低氧诱导因子-1α在喹啉酸诱导的PC12细胞损伤中的作用 被引量：3

1

作者 李永金 杨开勇 +3 位作者 张谊 陈月芳 端礼荣 黄晓佳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期493-499,共7页

目的探讨低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸(2.5,5和10mmol·L-1)处理PC12细胞24 h诱导细胞损伤,采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢... 目的探讨低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸(2.5,5和10mmol·L-1)处理PC12细胞24 h诱导细胞损伤,采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度,采用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞内氧自由基水平,Hoechst 33258单荧光染色法观察细胞凋亡,免疫荧光染色法检测HIF-1α在细胞内的表达,免疫印迹法检测细胞HIF-1α、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated-Akt,pAkt)、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果喹啉酸可剂量依赖性地诱导PC12细胞损伤,导致细胞内氧自由基增多和细胞凋亡。同时,喹啉酸可使PC12细胞HIF-1α表达上调并聚集于核内;p-Akt表达增加,Bax/Bcl-2表达比例增加。结论 HIF-1α和Akt介导了喹啉酸诱导PC12的细胞凋亡;此外,氧化应激过程也可能参与了细胞损伤。 展开更多

关键词 喹啉酸 PC12细胞 细胞损伤 细胞凋亡 HIF-1Α 信号通路 氧化应激

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缺氧诱导因子与炎症及肿瘤的关系 被引量：13

2

作者 张芸 张崇高 许化溪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期17-19,共3页

局部微环境缺氧是炎症和恶性肿瘤的共同特征。缺氧使细胞触发适应性反应导致缺氧诱导因子(HIF)过度表达。该文在扼要叙述其结构与功能的基础上,探讨HIF与炎症和肿瘤的关系。

关键词 缺氧诱导因子 炎症 肿瘤

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mGluR5拮抗剂SIB-1893逆转6-OHDA抑制星形胶质细胞摄取谷氨酸的作用 被引量：5

3

作者 张芸 丁建花 胡刚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第1期25-28,共4页

目的 :研究亲代谢型谷氨酸受体 5 (mGluR5 )拮抗剂 (E) 2 甲基 6 (2 苯乙烯 )嘧啶 (SIB 1893)及6 羟基多巴胺 (6 OHDA)对星形胶质细胞摄取谷氨酸功能的影响。方法 :取新生大鼠脑星形胶质细胞作原代培养 ,根据 [3 H]标记的D ,L ... 目的 :研究亲代谢型谷氨酸受体 5 (mGluR5 )拮抗剂 (E) 2 甲基 6 (2 苯乙烯 )嘧啶 (SIB 1893)及6 羟基多巴胺 (6 OHDA)对星形胶质细胞摄取谷氨酸功能的影响。方法 :取新生大鼠脑星形胶质细胞作原代培养 ,根据 [3 H]标记的D ,L 谷氨酸摄入量判断细胞的谷氨酸摄取功能。应用高效液相色谱法(HPLC)与荧光检测器联用的方法检测培养液中的谷氨酸水平 ;乳酸脱氢酶 (LDH)释放法测定细胞活力。结果 :6 OHDA呈浓度依赖性抑制星形胶质细胞谷氨酸摄取功能、降低细胞活力 ,但不诱导细胞释放谷氨酸 ;SIB 1893不影响正常星形胶质细胞的谷氨酸摄取量 ,但可以增加 6 OHDA损伤组的谷氨酸摄取量。结论 :6 OHDA的神经损伤机制可能与其抑制星形胶质细胞谷氨酸摄取功能有关 ,SIB 1893则能逆转 6 OHDA引起的谷氨酸摄取抑制效应 。 展开更多

关键词 (E)-2-甲基-6-(2-苯乙烯)嘧啶 6-羟基多巴胺 星形胶质细胞 谷氨酸 摄取 细胞活力

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大鼠脑皮层星形胶质细胞培养与鉴定 被引量：6

4

作者 张芸 张志坚 +2 位作者 端礼荣 杨勇 许化溪 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2006年第6期493-495,499,共4页

