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医学微生物学自主设计性实验的组织实施与体会 被引量:9
1
作者 王丹敏 葛新 屈野 《医学理论与实践》 2005年第9期1111-1112,共2页
关键词 医学微生物学 自主设计性实验
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致肾盂肾炎大肠埃希菌毒力的研究 被引量:6
2
作者 高新蕾 陈锦英 +1 位作者 葛新 高鹏 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第7期617-620,I0003,共5页
目的了解致肾盂肾炎大肠埃希菌(UPEC)毒力因子的致病性,为研究UPEC的致病机制奠定基础。方法用PCR方法扩增41株UPEC菌株和40株健康人粪便分离的大肠埃希菌6种毒力因子基因。取24只雌性BALB/c小鼠,随机分为A、B、C 3组,A、B组分别用UPEC ... 目的了解致肾盂肾炎大肠埃希菌(UPEC)毒力因子的致病性,为研究UPEC的致病机制奠定基础。方法用PCR方法扩增41株UPEC菌株和40株健康人粪便分离的大肠埃希菌6种毒力因子基因。取24只雌性BALB/c小鼠,随机分为A、B、C 3组,A、B组分别用UPEC J96和E.coli K-12p678-54(无菌毛株)菌液经尿道逆行感染,C组为空白对照,经尿道注入无菌PBS。感染5d后比较3组小鼠尿液和肾脏菌落计数(RCD)以及肾脏组织病理学检查结果。结果PCR检测UPEC和健康人粪便分离大肠埃希菌6种毒力因子基因papC、fimH、hly、cnf1、aer和R049的检出率分别为100%和2.50%,53.66%和5.00%,63.41%和10.00%,34.15%和5.00%,60.98%和35.00%,40.00%和7.50%,差异均有统计学意义(P均<0.01)。A组(UPEC J96感染)小鼠尿液和肾组织培养均有细菌生长(细菌鉴定为papC阳性),菌落计数RCD值绝大多数>3+;B组(E.coli K-12p678-54感染)小鼠中有1只尿液和肾组织细菌培养阳性(细菌鉴定papC阴性),菌落计数为1+。C组(空白对照)小鼠尿道与肾脏均无细菌生长。A组与B组小鼠尿道和肾脏RCD均值(x±s)分别为4.25±0.707、5.75±1.669和0.125±0.354、0.125±0.354,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。病理检查A组有4只小鼠肾组织出现较为明显的炎症变化,B组肾组织未发现明显病变,C组肾组织结构清晰,无病理变化。结论 6种毒力因子与UPEC致病性相关,建立的UPEC感染小鼠模型对UPEC致病机制的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 尿路感染 致肾盂肾炎大肠埃希菌 毒力因子 动物模型
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白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶的诱导研究 被引量:4
3
作者 王丹敏 董小青 +1 位作者 龚海英 刘丽英 《武警医学》 CAS 2002年第6期341-343,共3页
目的 了解诱导白色念珠菌分泌酸性蛋白酶 (SAP)的条件。方法 分别用含不同氮源及不同起始pH的培养基摇瓶培养白色念珠菌WD 2 7菌株 ,定时取样用分光光度法检测胞外SAP活性和菌体生长量。结果 蛋白质、多肽类大分子氮源可诱导白色念... 目的 了解诱导白色念珠菌分泌酸性蛋白酶 (SAP)的条件。方法 分别用含不同氮源及不同起始pH的培养基摇瓶培养白色念珠菌WD 2 7菌株 ,定时取样用分光光度法检测胞外SAP活性和菌体生长量。结果 蛋白质、多肽类大分子氮源可诱导白色念珠菌分泌SAP ,氨基酸、尿素、铵盐等小分子、易代谢氮源可阻遏SAP分泌。当两大类氮源同时存在时酶分泌抑制程度取决于阻遏物的浓度。培养基起始pH为 3 0~ 6 0时白色念珠菌才可被诱导分泌SAP。 展开更多
关键词 白色念珠菌 酸性蛋白酶 诱导
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白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的纯化与性质 被引量:4
4
作者 王丹敏 刘丽英 +1 位作者 叶路 高磊 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期27-30,共4页
