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外源性胰岛素样生长因子-1对老年小鼠认知功能的影响 被引量:7
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作者 吴连连 袁红花 朱孝荣 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期22-26,共5页
目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对老年小鼠认知功能的影响机制。方法给予老年C57/BL6小鼠侧脑室注射IGF-1,Western blot检测胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)荧光染色标记海马齿状回增殖的细胞... 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对老年小鼠认知功能的影响机制。方法给予老年C57/BL6小鼠侧脑室注射IGF-1,Western blot检测胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)荧光染色标记海马齿状回增殖的细胞,尼氏染色标记海马齿状回神经元,用Morris水迷宫实验和跳台实验评定老年小鼠学习记忆能力。结果 Western blot检测显示,IGF-1组老年小鼠海马中IGF-1R表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Brd U染色结果显示,IGF-1组海马Brd U阳性细胞数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。尼氏染色结果显示,IGF-1组神经元细胞数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。水迷宫实验结果显示,经过训练后,IGF-1组老年小鼠的逃避潜伏期短于对照组,穿过平台的次数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。跳台实验结果显示,与对照组比较,IGF-1组老年小鼠的基础错误次数减少,而潜伏期延长(P<0.05)。结论老年小鼠注射IGF-1后,其认知功能有一定改善,IGF-1可以提高老年小鼠认知功能。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 老年鼠 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 水迷宫 认知功能
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细胞自噬促进脂肪干细胞向软骨细胞分化 被引量:2
2
作者 陈全刚 陈仁金 袁红花 《黑龙江医药科学》 2016年第6期1-3,8,共4页
目的:探讨细胞自噬对ADSCs分化的影响。方法:无菌条件下取大鼠大网膜,肾周脂肪囊,睾丸周围等处取脂肪组织并分离ADSCs,用软骨细胞诱导培养基进行培养,并通过抑制剂或干扰分子改变细胞自噬水平,检测ADSCs向软骨细胞分化的变化情况。结果... 目的:探讨细胞自噬对ADSCs分化的影响。方法:无菌条件下取大鼠大网膜,肾周脂肪囊,睾丸周围等处取脂肪组织并分离ADSCs,用软骨细胞诱导培养基进行培养,并通过抑制剂或干扰分子改变细胞自噬水平,检测ADSCs向软骨细胞分化的变化情况。结果:抑制自噬,细胞表达软骨细胞标识蛋白,SOX-9的量显著下调:诱导自噬,SOX-9的表达显著升高,结论:细胞自噬促进ADSCs向软骨细胞分化。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 细胞自噬 细胞分化
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肺癌中LncRNA的表达及其与预后的相关性 被引量:6
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作者 王丹 沙岩 +2 位作者 吴言 朴雪 胡俊峰 《生物技术》 CAS 2018年第4期387-391,共5页
[目的]筛选出在肺癌组织中特异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),并探讨其在肺癌中的表达水平与患者预后的相关性。[方法]从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)下载肺癌临床病理和基因表达谱信息。以|Fold Change|>2和校正... [目的]筛选出在肺癌组织中特异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),并探讨其在肺癌中的表达水平与患者预后的相关性。[方法]从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)下载肺癌临床病理和基因表达谱信息。以|Fold Change|>2和校正后的P值(FDR)<0.05为标准筛选差异表达的lncRNA。