0.05),p62、NLRP3和IL-1β蛋白水平均显著降低(P<0.01)。结论:FA可抑制高糖诱导的SV40 MES 13细胞异常增殖,FA可通过抑制炎症、提高自噬水平而保护系膜细胞。展开更多
文摘目的:通过观察阿魏酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎症及自噬水平的影响,探讨阿魏酸对糖尿病肾病的保护作用及其可能机制。方法:将SV40 MES 13细胞进行传代培养,随机分为:正常组(Control,5.6 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(Man,30 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,30 mmol/L葡萄糖)、阿魏酸组(FA,30 mmol/L葡萄糖+12.5、25、50、100、200μmol/L阿魏酸)。采用MTT法观察各组系膜细胞增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白介素-1β(IL-1β)的含量;免疫印迹法(Western blot)检测系膜细胞NLRP3、IL-1β、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62蛋白的表达水平。结果:①与Control组相比,HG组肾小球系膜细胞增殖活力显著升高(P<0.01),与HG组相比,不同浓度FA组的肾小球系膜细胞增殖活力则有不同程度的下降(P<0.05~0.01);②与Control组相比,HG组细胞上清液中TNF-α、MCP-1和IL-1β含量均显著增加(P<0.01),与HG组相比,FA组TNF-α、MCP-1和IL-1β含量均显著减少(P<0.01);③与Control组相比,HG组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ比值减小,p62、NLRP3和IL-1β蛋白表达则均显著升高(P<0.01),与HG组比较,FA组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ比值明显增大(P<0.05),p62、NLRP3和IL-1β蛋白水平均显著降低(P<0.01)。结论:FA可抑制高糖诱导的SV40 MES 13细胞异常增殖,FA可通过抑制炎症、提高自噬水平而保护系膜细胞。