目的:介绍一种新的脑组织星形胶质细胞培养方法,为进一步研究奠定基础。方法:常规分离纯化星形胶质细胞,将其低密度种植,维持在含10%新生牛血清DMEM培养基中培养,并在长时期内不给予更换或补加培养液。利用GFAP-FITC免疫荧光法对所获细... 目的:介绍一种新的脑组织星形胶质细胞培养方法,为进一步研究奠定基础。方法:常规分离纯化星形胶质细胞,将其低密度种植,维持在含10%新生牛血清DMEM培养基中培养,并在长时期内不给予更换或补加培养液。利用GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。结果:经原代及传代培养,获得大量几乎为单一种类细胞,其特点为细胞突起细长、胞体明显缩小、形态多样,最后细胞突起之间相互连接形成星形胶质细胞网络,并在相当长的时间内保持不变。GFAP-FITC免疫荧光染色为强阳性。结论:在限制细胞种植密度和限制给予培养液的培养条件下星形胶质细胞的体外形态发育与在体的情形基本一致,提示该细胞培养方法可能有助于研究中枢神经系统中星形胶质细胞的生理功能。 展开更多

关键词 星形胶质细胞 细胞培养 神经胶质原纤维酸性蛋白 大鼠

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Seminar教学法在医学留学生药理学教学中的实践与体会 被引量：6

5

作者 黄晓佳 李永金 +1 位作者 许潇 李静 《基础医学教育》 2016年第1期77-79,共3页

临床医学专业留学生占据了来华海外留学生的多数,而传统讲授教学模式对留学生学习的主动性促进能力不足,教学效果一般。文章旨在探讨在药理学教学过程中如何合理应用Seminar教学法,总结教学体会,激发学生学习兴趣,提高教学质量。

关键词 药理学 SEMINAR教学法 留学生教育

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HIF-1α、ROCK-2、FoxM1在醋酸铅诱导PC12细胞损伤中的表达变化 被引量：4

6

作者 李永金 张谊 +5 位作者 杨开勇 席可 李少邱 朱春雪 陈月芳 黄晓佳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1562-1568,共7页

目的探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶-2(Rho associated coiled coil forming protein kinase-2,ROCK-2)、叉头蛋白M1(forkhead box protein M1,Fox M1)在醋酸铅[Pb(Ac)_2]诱导... 目的探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶-2(Rho associated coiled coil forming protein kinase-2,ROCK-2)、叉头蛋白M1(forkhead box protein M1,Fox M1)在醋酸铅[Pb(Ac)_2]诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的表达和意义。方法将PC12细胞暴露于不同浓度的Pb(Ac)_2(100、200、400μmol·L^(-1))24 h以诱导细胞发生损伤。采用噻唑蓝比色法检测细胞的存活率,倒置显微镜观察细胞形态的变化,乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度,采用试剂盒检测丙二醛(malondialdehvde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平,Hoechst 33342单荧光染色法观察细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞HIF-1α、ROCK-2、Fox M1、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia,Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果 MTT实验显示Pb(Ac)_2对PC12细胞具有明显抑制作用并呈剂量依赖性,与对照组相比,Pb(Ac)_2可增加细胞内LDH漏出率,升高MDA含量,降低SOD含量,诱导细胞发生凋亡。此外,Pb(Ac)_2上调细胞HIF-1α、ROCK-2的表达,下调Fox M1的表达,提高Bax/Bcl-2的表达比例。结论 Pb(Ac)_2诱导PC12细胞发生凋亡可能与HIF-1α、ROCK-2、FoxM 1的表达以及自由基损伤有关。 展开更多

关键词 醋酸铅 PC12细胞 细胞损伤 HIF-1Α ROCK-2 FOXM1

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细胞对缺氧的感知及其生物学意义 被引量：3

7

作者 张崇高 曹茄柽 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2006年第1期82-86,89,共6页