对差异表达显著的FOXD3-AS1进行RNA结合蛋白(RBP)预测,并用关联矩阵法构建差异表达的lncRNA-RBP-mRNA共表达网络,继而对共表达mRNA进行Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路富集分析;通过Kaplan-Meier Plotter方法研究FOXD3-AS1与预后相关性。[结果]共筛选出1 362个在肺癌中差异表达的lncRNA,其中表达上调的1 184个,表达下调的178个。与FOXD3-AS1具有共表达关系的mRNA共有11个。KEGG分析这些共表达的mRNA主要富集在黏着连接、结肠直肠癌和松弛素信号通路,RBP预测发现FOXD3-AS1可以与人丝氨酸/精氨酸富有剪接因子SRSF1结合。FOXD3-AS1与肺癌患者生存曲线具有极显著相关性(P<0.01)。[结论]SRSF1居于lncRNA-RBP-mRNA共表达网络的核心位置,在肺癌的发生、发展中起到重要的调控作用,有望成为肺癌免疫治疗的分子靶标。差异表达的FOXD3-AS1可以很好地判断肺癌患者的预后,因此,可以作为潜在的肺癌检测分子标志物。 展开更多
关键词 肺癌 长链非编码RNA FOXD3-AS1 lncRNA-mRNA共表达网络
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6%和8%缺氧对新生大鼠脑白质损伤的差异及其机制 被引量:3
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作者 王晓舟 王宇 +1 位作者 张振中 姚瑞芹 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期313-319,共7页
目的:观察新生大鼠不同缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)条件下脑白质的损伤状况,并探其损伤的机制。方法:新生3 d SD大鼠随机分为正常对照组、6%缺氧和8%缺氧损伤模型组,模型组大鼠进行右侧颈总动脉结扎,2 h后进行6%或8%缺氧,建立HI脑白... 目的:观察新生大鼠不同缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)条件下脑白质的损伤状况,并探其损伤的机制。方法:新生3 d SD大鼠随机分为正常对照组、6%缺氧和8%缺氧损伤模型组,模型组大鼠进行右侧颈总动脉结扎,2 h后进行6%或8%缺氧,建立HI脑白质损伤动物模型。分别于2周、3周和4周取脑制作冰冻切片,免疫荧光检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和髓鞘相关糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)的变化,RT-PCR检测增殖和分化相关因子硫酸软骨素蛋白多糖4(chrondroitin sulfate proteoglycan 4,CSPG4)和类胰岛素一号增长因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)的表达,探索HI脑白质损伤的机制。结果:体重统计显示:与正常对照组大鼠相比,HI损伤后1周、2周、3周和4周时模型大鼠平均体重在各时间点均显著性降低;6%和8%模型大鼠平均体重在各时间点无显著差异。与对侧MBP和MAG荧光强度相比,3周和4周时6%缺氧组损伤侧MBP和MAG荧光强度的比值均较8%缺氧组减少(P<0.05)。RT-PCR结果显示:同一时间点,6%缺氧组CSPG4的表达显著高于8%缺氧组(P<0.05),而IGF-1的表达显著低于8%缺氧组(P<0.05)。结论:6%或8%缺氧损伤均可造成新生大鼠明显的脑白质损伤,但6%氧损伤导致大鼠脑白质损伤较8%缺氧加重,其机制可能与不同缺氧程度导致的少突胶质前体细胞分化抑制因子CSPG4和增殖分化因子IGF-1的不同表达有关。 展开更多
关键词 缺血缺氧 脑白质损伤 少突胶质细胞 CSPG4 IGF-1 大鼠
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细胞周期素D1与增殖细胞核抗原在人脑胶质瘤中表达 被引量:2
5
作者 王晓舟 姚瑞芹 +1 位作者 张琳 董薇 《齐齐哈尔医学院学报》 2018年第8期881-883,共3页
目的探讨细胞周期素D1(Cyclin D1)与增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在脑胶质瘤的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测16例正常脑组织、28例低级别脑胶质瘤组织和20例高级别脑胶质瘤中Cyclin D1与PCNA... 目的探讨细胞周期素D1(Cyclin D1)与增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在脑胶质瘤的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测16例正常脑组织、28例低级别脑胶质瘤组织和20例高级别脑胶质瘤中Cyclin D1与PCNA的蛋白表达及其差别,并采用Spearman等级相关法分析Cyclin D1与PCNA与脑瘤发生的相关性。结果正常脑组织、低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤中,Cyclin D1蛋白的阳性比例分别为3/16、14/28和15/20,3组之间均有显著性差异(P<0.01)。PCNA蛋白阳性的比例分别为4/16、13/28和16/20,3组之间差异有统计学意义(P<0.01)。用Spearman等级相关法证实Cyclin D1与PCNA在低级别脑胶质瘤和高级别脑肿瘤中正相关(P<0.05),而在正常脑组织中无相关性(P>0.05)。结论 PCNA与Cyclin D1在脑胶质瘤细胞中表达增加并与肿瘤级别呈正相关,提示二者可以在临床上作为肿瘤发生及级别的指征。 展开更多
