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H9可能是人类下次流感大流行的亚型 被引量：6
1
作者 徐克敏 李康生 《国外医学（微生物学分册）》 2003年第2期7-9,共3页
甲型流感病毒HA发生抗原性转换是流感世界性大流行产生的原因。20世纪人类共发生4次流感世界性大流行。自1968年香港流感及1977年俄国流感之后,距今已有二三十年人类没有暴发过流感世界性大流行。在香港禽H5N1及H9N2感染人之后,H9亚型... 甲型流感病毒HA发生抗原性转换是流感世界性大流行产生的原因。20世纪人类共发生4次流感世界性大流行。自1968年香港流感及1977年俄国流感之后,距今已有二三十年人类没有暴发过流感世界性大流行。在香港禽H5N1及H9N2感染人之后,H9亚型流感病毒的研究已引起了流感学界的高度重视。本文综述了近年来H9的研究进展以及H9可能与人类下次流感大流行的关系。 展开更多
关键词 H9 流感病毒 亚型 分布 表面糖蛋白特性
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高致病性禽流感病毒H5N1中和抗体的单链抗体构建与活性鉴定 被引量：3
2
作者 方钟 罗文新 +5 位作者 王明桥 陈瑛炜 张军 陈鸿霖 管轶 夏宁邵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期292-296,共5页
在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实... 在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实验及中和实验检测其活性。结果在针对3株病毒的血凝抑制实验中,10F7scFv蛋白对其中2株H5N1病毒均显示出结合活性,而对H9毒株没有反应。在针对7株H5N1病毒的中和实验中,10F7scFv对5株病毒具有较好的中和能力。H5N1广谱中和抗体10F7的单链抗体构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 高致病毒性禽流感病毒 单链抗体 血凝抑制 中和实验
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华南流感病毒NS1基因特性研究 被引量：8
3
作者 张志珍 段炼 李康生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期237-243,共7页
为了解H9N2和H5N1亚型流行性感冒病毒株的NS1基因特性 ,采用RT PCR方法测定了 12株 2 0 0 0～2 0 0 3年间在华南地区分离的禽流感病毒株的NS1基因核苷酸序列 .测序显示 6株H9N2亚型流感病毒NS1基因开放阅读框 (ORF)长 6 5 4bp ,编码 2 1... 为了解H9N2和H5N1亚型流行性感冒病毒株的NS1基因特性 ,采用RT PCR方法测定了 12株 2 0 0 0～2 0 0 3年间在华南地区分离的禽流感病毒株的NS1基因核苷酸序列 .测序显示 6株H9N2亚型流感病毒NS1基因开放阅读框 (ORF)长 6 5 4bp ,编码 2 17个氨基酸 .6株H5N1亚型毒株NS1基因ORF长 6 78bp ,编码 2 2 5个氨基酸 .核苷酸和氨基酸同源性分析表明 ,同一亚型分离株之间有很高的同源性 ,而不同亚型的H9N2和H5N1毒株之间存在较大差异 .BLAST分析表明 ,H5N1和H9N2亚型流感病毒分离株的NS1基因分别与近两年从香港特区和华南地区的鸭中分离的毒株A/Duck/HongKong/ 6 4 6 3/ 0 1(H5N1)、A/Duck/Shantou/ 2 14 3/ 0 1(H9N2 )有很高的亲缘关系 .该研究结果为进一步进行NS1功能研究奠定了基础 . 展开更多
关键词 流行性感冒病毒 NSl基因 序列分析 生物信息学 华南地区
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免疫荧光法检测非典型肺炎患者血清抗冠状病毒抗体 被引量：1
4
作者 许少明 王嘉 +5 位作者 徐克敏 林秀辉 蔡应木 侯乐声 管轶 李康生 《汕头大学医学院学报》 2003年第3期129-131,F001,共4页
目的 :检测非典型肺炎患者血清中抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊非典型肺炎。方法 :间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果 :3例临床诊断非典型肺炎患者血清内有特异性抗冠状病毒抗体 ,且... 目的 :检测非典型肺炎患者血清中抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊非典型肺炎。方法 :间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果 :3例临床诊断非典型肺炎患者血清内有特异性抗冠状病毒抗体 ,且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高 4倍以上。结论 :用具有高度特异性的免疫荧光技术对怀疑感染非典型肺炎的患者进行血清学检测 。 展开更多
关键词 免疫荧光法 非典型肺炎 血清 抗冠状病毒抗体 AP 诊断 SARS
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冠状病毒感染细胞抗原片法检测SARS患者血清中特异性抗体
5
作者 许少明 王嘉 +4 位作者 徐克敏 林秀辉 蔡应木 管轶 李康生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期475-476,F004,共3页
