羟乙基淀粉130/0.4对大鼠内毒素性急性肺损伤ICAM-1表达的影响及MAPK信号通路在其中的作用 被引量：16

1

作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 佘守章 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期394-398,共5页

目的探讨不同剂量羟乙基淀粉溶液(hydroxyethylstarch,HES)130.04对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)肺组织细胞间粘附分子1(intercellular adhesionmolecule1,ICAM-1)表达的影响及丝裂原活化蛋白激酶(mi-togen activated ... 目的探讨不同剂量羟乙基淀粉溶液(hydroxyethylstarch,HES)130.04对大鼠内毒素性急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)肺组织细胞间粘附分子1(intercellular adhesionmolecule1,ICAM-1)表达的影响及丝裂原活化蛋白激酶(mi-togen activated protein kinase,MAPK)通路在其中的作用。方法36只♂SD大鼠,随机分为6组,每组6只,N组(对照组)不给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),H1、H2、H3、H4组给予LPS后分别按照3.75,7.5,15,30ml.kg-1的剂量持续输入HES130/0.4,L组给予LPS后持续输入生理盐水。于LPS注射4h后处死大鼠,测定肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性、肺湿干重比(W/D)、ICAM-1蛋白和mRNA表达、MAPK激酶活性以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白和白细胞数。结果与N组比较,L组肺组织MPO活性、W/D比、ICAM-1蛋白和mRNA、p-ERK、p-p38、p-JNK表达以及BALF中总蛋白和白细胞数升高;与L组比较,H1和H2组肺组织和BALF中上述指标降低,其中以7.5ml.kg-1剂量最为明显。结论中小剂量使用HES130/0.4可改善内毒素性急性肺损伤炎症反应,这种作用可能与通过MAPK通路抑制ICAM-1蛋白和mRNA的表达有关。 展开更多

关键词 羟乙基淀粉 内毒素 急性肺损伤 细胞间粘附分子-1 信号转导

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p38MAPK在周期性机械牵张诱导肺泡巨噬细胞表达HMGB1中的作用 被引量：5

2

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1979-1982,共4页

目的:研究p38 MAPK在周期性机械牵张诱导肺泡巨噬细胞(AM)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法:大鼠AM随机分为A、B、C3组,A组为对照组;B组细胞施加20%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B组相同,在牵张前用p38 MAPK特... 目的:研究p38 MAPK在周期性机械牵张诱导肺泡巨噬细胞(AM)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法:大鼠AM随机分为A、B、C3组,A组为对照组;B组细胞施加20%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B组相同,在牵张前用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580(40μmol/L)预处理2h。利用RT-PCR法检测HMGB1 mRNA的表达,Western blotting检测HMGB1蛋白表达和p38 MAPK的活性。结果:与对照组相比,AM施加20%牵张应变可诱导HMGB1蛋白和mRNA表达明显增加、p38 MAPK活性明显增高(均P<0.05),SB203580可显著抑制牵张应变的这种诱导作用(均P<0.05)。结论:周期性机械牵张可能通过p38 MAPK信号通路,调节肺泡巨噬细胞HMGB1 mRNA和蛋白的表达。 展开更多

关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白质1 P38MAP激酶 肺泡巨噬细胞

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p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达 被引量：5

3

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1169-1172,共4页

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤（ventilator-induced lung injury，VILI）大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白B1（highmobility group box 1 protein，HMGB1）中的作用。方法健康SD大鼠24只随机分为3组：对照组（A组）不行机械通... 目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤（ventilator-induced lung injury，VILI）大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白B1（highmobility group box 1 protein，HMGB1）中的作用。方法健康SD大鼠24只随机分为3组：对照组（A组）不行机械通气，保留自主呼吸；常规通气组（B组）潮气量（Vt）为8mL／kg；大潮气量通气组（C组）Vt为40mL／kg。机械通气4h后处死动物，测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值（W／D）和中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）活性。采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和D38激酶活性变化，采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达。应用单因素方差分析进行不同组别间的比较。结果通气4h后，与A组相比，C组总蛋白水平（1．77±0．68）g／L、白细胞计数（106．55±28．17）×10^7L^-1、肺W／D比值（7．16±1．02）、MPO活性（3．94±1．21）U／g、HMGB1蛋白（0．64±0．17）和mRNA（1．17±0．45）表达以及p38激酶活性（0．514-0．12）均明显增加（P〈0．05），而B组上述各项指标的变化均无统计学意义（P〉0．05）。结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤，p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达。 展开更多

