口岸查验、实验室检测、快速联控三位一体构筑口岸防疫铜墙铁壁——广东口岸成功处置3起输入性基孔肯雅热疫情 被引量：16

1

作者 林苗 李华 +5 位作者 戴俊 黄鹂 黄吉城 郑夔 潘德观 吴惠明 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2009年第5期293-296,共4页

〔目的〕总结广东口岸发现并有效控制输入性基孔肯亚热病例的经验,完善国境口岸传染病预防控制新模式。〔方法〕2008年根据国家质检总局在国境口岸实施检疫查验制度改革的要求,广东出入境检验检疫局在广东口岸探索建立了"口岸查验... 〔目的〕总结广东口岸发现并有效控制输入性基孔肯亚热病例的经验,完善国境口岸传染病预防控制新模式。〔方法〕2008年根据国家质检总局在国境口岸实施检疫查验制度改革的要求,广东出入境检验检疫局在广东口岸探索建立了"口岸查验、实验室检测、快速联控"三位一体的口岸传染病预防控制新模式。〔结果〕2008年3月4日、10月3日、10月10日,广东出入境检验检疫局运用新模式,在国境口岸发现并成功处置3起5例中国内地输入性基孔肯亚热病例。〔结论〕3起基孔肯亚热病例的成功处置对在口岸阻断传染病在国际间传播有着现实的示范作用,填补了我国在基孔肯亚热的预防控制、实验室检测、临床诊治等方面的空白,充分体现了广东口岸卫生主管当局核心能力建设取得的实际成效。 展开更多

关键词 口岸 查验 实验室 检测 快速联控 基孔肯雅热

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广东口岸输入性疟疾疫情监测分析 被引量：12

2

作者 苏锦坤 师永霞 +6 位作者 洪烨 郑夔 李小波 黄吉城 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2011年第1期11-13,共3页

目的了解疟疾的流行情况,为口岸输入性疟疾的预防控制提供依据。方法对经广东口岸入境疑似疟疾的旅行者和不明原因发热者进行实验室检查和流行病学调查。结果 2006—2010年8月间对226份血样进行检查,共检出疟疾32例,恶性疟30例,间日疟2... 目的了解疟疾的流行情况,为口岸输入性疟疾的预防控制提供依据。方法对经广东口岸入境疑似疟疾的旅行者和不明原因发热者进行实验室检查和流行病学调查。结果 2006—2010年8月间对226份血样进行检查,共检出疟疾32例,恶性疟30例,间日疟2例;其中男28例,女4例。感染者主要是中青年、劳务工人,多数来自非洲地区,发病季节以6-8月份居多。结论广东口岸地区面临输入性疟疾的威胁,出入境检验检疫机构应及时掌握国内外疫情信息,加强口岸检疫查验、疾病监测,一旦发现疫情,及时采取有效的控制措施,防止输入性疟疾的播散。 展开更多

关键词 输入性疟疾 流行病学 监测 口岸

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黄热病现状分析及研究进展 被引量：9

3

作者 苏锦坤 师永霞 +6 位作者 洪烨 郑夔 李小波 黄吉城 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2011年第2期139-144,共6页

黄热病是黄病毒科、黄病毒属的黄热病病毒引起的急性传染病,经蚊媒传播,主要发生在非洲和美洲地区,严重威胁人类健康。目前该病尚无特效药治疗,接种疫苗是最好的预防途径。虽然亚洲地区尚未发现黄热病,但随着全球经济的发展,国际间的人... 黄热病是黄病毒科、黄病毒属的黄热病病毒引起的急性传染病,经蚊媒传播,主要发生在非洲和美洲地区,严重威胁人类健康。目前该病尚无特效药治疗,接种疫苗是最好的预防途径。虽然亚洲地区尚未发现黄热病,但随着全球经济的发展,国际间的人群交往更为便利,全球贸易一体化和都市化生活等因素使得病毒和传播媒介更易在各个国家之间传播。我国应长期保持警惕,及时预防、控制该病通过国境口岸传入。本文就黄热病流行病学、预防控制,以及疫苗研究等情况进行了综述。 展开更多

关键词 黄热病 流行病学 预防控制 疫苗 现状分析 研究进展

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2009—2010年广东国境口岸军团菌检测结果及分析 被引量：5

4

作者 幸芦琴 李小波 +4 位作者 洪烨 苏锦坤 师永霞 郭波旋 黄吉城 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2011年第1期14-16,共3页