利用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephacel离子交换层析从白色念珠菌WD27培养液中提纯得到一种蛋白酶,纯化倍数为25.4,收率为5.2%。其活性可被抑胃肽特异抑制,初步鉴定该酶为天冬氨酸蛋白酶。该酶在酸性范围内有水解蛋白活性,最适作用pH为4.0... 利用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephacel离子交换层析从白色念珠菌WD27培养液中提纯得到一种蛋白酶,纯化倍数为25.4,收率为5.2%。其活性可被抑胃肽特异抑制,初步鉴定该酶为天冬氨酸蛋白酶。该酶在酸性范围内有水解蛋白活性,最适作用pH为4.0,最适温度为37℃。酶在pH5.0~6.0、45℃以下较稳定,该酶具有较广的底物作用范围,对牛血红蛋白最敏感。酶作用于牛血红蛋白的米氏常数Km为0.814mmol/L。 展开更多
关键词 分泌型天冬氨酸蛋白酶 致病性 毒力因子 白色念珠菌 纯化 性质
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从万古霉素抗性突变体中筛选碱性纤维素酶高产菌株 被引量:2
5
作者 王丹敏 宋桂经 《生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期15-16,共2页
以芽胞杆菌 X—6 为出发菌株,经甲基磺酸乙酯( E M S) 和紫外线( U V) 复合诱变,选育万古霉素抗性突变体。研究结果表明,抗药性突变株碱性羧甲基纤维素酶( C M Case) 产量提高的正变率和正变幅度明显高于非抗药... 以芽胞杆菌 X—6 为出发菌株,经甲基磺酸乙酯( E M S) 和紫外线( U V) 复合诱变,选育万古霉素抗性突变体。研究结果表明,抗药性突变株碱性羧甲基纤维素酶( C M Case) 产量提高的正变率和正变幅度明显高于非抗药性菌株。从抗性突变株中获得 E V23 菌株,其产酶活力比出发株 X—6 提高320 % ,酶活力达353u/ ml。 展开更多
关键词 诱变 万古霉素 抗性 突变体 碱性纤维素酶
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麻疹病毒的纯化及其在麻疹IgG EIA诊断试剂中的应用 被引量:3
6
作者 詹曦菁 秦晓勇 +1 位作者 刘丽英 孔健 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第4期618-621,共4页
目的:摸索纯化麻疹病毒的方法,并以其为包被抗原,制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂。方法:将L4株麻疹病毒液先后用超滤、PEG沉淀的方法进行浓缩,再分别用连续和不连续蔗糖密度梯度超速离心法进行纯化,比较不同方法纯化后的效果,最终建... 目的:摸索纯化麻疹病毒的方法,并以其为包被抗原,制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂。方法:将L4株麻疹病毒液先后用超滤、PEG沉淀的方法进行浓缩,再分别用连续和不连续蔗糖密度梯度超速离心法进行纯化,比较不同方法纯化后的效果,最终建立制备高纯度麻疹病毒包被抗原的方法,并在此基础上制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂。结果:用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心纯化后的麻疹病毒的比活性为775.76 HAU/mg,SDS-PAGE及Western-blot证明纯化产物的纯度符合要求,电镜结果显示纯化物中含大量麻疹病毒。以该纯化抗原制备的EIA检测试剂与血凝抑制实验(HI)相比,该试剂的灵敏度为99.46%,特异度为81.82%,一致性为97.58%。与SIGMA麻疹IgG EIA诊断试剂盒的一致率为95.12%。结论:采用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心的方法可制备满足麻疹IgG EIA诊断试剂要求的包被抗原。 展开更多
关键词 IA株麻疹病毒 酶联免疫(EIA) 包被抗原 蔗糖密度梯度超速离心
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尿道致病性大肠杆菌I型菌毛的研究进展 被引量:4
7
作者 杨东靖 葛新 李力 《中国慢性病预防与控制》 CAS 北大核心 2011年第1期101-103,共3页