关键词 机械通气 急性肺损伤 高迁移率族蛋白B1 P38丝裂原活化蛋白激酶

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MKK6p38α信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞表达晚期糖基化终末产物受体中的作用 被引量：4

4

作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 余守章 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期597-600,共4页

目的探讨p38α及其上游激酶丝裂素活化蛋白激酶6（MKK6）在机械牵张诱导肺泡上皮细胞（A549）表达晚期糖基化终末产物受体（RAGE）中的作用。方法应用阳离子脂质体DOTAP介导的基因转染方法将p38a显性无活性突变体p38α（AF）＋绿色荧光... 目的探讨p38α及其上游激酶丝裂素活化蛋白激酶6（MKK6）在机械牵张诱导肺泡上皮细胞（A549）表达晚期糖基化终末产物受体（RAGE）中的作用。方法应用阳离子脂质体DOTAP介导的基因转染方法将p38a显性无活性突变体p38α（AF）＋绿色荧光表达载体pGFP及MKK6b的组成性活性突变体MKK6b（E）＋pGFP分别导入A549细胞，以质粒pcDNA3＋pGFP作为阴性对照。以pGFP作为空白对照。应用蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）检测转染基因。建立体外细胞牵张应变模型，观察各组细胞在施加20％牵张应变时p38激酶活性变化及RAGE的蛋白和mRNA表达变化。结果Western blotting检测结果显示，外源基因成功转染A549细胞，并在细胞内表达。在A549细胞牵张应变模型中观察到，MKK6b（E）转染细胞内p38激酶活性明显升高，而p38a（AF）转染细胞内p38激酶活性显著下降；MKK6b（E）基因转染可促进20％牵张应变诱导A549细胞RAGE的蛋白和mRNA表达，而p38α（AF）基因转染则抑制牵引应变诱导的RAGE蛋白和mRNA表达。结论牵张应变通过MKK6p38α信号通路调节A549细胞RAGE的表达。 展开更多

关键词 机械牵张 肺泡上皮细胞 P38丝裂素活化蛋白激酶 晚期糖基化终末产物受体

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老年急性脑梗死合并冠心病的危险因素分析 被引量：5

5

作者 黄丽 《中国卫生产业》 2014年第24期15-17,共3页

目的分析老年急性脑梗死合并冠心病的危险因素,为防治老年急性脑梗死合并冠心病提供参考。方法选取2013年1月—2014年3月我院治疗的93例老年急性脑梗死合并冠心病患者作为临床研究对象,另选取同期治疗的90例单纯老年急性脑梗死患者作为... 目的分析老年急性脑梗死合并冠心病的危险因素,为防治老年急性脑梗死合并冠心病提供参考。方法选取2013年1月—2014年3月我院治疗的93例老年急性脑梗死合并冠心病患者作为临床研究对象,另选取同期治疗的90例单纯老年急性脑梗死患者作为对照组,比较两组高血压、糖尿病、血脂及血糖等生化检查的差异性,应用Logistic回归方程分析老年急性脑梗死合并冠心病的临床危险因素。结果观察组患者BMI为(28.7±4.6)kg/m2,SBP为(170.6±17.5)mmHg,TG为(2.9±0.6)mmol/L,LDL-C为(4.3±0.5)mmol/L,TC为(5.8±1.9)mmol/L,FBG为(8.4±2.5)mmol/L,2hPG为(14.3±2.9)mmol/L,年龄为(71.86±7.96)岁,吸烟共68例,高血压共74例,糖尿病共,46例,血脂异常共39例,显著高于对照组患者,对照组BMI 22.6±4.3kg/m2,SBP为(142.3±12.9)mmHg,TG为(1.7±0.7)mmol/L,LDL-C为(3.1±0.6)mmol/L,TC为(4.6±1.4)mmol/L,FBG为(5.7±2.8)mmol/L,2hPG为(10.6±2.2)mmol/L,年龄为(65.29±7.58)岁,吸烟共51例,高血压共55例,糖尿病共24例,血脂异常共26例(P<0.05);Logistic回归方程分析显示年龄、吸烟、肥胖、高血压、高血糖以及高血脂均为老年急性脑梗死合并冠心病的危险因素,糖尿病及高LDL-C血症为独立危险因素。结论老年急性脑梗死合并冠心病的独立危险因为糖尿病及高LDL-C血症,早期干预危险因素,有利于防治心脑血管事件。 展开更多