目的对广东地区国境口岸中央空调冷凝水进行军团菌检测,调查军团菌各血清型在口岸的分布规律。方法通过对2009—2010年广东地区国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检... 目的对广东地区国境口岸中央空调冷凝水进行军团菌检测,调查军团菌各血清型在口岸的分布规律。方法通过对2009—2010年广东地区国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检测及血清学分型,并对检测结果进行统计分析。结果 2009年共检测口岸中央空调水样16批,检测样本42份,从中检出军团菌12例,阳性率为28.56%,其中嗜肺军团菌11例;2010年1-8月检测样本10批,从48份样本中检出军团菌21例,阳性率为43.75%,全部为嗜肺军团菌。结论 2010年度军团菌检出率明显高于2009年,阳性样本中嗜肺军团菌L1型占比率较大。 展开更多

关键词 国境口岸 军团菌 中央空调 血清型 冷凝水

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荧光定量PCR检测细菌NDM-1基因方法的探讨 被引量：1

5

作者 张建明 黄吉城 +6 位作者 吴健 王向阳 何洪涛 陈姗 师永霞 李小波 洪烨 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第1期133-135,共3页

目的:将Taqman荧光定量PCR技术与SYBRGreen染料RT-PCR技术比较后,应用于检测细菌NDM-1基因。方法:使用Taqman荧光定量PCR方法与SYBRGreen染料RT-PCR对已知特性的标准株中NDM-1基因检测,对比其扩增灵敏度。结果:Taqman荧光定量PCR技术灵... 目的:将Taqman荧光定量PCR技术与SYBRGreen染料RT-PCR技术比较后,应用于检测细菌NDM-1基因。方法:使用Taqman荧光定量PCR方法与SYBRGreen染料RT-PCR对已知特性的标准株中NDM-1基因检测,对比其扩增灵敏度。结果:Taqman荧光定量PCR技术灵敏度高于SYBRGreen染料RT-PCR法,所测标准株中NDM-1基因转录水平可高达7.5×104拷贝/μl,比SYBRGreen染料RT-PCR技术检测灵敏度高7.8倍。结论:Taqman荧光PCR技术对超级耐药菌NDM-1基因具有较高的敏感性和准确性,可以作为对超级细菌进行监控与防控的方法。 展开更多

关键词 NDM-1 Taqman荧光定量PCR SYBRGreen染料RT-PCR

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二氧化氯溶液消毒剂对呼吸道病毒的杀灭效果评估 被引量：1

6

作者 叶丹 黄文博 +4 位作者 李小波 关文达 伍时冠 杨子峰 黄吉城 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第16期3105-3107,3157,共4页

目的:评估"菌bye-bye"消毒剂对甲型H1N1流感病毒PR8(PR8)、呼吸道合胞病毒(RSV)、3型腺病毒(ADV3)、人感染H7N9禽流感病毒(H7N9)的体外杀灭效果。方法:参考《消毒技术规范》和受试产品说明书进行细胞毒性试验、消毒剂中和试... 目的:评估"菌bye-bye"消毒剂对甲型H1N1流感病毒PR8(PR8)、呼吸道合胞病毒(RSV)、3型腺病毒(ADV3)、人感染H7N9禽流感病毒(H7N9)的体外杀灭效果。方法:参考《消毒技术规范》和受试产品说明书进行细胞毒性试验、消毒剂中和试验和对PR8、RSV、ADV3、H7N9病毒的体外杀灭实验。结果:(1)候选中和剂选定0.02mol/L硫代硫酸钠(Na_2S_2O_4);(2)候选中和剂、"菌-bye-bye"消毒剂及两者混合物对细胞毒性低;(3)候选中和剂能完全中和消毒剂消毒效果;(4)随着"菌bye-bye"消毒剂的浓度增大,病毒杀灭效果亦越好。在其不稀释的条件下,除了PR8毒株外,其他3种病毒的平均灭活率均在99.99%以上,且平均病毒TCID50负对数值(log_(10)TCID_(50)/m L)均降低4 log_(10)或以上;对半稀释后对RSV的杀灭效果最好,而对ADV3的杀灭效果最差。结论:高浓度"菌bye-bye"消毒剂对呼吸道病毒的杀灭效果较好,且对细胞的毒性较小,是一种安全、高效的消毒剂,值得临床推广。 展开更多