泌尿道感染(Urinary tract infections,UTIs)是世界范围内严重的公共卫生问题。尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是引发UTIs的首要致病菌。I型菌毛是UPEC重要的毒力因子,在UPEC中分布广泛,介导其在泌尿道的粘... 泌尿道感染(Urinary tract infections,UTIs)是世界范围内严重的公共卫生问题。尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是引发UTIs的首要致病菌。I型菌毛是UPEC重要的毒力因子,在UPEC中分布广泛,介导其在泌尿道的粘附、侵入和定植。该文对UPECⅠ型菌毛的结构、装配和毒力机制进行综述。 展开更多
关键词 泌尿道感染 尿道致病性大肠杆菌 I型菌毛
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小鼠腹腔感染中白色念珠菌芽管及蛋白酶活性与其毒力的相关性研究 被引量:1
8
作者 董小青 王丹敏 +2 位作者 刘丽英 龚海英 张威 《武警医学院学报》 CAS 2002年第2期78-80,共3页
目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :40株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和α -淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别... 目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :40株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和α -淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别与受染动物血清中ALT、AM含量呈正相关 (rALT=0 . 893,rAM=0 . 80 1,P <0 . 0 1) ,菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)活力与血中ALT、AM水平也存在显著的正相关关系 (P <0 .0 1) ,且经SAP特异抑制剂处理过的受染小鼠其ALT活性显著降低 (P <0 . 0 1)。结论 展开更多
关键词 芽管 分泌型天冬氨酸蛋白酶 毒力
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熄风胶囊对癫痫小鼠皮质层神经元型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:2
9
作者 秦晓勇 詹曦菁 熊杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS 2008年第12期80-81,共2页
关键词 熄风胶囊 神经元型一氧化氮合酶 皮质层 NNOS 小鼠 小家鼠 癫痫 脑病
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口捷爽对口腔常见细菌的抑制作用
10
作者 张磊 朱铁梁 +3 位作者 张莉 吴健 董小青 王玉祥 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期172-173,共2页
目的:通过体外实验的方法验证口捷爽对细菌生长的抑制作用。方法:选用多种口腔常见细菌进行繁殖培养,用麦氏比浊管调节细菌液浓度,按照倍比稀释法,对口捷爽调节6个倍比浓度,另加一个原药液浓度阳性对照,一个菌液阴性对照,每个漱口液各8... 目的:通过体外实验的方法验证口捷爽对细菌生长的抑制作用。方法:选用多种口腔常见细菌进行繁殖培养,用麦氏比浊管调节细菌液浓度,按照倍比稀释法,对口捷爽调节6个倍比浓度,另加一个原药液浓度阳性对照,一个菌液阴性对照,每个漱口液各8支试管,检测漱口液的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:口捷爽对金葡菌、表葡菌、甲链、乙链的生长均有较强的抑制作用,MBC大都在1.25mg·mL-1左右,但对白色链球菌效果不明显。结论:口捷爽有较强的抑菌作用,但其抑菌杀灭作用并无选择性,长期应用可诱发微生态失衡,建议短期服用。 展开更多
关键词 口捷爽 漱口液 口腔菌 抑制作用
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主要病原念珠菌蛋白酶分泌水平的比较
11
作者 王丹敏 蒋书勤 叶路 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2001年第6期349-349,352,共2页
