目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,p16)、磷酸酶张力蛋白同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因甲基化状态和蛋白表达的影响,并探...目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,p16)、磷酸酶张力蛋白同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因甲基化状态和蛋白表达的影响,并探讨解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用.方法:采用低浓度N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)的综合造模方法,创建实验性大鼠胃黏膜异型增生病变模型;分模型对照组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组,并选择正常大鼠作为阳性对照组进行干预;应用甲基化特异PCR技术检测大鼠胃黏膜p16、P T E N基因甲基化状态;R e a l-t i m e P C R、Western blot、免疫组织化学技术检测p16,PTEN在mRNA和蛋白表达水平的变化.结果:模型组胃黏膜异型增生细胞p16、PTEN基因的甲基化阳性检出率均为33.33%(6/18),均高于正常对照组20%(2/10),但差异不显著;解毒化瘀健脾方治疗组p16基因甲基化检出率均未0%(0/15),相比模型组20%(2/10)甲基化程度降低,但差异均无统计学意义;p16在mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高;PTEN在mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高.结论:解毒化瘀健脾方对异型增生胃黏膜细胞p16、PTEN基因具有一定的去甲基化作用,并显著诱导二者的表达量增加.解毒化瘀健脾组方的对胃黏膜异型增生具有潜在的治疗作用.展开更多
目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠血小板反应蛋白1基因(thrombospondin 1,Thbs1)甲基化状态的影响,并探讨解毒化瘀健脾方治疗胃黏膜异型增生的可能机制.方法:将实验性胃黏膜异型增生病变模型大鼠分为:模型对照组(model ...目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠血小板反应蛋白1基因(thrombospondin 1,Thbs1)甲基化状态的影响,并探讨解毒化瘀健脾方治疗胃黏膜异型增生的可能机制.方法:将实验性胃黏膜异型增生病变模型大鼠分为:模型对照组(model control group,M G)、阳性对照组(positive control group,PCG)-西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组(Jiedu Huayu Jianpi Fang treatment group,A),并以健康大鼠为对照组(control group,CG),进行相应的药物干预;取胃黏膜组织,应用甲基化特异PCR技术检测Thbs1基因甲基化状态;HE染色观察各处理组胃黏膜组织结构变化差异.结果:CG组10只健康大鼠胃黏膜经检测Thbs1基因均未发生甲基化,胃黏膜异型增生MG组大鼠T h b s1基因的甲基化阳性检出率为33.33%(6/18);PCG组-西药维甲酸组同正常大鼠相同,Thbs1基因甲基化检出率为0.00%;A组治疗大鼠Thbs1基因甲基化比率(20.00%),相比MG组显著降低(P=0.0198).HE染色结果显示MG、PCG、A组呈现中轻度胃黏膜异型增生症状,经治疗后PCG、A组异型增生趋于正常.结论:解毒化瘀健脾方对发生异型增生的胃黏膜组织Thbs1基因具有显著地去甲基化作用.解毒化瘀健脾方治疗胃黏膜异型增生可能与该药物使Thbs1基因甲基化程度显著降低有关.展开更多
目的:从诱导基因表达角度评估解毒化瘀健脾方及拆方对胃黏膜异型增生模型大鼠治疗的贡献作用.方法:甲基化特异性PCR(methylmion specific PCR,MSP)法检测正常对照组、胃黏膜异型增生组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾全组方治疗组、...目的:从诱导基因表达角度评估解毒化瘀健脾方及拆方对胃黏膜异型增生模型大鼠治疗的贡献作用.方法:甲基化特异性PCR(methylmion specific PCR,MSP)法检测正常对照组、胃黏膜异型增生组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾全组方治疗组、中药单组方解毒组、化瘀组、益气组、养阴组、理气组抑癌基因及肿瘤相关基因p16、PETN、凝血栓蛋白酶基因1(thrombospondin 1,Thbs1)、E-Cadherin、Runx3的甲基化程度;Real-time PCR及免疫组织化学法检测解毒化瘀健脾中药各组处理因促使各基因去甲基化导致的mRNA及蛋白表达水平表达变化.结果:解毒化瘀健脾方及各拆方组均可一定程度实现p16、PETN、Thbs1、E-Cadherin、Runx3的去甲基化;转录水平各组相比CG组基因表达变化分别为:A组p16极显著升高(P<0.01),PETN、E-Cadherin、Thbs1、B组Thbs1、C组p16、PETN、Thbs1、E组Thbs1、F组p16、Thbs1显著升高(P<0.05);蛋白水平各组相比CG组蛋白表达的变化为:A组p16、PTEN、E-Cadherin、RUNX3、THBS1、B组p16、C组p16、THBS1、D组除RUNX3外的蛋白、E组除PTEN的蛋白、F组除THBS1外的蛋白均显著上调(P<0.05);统计各组在转录和蛋白翻译水平的变化积分,结果表明解毒化瘀健脾中药方贡献分值最为突出,其次为单组方理气组、养阴组、化瘀、益气组及解毒组.结论:解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用优于各拆方治疗组,对胃黏膜异型增生的治疗应以理气养阴为主.展开更多