目的 :检测SARS患者血清中特异性抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊SARS。方法 :用本次爆发SARS患者鼻腔抽吸液分离的冠状病毒感染新生恒河猴肾细胞 ,制备抗原片 ,用间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病... 目的 :检测SARS患者血清中特异性抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊SARS。方法 :用本次爆发SARS患者鼻腔抽吸液分离的冠状病毒感染新生恒河猴肾细胞 ,制备抗原片 ,用间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果 :汕头地区 7例SARS患者血清内均有特异性抗冠状病毒抗体 ,且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高 4倍以上。结论 :用冠状病毒感染细胞抗原片对怀疑感染SARS的患者血清进行特异性抗体检测 。 展开更多
关键词 严重急性呼吸道综合征 抗冠状病毒抗体 间接免疫荧光法
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用SPF莱亨鸡制备抗甲型流感病毒血清
6
作者 段炼 王利 +1 位作者 洪文珊 李康生 《汕头大学医学院学报》 2004年第4期216-217,共2页
目的 :制备甲型流感病毒的抗血清作为流感病毒亚型鉴定之用。方法 :用两株H1 1亚型流感病毒分别免疫成年、健康的SPF莱亨鸡 ,刺激其产生抗体。通过血凝抑制实验检测抗血清的抗体滴度。结果 :所有免疫SPF莱亨鸡都产生了抗H1 1亚型流感病... 目的 :制备甲型流感病毒的抗血清作为流感病毒亚型鉴定之用。方法 :用两株H1 1亚型流感病毒分别免疫成年、健康的SPF莱亨鸡 ,刺激其产生抗体。通过血凝抑制实验检测抗血清的抗体滴度。结果 :所有免疫SPF莱亨鸡都产生了抗H1 1亚型流感病毒的抗体 ,且血清抗体滴度差异较大。结论 :本实验所用方法简便 ,制备的抗体特异性强 ,产生的抗体可用于甲型流感病毒亚型鉴定。 展开更多
关键词 亚型 甲型流感病毒 抗体特异性 血清抗体滴度 SPF 抗血清 免疫 结论 产生 成年
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禽流感病毒的变异进化及其预防控制 被引量：4
7
作者 韦天彬 黄裔腾 李康生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期16-19,共4页
流感病毒属于正粘病毒科，为有包膜单链负股RNA病毒，其基因组由7或8个基因片段组成。流感病毒包膜上有两种重要的表面蛋白，血凝素（Hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（Neuramidinase，NA），尤其是HA分子，除了能够和宿主细胞表面的H... 流感病毒属于正粘病毒科，为有包膜单链负股RNA病毒，其基因组由7或8个基因片段组成。流感病毒包膜上有两种重要的表面蛋白，血凝素（Hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（Neuramidinase，NA），尤其是HA分子，除了能够和宿主细胞表面的HA受体特异性结合、介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合外，也是机体免疫系统识别和攻击的主要靶点。流感病毒根据其核蛋白（NP）和M1蛋白的差异，可分为甲、乙、丙（A／B／C）三型，其中甲型流感病毒根据HA和NA抗原性的差异又分为不同的亚型。 展开更多
关键词 禽流感病毒 预防控制 RNA病毒 宿主细胞膜 进化 变异 甲型流感病毒 表面蛋白 正粘病毒科 神经氨酸酶
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流感病毒ns1基因的克隆及其原核表达载体的构建 被引量：3
8
作者 张志珍 洪文珊 李康生 《中国病毒学》 CSCD 2004年第5期449-453,共5页
为了解H5N1亚型流感病毒株的ns1基因特性及其规模制备NS1蛋白,首先将病毒在鸡胚中传代,从收获的尿囊液中提取RNA,采用RT-PCR技术扩增流感病毒全长ns基因。测序显示H5N1亚型流感病毒NS1cDNA全长678bp,编码225个氨基酸。BLAST分析表明,Qa/... 为了解H5N1亚型流感病毒株的ns1基因特性及其规模制备NS1蛋白,首先将病毒在鸡胚中传代,从收获的尿囊液中提取RNA,采用RT-PCR技术扩增流感病毒全长ns基因。测序显示H5N1亚型流感病毒NS1cDNA全长678bp,编码225个氨基酸。BLAST分析表明,Qa/ST/852/01(H5N1)病毒株ns1基因与近年来从华南地区分离的禽H5N1毒株的ns1基因有很高的同源性。之后采用PCR方法扩增ns1基因的cDNA片段,将其克隆到pGEX-4T-3载体中,与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)基因融合,构建重组质粒pGEX-4T-3/NS1cDNA,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行诱导表达。SDS-PAGE和凝胶扫描分析,GST-NS1融合蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,并且以可溶形式存在,重组融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的28.5%,表达产物经亲和层析纯化后蛋白质纯度达96%以上。经免疫印记证实重组融合蛋白可以被GST特异性抗体所识别。该表达载体的构建为获得大量NS1蛋白进行功能研究及抗体制备提供了基础。 展开更多
关键词 流感病毒 nsl基因 序列分析:克隆 诱导表达
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