关键词 二氧化氯 消毒剂 呼吸道 病毒 感染

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1例国内罕见的输入性卵形疟的实验室检测 被引量：31

7

作者 师永霞 黄吉城 +5 位作者 苏锦坤 李小波 幸芦琴 郑夔 洪烨 郭波旋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期914-917,920,共5页

目的对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法制备疑似疟疾患者血样的血涂片,吉姆萨染色后进行疟原虫的镜检观察。利用实验室自行研制的疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和实时荧光PCR检测方法,对该血样... 目的对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法制备疑似疟疾患者血样的血涂片,吉姆萨染色后进行疟原虫的镜检观察。利用实验室自行研制的疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和实时荧光PCR检测方法,对该血样进行疟疾检测及分型。将PCR扩增片段进行序列测定,并与已知的卵形疟序列进行blast比对分析。结合血样的分子生物学检测结果,重新对镜检结果进行复核。结果血样初次镜检为疟疾阴性。使用疟原虫巢式PCR通用引物对血样的DNA进行PCR检测,扩增出了预期大小约240bp的条带;巢式PCR分型检测表明,血样仅扩增出预期大小约450bp的卵形疟条带,无对应大小的恶性疟、间日疟和三日疟扩增条带产生。疟原虫通用型和卵形疟特异性的荧光PCR检测结果均为典型的S形阳性曲线,卵形疟扩增片段的熔解温度为72.5℃。序列分析表明,扩增片段长度为434bp,blast比对发现去除引物后的393个碱基与GenBank DQ845247等卵形疟的SSU rRNA对应部分的基因序列同源性为100%。重新对血涂片进行镜检复核,结果在薄血膜中发现了卵形疟的环状滋养体,被寄生的红细胞为椭圆形,边缘呈伞矢状。结论使用巢式PCR、实时荧光PCR、序列分析和镜检等方法,证实该例输入性的疑似疟疾患者为卵形疟原虫感染。 展开更多

关键词 输入性卵形疟 镜检 巢式PCR 实时荧光PCR 序列分析

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广东口岸2010-2011年入境人员疟疾监测现状及对策分析 被引量：17

8

作者 戴俊 洪烨 +7 位作者 张显光 张文 邓荆 吴惠明 黄鹂 潘德观 黄吉城 师永霞 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期517-520,共4页

目的分析经广东出入境检验检疫局所辖旅检口岸(简称广东口岸)入境输入性疟疾患者的流行病学特征,研究其罹患因素,探讨如何完善口岸疟疾防控措施。方法对2010-2011年间在广东口岸发现的输入性疟疾患者进行流行病学分析,并针对其主要特征... 目的分析经广东出入境检验检疫局所辖旅检口岸(简称广东口岸)入境输入性疟疾患者的流行病学特征,研究其罹患因素,探讨如何完善口岸疟疾防控措施。方法对2010-2011年间在广东口岸发现的输入性疟疾患者进行流行病学分析,并针对其主要特征探讨相应的防控措施。结果 2010-2011年广东口岸共发现40名输入性疟疾病例(其中37名为恶性疟,3名为间日疟);非洲地区是主要的输入性疟疾疫情疫源地;中国籍赴非洲归国劳务人员成为最主要的输入性疟疾病例来源;绝大多数输入性疟疾患者均乘坐飞机入境;入境时间主要为2010年6～9月和2010年11月～2011年2月;入境时主要症状为头痛、畏寒、眼结膜充血、咽部充血;主要罹患因素包括广泛存在的疟疾疫情、恶劣的环境、蚊虫叮咬、患者缺乏疟疾自我防护常识等。结论全球多个地区尤其是非洲地区疟疾疫情形势仍然严峻,在外生活时间较长的赴外归国劳务人员等较易感染疟疾,加之我国境内疟疾传播媒介孳生,易感者数量庞大,高发的输入性疟疾疫情对我国的威胁巨大,检验检疫、卫生、商务、外事、劳务等部门应通力合作,采取积极主动的境外控制和境内监管措施,以达到保护人民身体健康、阻断疫情跨境传播,最终在中国消除疟疾的目标。 展开更多

关键词 疟疾 流行病学 传染病控制

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广东首例苏里南输入性寨卡病毒感染病例的实验室检测 被引量：7

9

作者 梁洁怡 戴俊 +8 位作者 黎东红 师永霞 黄吉城 袁帅 郑夔 李小波 张显光 宋卫 吴惠明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期522-525,共4页