关键词 急性脑梗死 冠心病 老年 危险因素

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不同潮气量机械通气对肺损伤的影响及其针对性护理 被引量：4

6

作者 肖慧 刘灵芝 丁宁 《中华现代护理杂志》 2010年第23期2755-2757,共3页

目的 研究不同潮气量机械通气对肺损伤的影响,探讨机械通气时的针对性护理措施.方法 将24只健康SD大鼠随机分为对照组（n=8）、小潮气量通气组（n=8,VT=8 ml/kg）和大潮气量通气组（n=8,VT=40ml/kg）.通气时间均为4 h.检测肺组织总蛋白... 目的 研究不同潮气量机械通气对肺损伤的影响,探讨机械通气时的针对性护理措施.方法 将24只健康SD大鼠随机分为对照组（n=8）、小潮气量通气组（n=8,VT=8 ml/kg）和大潮气量通气组（n=8,VT=40ml/kg）.通气时间均为4 h.检测肺组织总蛋白、肺湿干重比（W/D）、白细胞计数和中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）含量以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白和mRNA的含量.结果与对照组比较,大潮气量通气组肺组织总蛋白、W/D、白细胞计数和MPO含量以及TNF-α蛋白和mRNA含量均显著增加（P〈0.05）,而小潮气量通气组上述指标的变化无统计学意义（P〉0.05）.结论 大潮气量机械通气可导致呼吸机所致肺损伤,临床上应加强对机械通气患者的护理防护. 展开更多

关键词 机械通气 肺损伤 护理

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时间给药法及护理干预对难治性高血压患者治疗效果的影响 被引量：5

7

作者 陈泽敏 滕娟 +2 位作者 曾瑞兰 邓智敏 邓洁霞 《海峡药学》 2016年第5期137-139,共3页

目的分析时间给药法及护理干预对难治性高血压患者治疗效果的影响。方法本研究对象选取2013年4月至2015年3月82例难治性高血压患者,根据随机原则分成对照组和实验组。其中对照组患者给予常规护理干预,实验组患者采用时间给药护理干预。... 目的分析时间给药法及护理干预对难治性高血压患者治疗效果的影响。方法本研究对象选取2013年4月至2015年3月82例难治性高血压患者,根据随机原则分成对照组和实验组。其中对照组患者给予常规护理干预,实验组患者采用时间给药护理干预。随访6个月,对比两组患者治疗效果、不良反应等差异。结果经过数据统计发现,实验组患者血压控制达标率82.93%明显高于对照组60.98%,用药期间不良反应发生率9.76%明显低于对照组34.15%,组间有显著的统计学差异(P<0.05)。结论对难治性高血压患者采用时间给药法及护理干预有助于控制血压达标,减少用药不良反应,具有积极的临床意义。 展开更多

关键词 时间给药法 护理干预 难治性高血压 治疗效果 不良反应

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HMGB1启动子荧光素酶报告基因的构建及鉴定 被引量：3