文摘目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,p16)、磷酸酶张力蛋白同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因甲基化状态和蛋白表达的影响,并探讨解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用.方法:采用低浓度N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)的综合造模方法,创建实验性大鼠胃黏膜异型增生病变模型;分模型对照组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组,并选择正常大鼠作为阳性对照组进行干预;应用甲基化特异PCR技术检测大鼠胃黏膜p16、P T E N基因甲基化状态;R e a l-t i m e P C R、Western blot、免疫组织化学技术检测p16,PTEN在mRNA和蛋白表达水平的变化.结果:模型组胃黏膜异型增生细胞p16、PTEN基因的甲基化阳性检出率均为33.33%(6/18),均高于正常对照组20%(2/10),但差异不显著;解毒化瘀健脾方治疗组p16基因甲基化检出率均未0%(0/15),相比模型组20%(2/10)甲基化程度降低,但差异均无统计学意义;p16在mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高;PTEN在mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高.结论:解毒化瘀健脾方对异型增生胃黏膜细胞p16、PTEN基因具有一定的去甲基化作用,并显著诱导二者的表达量增加.解毒化瘀健脾组方的对胃黏膜异型增生具有潜在的治疗作用.
文摘目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠血小板反应蛋白1基因(thrombospondin 1,Thbs1)甲基化状态的影响,并探讨解毒化瘀健脾方治疗胃黏膜异型增生的可能机制.方法:将实验性胃黏膜异型增生病变模型大鼠分为:模型对照组(model control group,M G)、阳性对照组(positive control group,PCG)-西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组(Jiedu Huayu Jianpi Fang treatment group,A),并以健康大鼠为对照组(control group,CG),进行相应的药物干预;取胃黏膜组织,应用甲基化特异PCR技术检测Thbs1基因甲基化状态;HE染色观察各处理组胃黏膜组织结构变化差异.结果:CG组10只健康大鼠胃黏膜经检测Thbs1基因均未发生甲基化,胃黏膜异型增生MG组大鼠T h b s1基因的甲基化阳性检出率为33.33%(6/18);PCG组-西药维甲酸组同正常大鼠相同,Thbs1基因甲基化检出率为0.00%;A组治疗大鼠Thbs1基因甲基化比率(20.00%),相比MG组显著降低(P=0.0198).HE染色结果显示MG、PCG、A组呈现中轻度胃黏膜异型增生症状,经治疗后PCG、A组异型增生趋于正常.结论:解毒化瘀健脾方对发生异型增生的胃黏膜组织Thbs1基因具有显著地去甲基化作用.解毒化瘀健脾方治疗胃黏膜异型增生可能与该药物使Thbs1基因甲基化程度显著降低有关.
文摘目的:从诱导基因表达角度评估解毒化瘀健脾方及拆方对胃黏膜异型增生模型大鼠治疗的贡献作用.方法:甲基化特异性PCR(methylmion specific PCR,MSP)法检测正常对照组、胃黏膜异型增生组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾全组方治疗组、中药单组方解毒组、化瘀组、益气组、养阴组、理气组抑癌基因及肿瘤相关基因p16、PETN、凝血栓蛋白酶基因1(thrombospondin 1,Thbs1)、E-Cadherin、Runx3的甲基化程度;Real-time PCR及免疫组织化学法检测解毒化瘀健脾中药各组处理因促使各基因去甲基化导致的mRNA及蛋白表达水平表达变化.结果:解毒化瘀健脾方及各拆方组均可一定程度实现p16、PETN、Thbs1、E-Cadherin、Runx3的去甲基化;转录水平各组相比CG组基因表达变化分别为:A组p16极显著升高(P<0.01),PETN、E-Cadherin、Thbs1、B组Thbs1、C组p16、PETN、Thbs1、E组Thbs1、F组p16、Thbs1显著升高(P<0.05);蛋白水平各组相比CG组蛋白表达的变化为:A组p16、PTEN、E-Cadherin、RUNX3、THBS1、B组p16、C组p16、THBS1、D组除RUNX3外的蛋白、E组除PTEN的蛋白、F组除THBS1外的蛋白均显著上调(P<0.05);统计各组在转录和蛋白翻译水平的变化积分,结果表明解毒化瘀健脾中药方贡献分值最为突出,其次为单组方理气组、养阴组、化瘀、益气组及解毒组.结论:解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用优于各拆方治疗组,对胃黏膜异型增生的治疗应以理气养阴为主.