目的对从广州白云国际机场口岸入境的一例自苏里南归国发热人员进行寨卡病毒实验室检测。方法采集发热人员的血液和唾液样本,同时使用两种寨卡病毒实时荧光RT-PCR试剂进行寨卡病毒核酸检测。RT-PCR扩增寨卡病毒部分基因片段,并进行序列... 目的对从广州白云国际机场口岸入境的一例自苏里南归国发热人员进行寨卡病毒实验室检测。方法采集发热人员的血液和唾液样本,同时使用两种寨卡病毒实时荧光RT-PCR试剂进行寨卡病毒核酸检测。RT-PCR扩增寨卡病毒部分基因片段,并进行序列测定和同源性比较。基于扩增片段构建系统进化树,分析输入性病例的来源。结果实时荧光RT-PCR结果显示,该病例血清样本寨卡病毒核酸弱阳性、唾液样本寨卡病毒核酸阳性。RT-PCR扩增出预期大小约1.5Kb片段,测序结果表明该片段与巴西寨卡病毒株(GenBank号KX197250)相应序列的同源性为99%。系统进化树显示该病毒属亚洲谱系。结论根据患者流行病学史、临床表现和病例标本核酸检测情况,确诊该病例为广东首例从苏里南地区输入性寨卡病例。 展开更多

关键词 寨卡病毒 实时荧光RT-PCR 核酸检测 进化分析

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一例输入性基孔肯雅病的实验室诊断 被引量：5

10

作者 洪烨 郑夔 +9 位作者 黄吉城 李小波 相大鹏 郭波旋 李华 宋卫 戴俊 钟玉清 幸芦琴 师永霞 《中华疾病控制杂志》 CAS 2008年第5期502-504,共3页

关键词 虫媒病毒 伊蚊属 逆转录聚合酶链反应

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广东国境口岸五种蚊种核糖体基因第2内转录间隔区分子鉴定方法研究 被引量：7

11

作者 师永霞 幸芦琴 +5 位作者 洪烨 李小波 郭波旋 相大鹏 黄吉城 郑夔 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2008年第1期24-28,共5页

〔目的〕建立国境口岸不同蚊种的核糖体基因第2内转录间隔区(rDNA-ITS2)分子鉴定方法及其系统进化关系。〔方法〕针对蚊虫的rDNA核酸序列保守性,设计扩增rDNA-ITS2编码区的PCR引物,对广州机场、江门和湛江等国境口岸采集的致倦库蚊、三... 〔目的〕建立国境口岸不同蚊种的核糖体基因第2内转录间隔区(rDNA-ITS2)分子鉴定方法及其系统进化关系。〔方法〕针对蚊虫的rDNA核酸序列保守性,设计扩增rDNA-ITS2编码区的PCR引物,对广州机场、江门和湛江等国境口岸采集的致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊等成蚊和实验室喂养的蚊幼虫进行PCR扩增和序列测定,并与GenBank中已知蚊虫的rDNA-ITS2进行同源性比较和系统进化分析。〔结果〕不同蚊虫的rDNA-ITS2扩增片断长度不同,M2引物对致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊和中华按蚊的扩增片断分别为447bp～520bp、432bp～438bp、527bp～586bp、439bp～448bp和644bp。序列分析和系统进化关系显示,尖音库蚊组和三带喙库蚊聚类为库蚊属,再与白纹伊蚊和骚扰阿蚊聚类为库蚊亚科,库蚊亚科再与中华按蚊进行聚类,分子进化与蚊虫形态学鉴定的亲缘关系保持一致。〔结论〕建立的rDNA-ITS2分子鉴别技术可成功地应用于国境口岸范围内成蚊和幼蚊的亚科、属和种的区分和确定系统发育关系。这可以弥补蚊虫形态特征信息量的不足等传统分类系统的缺点,对国境口岸范围外来的或新发现的蚊种的鉴别提供了分子水平的技术依据。 展开更多