8

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第22期2580-2582,共3页

目的:构建高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子驱动的荧光素酶报告基因的真核表达载体pGL3-HMGB1P,转染肺泡上皮细胞(A549)后检测报告基因在机械牵张刺激中的转录活性.方法:以A549细胞基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增HMGB1启动子片段,测序... 目的:构建高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子驱动的荧光素酶报告基因的真核表达载体pGL3-HMGB1P,转染肺泡上皮细胞(A549)后检测报告基因在机械牵张刺激中的转录活性.方法:以A549细胞基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增HMGB1启动子片段,测序正确后克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3,将重组质粒pGL3-HMGB1P导入A549细胞,检测不同强度机械牵张(分别为5%和20%)刺激下荧光素酶的活性变化.结果:PCR和测序结果表明扩增的HMGB1启动子序列正确,酶切检测证实重组真核表达载体pGL3-HMGB1P构建成功.在5%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的2.9倍(P<0.05);而在20%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的6.2倍(P<0.01).结论:利用荧光素酶报告基因系统证实机械牵张可诱导HMGB1转录表达增加,为深入研究HMGB1转录表达的调控机制提供了基础. 展开更多

关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白1 基因 报告

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细胞外调节蛋白激酶信号通路参与机械牵张诱导肺泡上皮细胞高迁移率族蛋白B1的表达调控 被引量：3

9

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期919-922,共4页

目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法肺泡上皮细胞A549分为A、B、C3组,A组为对照组;B组A549细胞施加14%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B... 目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法肺泡上皮细胞A549分为A、B、C3组,A组为对照组;B组A549细胞施加14%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B组相同,只是于施加牵张前用ERK的特异性抑制剂PD98059预处理A549细胞2h。分别用免疫细胞化学染色和RT-PCR检测细胞HMGB1蛋白和mRNA的表达,用Westernblotting检测ERK激酶的活性。结果A549细胞施加14%牵张应变后,HMGB1蛋白和mRNA表达明显增加,ERK激酶活性明显增高(P<0.05);该诱导激活作用可被PD98059阻断。结论机械牵张通过ERK信号通路,调节A549细胞的HMGB1基因和蛋白表达。 展开更多

关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白B1 细胞外调节蛋白激酶 免疫组织化学 反转录.聚合酶链反应 免疫 印迹法 肺泡上皮细胞

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医患关系视角下投诉专线客服的身份构建

10

作者 孙文玲 《中国卫生标准管理》 2023年第13期45-49,共5页

在医患关系日益紧张的大背景下,医院投诉专线的作用越来越重要。对患者、医者和医院来说,投诉专线是一个非常好的桥梁,可以缓和医患矛盾,提升医院的形象,促进医院可持续发展。投诉专线客服应具备专业化、高效化、情感化的特质。在实际... 在医患关系日益紧张的大背景下,医院投诉专线的作用越来越重要。对患者、医者和医院来说,投诉专线是一个非常好的桥梁,可以缓和医患矛盾,提升医院的形象,促进医院可持续发展。投诉专线客服应具备专业化、高效化、情感化的特质。在实际工作中,投诉专线客服有3种身份定位,即基于患者的抱怨需求-耐心的倾听者、基于患者的咨询需求-热情的指引者、基于患者的投诉需求-客观的“第三者”。在动态身份构建过程中,投诉专线在默认身份、变异身份和动态身份下需要有不同的服务策略,以更好地服务患者。建议对投诉专线客服进行心理素养培训提升其动态身份构建能力,而且医院要不断完善投诉处理流程,不断提升医院的服务水平,改善医患关系。 展开更多

关键词 身份构建 客服 医院 医患关系 医患沟通 服务

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晚期糖基化终产物受体胞外段的原核表达及其相互作用蛋白的筛选 被引量：2