目的 :了解不同病原念珠菌蛋白酶分泌情况 ,探讨蛋白酶活性与菌种致病力的关系。方法 :采用牛血清白蛋白 (BSA)琼脂平板检测 7种 (共 2 86株 )念珠菌酸性蛋白酶的分泌 ;将菌株分别经摇瓶液体培养测定胞外蛋白水解活力。结果 :7种念珠菌... 目的 :了解不同病原念珠菌蛋白酶分泌情况 ,探讨蛋白酶活性与菌种致病力的关系。方法 :采用牛血清白蛋白 (BSA)琼脂平板检测 7种 (共 2 86株 )念珠菌酸性蛋白酶的分泌 ;将菌株分别经摇瓶液体培养测定胞外蛋白水解活力。结果 :7种念珠菌蛋白酶分泌水平的高低关系为 :白色念珠菌 >热带念珠菌 >近平滑念珠菌 >季也蒙念珠菌 >其他 3种念珠菌 ,与菌种致病力强弱关系基本一致 ;白色念珠菌、热带念珠菌菌株平均产酶能力是光滑念珠菌、乳淋念珠菌的 17.4~ 36 .3倍。各种念珠菌产生的蛋白酶均属天冬氨酸蛋白酶类。结论 :蛋白酶与念珠菌致病性关系密切。 展开更多
关键词 念珠菌 蛋白酶 分泌水平 致病性
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小鼠腹腔感染中白色念珠菌芽管及蛋白酶活性与其毒力的相关性研究 被引量:1
12
作者 王丹敏 董小青 +1 位作者 张威 屈野 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期147-149,共3页
目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :4 0株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (AL T)和α-淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别... 目的 :探讨白色念珠菌与腹膜炎发生相关的毒力因子。方法 :4 0株临床分离菌分别以腹腔接种方式感染小鼠进行毒力试验 ,以血清中丙氨酸氨基转移酶 (AL T)和α-淀粉酶 (AM)活力为表示菌株毒力的指标。结果 :白念菌体外测得的芽管长度分别与受染动物血清中 AL T、AM含量呈正相关 (r ALT=0 .893,r AM=0 .80 1,P<0 .0 1) ,菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)活力与血中 AL T、AM水平也存在显著的正相关关系 (P<0 .0 1) ,且经 SAP特异抑制剂处理过的受染小鼠其 AL T活性显著降低 (P<0 .0 1)。结论 展开更多
关键词 小鼠 腹腔感染 白色念珠菌 芽管 蛋白酶活性 毒力 相关性
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某医院病房空气和床头柜细菌学监测分析 被引量:1
13
作者 郭丹锋 熊靓 +2 位作者 吕琪 赵哲 王丹敏 《职业与健康》 CAS 2004年第3期80-81,共2页
关键词 医院病房 空气 床头柜 细菌学监测
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医院门诊部空气细菌污染情况调查
14
作者 王丹敏 刘丽英 +1 位作者 焦小杰 刘子泉 《职业与健康》 CAS 2001年第9期72-73,共2页
[目的]了解门诊部空气细菌污染情况,为控制医院感染提供依据。[方法]采用平皿沉降法对门诊部20个场所空气采样,计菌落数并根据生化反应对分离菌进行鉴定、分类。[结果]门诊部大部分场所空气含菌量超过700cfu/m^3,以挂号厅、候诊厅、急... [目的]了解门诊部空气细菌污染情况,为控制医院感染提供依据。[方法]采用平皿沉降法对门诊部20个场所空气采样,计菌落数并根据生化反应对分离菌进行鉴定、分类。[结果]门诊部大部分场所空气含菌量超过700cfu/m^3,以挂号厅、候诊厅、急诊观察室及口腔科诊室空气细菌含量最高(>1500cfu/m^3)。共分离到519株细菌,其中G^+菌占79.8%,且检出金葡菌、大肠杆菌、假单胞菌、克雷伯氏菌等院内感染常见病原菌。[结论]应积极采取有效措施来降低门诊部空气细菌含量。 展开更多
关键词 医院门诊部 空气 细菌污染 检测
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念珠菌在人唾液中生长及蛋白酶表达情况的研究
15
作者 王丹敏 董小青 +1 位作者 蒋书勤 刘丽英 《武警医学院学报》 CAS 2002年第1期10-13,共4页
目的 :了解念珠菌在人唾液中生长及分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)表达情况。方法 :分别用添加0 2M葡萄糖的人唾液振荡培养白色念珠菌、热带念珠菌及季也蒙念珠菌 ,定时取样测定生长量、pH值、胞外蛋白酶活性及唾液总蛋白浓度。结果 :三... 目的 :了解念珠菌在人唾液中生长及分泌型天冬氨酸蛋白酶 (SAP)表达情况。方法 :分别用添加0 2M葡萄糖的人唾液振荡培养白色念珠菌、热带念珠菌及季也蒙念珠菌 ,定时取样测定生长量、pH值、胞外蛋白酶活性及唾液总蛋白浓度。结果 :三种念珠菌在含糖唾液中均生长良好且都能产生SAP ,蛋白酶表达水平存在种间差异。念珠菌生长速率、唾液 pH变化及总蛋白含量降低幅度与菌株SAP表达程度基本一致。 结论 展开更多