关键词 蚊 DNA 核糖体 第2内转录间隔区 聚合酶链反应 序列分析 系统进化树

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军团菌及其实验室检测方法研究进展 被引量：7

12

作者 丁国允 李小波 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第5期1335-1338,共4页

军团菌病（Legionellosis）是由军团菌（Legionella）引起的一种人类呼吸道传染病。1977年,美国的McDade等[1,2]首次从患者肺部组织中分离到该病原体,随后欧洲、澳大利亚等国家和地区相继发现军团菌病例;1982年,我国南京市在国内首次报... 军团菌病（Legionellosis）是由军团菌（Legionella）引起的一种人类呼吸道传染病。1977年,美国的McDade等[1,2]首次从患者肺部组织中分离到该病原体,随后欧洲、澳大利亚等国家和地区相继发现军团菌病例;1982年,我国南京市在国内首次报道了军团菌病, 展开更多

关键词 军团菌 检测方法

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广东国境口岸中央空调水嗜肺军团菌检测及结果分析 被引量：6

13

作者 李小波 师永霞 +5 位作者 郑夔 洪烨 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 黄吉城 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第12期2602-2604,共3页

目的:为了解广东地区国境口岸中央空调冷凝水中军团菌的阳性率,分析军团菌对出入境旅客健康的潜在危害并为北京奥运会期间国境口岸军团菌防控提供理论依据。方法:通过对2007年度和2008年度广东地区6个国境口岸中央空调冷凝水的采集、处... 目的:为了解广东地区国境口岸中央空调冷凝水中军团菌的阳性率,分析军团菌对出入境旅客健康的潜在危害并为北京奥运会期间国境口岸军团菌防控提供理论依据。方法:通过对2007年度和2008年度广东地区6个国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检测及血清学分型,检验依据为ISO11731:1998。对检测结果进行分析。结果:2007年度从63份样本中检出军团菌7例,检测阳性率为11.1%,其中嗜肺军团菌4例;2008年度从46份样本中检出军团菌3例,检测阳性率为6.5%,全部为嗜肺军团菌。结论:本次军团菌检出率略低于有关文献报道的全国平均检出率,阳性样本中嗜肺军团菌L1型占比率较大(30%);本研究结果有利于分析国境口岸空调通风系统的卫生状况,为口岸卫生控制提供技术指导,有利于北京奥运会和谐、顺利举办。 展开更多

关键词 国境口岸 军团菌 北京奥运会

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基孔肯雅病毒LAMP检测方法的建立及其应用研究 被引量：5

14

作者 李小波 鲁曦 +4 位作者 幸芦琴 郑夔 单潇潇 黄吉城 石磊 《中国卫生检验杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期506-508,共3页

目的:建立快速、灵敏、特异的基孔肯雅病毒(CHIKV)环介导等温基因扩增(LAMP)检测方法,将该方法应用于基孔肯雅热(CHIK)可疑患者的快速筛查。方法:根据CHIKV核酸序列多重比对结果设计并合成LAMP专用的扩增引物,摸索最佳反应条件,建立灵... 目的:建立快速、灵敏、特异的基孔肯雅病毒(CHIKV)环介导等温基因扩增(LAMP)检测方法,将该方法应用于基孔肯雅热(CHIK)可疑患者的快速筛查。方法:根据CHIKV核酸序列多重比对结果设计并合成LAMP专用的扩增引物,摸索最佳反应条件,建立灵敏、特异的CHIKV核酸LAMP检测新方法;应用该方法对疑似患者血清中提取的核酸进行快速检测。结果:本方法对CHIKV样本的检测灵敏度达到27拷贝/反应,检测灵敏度高于普通PCR法,略低于实时荧光PCR法。本方法快速、灵敏,并具有较高的特异性和很好的重复性,可在两小时内对CHIK疑似病例进行准确诊断。利用本方法对入境CHIK患者及国内患者样本进行检测,均取得了良好的效果。结论:本方法适合国境口岸一线及基层卫生机构对CHIK可疑患者进行快速检测,对防止CHIK疫情向我国的传播及保障我国公共卫生安全均具有重要意义。 展开更多

关键词 基孔肯雅病毒 环介导等温基因扩增

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非洲籍输入性基孔肯雅热一例的实验室诊断 被引量：2

15

作者 洪烨 郑夔 +5 位作者 相大鹏 黄吉城 师永霞 戴俊 李小波 幸芦琴 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期524-526,共3页