11

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期492-496,共5页

目的构建晚期糖基化终产物受体(receptor for ad-vanced glycation end-product,RAGE)胞外段基因的原核表达载体并诱导表达,应用噬菌体展示技术筛选其相互作用蛋白。方法用RT-PCR方法扩增人RAGE胞外段cDNA,构建于原核表达载体pET14b,转... 目的构建晚期糖基化终产物受体(receptor for ad-vanced glycation end-product,RAGE)胞外段基因的原核表达载体并诱导表达,应用噬菌体展示技术筛选其相互作用蛋白。方法用RT-PCR方法扩增人RAGE胞外段cDNA,构建于原核表达载体pET14b,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导RAGE胞外段融合蛋白表达,用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化并行Western blot鉴定。以重组RAGE胞外段蛋白为靶分子,进行3轮噬菌体展示环七肽库的筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选分隔良好的噬菌体克隆扩增后进行ELISA鉴定。对获得的阳性噬菌体克隆分别进行扩增、纯化,提取DNA测序后翻译为氨基酸序列,用BLAST软件搜索Gen-Bank中的同源序列。结果成功构建并表达、纯化了RAGE胞外段融合蛋白。经过3轮筛选后,随机挑取的24个噬菌体克隆中11个可与RAGE胞外段结合。对11个噬菌体测序后用BLAST软件搜索同源序列,得到14个编码蛋白。结论应用噬菌体展示技术筛选到与RAGE胞外段相互作用的蛋白,为进一步研究其功能和作用机制提供新线索。 展开更多

关键词 糖基化终产物 受体 噬菌体展示 肽库 蛋白质相互作用

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高迁移率族蛋白B1的表达纯化及其对单核细胞释放炎症因子的影响 被引量：2

12

作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期711-714,共4页

目的通过重组HMGB1蛋白，观察其对单核细胞株THP—1释放炎症因子的影响。方法用RT—PCR方法扩增人HMGB1 cDNA，将目的片段HMGB1亚克隆到原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠杆菌BL21，以IPTG诱导HMGB1融合蛋白表达，经Ni^2 -NTA和多黏菌素B... 目的通过重组HMGB1蛋白，观察其对单核细胞株THP—1释放炎症因子的影响。方法用RT—PCR方法扩增人HMGB1 cDNA，将目的片段HMGB1亚克隆到原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠杆菌BL21，以IPTG诱导HMGB1融合蛋白表达，经Ni^2 -NTA和多黏菌素B亲和层析柱纯化蛋白。分别用不同浓度的重组HMGB1蛋白（10、50和100ng,／mL）刺激THP-1细胞24h，应用Liquichip液相蛋白芯片系统检测培养上清中TNF—α、IL—1、IL-6和IL-8的浓度；以终浓度为100ng／mL的HMGB1蛋白分别刺激THP-1细胞1、3、6、12和24h，检测上述细胞因子的浓度。结果成功表达、纯化了重组HMGB1蛋白，与对照组相比，浓度为10、50和100．g／mL的HMGB1蛋白均使TNF—α、IL-1、IL-6和IL-8的分泌增加（尸均〈0．05）。并且随着HMGB1蛋白剂量的增加呈递增趋势；上述细胞因子水平在以100ng／mL的HMGB1刺激后3h或6h即开始升高（P均〈0．05），并且均随刺激时间的延长而呈递增趋势。结论HMGB1可诱导一系列细胞因子的产生和释放，为临床防治脓毒症提供了一个新的靶点。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白B1 单核细胞 脓毒症 炎症因子

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应用LiquiChip液相蛋白芯片技术检测HMGB1诱导肺泡巨噬细胞的细胞因子表达谱 被引量：1

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作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 佘守章 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期787-789,共3页

目的检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导肺泡巨噬细胞(AM)的细胞因子表达谱。方法 RT-PCR扩增HMGB1 cDNA,插入pGEX4T-1原核表达载体并转大肠杆菌,IPTG诱导HMGB1表达,Ni2+-NTA和多粘菌素B亲和层析柱分离纯化。应用LiquiChip液相蛋白芯片检... 目的检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导肺泡巨噬细胞(AM)的细胞因子表达谱。方法 RT-PCR扩增HMGB1 cDNA,插入pGEX4T-1原核表达载体并转大肠杆菌,IPTG诱导HMGB1表达,Ni2+-NTA和多粘菌素B亲和层析柱分离纯化。应用LiquiChip液相蛋白芯片检测HMGB1(20ng/ml)诱导AM细胞因子表达谱的变化。结果成功表达纯化的重组HMGB1可诱导AM肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、MIP-2、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及γ-干扰素(IFN)-γ的表达显著增加(P<0.01)。结论 HMGB1可诱导AM释放多种炎性细胞因子。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白B1 肺泡巨噬细胞 细胞因子

