双酚A对激素相关肿瘤细胞增殖活性的影响 被引量：8

1

作者 刘文敏 许强 +4 位作者 阴海鹏 李翠玲 孙晓萌 顾洪涛 张玲 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第1期9-11,共3页

目的研究环境雌激素双酚A(BPA)对人卵巢癌3AO细胞、子宫内膜癌HHUA细胞及前列腺癌DU145细胞株增殖活性的影响,探讨BPA的致瘤性。方法将不同浓度的BPA以及17β-雌二醇(17β-E2)作用于3AO、HHUA及DU145细胞,并设溶剂对照,采用MTT法测定药... 目的研究环境雌激素双酚A(BPA)对人卵巢癌3AO细胞、子宫内膜癌HHUA细胞及前列腺癌DU145细胞株增殖活性的影响,探讨BPA的致瘤性。方法将不同浓度的BPA以及17β-雌二醇(17β-E2)作用于3AO、HHUA及DU145细胞,并设溶剂对照,采用MTT法测定药物作用48 h的细胞增殖情况,并以浓度为10-9mol/L的BPA、10-7mol/L的E2作用于三种细胞,检测药物作用0、24、48、72 h的细胞增殖活性。结果与溶剂对照相比,BPA分别在10-5、10-9mol/L的浓度促进3AO、HHUA及DU145细胞增殖(P<0.05);10-9mol/LBPA作用48、72 h对HHUA及DU145细胞均有促增殖效应,与溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BPA可促进激素相关肿瘤细胞3AO、HHUA及DU145的增殖,且其促进肿瘤细胞的增殖效应与剂量、时间相关。提示BPA的污染可能与激素相关性肿瘤的发生发展有关。 展开更多

关键词 环境雌激素 双酚A 3AO细胞 HHUA细胞 DU145细胞 细胞增殖

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宫清颗粒预防和治疗米非司酮-米索前列醇药物流产后出血的机制 被引量：4

2

作者 李霞 刘瑞芬 +5 位作者 师伟 王丽 孙建丽 周宪宾 郭钰琪 姚成芳 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期179-184,共6页

目的探讨宫清颗粒诱导米非司酮-米索前列醇药流后人早孕绒毛膜、蜕膜组织细胞凋亡的作用机制。方法将240例受试者随机分为宫清药流组(A组)、茜芷药流组(B组)、单纯药流组(C组)及人工流产组(D组),各60例。收集各组绒毛膜和蜕膜组织,缺口... 目的探讨宫清颗粒诱导米非司酮-米索前列醇药流后人早孕绒毛膜、蜕膜组织细胞凋亡的作用机制。方法将240例受试者随机分为宫清药流组(A组)、茜芷药流组(B组)、单纯药流组(C组)及人工流产组(D组),各60例。收集各组绒毛膜和蜕膜组织,缺口原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率(AR),免疫组化法检测Fas、FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达。结果A组绒毛膜与蜕膜组织细胞AR、Fas、FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达明显升高,与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论宫清颗粒能促进Fas/FasL介导的凋亡信号转导,激活Caspase级联反应,诱导人早孕绒毛膜、蜕膜组织细胞凋亡,促进绒毛膜与蜕膜组织完全排出,进而防治药流后出血。 展开更多

关键词 绒毛膜 蜕膜 细胞凋亡 恶露不绝 宫清颗粒

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宫清颗粒防治药物流产后出血现代文献依据 被引量：1

3

作者 李霞 刘瑞芬 +3 位作者 郭钰琪 周宪宾 王丽 姚成芳 《山东中医药大学学报》 2009年第1期9-10,共2页

目的:通过分析现代中医文献,探讨药物流产后出血的病机特点及辨证论治规律,为宫清颗粒防治本病提供文献学依据。方法:收集现代中医药有关防治药物流产后出血的文献报道,采用频数分析方法研究,分析其病机特点及治疗规律。结果:文献研究显... 目的:通过分析现代中医文献,探讨药物流产后出血的病机特点及辨证论治规律,为宫清颗粒防治本病提供文献学依据。方法:收集现代中医药有关防治药物流产后出血的文献报道,采用频数分析方法研究,分析其病机特点及治疗规律。结果:文献研究显示",瘀、虚、热"是本病的主要病机",补虚、化瘀、清热"是防治本病的基本思路。结论:宫清颗粒的组方立法原则符合本研究统计结果。 展开更多

关键词 药物流产 异常子宫出血 现代中医文献 频数分析 宫清颗粒

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中药提取物逆转K562／ADM细胞的耐药作用及其分子机制的探讨 被引量：1

