抗肿瘤药物疗效的研究多集中在肿瘤细胞,目前针对正常细胞的研究颇少,有必要建立能进行定量分析的同源重组定量修复体系。我们已建立的模型可以探讨肿瘤药物化疗后对HEK293细胞DSBs修复的继发性后果。通过构建含有带I-SceⅠ酶切位点的...抗肿瘤药物疗效的研究多集中在肿瘤细胞,目前针对正常细胞的研究颇少,有必要建立能进行定量分析的同源重组定量修复体系。我们已建立的模型可以探讨肿瘤药物化疗后对HEK293细胞DSBs修复的继发性后果。通过构建含有带I-SceⅠ酶切位点的同源介导的重组修复底物(homologous direct recombination,HDR),或单链退火修复(single strand annealing,SSA)底物的细胞株,定量检测依托泊苷(etoposide,VP-l6)对同源性重组修复(homologous recombination,HR)通路的影响。成功构建了可用于定量检测DNA双链断裂(double-strand break,DSBs)诱导的SSA和HDR修复的正常人HEK293细胞应用模型。细胞毒结果证实,与SSA/293对照组对比,VP-16给药组16μmol/L(0.475±0.029 vs 1.000±0.000,P<0.001)细胞活力明显降低;与HDR/293对照组相比,VP-16给药组16μmol/L(0.458±0.188 vs 1.000±0.000,P<0.05)细胞活力降低。此外,本研究证实,VP-16抑制SSA修复,VP-16给药组2μmol/L与SSA/293对照组相比(0.575%±0.177%vs 1.352%±0.195%,P<0.05),修复效率降低;VP-16抑制HDR修复,VP-16给药组1μmol/L与HDR/293对照组修复效率相比(0.305%±0.078%vs.0.635%±0.049%,P<0.05),修复效率降低。VP-16诱导DNA损伤的同时,抑制HDR修复和SSA修复,修复效率呈现剂量依赖性。本研究结果可为抗肿瘤药物的临床应用提供某些指导。展开更多
腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine activated protein kinase,AMPK)是一种能够感受细胞内能量变化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在肿瘤的发生发展中起着十分重要的作用,根据AMPK催化亚基的差异分为AMPKα1和AMPKα2。AMPKα1亚基是AMPK的催化亚...腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine activated protein kinase,AMPK)是一种能够感受细胞内能量变化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在肿瘤的发生发展中起着十分重要的作用,根据AMPK催化亚基的差异分为AMPKα1和AMPKα2。AMPKα1亚基是AMPK的催化亚基,在不同组织器官中分布广泛。该文主要介绍AMPKα1的结构、激活方式和功能以及AMPKα1参与细胞内物质代谢的调节,总结归纳了AMPKα1在不同癌症中发挥的作用以及AMPKα1在不同癌症中作为药物靶点的潜在应用价值。AMPKα1可以作为癌诊断的标志物或药物靶点,为癌症的治疗提供一种思路,具有重要的临床意义。展开更多
文摘抗肿瘤药物疗效的研究多集中在肿瘤细胞,目前针对正常细胞的研究颇少,有必要建立能进行定量分析的同源重组定量修复体系。我们已建立的模型可以探讨肿瘤药物化疗后对HEK293细胞DSBs修复的继发性后果。通过构建含有带I-SceⅠ酶切位点的同源介导的重组修复底物(homologous direct recombination,HDR),或单链退火修复(single strand annealing,SSA)底物的细胞株,定量检测依托泊苷(etoposide,VP-l6)对同源性重组修复(homologous recombination,HR)通路的影响。成功构建了可用于定量检测DNA双链断裂(double-strand break,DSBs)诱导的SSA和HDR修复的正常人HEK293细胞应用模型。细胞毒结果证实,与SSA/293对照组对比,VP-16给药组16μmol/L(0.475±0.029 vs 1.000±0.000,P<0.001)细胞活力明显降低;与HDR/293对照组相比,VP-16给药组16μmol/L(0.458±0.188 vs 1.000±0.000,P<0.05)细胞活力降低。此外,本研究证实,VP-16抑制SSA修复,VP-16给药组2μmol/L与SSA/293对照组相比(0.575%±0.177%vs 1.352%±0.195%,P<0.05),修复效率降低;VP-16抑制HDR修复,VP-16给药组1μmol/L与HDR/293对照组修复效率相比(0.305%±0.078%vs.0.635%±0.049%,P<0.05),修复效率降低。VP-16诱导DNA损伤的同时,抑制HDR修复和SSA修复,修复效率呈现剂量依赖性。本研究结果可为抗肿瘤药物的临床应用提供某些指导。
文摘腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine activated protein kinase,AMPK)是一种能够感受细胞内能量变化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在肿瘤的发生发展中起着十分重要的作用,根据AMPK催化亚基的差异分为AMPKα1和AMPKα2。AMPKα1亚基是AMPK的催化亚基,在不同组织器官中分布广泛。该文主要介绍AMPKα1的结构、激活方式和功能以及AMPKα1参与细胞内物质代谢的调节,总结归纳了AMPKα1在不同癌症中发挥的作用以及AMPKα1在不同癌症中作为药物靶点的潜在应用价值。AMPKα1可以作为癌诊断的标志物或药物靶点,为癌症的治疗提供一种思路,具有重要的临床意义。