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机械牵张诱导THP-1细胞高迁移率族蛋白B1移位出核 被引量：1

14

作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 佘守章 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期382-385,共4页

目的:探讨机械牵张对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在THP-1细胞内移位的影响。方法:构建HMGB1-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的真核表达载体。通过两步亚克隆的方法,将HMGB1和EGFP的编码序列以融合蛋白的形式克隆到pcDNA3-HA载体上,随后... 目的:探讨机械牵张对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在THP-1细胞内移位的影响。方法:构建HMGB1-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的真核表达载体。通过两步亚克隆的方法,将HMGB1和EGFP的编码序列以融合蛋白的形式克隆到pcDNA3-HA载体上,随后转染THP-1细胞并施加机械牵张应变,荧光显微镜观察HMGB1在细胞内的表达及移位情况。结果:重组质粒经酶切鉴定证明构建正确,并在THP-1细胞中大量表达。荧光显微镜观察发现,HMGB1-EGFP融合蛋白主要分布于细胞核,经机械牵张18 h,可见细胞中融合蛋白从细胞核移位到细胞质,在细胞浆中观察到明显的绿色荧光。结论:成功构建了HMGB1-EGFP融合蛋白,在THP-1细胞中观察到机械牵张可诱导HMGB1移位出核。 展开更多

关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白质类 THP-1细胞

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外宾门诊患者调查及服务特点分析 被引量：2

15

作者 黄翠婵 《广州医药》 2006年第2期70-71,共2页

目的 探讨广州某宾馆外宾诊室患者就诊的特点，并总结做好本项工作的体会。方法 收集广州市中心一所较有代表性的宾馆外宾诊室2000—2005年资料共6775例。分析其惠病以及和国内患者不同的特点以总结经验。结果 患者主要采自：港澳地区（... 目的 探讨广州某宾馆外宾诊室患者就诊的特点，并总结做好本项工作的体会。方法 收集广州市中心一所较有代表性的宾馆外宾诊室2000—2005年资料共6775例。分析其惠病以及和国内患者不同的特点以总结经验。结果 患者主要采自：港澳地区（占47．7％），台湾省（17．0％），男性多于女性，疾病种类以内科病为主．呼吸道感染占48．8％，急性胃肠炎占15．2％。重危抢救的19例（0．3％）中，冠心病和急性酒精中毒比例较大（共9例）。结论 根据外宾和国内患者的不同特点，提高接诊医护人员的素质和业务水平，规范医疗管理尤为重要。 展开更多

关键词 外宾医疗点 医疗 服务要求

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利用生物素-链亲和素系统筛选呼吸机所致肺损伤HMGB1启动子结合蛋白

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作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 佘守章 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第21期2345-2347,共3页