4

作者 乔高娟 李贵海 +6 位作者 杨炜华 温培娥 任霞 范华 唐天华 任海全 姜国胜 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2009年第6期474-476,共3页

目的观察两种中药提取物黄芩苷、京尼平苷对多药耐药（MDR）K562／ADM细胞的耐药逆转作用，探讨其分子机制。方法建立阿霉素（ADM）诱导K562／ADM细胞耐药模型，分别将不同浓度黄芩苷、京尼平苷作用于K562／ADM细胞，用四甲基偶氮唑盐（... 目的观察两种中药提取物黄芩苷、京尼平苷对多药耐药（MDR）K562／ADM细胞的耐药逆转作用，探讨其分子机制。方法建立阿霉素（ADM）诱导K562／ADM细胞耐药模型，分别将不同浓度黄芩苷、京尼平苷作用于K562／ADM细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测其对化疗药物的敏感性，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测多药耐药基因-1（mdr-1）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）基因在mRNA水平的表达变化。结果两种中药提取物黄芩苷、京尼平苷，可增加K562／ADM细胞对ADM的敏感性，K562／ADM细胞增殖受到明显抑制，耐药逆转倍数分别为1.95倍及1.46倍；RT-PCR检测mdr-1基因表达减弱，TopoⅡ基因表达增强（P〈0.01）。结论黄芩苷、京尼平苷可通过降低K562／ADM细胞mdr-1基因表达和提高TopoⅡ的表达来逆转白血病细胞MDR。 展开更多

关键词 黄芩 栀子 P糖蛋白 白血病

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HL－60细胞诱导分化后血管内皮生长因子表达变化分子机制的探讨

5

作者 李燕梅 宋冠华 +3 位作者 温培娥 任霞 毕可红 姜国胜 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2012年第11期873-877,共5页

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导HL-60细胞分化模型中血管内皮生长因子（VEGF）表达调控的分子机制，为白血病的抗血管新生治疗提供新的靶点。方法Wright—Gimesa染色观察细胞形态，硝基四唑氮蓝（NBT）还原实验检测HL-60细胞分化，... 目的探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导HL-60细胞分化模型中血管内皮生长因子（VEGF）表达调控的分子机制，为白血病的抗血管新生治疗提供新的靶点。方法Wright—Gimesa染色观察细胞形态，硝基四唑氮蓝（NBT）还原实验检测HL-60细胞分化，逆转录－聚合酶链反应（RT—PCR）、蛋白质印记（Westernblot）分别从mRNA和蛋白水平检测细胞VEGF、信号转导和转录激活因子-3（STA33）、c-myc的表达变化。结果1μmolATRA作用于HL-60细胞96h后可明显抑制细胞增殖，并出现明显的分化现象，倒置显微镜下可观察到细胞向成熟粒细胞方向分化；NBT阳性率为82．59％（t=－24．157，P〈0．01）；VEGFmRNA表达水平下降（t=7．339，P〈0．05）、STAT3mRNA表达水平下降（t=3．667，P〈0．05）、c—mycmRNA表达水平下降（t=6．858，P〈0．05）。VEGF蛋白表达水平下降（t=3．386，P〈0．05）、STA33蛋白表达水平下降（t=4．074，P〈0．05）、c-myc蛋白表达水平下降（t=3．333，P〈0．05）。结论在ATRA诱导HL-60细胞分化的模型中VEGF的表达水平随诱导分化的进程而下降，其下调机制可能与STAT3、c—myc具有相关性。 展开更多

关键词 维甲酸 血管内皮生长因子类 HL-60细胞

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全反式维甲酸对HL-60细胞VEGF表达与分泌影响的分子机制研究

6

作者 范华 温培娥 +6 位作者 杨炜华 任霞 赵海涛 乔高娟 唐天华 任海全 姜国胜 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2009年第4期316-319,共4页