关键词 胶质瘤 细胞周期蛋白D1 增殖细胞核抗原
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人参皂苷Rg1对脂多糖诱导的脑损伤急性炎症模型小鼠的影响
6
作者 陈玲 李慧 +4 位作者 石月 李灵芝 宋远见 温相如 戴园园 《徐州医学院学报》 CAS 2016年第4期221-224,共4页
目的研究人参皂苷Rg1(ginsenosideRg1)对脂多糖(1ipop01ysaccharide,LPS)诱导的脑损伤急性炎症模型小鼠自主活动的影响。方法小鼠腹腔注射LPS构建脑损伤急性炎症模型。记录各组小鼠的总活动距离和穿格次数。免疫组化法检测Rg1对小... 目的研究人参皂苷Rg1(ginsenosideRg1)对脂多糖(1ipop01ysaccharide,LPS)诱导的脑损伤急性炎症模型小鼠自主活动的影响。方法小鼠腹腔注射LPS构建脑损伤急性炎症模型。记录各组小鼠的总活动距离和穿格次数。免疫组化法检测Rg1对小鼠额叶皮质中自介素1p(IL-1β)表达的影响。结果与对照组比较,模型组小鼠的总活动距离及穿格次数明显减少,且额叶皮质中IL-1β表达水平增高,差异有统计学意义(P〈0.01)。与模型组相比,Rg1-160mg组(腹腔注射160mg/kgRg1)的总活动距离及穿格次数明显增加(P〈0.05),IL-1β的表达水平降低(P〈0.01)。结论Rg1能够改善脂多糖诱导的脑损伤急性炎症期模型小鼠的自主活动。这可能与其抑制IL-1β的表达有关。 展开更多
关键词 脑损伤急性炎症 人参皂苷RG1 自主活动
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过表达Olig2的少突胶质前体细胞在缺血缺氧脑白质损伤新生大鼠脑内的分化 被引量:1
7
作者 王晓舟 张振中 +2 位作者 余浩 王宇 姚瑞芹 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期685-690,共6页
目的:观察过表达特异性转录因子Olig2的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)移植在缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)脑白质损伤新生大鼠脑内的分化情况。方法:用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的... 目的:观察过表达特异性转录因子Olig2的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)移植在缺血缺氧(hypoxia-ischemia,HI)脑白质损伤新生大鼠脑内的分化情况。方法:用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的过表达Olig2的慢病毒感染原代分离纯化的大鼠大脑皮层OPCs,GFP阳性细胞计数测其感染率。将过表达Olig2的OPCs(Olig2组)或阴性对照病毒感染的OPCs(Vector组)脑立体定位注射到造模后7 d的HI模型大鼠胼胝体膝部,移植后2周,冰冻切片行免疫荧光染色观察OPCs的存活和分化情况。结果:Olig2-GV218病毒感染OPCs细胞48 h,荧光显微镜检测显示85%左右的OPCs细胞表达GFP;移植后2周,caspase-3荧光染色表明移植后绝大部分细胞存活,Vector组和Olig2组之间无统计学差异(P>0.05);GFAP/GFP双阳性细胞在两组之间也无显著差异(P>0.05);而Olig2组MBP/GFP双阳性细胞的荧光密度显著高于Vector组(P<0.05)。结论:过表达Olig2可促进移植OPCs向少突胶质细胞分化。 展开更多
关键词 缺血缺氧 脑白质损伤 细胞移植 OLIG2 髓鞘形成 大鼠
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Ro25-6981对脑缺血再灌注模型大鼠海马齿状回颗粒下层nestin和BrdU表达的影响
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作者 董富兴 万法萍 +2 位作者 于红丽 姚瑞芹 刘亚萍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期677-683,共7页