基孔肯雅热是由基孔肯雅病毒引起,经伊蚊叮咬传播,以发热、关节疼痛、皮疹和轻度出血为主要特征的病毒性急性传染病.基孔肯雅病毒是单股RNA病毒,属于披膜病毒科甲病毒属.1952年研究人员发现基孔肯雅热在坦桑尼亚流行,并从严重关节炎患... 基孔肯雅热是由基孔肯雅病毒引起,经伊蚊叮咬传播,以发热、关节疼痛、皮疹和轻度出血为主要特征的病毒性急性传染病.基孔肯雅病毒是单股RNA病毒,属于披膜病毒科甲病毒属.1952年研究人员发现基孔肯雅热在坦桑尼亚流行,并从严重关节炎患者血液中分离出基孔肯雅病毒.1956年,Ross[1]从急性期患者的血液及野外捕获的埃及伊蚊体内分离出基孔肯雅病毒.近年来,本病在东非海岸、印度洋岛屿、印度及东南亚地区流行,导致超过200 万人感染发病,且流行地区不断扩大, 展开更多

关键词 基孔肯雅热 实验室诊断 基孔肯雅病毒 输入性 非洲 RNA病毒 急性传染病 披膜病毒科

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输入性甲型H1N1流感病毒M、NP、PB1基因进化特征 被引量：2

16

作者 师永霞 刘丽珊 +7 位作者 黄吉城 洪烨 丁国允 李小波 郑夔 苏锦坤 幸芦琴 钟玉清 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期488-491,共4页

目的分析口岸输入性甲型H1N1流感病毒的M、NP和PB1基因进化特征,及时发现变异株。方法对广东口岸2009-2011年检测的甲型H1N1流感阳性病例进行M、NP和PB1基因的RT-PCR扩增和核苷酸序列测定。以2009年甲型H1N1流感代表株A/California/04/2... 目的分析口岸输入性甲型H1N1流感病毒的M、NP和PB1基因进化特征,及时发现变异株。方法对广东口岸2009-2011年检测的甲型H1N1流感阳性病例进行M、NP和PB1基因的RT-PCR扩增和核苷酸序列测定。以2009年甲型H1N1流感代表株A/California/04/2009/H1N1的M、NP和PB1基因作为参考序列,分析输入性病例的系统进化树、核苷酸及氨基酸序列同源性和变异位点。结果 M基因系统进化树分为4个分支,2009年病毒与2010年病毒主要分布在第Ⅰ分支,2011年检出的多数病毒聚集于第Ⅳ分支。同源性结果显示M基因高度保守,仅有5个核苷酸位点发生显著变异,对应的蛋白序列仅在氨基酸V80I位点出现突变。所有病毒NP蛋白均出现V100I突变,同时零星出现K452R突变。PB1蛋白氨基酸序列在G154D、I397M和I435T等位点发生较明显突变。结论 2009-2011年输入性甲型H1N1流感病毒M、NP、PB1基因已发生一定程度的变异,对口岸和国内流感防控提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 流感病毒A型 H1N1亚型 M基因 NP基因

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甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR标准阳性模板的构建 被引量：2

17

作者 方盛藩 郑夔 +1 位作者 李小波 苏锦坤 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第1期1-3,共3页

目的制备甲型H1N1流感病毒核酸检测标准阳性模板,将其应用于日常甲型流感病毒荧光定量PCR(RTPCR)检测中。方法根据甲型H1N1流感病毒基因序列设计出M、HA、NA片段的全基因扩增引物,采用RT-PCR方法扩增以上3个基因片段,将3个目标片段分别... 目的制备甲型H1N1流感病毒核酸检测标准阳性模板,将其应用于日常甲型流感病毒荧光定量PCR(RTPCR)检测中。方法根据甲型H1N1流感病毒基因序列设计出M、HA、NA片段的全基因扩增引物,采用RT-PCR方法扩增以上3个基因片段,将3个目标片段分别连接到PGM-T载体上构建重组质粒,筛选出分别含M、HA、NA基因阳性质粒,将以上阳性质粒两两连接,最后制备成含M、HA、NA基因的标准阳性模板。结果此模板在-20℃保存3个月对荧光定量PCR结果无显著影响,具有较好的稳定性,Ct值最大变异系数为1.30%。使用该模板建立的定量范围为1×1010copy/ml^1×1019copy/ml,标准曲线方程为:y=-2.7232x+40.99。检测方法表明该标准阳性模板具有良好的特异性。结论本次制备成的标准阳性模板适用于各甲型H1N1流感病毒检测实验室的质量控制,可用于临床诊断。 展开更多

关键词 甲型H1N1流感病毒 标准模板 荧光定量聚合酶链式反应

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军团菌快速检测方法的建立及其在国境口岸的应用 被引量：1