目的探讨人髓系白血病细胞株HL-60在诱导分化过程中血管内皮生长因子（VEGF）表达及分泌水平变化的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测HL-60细胞被全反式维甲酸（ATRA）诱导分化后的增殖水平变化，流式细胞术测定HL-60细胞CD11... 目的探讨人髓系白血病细胞株HL-60在诱导分化过程中血管内皮生长因子（VEGF）表达及分泌水平变化的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测HL-60细胞被全反式维甲酸（ATRA）诱导分化后的增殖水平变化，流式细胞术测定HL-60细胞CD11b表达和细胞周期的改变，半定量逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测HL-60细胞VEGF、c-myc、缺氧诱导因子（HIF）-1α、基质金属蛋白酶（MMP）-9和MMP-2 mRNA表达水平，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测药物作用前后HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量。结果经ATRA诱导分化后，HL-60细胞增殖水平明显降低，CD11b表达水平明显升高，出现粒系定向分化趋势，且分化程度明显升高（P〈0．05），c-myc与VEGF mRNA表达水平均明显下调（P〈0．05），HIF-1α mRNA表达水平则明显升高（P〈0．05）。用MMP-2及MMP-9抑制因子I阻断HL-60细胞MMP-9和MMP-2表达后，细胞培养上清中VEGF蛋白分泌量明显降低（P〈0．05）。结论HL-60细胞被诱导分化过程中VEGF的表达与c-myc表达正相关，与HIF-1α表达负相关。MMP-9、MMP-2可能是调控HL-60细胞分泌VEGF的主要原因之一。 展开更多

关键词 维甲酸 白血病 血管内皮生长因子类 基因 myc 基质金属蛋白酶类

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冬凌草甲素联合丙戊酸钠对HL-60细胞的生长抑制和诱导凋亡作用研究

7

作者 邹慧娟 姜国胜 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2011年第5期390-393,共4页

目的研究中药单体冬凌草甲素（ORI）联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠（VPA）诱导急性早幼粒白血病细胞株HL-60凋亡，探讨其应用于临床的可行性。方法在对数生长期的HL-60细胞中分别加入6—12μmol／L的OR／和0．5—1mmol／L的VPA，... 目的研究中药单体冬凌草甲素（ORI）联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠（VPA）诱导急性早幼粒白血病细胞株HL-60凋亡，探讨其应用于临床的可行性。方法在对数生长期的HL-60细胞中分别加入6—12μmol／L的OR／和0．5—1mmol／L的VPA，采用细胞计数法测定ORI和VPA单独和联合应用时对细胞的生长抑制，并用AnnexinV／PI双标法流式细胞术检测细胞凋亡。结果OR[联合VPA可协同降低HL-60细胞活力，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，比单独用药凋亡作用更为显著（P〈0．05）。结论ORI和VPA具有协同作用，能高效杀灭白血病细胞。ORI和VPA是一种有望应用于白血病临床治疗的新型生物制剂。 展开更多

关键词 冬凌草素 丙戊酸钠 HL-60细胞 生长抑制物 细胞凋亡

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中药淫羊藿苷抑制肝癌HepG2.2.15细胞增殖和免疫逃逸作用研究 被引量：37

8

作者 王谦 张玲 +5 位作者 毛海婷 顾洪涛 夏武青 温培娥 李翠玲 杨尚军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期908-911,共4页

目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据。方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞... 目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据。方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞表面分子表达水平和细胞凋亡率。结果:50μg/mlICA作用HepG2.2.15细胞48、72小时的增殖抑制作用明显,抑制率分别为22.04%、29.68%(P<0.05),呈时间依赖效应。HepG2.2.15细胞经ICA处理后,FasL的表达率由16.22%显著下降至8.29%,Fas表达率由0.79%提高到1.70%(P>0.05)。ICA可明显抑制HepG2.2.15细胞诱导Jurkat细胞凋亡,凋亡率从46.66%下降为18.20%。ICA处理HepG2.2.15细胞后,不同效靶比的CD3AK细胞的杀伤活性,可分别由对照组的15.81%、35.04%、42.85%显著提高至42.58%、67.55%、88.93%(P<0.05,P<0.01),呈效靶比依赖效应。结论:ICA能有效地抑制HepG2.2.15细胞增殖,并有一定时间依赖效应;ICA可下调FasL的表达,上调细胞表面Fas的表达,对HepG2.2.15细胞诱导的T淋巴细胞凋亡作用有一定阻断,逆转肿瘤细胞的免疫逃逸作用;ICA显著增强HepG2.2.15细胞对CD3AK细胞杀伤的敏感性。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 HEPG2.2.15 JURKAT细胞 FAS/FASL CD3AK 免疫逃逸

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淫羊藿苷与黄芩苷联合多柔比星对肝癌细胞APRIL表达和血管内皮细胞生长抑制的研究 被引量：11

9

作者 唐菁 张玲 +5 位作者 李翠玲 顾洪涛 杨尚军 阴海鹏 温培娥 姜国胜 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第20期1534-1537,共4页