关键词 缺氧 缺氧诱导因子 降解 稳定性 癌症治疗靶

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大学生科研立项完成模式的调查及探讨 被引量：3

8

作者 黄晓佳 李静 +1 位作者 封云 李永金 《基础医学教育》 2016年第6期509-511,共3页

大学生科研立项是江苏大学面向在读大学生所设置的一项科研训练项目,目的是使高年级大学生及早接触科学研究,学习其方法和思维方式。通过对大学生完成科研立项模式的调查,发现小课题组模式与大课题组模式均能提高学生科研创新能力,但对... 大学生科研立项是江苏大学面向在读大学生所设置的一项科研训练项目,目的是使高年级大学生及早接触科学研究,学习其方法和思维方式。通过对大学生完成科研立项模式的调查,发现小课题组模式与大课题组模式均能提高学生科研创新能力,但对于学生的能力培养和思维方式训练效果不同,表明大学生科研训练的不同完成模式具有不同的教育效果和训练意义。 展开更多

关键词 大学生科研立项 能力培养 思维方式训练

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醋酸铅暴露对PC12细胞凋亡与自噬的影响及可能机制

9

作者 张谊 王立晖 +2 位作者 陈月芳 李永金 柳浦青 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期774-780,共7页

目的探讨醋酸铅〔Pb(Ac)_(2)〕暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡与自噬的影响及相关分子机制。方法体外培养的PC12细胞用Pb(Ac)_(2)0(细胞对照),100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(L... 目的探讨醋酸铅〔Pb(Ac)_(2)〕暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡与自噬的影响及相关分子机制。方法体外培养的PC12细胞用Pb(Ac)_(2)0(细胞对照),100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH含量,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)试剂盒检测细胞自噬,免疫荧光法观察Bcl-2相互作用蛋白1(Beclin1)在细胞内的表达,Western印迹法检测细胞内自噬相关蛋白沉默信息调节因子1(Sirt1)、叉头框蛋白转录因子3a(FoxO3a)、叉头蛋白M1(FoxM1),Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)以及P62蛋白表达。结果与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,PC12细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞外液LDH含量升高(P<0.05,P<0.01)。AO/EB染色结果显示,随着Pb(Ac)_(2)浓度的提高,PC12细胞颜色逐渐加深为橙红色,出现明显的凋亡现象;与细胞对照组相比,PC12细胞凋亡率随Pb(Ac)_(2)浓度的提高而显著增加(P<0.01),PC12细胞内自噬体数量增加(P<0.01)。免疫荧光结果显示,Pb(Ac)_(2)暴露后,PC12细胞胞质内Beclin1呈现大量点状聚集且荧光强度加强,表明细胞发生了自噬。Western印迹法结果显示,与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)各浓度组Sirt1,FoxO3a和Beclin1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加(P<0.05,P<0.01),FoxM1和P62蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论Pb(Ac)_(2)暴露可诱导PC12细胞发生凋亡与自噬,其机制可能与Sirt1/FoxO3a信号通路激活有关。 展开更多

关键词 醋酸铅 PC12细胞 细胞凋亡 细胞自噬 Sirt1/FoxO3a信号通路

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醋酸铅对PC12细胞的增殖与凋亡研究 被引量：1

10

作者 张谊 欧玉龙 +2 位作者 王惠霞 陈月芳 李永金 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1214-1217,共4页