关键词 唾液 念珠菌 蛋白酶表达 致病型真菌 口腔感染 SAP
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耳鼻喉门诊诊室三种空气消毒方法效果观察
16
作者 薄建华 曾松柏 吴玉秀 《武警医学院学报》 CAS 2007年第3期303-304,共2页
关键词 空气消毒 细菌总数 诊室
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中药复方对戊四唑致癫小鼠海马神经元型一氧化氮合酶表达的影响
17
作者 秦晓勇 詹曦菁 熊杰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第9期1832-1833,1864,共3页
目的:探讨中药复方对戊四唑致痫小鼠脑诱导型神经元一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:40只昆明种小鼠,按随机方法分为4组,即中药复方2个剂量组、模型组、正常对照组。将两组不同浓度的中药复方浓缩剂,分别灌服两组小鼠,连续6 d。前3... 目的:探讨中药复方对戊四唑致痫小鼠脑诱导型神经元一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:40只昆明种小鼠,按随机方法分为4组,即中药复方2个剂量组、模型组、正常对照组。将两组不同浓度的中药复方浓缩剂,分别灌服两组小鼠,连续6 d。前3组腹腔注射戊四唑(55 ml/kg)致痫,55 min后处死动物。采用免疫组织化学法,观察中药复方对戊四唑致痫小鼠nNOS表达的影响。结果:中药复方各组nNOS阳性细胞数目明显多于模型组(P<0.01)。中药复方两个剂量组亦存在差异(P<0.05)。结论:中药复方对癫痫小鼠海马神经元有保护作用,此结果可能是其治疗癫痫的机理之一。 展开更多
关键词 中药复方 癫痫小鼠 神经元型一氧化氮合酶 戊四唑
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优化教学方法 提高教学效果 被引量:1
18
作者 王丹敏 于德芳 《医学检验教育》 1998年第4期21-22,共2页
医学微生物学是高等医学院校各专业的一门重要的基础课程,提高该课程的教学质量是培养合格医学生、使学生学好后继课程的重要保证。近年来随着深入教学改革的需要,本课程的学时一再压缩,而教材内容仍十分丰富,学科进展也较快,如何... 医学微生物学是高等医学院校各专业的一门重要的基础课程,提高该课程的教学质量是培养合格医学生、使学生学好后继课程的重要保证。近年来随着深入教学改革的需要,本课程的学时一再压缩,而教材内容仍十分丰富,学科进展也较快,如何在学时少内容多的情况下有效提高教学效果一直是笔者留意的问题。为此, 展开更多
关键词 高教 课程 教学效果 优化教学 学时 专业 学科进展 教学改革 医学微生物学 医学生
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中国汉族人群D2S1328基因座的遗传多态性研究
19
作者 闫玉仙 丛斌 +4 位作者 彭郁葱 姚玉霞 王俊霞 尤红煜 马春玲 《中国法医学杂志》 CSCD 2001年第4期227-228,共2页
关键词 D2S1328基因座 遗传多态性 PAG垂直电泳技术 法医学
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碳源对芽胞杆菌碱性纤维素酶合成的影响
20
作者 王丹敏 宋桂经 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 1997年第4期207-209,共3页
目的:探讨碳源对芽胞杆菌碱性纤维素酶(CMCase)合成的影响,揭示酶的阻遏合成规律。方法:采用分批培养法,改变培养基中基质种类及浓度,定时取样测定CMCase酶活(DNS法)和菌体干重(DCW),以比合成作为产酶水平的指标。结果:碳源种类对酶合... 目的:探讨碳源对芽胞杆菌碱性纤维素酶(CMCase)合成的影响,揭示酶的阻遏合成规律。方法:采用分批培养法,改变培养基中基质种类及浓度,定时取样测定CMCase酶活(DNS法)和菌体干重(DCW),以比合成作为产酶水平的指标。结果:碳源种类对酶合成水平影响不大。以葡萄糖为碳源培养,4%浓度时酶合成水平最高,≥5%的高浓度下酶合成才有部分被阻遏。ATP、三羧酸循环中间物对酶合成有一定的阻遏作用。结论:芽胞杆菌EV23产的碱性纤维素酶为组成型酶,酶的抗阻遏合成有一定限度。 展开更多
关键词 碱性纤维素酶 碳源 阻遏
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