目的:探讨中药单体淫羊藿苷(ICA)、黄芩苷(BAI)联合化疗药多柔比星(ADM)抑制肝癌HepG2细胞APRIL、VEGF的表达,进而抑制血管内皮细胞生长的作用机制。方法:MTT法检测血管内皮细胞ECV304的增殖活性;RT-PCR法检测HepG2细胞APRIL表达水平和E... 目的:探讨中药单体淫羊藿苷(ICA)、黄芩苷(BAI)联合化疗药多柔比星(ADM)抑制肝癌HepG2细胞APRIL、VEGF的表达,进而抑制血管内皮细胞生长的作用机制。方法:MTT法检测血管内皮细胞ECV304的增殖活性;RT-PCR法检测HepG2细胞APRIL表达水平和ECV304细胞中APRIL受体HSPG的表达情况;免疫细胞化学检测HepG2细胞VEGF表达水平。结果:HepG2细胞中VEGF蛋白、APRIL和ECV304细胞中APRIL受体HSPG的mRNA均呈高表达状态,且APRIL与VEGF两者高表达呈显著正相关(P<0.001);HepG2细胞经25μg/mLICA、200μg/mLBAI、2μg/mLADM以及12.5μg/mLICA+1μg/mLADM、100μg/mLBAI+1μg/mLADM5组药物处理后,与未用药对照组相比,APRILmRNA表达水平明显下降;HepG2细胞经5组药物处理后的上清液与未用药对照组相比,对ECV304细胞具有明显的增殖抑制作用,抑制率分别为(2.79±5.57)%、(15.20±3.79)%、(12.10±4.50)%、(19.34±8.17)%和(20.27±4.77)%(P均<0.05);HepG2细胞经5组药物处理后,与未用药对照组相比,VEGF的表达水平明显下降。结论:A-PRIL具有促进静脉内皮细胞ECV304增殖的作用。ICA、BAI联合ADM能降低HepG2细胞中APRIL与VEGF的表达水平,从而发挥其抑制血管内皮细胞ECV304生长的作用。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 黄芩苷 多柔比星 人肝癌细胞 APRIL 血管内皮细胞

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胃癌组织衰变加速因子表达及其临床意义的研究 被引量：8

10

作者 王芹 张玲 +2 位作者 张维东 魏丽 贾青 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第9期683-686,共4页

目的:检测衰变加速因子(decay-accelerating factor,DAF,CD55)在胃癌组织中的表达情况,分析DAF高表达在促进肿瘤细胞增殖转移、肿瘤血管生长,逃避免疫监视的作用,探讨DAF高表达与PCNA、血管内皮生长因子(VEGF)高表达的关系。方法:免疫... 目的:检测衰变加速因子(decay-accelerating factor,DAF,CD55)在胃癌组织中的表达情况,分析DAF高表达在促进肿瘤细胞增殖转移、肿瘤血管生长,逃避免疫监视的作用,探讨DAF高表达与PCNA、血管内皮生长因子(VEGF)高表达的关系。方法:免疫组化法检测32例胃癌和20例癌旁组织病理切片中DAF、PCNA和VEGF表达情况。结果:免疫组化结果显示,胃癌切片标本中DAF、PCNA和VEGF阳性率分别为78.1%、75.0%和65.6%;癌旁组织中阳性率分别为25.0%、30.0%和25.0%,肿瘤组织显著高于癌旁对照组,P<0.05。DAF高表达与胃癌病理分期显著相关,P<0.05。转移组DAF、PCNA阳性表达率显著高于无转移组。结论:DAF与胃癌临床分期和转移显著相关,可作为预后判断的参考指标。 展开更多

关键词 抗原 CD55/分析 胃肿瘤/病理学 血管内皮生长因子/生物合成 免疫组织化学

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宫清颗粒诱导Th17/Treg亚群偏移减轻药物流产后子宫出血 被引量：7

11

作者 李霞 王永红 +5 位作者 王丽 赵向忠 周宪宾 郭钰琪 姜国胜 姚成芳 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期462-468,共7页