目的:研究Ro25-6981对成年大鼠短暂性脑缺血再灌注海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)神经干细胞增殖的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠在进行侧脑室置管7 d后,随机分为正常组、假手术组和脑缺血再灌注组,每组又分别再分为Ro25-6... 目的:研究Ro25-6981对成年大鼠短暂性脑缺血再灌注海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)神经干细胞增殖的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠在进行侧脑室置管7 d后,随机分为正常组、假手术组和脑缺血再灌注组,每组又分别再分为Ro25-6981组和生理盐水组。缺血再灌注组大鼠采用四动脉阻断前脑缺血再灌注模型,即缺血15 min再灌注1、3、7、14、21、28 d和35 d,缺血前15 min经侧脑室套管注射Ro25-6981或生理盐水。各组大鼠均采用免疫组织化学显示SGZ区Brd U、nestin阳性细胞的表达情况,采用免疫荧光双重标记法检测再灌7 d时SGZ区Brd U/nestin双标阳性细胞数量的改变。结果:脑缺血再灌注生理盐水组SGZ区nestin阳性细胞表达再灌1 d时开始增多,7 d时达到峰值,14 d时急剧下降,至35 d时降至正常水平;缺血前给予Ro25-6981,各时间点的nestin阳性细胞表达均有所下降,其中在3、7 d和14 d时减少明显,差异有统计学意义(P<0.05)。脑缺血再灌注生理盐水组SGZ区Brd U阳性细胞再灌1 d开始增殖,7 d达到峰值,35 d降至正常水平;缺血前给予Ro25-6981,各时间点的Brd U阳性细胞表达均有所下降,其中在3、7、14 d和21 d时减少明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与脑缺血再灌注生理盐水组相比,Ro25-6981可以降低脑缺血再灌7 d海马SGZ区的Brd U/nestin双标阳性细胞密度,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ro25-6981可以抑制前脑缺血再灌注后海马SGZ区神经干细胞的增殖,提示NR2B参与并促进了前脑缺血再灌注引起的神经干细胞的增殖。 展开更多
关键词 Ro25-6981 脑缺血再灌注 神经干细胞 海马 大鼠
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兔病毒性出血症3C基因荧光表达载体的构建及其在293 T细胞中的表达
9
作者 刘鹏 陈全刚 +5 位作者 袁红花 张锦萍 吴连连 胡安康 陈仁金 朱孝荣 《徐州医学院学报》 CAS 2016年第7期446-448,共3页
目的:构建EGFP与3C融合表达的真核表达质粒,为研究RHDV 3C蛋白在病毒感染中的作用提供基础。方法 RHDV 3C基因的片段经过反转录成cDNA,纯化的PCR产物经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后克隆到pEG-FP-C1载体,构建EGFP与3C融合表达的真核表达... 目的:构建EGFP与3C融合表达的真核表达质粒,为研究RHDV 3C蛋白在病毒感染中的作用提供基础。方法 RHDV 3C基因的片段经过反转录成cDNA,纯化的PCR产物经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后克隆到pEG-FP-C1载体,构建EGFP与3C融合表达的真核表达质粒。 pEGFP-C1-3C真核表达载体转染293T细胞,24 h后荧光显微镜检测及Western blot检测EGFP-3C融合蛋白表达情况。结果24 h后荧光显微镜及Western blot检测表明RHDV 3 C基因全长编码序能够成功插入到pEGFP-C1载体。结论 EGFP-3 C融合表达质粒能够被成功构建,从而有助于探索RHDV 3C蛋白在RHDV感染过程中的功能,为深入探讨RHDV的防治提供基础。 展开更多
关键词 兔病毒性出血症病毒 3C蛋白 真核表达载体
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缺氧新生鼠胼胝体神经元-胶质细胞抗原2、胶质纤维酸性蛋白表达观察
10
作者 王晓舟 王宇 +1 位作者 张振中 姚瑞芹 《山东医药》 CAS 2018年第43期10-13,共4页
目的观察缺氧新生大鼠胼胝体神经元-胶质细胞抗原2(NG2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。方法新生3 d的SD大鼠36只随机分为对照组、低浓度组(6%氧)、高浓度组(8%氧)各12只。对照组新生鼠不做任何处理。低、高浓度组制作缺血缺氧(HI... 目的观察缺氧新生大鼠胼胝体神经元-胶质细胞抗原2(NG2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。方法新生3 d的SD大鼠36只随机分为对照组、低浓度组(6%氧)、高浓度组(8%氧)各12只。对照组新生鼠不做任何处理。低、高浓度组制作缺血缺氧(HI)损伤模型。分别于造模2、3、4周时各组取4只大鼠,处死后断头取脑,切大鼠氧损伤侧及对照侧组织切片,采用免疫荧光染色法检测大鼠氧损伤侧及对照侧脑组织NG2、GFAP表达。