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实验性胰腺炎大鼠胰腺总RNA的提取 被引量：5
1
作者 张勇 郭永章 +1 位作者 曹西南 李立 《昆明医学院学报》 2003年第3期29-31,共3页
目的 :探讨提取实验性胰腺炎大鼠胰腺总RNA并尽量减少胰腺RNA降解的方法 ,为胰腺组织mRNA的检测提供前提条件 .方法 :健康SD大鼠 5 4只 ,随机分为假手术组 (A)、损伤组 (B)、动脉给药组(C)和静脉给药组 (D) ,RNA提取采用Chomczynski酸... 目的 :探讨提取实验性胰腺炎大鼠胰腺总RNA并尽量减少胰腺RNA降解的方法 ,为胰腺组织mRNA的检测提供前提条件 .方法 :健康SD大鼠 5 4只 ,随机分为假手术组 (A)、损伤组 (B)、动脉给药组(C)和静脉给药组 (D) ,RNA提取采用Chomczynski酸性一步法 .结果 :RNA琼脂糖凝胶电泳显示RNA没有明显降解 .结论 :胰腺组织RNA含量丰富 ,极易降解RNA ,操作速度。 展开更多
关键词 胰腺炎 大鼠 胰腺总 RNA 提取 MRNA 检测
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基因治疗与神经系统疾病 被引量：3
2
作者 曹西南 《昆明医学院学报》 2000年第1期19-24,共6页
介绍了常用基因治疗技术的一般方法、常用载体 ,以及一些基因治疗技术在神经系统疾患方面的应用研究 .
关键词 基因治疗 载体 神经系统
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PKCε与Lck在细胞内直接相互作用的荧光共振能量转移证据 被引量：1
3
作者 曹西南 平佩佩 宋昌旭 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期529-534,共6页
蛋白激酶Cε亚型 (PKCε)和蛋白酪氨酸激酸Lck均在心肌缺血预适应的信号转导中起着十分重要的作用 .构建PKCε和Lck与绿色荧光蛋白的融合蛋白的真核细胞表达载体 .将其共转染H2 93细胞进行表达 .用荧光显微镜观察到荧光共振能量转移现象 。
关键词 PKCΕ LCK 直接相互作用 荧光共振能量转移 缺血预适应 蛋白质相互作用 心肌缺血 HELA细胞
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急性胰腺炎大鼠内皮素-3基因表达的逆转录检测
4
作者 张勇 郭永章 +1 位作者 李立 曹西南 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2007年第6期665-669,共5页
目的研究内皮素-3(endothelin-3,ET-3)mRNA的表达水平与急性胰腺炎时胰腺炎症程度的关系。方法将54只SD大鼠编号后随机分为4组,其中假手术组9只,胰腺炎组、动脉给药组和静脉给药组〔多巴胺:5μg/(kg.min)〕各15只,按Aho法用4.5%牛磺胆... 目的研究内皮素-3(endothelin-3,ET-3)mRNA的表达水平与急性胰腺炎时胰腺炎症程度的关系。方法将54只SD大鼠编号后随机分为4组,其中假手术组9只,胰腺炎组、动脉给药组和静脉给药组〔多巴胺:5μg/(kg.min)〕各15只,按Aho法用4.5%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射制作急性胰腺炎模型,分别在1、6及24h取胰腺组织,采用半定量逆转录聚合酶链式反应检测ET-3基因的转录水平,并观察各组胰腺组织病理变化,确定ET-3mRNA的表达水平与胰腺炎炎症程度的关系。结果模型制作后1、6及24h均可见到ET-3mRNA表达,各组(除假手术组外)均以6h时ET-3mRNA表达最强。除1h外,动脉给药组ET-3mRNA表达量明显低于静脉给药组及胰腺炎组(P<0.05,P<0.01);而假手术组在任何时相均明显低于另外3组(P<0.05,P<0.01)。各组胰腺组织病理学评分按假手术组→动脉给药组→静脉给药组→胰腺炎组的顺序逐渐升高。结论ET-3mRNA的表达与胰腺炎炎症程度有一定关系,ET-3mRNA表达量随胰腺炎严重程度的加重而增加;急性胰腺炎中,多巴胺动脉给药比静脉给药有效。 展开更多
关键词 内皮素-3 MRNA 胰腺炎 微循环
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重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达条件的优化
5
作者 王芳 曹西南 《昆明医学院学报》 2004年第4期10-13,共4页
目的 :优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒 pUC -CK在大肠杆菌中表达的最佳条件 方法 :含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS -PAGE电泳及Westernblot检测 结果 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的最佳条件为 :含重组质粒大肠杆... 目的 :优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒 pUC -CK在大肠杆菌中表达的最佳条件 方法 :含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS -PAGE电泳及Westernblot检测 结果 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的最佳条件为 :含重组质粒大肠杆菌过夜培养时加入 0 1%的葡萄糖增加质粒拷贝数 ;诱导剂(IPTG)的最适工作浓度为 0 5mmol/L ;诱导最适培养温度为 30℃ ;诱导培养时间为 2～ 3h用于检测 ,6～2 4h用于分离纯化 结论 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中成功表达 ,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫 . 展开更多
关键词 重组质粒 CK 表达条件 PKC UC 大肠杆菌 催化功能 质粒拷贝数 IPTG SDS-PAGE电泳
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兔PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达与部分纯化
6
作者 王芳 曹西南 《热带医学杂志》 CAS 2004年第5期509-512,517,共5页
目的通过构建蛋白激酶Cε原核表达载体以获得纯化的PKCε蛋白。方法将PKCε催化功能域(野生型和突变型)构建至原核表达载体pUC18上形成重组质粒pUC-CK和pUC-CR,将其转化至大肠杆菌DH5α细胞中诱导其高效表达。结果表达产物的SDS-PAGE电... 目的通过构建蛋白激酶Cε原核表达载体以获得纯化的PKCε蛋白。方法将PKCε催化功能域(野生型和突变型)构建至原核表达载体pUC18上形成重组质粒pUC-CK和pUC-CR,将其转化至大肠杆菌DH5α细胞中诱导其高效表达。结果表达产物的SDS-PAGE电泳及Westernblot检测表明,催化功能域在大肠杆菌中成功表达,并对其进行了部分纯化。结论获得纯化的PKCε蛋白,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫。 展开更多
关键词 PKCΕ 催化结构域 大肠杆菌 表达与纯化
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多发性硬化的免疫机制进展及潜在治疗靶点
7
作者 徐晨晨 孟强 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期21-24,共4页
多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种好发于中青年患者的中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫性疾病。该病可导致认知、运动、感觉、语言等多种功能障碍。深入探索MS的发病机制,发掘有效的药物作用靶点具有重要意义... 多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种好发于中青年患者的中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫性疾病。该病可导致认知、运动、感觉、语言等多种功能障碍。深入探索MS的发病机制,发掘有效的药物作用靶点具有重要意义。本文通过分析、归纳近年来国内外MS的研究进展,旨在为进一步阐明其发病机制及潜在治疗靶点提供借鉴。 展开更多
关键词 多发性硬化 先天免疫 发病机制 潜在靶点
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