目的探讨米非司酮药物流产中Th17/Treg亚群偏移与子宫出血量的相关性及宫清颗粒诱导Th17/Treg亚群偏移减轻药物流产后子宫出血的作用与机制。方法孕小鼠30只,随机分为正常妊娠组和米非司酮大(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)×3 d,... 目的探讨米非司酮药物流产中Th17/Treg亚群偏移与子宫出血量的相关性及宫清颗粒诱导Th17/Treg亚群偏移减轻药物流产后子宫出血的作用与机制。方法孕小鼠30只,随机分为正常妊娠组和米非司酮大(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)×3 d,ig)、小剂量组(0.88 mg·kg^(-1)·d^(-1)×3 d,ig),每组10只,改良碱性正铁血红素法检测子宫出血量,流式细胞术双染色法检测子宫组织Th17(CD3^+CD4^+IL-17A^+)、Treg(CD4^+CD25^+Foxp3^+)亚群比例。孕小鼠40只,随机分为米非司酮组(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)×3 d,ig)和宫清大、中、小剂量组(米非司酮1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)×3 d+宫清颗粒308.16、154.08、77.04 mg·kg^(-1)·d^(-1)×5 d,ig),每组10只,检测子宫出血量及子宫组织Th17、Treg亚群比例,RT-PCR法检测子宫组织白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA转录水平。结果药物流产小鼠子宫出血量与Th17亚群比例、Th17/Treg比值呈负相关(r=-0.700、r=-0.867,P<0.05),与Treg亚群比例呈正相关(r=0.554,P<0.05)。宫清颗粒作用后小鼠子宫出血量明显减少;Th17亚群比例升高,Treg亚群比例降低,Th17/Treg比值升高(均P<0.05);IL-17A mRNA表达升高,IL-10、TGF-βmRNA表达降低,均P<0.05。结论米非司酮药物流产中Th17/Treg亚群偏移与子宫出血量密切相关,宫清颗粒优势诱导Th17亚群偏移,进而减轻子宫出血。 展开更多

关键词 宫清颗粒 流产 人工 子宫出血 T淋巴细胞亚群 Th17 TREG

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左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群的影响 被引量：7

12

作者 李霞 王丽 +4 位作者 郭钰琪 周宪宾 张巧凤 姚成芳 姜国胜 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1359-1364,共6页

目的观察左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失模型小鼠脾脏辅助性T细胞亚群17(Th17)/调节性T细胞亚群(Treg)亚群平衡的影响,并探讨其作用机制。方法 50只BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为假手术组、卵巢切除模型组、左归丸加减(简称中药)小... 目的观察左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失模型小鼠脾脏辅助性T细胞亚群17(Th17)/调节性T细胞亚群(Treg)亚群平衡的影响,并探讨其作用机制。方法 50只BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为假手术组、卵巢切除模型组、左归丸加减(简称中药)小、中、大剂量组,共5组,每组10只。中药组分别给予中药小、中、大剂量(7.25、14.50、29.00 g/kg),1天1次,1次约0.5 m L,连续用药12周;同时假手术组及模型组给予等量的生理盐水。采用酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组血清雌二醇(E2)水平,双能X线骨密度仪检测股骨骨密度(bone mineral density,BMD),流式细胞仪胞内外双染色法检测脾脏单个核细胞Th17/Treg亚群比例,RT-PCR法检测脾脏单个核细胞IL-17A、TGF-βmRNA表达。结果与假手术组比较,模型组E2、BMD均降低(P<0.05),Th17亚群比例、Th17/Treg比值均升高(P<0.05),Treg亚群比例明显降低(P<0.05),IL-17A mRNA表达明显升高(P<0.05),TGF-βmRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,中药中、大剂量组BMD值明显升高(P<0.05),Th17亚群比例、Th17/Treg比值降低(P<0.05)、Treg亚群比例升高(P<0.05),IL-17A mRNA表达降低(P<0.05)及TGF-βmRNA表达升高(P<0.05)。相关性分析显示BMD与血清E2水平、Treg亚群比例呈明显正相关(P<0.05),与Th17亚群比例呈明显负相关(P<0.05);血清E2水平与Treg亚群比例呈明显正相关(P<0.05),与Th17亚群比例呈明显负相关(P<0.05)。结论 Th17/Treg亚群平衡状态与雌激素缺乏骨丢失存在相关性,左归丸加减能降低雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17亚群比例,升高雌激素缺乏骨丢失小鼠Treg亚群比例。左归丸加减可能通过调节雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群平衡达到治疗作用,且该方无明显雌激素样作用。 展开更多

关键词 左归丸加减 雌激素缺乏 辅助性T细胞亚群17 调节性T细胞 骨代谢

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二氢青蒿素诱导乳腺癌细胞凋亡的分子机制初探 被引量：4

13

作者 顾洪涛 毛海婷 +4 位作者 张玲 温培娥 许晓群 李翠玲 阴海鹏 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第14期1051-1054,共4页