目的:筛选呼吸机所致肺损伤(VILI)高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的启动子结合蛋白.方法:制备VILI大鼠模型,与正常对照组大鼠同期处死,取肺组织提取细胞核蛋白.用PCR法扩增末端带生物素标记的HMGB1启动子探针,将细胞核蛋白与制备的HMGB1启动... 目的:筛选呼吸机所致肺损伤(VILI)高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的启动子结合蛋白.方法:制备VILI大鼠模型,与正常对照组大鼠同期处死,取肺组织提取细胞核蛋白.用PCR法扩增末端带生物素标记的HMGB1启动子探针,将细胞核蛋白与制备的HMGB1启动子探针进行孵育,再以标记有链亲和素的磁珠分离HMGB1启动子-蛋白反应复合物,分别用0.25mol/L和1mol/LNaCl洗脱探针上结合的蛋白,SDS-PAGE电泳分离样品蛋白,并对凝胶进行银染显色,比较VILI组与正常对照组的差异条带.结果:两组细胞核蛋白中共观察到24条差异条带.分析差异条带显示,与正常对照组比较,在低亲和力作用水平,机械通气后有6个蛋白与HMGB1启动子的结合力增强,有2个蛋白的结合力减弱;在高亲和力作用水平,有10个蛋白与HMGB1启动子的结合力增强,有6个蛋白的结合力减弱.结论:筛选到一些VILI特异性HMGB1启动子结合蛋白,对于研究HMGB1的转录调控机制具有重要意义. 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白B1 机械通气 急性肺损伤 启动子 生物素-链亲和素

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重大突发公共卫生事件下医务人员职业紧张影响因素分析 被引量：3

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作者 谢丹萍 戴颖诗 +2 位作者 林瀚生 冯欣贤 包品红 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2023年第3期294-300,共7页

目的分析重大突发公共卫生事件下医务人员职业紧张现状及其影响因素。方法采取方便抽样方法,选择广州市491名医务人员作为研究对象,采用《工作内容问卷》《工作付出-回报失衡紧张量表》联合评估研究对象的工作要求-自主(JDC)和付出-回... 目的分析重大突发公共卫生事件下医务人员职业紧张现状及其影响因素。方法采取方便抽样方法,选择广州市491名医务人员作为研究对象,采用《工作内容问卷》《工作付出-回报失衡紧张量表》联合评估研究对象的工作要求-自主(JDC)和付出-回报失衡(ERI)模式职业紧张水平。结果研究对象的JDC、ERI模式职业紧张检出率分别为50.1%和52.5%;2种模式职业紧张检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,个人月收入越低、周工作时间越长者,检出JDC和ERI模式职业紧张的风险均越高(P值均<0.05);夜班、睡眠时间<6 h/d者、对单位提供的防护措施不满意者检出JDC和ERI模式职业紧张的风险分别高于无夜班、睡眠时间≥6 h/d、对单位提供的防护措施满意者(P值均<0.01);接触过新型冠状病毒感染病例或疑似病例的人员检出ERI模式职业紧张的风险高于无接触者(P<0.05)。结论重大突发公共卫生事件下,医务人员存在一定程度的JDC和ERI模式职业紧张;主要影响因素包括个人月收入、周工作时间、夜班、睡眠时间、对防护措施的满意度和职业暴露等。 展开更多

关键词 公共卫生事件 医务人员 职业紧张 影响因素

原文传递

甲基泼尼松龙冲击治疗小儿激素敏感肾病综合征的临床分析 被引量：3

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作者 莫筱玮 《系统医学》 2018年第20期107-108,131,共3页

目的对甲基泼尼松龙冲击治疗小儿激素敏感肾病综合征的临床效果作探讨。方法此次将2016年1月—2017年12月作为研究时间段,于期间随机抽取该院收治的激素敏感肾病综合征患儿84例为对象,将其以双盲法均分为两组:42例对照组患儿接受泼尼松... 目的对甲基泼尼松龙冲击治疗小儿激素敏感肾病综合征的临床效果作探讨。方法此次将2016年1月—2017年12月作为研究时间段,于期间随机抽取该院收治的激素敏感肾病综合征患儿84例为对象,将其以双盲法均分为两组:42例对照组患儿接受泼尼松口服治疗,42例观察组患儿接受甲基泼尼松龙冲击治疗;详细整理两组患儿临床治疗情况,将所获数据作对比分析。结果观察组患儿尿蛋白转阴时间(5.17±1.35)d比对照组(9.73±1.56)d短(t=6.932 1,P<0.05);观察组患儿治疗缓解率97.6%比对照组83.3%高(χ~2=5.160 4,P<0.05);观察组患儿3个月内复发率7.1%比对照组33.3%低(χ~2=7.385 1,P<0.05);观察组患儿体质量(34.10±4.37)kg/m^2、腹部脂肪厚度(10.52±2.14)mm、二头肌脂肪厚度(7.98±0.62)mm、骨密度(0.59±0.00)g/cm^2等指标数值比对照组优,(t=11.750 3、10.041 5、9.571 0、5.879 3,P<0.05);两组患儿用药期间均未见严重不良反应。结论激素敏感肾病综合征患儿接受甲基泼尼松龙冲击治疗的效果更佳。 展开更多