造模4周时观察各组大鼠存活情况。结果与氧损伤对照侧比较,造模2、3周时低、高浓度组脑组织NG2阳性细胞数均增多(P <0. 05);与低浓度组氧损伤侧比较,造模2周时高浓度组脑组织NG2阳性细胞数增多(P <0. 05)。与氧损伤对照侧比较,造模2、3、4周时低、高浓度组脑组织胼胝体GFAP阳性细胞数均增多(P均<0. 05);与低浓度组氧损伤侧比较,造模2、3周时高浓度组脑组织胼胝体GFAP阳性细胞数均增多(P <0. 05)。造模4周时,低浓度组、高浓度组、对照组大鼠分别存活9、10、12只。与低浓度组比较,对照组、高浓度组大鼠存活数目多。结论 :缺氧可导致新生大鼠胼胝体NG2、GFAP表达升高。6%、8%氧浓度均可导致新生大鼠胼胝体NG2、GFAP表达升高,且8%氧浓度作用更强。 展开更多
关键词 缺血缺氧 脑白质损伤 神经元-胶质细胞抗原2 胶质纤维酸性蛋白
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多发性硬化患者外周血S100A_8/A_9、TLR4和MMP-2表达水平的变化
11
作者 刘大进 吴明凤 +3 位作者 余浩 张振中 马丽 姚瑞芹 《中国临床医学》 2016年第6期801-804,共4页
目的:探讨多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者外周静脉血血清钙结合蛋白复合物(S100A_8/A_9)、Toll-样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和基质金属酶蛋白2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达水平的变化。方法:选取MS患者16例... 目的:探讨多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者外周静脉血血清钙结合蛋白复合物(S100A_8/A_9)、Toll-样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和基质金属酶蛋白2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达水平的变化。方法:选取MS患者16例作为MS组,健康体检者16例作为对照组。采用蛋白芯片检测法对血清样本进行检测,定量分析血清S100A_8/A_9、TLR4和MMP-2表达水平的变化。结果:MS组血清S100A_8/A_9、TLR4和MMP-2水平均高于对照组(P<0.01);MS组患者血清中上述3个指标具有明显相关性(P<0.05)。结论:MS患者血清S100A_8/A_9、TLR4和MMP-2表达上调,联合检测三者可能有助于临床MS疾病活动状态的判断。 展开更多
关键词 多发性硬化 S100A8/A9 TLR4 MMP-2
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miR-30a对实验性自身免疫性脑脊髓炎模型小鼠发病的作用
12
作者 刘守正 王婷 +4 位作者 张英 江红艳 张智慧 曲学彬 姚瑞芹 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-10,共4页
目的:探讨在体过表达miR-30a对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脱髓鞘病变的作用。方法:构建含稳定表达miR-30a的shRNA慢病毒载体,以含有空载体的慢病毒为对照(LV-ctrl)。雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(normal)、对照慢病毒... 目的:探讨在体过表达miR-30a对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脱髓鞘病变的作用。方法:构建含稳定表达miR-30a的shRNA慢病毒载体,以含有空载体的慢病毒为对照(LV-ctrl)。雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(normal)、对照慢病毒(LV-ctrl)组和miR-30a慢病毒(LV-miR-30a)组,2组慢病毒经尾静脉注射,注射7 d后用MOG35-55多肽免疫小鼠。Kono 5分法检测发病情况,快蓝(LFB)染色及透射电镜检测脊髓脱髓鞘程度及髓鞘结构的变化。结果:LV-ctrl组小鼠在MOG_(35-55)多肽免疫的第10天开始发病,到第21天,其Kono评分为2.57±0.79,LV-miR-30a组小鼠的Kono评分显著低于LV-ctrl组小鼠;miR-30a处理可显著提高小鼠体质量增长率,同时LFB评分也较LV-ctrl组显著增加;髓鞘超微结构显示LV-ctrl组小鼠脊髓髓鞘板层松解且稀疏,而LV-miR-30a组小鼠的髓鞘结构相对完好,髓鞘厚度显著大于LV-ctrl组。结论:过表达miR-30a可以明显减缓EAE的发病,减轻脊髓脱髓鞘程度。 展开更多
关键词 脊髓 实验性自身免疫性脑脊髓炎 髓鞘 脱髓鞘 miR-30a 小鼠
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