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对乳腺癌细胞系T47D的增殖、凋亡作用的影响,初步探讨其抗癌作用的分子机制。方法:以乳腺癌细胞T47D为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对T47D细胞的作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,分别P... 目的:研究二氢青蒿素(DHA)对乳腺癌细胞系T47D的增殖、凋亡作用的影响,初步探讨其抗癌作用的分子机制。方法:以乳腺癌细胞T47D为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对T47D细胞的作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,分别PI单染及Annexin-V双染法流式细胞术分析细胞周期分布和早期凋亡率的变化,RT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:DHA对T47D细胞有增殖抑制作用且呈剂量和时间依赖性,DHA作用24、48和72h的IC50值分别为60.03、33.86和17.18μmol/L;流式细胞仪检测细胞阻滞于G0/G1期,随药物剂量增大(20、40和60μmol/L),G0/G1期比例逐渐增高(42.76%、49.71%和63.01%),S期比例降低(48.45%、42.41%和30.98%);Annexin-V双染法示早期细胞凋亡率呈明显剂量依赖性升高〔(20.81±0.68)%、(30.90±0.73)%、(45.32±2.17)%(n=3)〕;RT-PCR检测显示,DHA作用后细胞凋亡诱导因子BimmR-NA的表达量升高;蛋白质印迹法检测DHA作用48h凋亡相关蛋白tbid和Caspase-8表达增强,且呈一定剂量依赖关系。结论:DHA能显著抑制人乳腺癌细胞T47D生长,影响细胞周期,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与促使Bim、tbid和Caspase-8表达增强的内源性凋亡途径有关。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 青蒿素 细胞凋亡

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淋巴细胞过度活化及细胞因子与鼻息肉的免疫发病机制研究 被引量：5

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作者 宋忠义 张玲 +2 位作者 李建东 李新功 李翠玲 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期201-204,共4页

目的:探讨淋巴细胞CD4、CD69和细胞因子RANTES、IL-5、IL-8在鼻息肉组织中的表达及其在鼻息肉发生、发展中的作用。方法:苏木精-伊红染色、免疫组织化学和图像分析法检测34例鼻息肉组织(鼻息肉组)和30例鼻甲黏膜组织(对照组)中CD4、CD69... 目的:探讨淋巴细胞CD4、CD69和细胞因子RANTES、IL-5、IL-8在鼻息肉组织中的表达及其在鼻息肉发生、发展中的作用。方法:苏木精-伊红染色、免疫组织化学和图像分析法检测34例鼻息肉组织(鼻息肉组)和30例鼻甲黏膜组织(对照组)中CD4、CD69、CD34、RANTES、IL-5、IL-8的表达。结果:鼻息肉组中淋巴细胞、嗜酸粒细胞弥漫浸润,腺体增生、杯状细胞增生、纤维增生、间质水肿的阳性率明显高于对照组(均P<0.01)。鼻息肉组中CD4、CD69、IL-5、IL-8、RANTES阳性淋巴细胞数密度(n/mm2)明显高于对照组(均P<0.05);CD4、CD69和RANTES、IL-5、IL-8的表达呈显著正相关(P<0.01、P<0.05和P<0.05)。IL-5、RANTES的高表达分别与嗜酸粒细胞浸润呈显著正相关(P<0.05、P<0.01)。IL-8的表达和鼻息肉组织中微血管形成呈显著正相关(P<0.01)。结论:CD4、CD69过度活化的T淋巴细胞及其产生的相关细胞因子IL-5、IL-8、RANTES可能促进和形成鼻息肉的免疫发病过程;IL-5、RANTES可促进嗜酸粒细胞的浸润、聚集、活化;IL-8可促进微血管形成。 展开更多

关键词 鼻息肉 过度活化淋巴细胞 CD4 CD69 RANTES IL-5 IL-8

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HL-60细胞高三尖杉酯碱诱导后CD44表达变化及机制的研究 被引量：5

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作者 刘佳宁 毕高峰 +7 位作者 温培娥 杨炜华 任霞 唐天华 谢超 董伟 姜国胜 林汝湘 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第18期1361-1364,共4页

目的:研究高三尖杉酯碱(homohar-ringtonine,HHT)诱导HL-60细胞分化后CD44表达变化及其与细胞周期调控的关系,探讨HHT的作用机制。方法:建立HHT诱导分化模型,瑞氏染色观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,... 目的:研究高三尖杉酯碱(homohar-ringtonine,HHT)诱导HL-60细胞分化后CD44表达变化及其与细胞周期调控的关系,探讨HHT的作用机制。方法:建立HHT诱导分化模型,瑞氏染色观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,流式细胞术检测细胞表面CD11b表达及细胞周期变化,RT-PCR检测CD44、p27、p21和Cyclin E基因在mRNA水平的表达变化。结果:MTT实验显示,HHT对HL-60细胞产生增殖抑制作用,HL-60细胞G0/G1期细胞百分比明显上升,S期细胞百分比明显下降,P<0.05。半定量分析PCR扩增产物光密度相对表达量显示,HHT诱导后HL-60细胞中CD44基因表达逐渐减弱,p27和p21基因逐渐增强,Cyclin E基因逐渐减弱。CD44与p27表达呈明显负相关,r=-0.686,P<0.05。结论:HHT可能通过下调CD44基因,进而提高p27和p21表达,抑制Cyclin E活性而对HL60细胞产生诱导分化作用。 展开更多