目的探讨醋酸铅(Pb(Ac)2)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的增殖与凋亡中低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)与Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶(rho associated coiled coil forming protein kinase, ROCK)信号通路的关... 目的探讨醋酸铅(Pb(Ac)2)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的增殖与凋亡中低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)与Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶(rho associated coiled coil forming protein kinase, ROCK)信号通路的关系以及潜在的作用机制。方法 (1)将体外培养的PC12细胞分为对照组和实验组。对照组加入含血清的培养基,低、中、高剂量实验组加入100,200,400μmol·L-1的Pb(Ac)2染毒,用噻唑蓝还原法测定药物对细胞增殖率的影响,以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)漏出率试剂盒检测细胞损伤程度,用DCFH-DA探针染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平,用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测细胞内HIF-1α、 ROCK-1、ROCK-2、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)以及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein, Bax)的蛋白表达。(2)采用siRNA技术沉默PC12细胞HIF-1α基因技术,将细胞分为对照组、实验组、阴性对照组、干扰组,观察细胞中HIF-1α、ROCK-1,ROCK-2蛋白表达水平的变化。结果随着Pb(Ac)2剂量的增大,药物对PC12细胞的损伤作用加深。对照组和高剂量实验组的存活率分别为(100.00±3.22)%,(47.21±4.98)%,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,中、高2个剂量实验组细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.01),表明Pb(Ac)2诱导细胞凋亡。Pb(Ac)2可上调细胞内HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Bax/Bcl-2的蛋白表达比例(均P<0.01)。当采用小RNA干扰HIF-1α后,发现醋酸铅对PC12细胞损伤的程度降低,HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2的蛋白表达水平下降(均P<0.01)。结论 Pb(Ac)2诱导PC12细胞发生凋亡可能与HIF-1α和ROCK信号通路的表达以及自由基损伤有关。 展开更多

关键词 醋酸铅 PC12细胞 细胞凋亡 缺氧诱导因子-1Α ROCK信号通路

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Akt/HIF-1α信号通路在二氧化硒诱导PC12细胞损伤中的作用 被引量：2

11

作者 李永金 谢简明 +3 位作者 张谊 杨开勇 陈月芳 黄晓佳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第11期1422-1429,共8页

该文主要探讨Akt/HIF-1α(hypoxia inducible factor-1α)信号通路在二氧化硒(Se O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。将PC12细胞暴露于不同浓度的Se O2(40、80、160μmol/L)24 h以诱导细胞发生损伤。采用噻唑蓝还原法... 该文主要探讨Akt/HIF-1α(hypoxia inducible factor-1α)信号通路在二氧化硒(Se O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。将PC12细胞暴露于不同浓度的Se O2(40、80、160μmol/L)24 h以诱导细胞发生损伤。采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度,倒置显微镜观察细胞形态的变化,用丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测细胞内活性氧类活性氧类(reactive oxygen species,ROS)水平,Hoechst 33342单荧光染色法观察细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞HIF-1α、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、PI3k、p53和Caspase-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3)的表达。结果显示,二氧化硒可呈剂量依赖性地诱导PC12细胞损伤,导致细胞内ROS增多和细胞凋亡,引起细胞皱缩,轴突变短。p-Akt、HIF-1α、p53、Caspase-3表达上调,Bax/Bcl-2表达比例显著增加。由此说明,二氧化硒诱导PC12细胞损伤,导致细胞凋亡,与其激活细胞Akt/HIF-1α信号通路,进而促进p53、Bax/Bcl-2、Caspase-3的表达及胞内ROS增加有关。 展开更多

关键词 二氧化硒 PC12细胞 细胞凋亡 HIF-1Α 信号通路

原文传递

布替萘芬霜剂局部给药对家兔慢性毒性实验研究 被引量：1

12

作者 李永金 陈素仙 +1 位作者 李静 张崇高 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2002年第3期220-222,共3页

目的 :观察布替萘芬霜剂长期大剂量皮肤局部使用对家兔的慢性毒性作用。方法 :将 2 4只家兔随机分成 4组 :对照组、布替萘芬高 (2 0 % )、中 (10 % )、低 (5 % )剂量组 ,连续皮肤局部使用 1个月后 ,进行全身情况、血液学、血液生化、组... 目的 :观察布替萘芬霜剂长期大剂量皮肤局部使用对家兔的慢性毒性作用。方法 :将 2 4只家兔随机分成 4组 :对照组、布替萘芬高 (2 0 % )、中 (10 % )、低 (5 % )剂量组 ,连续皮肤局部使用 1个月后 ,进行全身情况、血液学、血液生化、组织学检查。结果 :除敷药的局部皮肤有些异常外 ,实验组家兔全身情况、血液学参数、血液生化指标、组织学检查与对照组相比均无明显差异。结论 :布替萘芬局部给药安全 ,临床应用可靠。 展开更多