关键词 小儿 激素敏感肾病综合征 甲基泼尼松龙 冲击治疗

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针对大量噬菌体展示短肽序列的生物信息学分析策略的构建 被引量：1

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作者 丁宁 肖慧 +1 位作者 许立新 佘守章 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2008年第2期123-126,共4页

目的建立一种生物信息学分析预测方法，针对通过噬菌体展示技术获得的大量短肽信息，从中筛选出所需的目的功能蛋白。方法对应用噬菌体展示技术筛选脂多糖刺激的人外周血单核巨噬细胞株（THP-1）细胞获得的1263个七肽序列进行去冗余分... 目的建立一种生物信息学分析预测方法，针对通过噬菌体展示技术获得的大量短肽信息，从中筛选出所需的目的功能蛋白。方法对应用噬菌体展示技术筛选脂多糖刺激的人外周血单核巨噬细胞株（THP-1）细胞获得的1263个七肽序列进行去冗余分析，结合混洗算法和随机排列检验（RPT），统计非冗余七肽序列中特定三肽的丰度及其显著性。利用Clustal W软件对包含丰度具有显著性的三肽的七肽序列进行多序列比对分析，并根据氨基酸的性质，寻找特征性短肽，通过在线BLAST软件与SWISS～PROT蛋白序列数据库进行同源性分析，获得包含这些特征性短肽的已知蛋白，进一步应用SignalP和TMHMM软件预测其中的分泌蛋白和膜蛋白，并最终获得候选蛋白。结果得到TNF—α、toll样受体6（TLR-6）等炎性反应相关的细胞因子和膜蛋白及其表位模拟肽，为脓毒症等炎性反应相关疾病的研究和治疗提供依据。结论建立了一种生物信息学分析预测方法，该策略的建立为通过噬菌体展示技术筛选得到的短肽序列的分析提供一个全新的平台。 展开更多

关键词 噬菌体展示 生物信息学 短肽 分子模拟

原文传递

限制性输液对失血性休克大鼠血液系统的影响 被引量：1

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作者 肖慧 刘灵芝 丁宁 《中华现代护理杂志》 2008年第30期3154-3156,共3页

目的探讨限制性输液对失血性休克大鼠血液系统的影响。方法制作大鼠失血性休克模型，采取限制性输液和大量输液两种不同输液方法复苏大鼠失血性休克，对比各组不同时间点血红蛋白（HGB）、红细胞比容（HCT）、凝血酶原（PT）、部分凝血... 目的探讨限制性输液对失血性休克大鼠血液系统的影响。方法制作大鼠失血性休克模型，采取限制性输液和大量输液两种不同输液方法复苏大鼠失血性休克，对比各组不同时间点血红蛋白（HGB）、红细胞比容（HCT）、凝血酶原（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）以及纤维蛋白原含量（Fbg）的变化。结果休克模型120min后，与大量输液组比较，限制性输液组的HGB、HCT明显升高，分别为（142．5±12．3）g／L和（40．8±3．2）％（P均〈0．05），PT、APTT明显缩短，分别为（11．8±2．6）S和（57．2±8．1）S（P均〈0．05），Fbg含量显著增加，为（3．2±1．5）g/L（P〈0．05）。结论限制性输液可稳定HCT、维持HGB含量，缓解门和APTT时间的延长，阻止Fbg浓度的降低，是复苏失血性休克的理想方法。 展开更多

关键词 限制性输液 血液系统 失血性休克

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