关键词 HL-60细胞 白血病 早幼粒细胞 急性 三尖杉酯碱类/药理学 细胞周期

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Fas／FasL信号通路在千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡中的作用与机制研究 被引量：4

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作者 郭菲 李霞 +3 位作者 张超 任霞 史美艳 姜国胜 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2014年第9期679-684,共6页

目的：在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上，从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2．5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞... 目的：在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上，从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2．5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用，光学及荧光显微镜下观察细胞形态学变化，Annexin Ⅴ/PI 流式细胞术检测细胞凋亡，反转录-聚合酶链反应法检测Fas/FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平，比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性。结果千金子甾醇可明显抑制HL-60细胞的增殖，增殖抑制率分别为（34．9±3．7）％、（54．6±5．2）％、（61．3±4．3）％，细胞呈典型凋亡形态学改变，细胞早期凋亡率分别为（23．4±3．1）％、（35．7±4．3）％、（53．2±3．9）％。Fas、FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平明显上调（P＜0．01），caspase-8和caspase-3活性显著增高（P＜0．01）。结论千金子甾醇可以诱导HL-60细胞发生剂量依赖性细胞凋亡，其机制与上调Fas/FasL凋亡信号通路有关。 展开更多

关键词 HL-60细胞 细胞凋亡 千金子甾醇

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α-干扰素与5-FU联合作用对肝癌细胞HepG2．2．15生物学特性的影响 被引量：4

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作者 谢风祥 毛海婷 +6 位作者 李晓冰 张玲 顾洪涛 阴海鹏 周宪宾 王丽 李殊吏 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第7期494-498,共5页

目的:探讨α-干扰素(IFN-α)联合5-FU对肝癌细胞HepG2·2·15生物学特性的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察5-FU和IFN-α对HepG2·2·15细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化及细胞表面Fas表达变... 目的:探讨α-干扰素(IFN-α)联合5-FU对肝癌细胞HepG2·2·15生物学特性的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察5-FU和IFN-α对HepG2·2·15细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化及细胞表面Fas表达变化;RT-PCR检测凋亡抑制基因Bcl-xL表达变化。结果:IFN-α单独应用对HepG2·2·15细胞增殖抑制作用较弱,与5-FU联合应用时对细胞的增殖抑制作用明显增强,P<0·01;两者联合应用对HepG2·2·15细胞周期的影响表现为与对照组和IFN-α、5-FU单用药组相比,联合用药组G0/G1期细胞比率升高(78·33%vs54·95%、60·08%和72·50%),S期比率降低(10·97%vs29·04%、18·69%和17·44%),P<0·01;经药物处理48h后,联合用药组的细胞凋亡率为(25·08±2·54)%,与对照组及IFN-α和5-FU单独应用组相比,细胞凋亡率明显增高,P<0·01。IFN-α对HepG2·2·15细胞表面Fas表达没有影响,但可协同5-FU明显提高细胞表面Fas的表达,P<0.01。联合用药组HepG2·2·15细胞Bcl-xL的表达较对照组和单药组明显下降,P<0·05。结论:IFN-α和5-FU联合应用可抑制HepG2·2·15细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是调节凋亡抑制基因Bcl-xL的表达,影响内源性凋亡信号传导通路来发挥作用。 展开更多

关键词 干扰素Α 细胞凋亡 氟尿嘧啶 细胞周期

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胃癌组织吲哚胺2，3-双加氧酶表达及其诱导肿瘤免疫逃逸的研究 被引量：3

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作者 刘悦梅 张玲 +2 位作者 张维东 魏丽 贾青 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第15期1155-1158,共4页