18

作者 幸芦琴 丁国允 +1 位作者 苏锦坤 李小波 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第6期1225-1228,共4页

目的:建立适合口岸出入境大厅及其他公共设施中央空调水的分子生物学检测方法,以实现中央空调水的快速检测,提高检测速度及灵敏度。方法:根据军团菌核酸序列多重比对结果设计并合成实时荧光PCR的引物和探针,分别对军团菌16SrDNA和Mip基... 目的:建立适合口岸出入境大厅及其他公共设施中央空调水的分子生物学检测方法,以实现中央空调水的快速检测,提高检测速度及灵敏度。方法:根据军团菌核酸序列多重比对结果设计并合成实时荧光PCR的引物和探针,分别对军团菌16SrDNA和Mip基因相应片段进行扩增;建立快速、特异的军团菌分子快速检测新方法,并将该方法应用于对口岸中央空调水进行快速检测。结果:本研究以16SrDNA目标序列检测结果判断样本中是否存在军团菌,以Mip目标序列检测样本中是否存在嗜肺军团菌;本研究的方法快速、特异,能在2 h内完成对空调水样的检测。结论:本方法大大提高了军团菌的检测速度,提高了检测灵敏度,非常适合应用于中央空调水的快速检测。 展开更多

关键词 军团菌 检测 口岸

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诺如病毒快速检测方法的建立及其在国境卫生检疫中的应用 被引量：1

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作者 李小波 师永霞 +5 位作者 郑夔 洪烨 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 黄吉城 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第11期2303-2304,2329,共3页

目的:建立快速、特异的诺如病毒实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR相结合检测方法,对人感染诺如病毒进行快速检测。方法:根据国外最新流行的诺如病毒核酸序列,设计并合成诺如病毒基因扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件,制定出快速、灵... 目的:建立快速、特异的诺如病毒实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR相结合检测方法,对人感染诺如病毒进行快速检测。方法:根据国外最新流行的诺如病毒核酸序列,设计并合成诺如病毒基因扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件,制定出快速、灵敏检测诺如病毒核酸的实时荧光RT-PCR检测方法及常规RT-PCR检测方法。结果:实验证明,本方法将实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR检测方法相结合,能在5 h内快速确认诺如病毒,检测灵敏度达到102拷贝/反应,具有快速、灵敏的特点,且具有较高的特异性和重复性。结论:本实验室利用本方法,首次在广州某国境口岸从外籍发热船员样本中检出5例输入性GGⅡ群诺如病毒。该方法对防止诺如病毒传入我国,保障我国国境卫生安全具有重要意义。 展开更多

关键词 诺如病毒 实时荧光RT—PCR

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2009-2011年广州地区甲型H1N1流感病毒对奥司他韦耐药性分析 被引量：8

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作者 关文达 杨子峰 +9 位作者 伍时冠 王玉涛 陈荣昌 钟南山 徐国荣 李铭源 罗翌 李小波 押谷仁 鈴木陽 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-20,共5页

目的分析2009--2011年广州地区甲型HINl流感病毒对奥司他韦的耐药情况。方法选取2009年7月至2011年4月从广州地区分离的甲型HlNl流感病毒192株，通过对病毒的血凝素和神经氨酸酶基因进行序列测定，并利用数据库和软件进行生物信息学分... 目的分析2009--2011年广州地区甲型HINl流感病毒对奥司他韦的耐药情况。方法选取2009年7月至2011年4月从广州地区分离的甲型HlNl流感病毒192株，通过对病毒的血凝素和神经氨酸酶基因进行序列测定，并利用数据库和软件进行生物信息学分析；测定病毒对奥司他韦的敏感度，分析广州地区甲型H1N1流感病毒的耐药情况和变异规律。结果192株中1株神经氨酸酶基因发生$247N神经氨酸酶耐药突变，对奥司他韦的敏感活性（IC）50为0。45nmol／L，比野生株下降了2．5倍。进化分析结果表明该耐药株未在广州地区流行，且与2011年初澳大利亚和新加坡流行的$247N耐药株不处于同一进化分支。结论广州地区甲型HlNl流感病毒对奥司他韦耐药的比例低，但需要加强耐药株的监测，防控来自境外输人性耐药株的传播。 展开更多

关键词 流感病毒A型 HlNl亚型 奥司他韦 耐药性

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