关键词 实验研究 布替萘芬 慢性毒性 家兔 局部给药

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Toll样受体8激动剂在树突状细胞抗肿瘤免疫治疗中的研究进展

13

作者 张芸 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1554-1557,共4页

树突状细胞(DC)作为功能最强大的专职抗原提呈细胞,在诱导机体产生抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)中发挥重要作用。因此,现在的研究聚焦于使用免疫刺激性配体以增强DC在肿瘤中的抗原提呈功能,促进Th1型细胞免疫。由于小分子Toll样受体8(T... 树突状细胞(DC)作为功能最强大的专职抗原提呈细胞,在诱导机体产生抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)中发挥重要作用。因此,现在的研究聚焦于使用免疫刺激性配体以增强DC在肿瘤中的抗原提呈功能,促进Th1型细胞免疫。由于小分子Toll样受体8(TLR8)激动剂直接激活DC、增强DC抗原提呈功能和细胞免疫应答,特别是Th1细胞应答。因此,TLR8激动剂已经成为抗肿瘤免疫调节药物或免疫佐剂的研究热点。本文在总结TLR8激动剂的结构和免疫调节作用的基础上,重点阐明TLR8激动剂增强DC免疫原性的机制,以及TLR8激动剂用于制备新一代DC疫苗的研究进展,探讨TLR8激动剂作为免疫刺激性配体在肿瘤免疫治疗中的临床应用前景。 展开更多

关键词 Toll样受体8(TLR8) 激动剂 树突状细胞(DC) 肿瘤 免疫治疗 综述

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麋鹿角醇提液对衰老小鼠行为及免疫功能的影响 被引量：13

14

作者 杨朝晔 秦红兵 +1 位作者 成海龙 朱清 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期221-225,共5页

目的:观察麋鹿角醇提液对衰老小鼠行为以及免疫功能的影响。方法:取ICR小鼠54只,雌雄兼用,随机分成4组:正常对照组(NG),模型对照组(MG),低剂量给药组(LG,2g.kg-1.d-1),高剂量给药组(HG,4g.kg-1.d-1)。用D-半乳糖(D-gal)按120mg.kg-1.d-... 目的:观察麋鹿角醇提液对衰老小鼠行为以及免疫功能的影响。方法:取ICR小鼠54只,雌雄兼用,随机分成4组:正常对照组(NG),模型对照组(MG),低剂量给药组(LG,2g.kg-1.d-1),高剂量给药组(HG,4g.kg-1.d-1)。用D-半乳糖(D-gal)按120mg.kg-1.d-1背部皮下注射,造成亚急性衰老模型。造模同时,低剂量组和高剂量组分别给予相应浓度的麋鹿角醇提液。6周后,对各组小鼠行Y-迷宫行为学测试;采用单向琼脂扩散法,测定各组小鼠血清IgG水平;使用MTT比色法测定小鼠脾淋巴细胞转化刺激指数;ELISA法检测血清中细胞因子IL-2,IFN-γ的浓度。结果:衰老小鼠记忆功能和免疫功能明显下降,麋鹿角醇提液能显著提高衰老小鼠记忆功能,增加IgG水平;增加脾淋巴细胞转化刺激指数;升高血清中IL-2和IFN-γ的浓度。结论:麋鹿角醇提液可以改善衰老小鼠的行为学表现,增强其免疫功能以延缓衰老进程。 展开更多

关键词 麋鹿角 衰老 D-半乳糖 行为 免疫功能

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