目的:检测胃癌组织中吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)、增殖细胞核抗原(PCNA)、T细胞表面标志CD3、CD4和CD25的表达状况,探讨其在肿瘤细胞增殖、转移和免疫逃逸中的作用。方法:采用免疫组化染色及免疫荧光染色检测... 目的:检测胃癌组织中吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)、增殖细胞核抗原(PCNA)、T细胞表面标志CD3、CD4和CD25的表达状况,探讨其在肿瘤细胞增殖、转移和免疫逃逸中的作用。方法:采用免疫组化染色及免疫荧光染色检测胃癌组织中IDO、PCNA、T细胞表面标志CD3、CD4和CD25的表达,分析IDO表达在肿瘤细胞增殖、转移和免疫逃逸中的作用。结果:1)肿瘤细胞和单个核细胞表面表达IDO;胃癌肿瘤组织IDO的阳性表达率为73.33%,高于癌旁组织。肿瘤组织内IDO高表达与PCNA高表达显著相关,χ2=4.35,P<0.05。2)胃癌肿瘤组织内CD3阳性表达率为37.67%,低于癌旁对照组,χ2=4.45,P<0.05。3)胃癌组织中可见CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)。4)胃癌患者中转移组IDO阳性表达率为86.36%,无转移组表达率为60.0%,转移组IDO阳性表达率高于无转移组,P=0.01。结论:胃癌细胞高表达IDO,能抑制T细胞活化、增殖和向肿瘤组织内的浸润,在肿瘤组织内造成免疫抑制,从而促进肿瘤的增殖和转移。肿瘤组织中CD4+CD25+Treg细胞参与IDO引发胃癌肿瘤免疫耐受的过程,发挥免疫抑制作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 色氨酸加氧酶 肿瘤逃逸

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修饰的肿瘤抗原肽CEA_(610D)疫苗的体外抗肿瘤作用 被引量：2

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作者 刘晶 李翠玲 +4 位作者 顾洪涛 阴海鹏 朱传福 温培娥 张玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期120-124,共5页

目的:评价修饰的CEA610D抗原肽疫苗体外抗肿瘤免疫的有效性,为其临床应用提供依据。方法:多肽固相合成法合成HLA-A2CEA修饰肽(CEA610D)、HLA-A2天然肽CEA605-613(天然肽)和HLA-A2无关肽MAGE-3(无关肽),采用同种异体混合淋巴细胞与肽共... 目的:评价修饰的CEA610D抗原肽疫苗体外抗肿瘤免疫的有效性,为其临床应用提供依据。方法:多肽固相合成法合成HLA-A2CEA修饰肽(CEA610D)、HLA-A2天然肽CEA605-613(天然肽)和HLA-A2无关肽MAGE-3(无关肽),采用同种异体混合淋巴细胞与肽共孵育的方法,诱导肽特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),利用MTT法检测CTL的增殖和杀伤活性;流式细胞术观察细胞表型;RT-PCR检测细胞穿孔素的表达;ELISA法检测CTL上清中IFN-γ的水平。结果:CEA610D疫苗产生肽特异性CTL的能力最强(P<0.05),其CD8+T细胞数也高于天然肽组和无关肽组;在效靶比为40:1时,CEA610D和天然肽所诱导的CTL对CEA+HLA-A2限制性人结肠癌细胞T84的杀伤活性可达(56.7±3.73)%和(51.2±1.86)%,而3种肽特异性CTL细胞对CEA+HLA-A2人结肠癌lovo细胞杀伤活性维持在本底水平;CEA610D组的CTL所释放的杀伤相关介质穿孔素和上清中IFN-γ的水平也显著高于其余两组(P<0.01)。结论:与天然肽相比,CEA610D疫苗可打破自身表位的免疫耐受,在体外抗肿瘤免疫中更具优势。 展开更多

关键词 肿瘤抗原肽 癌胚抗原 修饰肽 细胞毒性T淋巴细胞 抗瘤作用

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干扰素在肿瘤细胞凋亡信号传导通路中的作用及影响 被引量：2

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作者 谢风祥（综述） 毛海婷（审校） 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2007年第6期404-406,共3页

干扰素（IFN）是一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子。近年来研究发现，IFN与肿瘤细胞表面受体结合后，主要通过JAK／STAT信号途径来调节一系列IFN刺激基因的表达，影响肿瘤细胞凋亡传导通路及某些凋亡调节因子，增强肿瘤... 干扰素（IFN）是一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子。近年来研究发现，IFN与肿瘤细胞表面受体结合后，主要通过JAK／STAT信号途径来调节一系列IFN刺激基因的表达，影响肿瘤细胞凋亡传导通路及某些凋亡调节因子，增强肿瘤细胞对凋亡信号的敏感性，诱导肿瘤细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤效应。 展开更多

关键词 干扰素类 细胞凋亡 细胞色素C类

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