万古霉素单用及联合利福平或磷霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究 被引量：33

1

作者 梅清 喻婷 +3 位作者 朱玉林 程君 叶英 李家斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期944-947,共4页

目的在体外探讨万古霉素单用及其分别与利福平、磷霉素联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)防耐药突变浓度的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010... 目的在体外探讨万古霉素单用及其分别与利福平、磷霉素联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)防耐药突变浓度的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010 CFU.ml-1细菌,琼脂平板倍比稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对10株MRSA临床分离株的防耐药突变浓度,并计算相应的选择指数和耐药频率。结果万古霉素单用对上述10株MRSA的选择指数为16～64;分别与利福平、磷霉素联合使用选择指数下降为2～16和1～8,联合用药较单独用药选择指数下降2～32倍,其耐药频率也大幅下降。结论万古霉素分别与利福平、磷霉素联合使用均可降低其单用对MRSA的防耐药突变浓度,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌的产生。 展开更多

关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 万古霉素 利福平 磷霉素 联合用药 防耐药突变浓度 耐药突变选择窗 耐药频率

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嗜麦芽窄食单胞菌的天然及获得性耐药机制研究进展 被引量：28

2

作者 胡立芬 叶英 +2 位作者 沈为华 李家斌 李旭 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期654-658,共5页

嗜麦芽窄食单胞菌,为条件致病菌,近年来感染率在不断增加。其不仅对多种抗生素存在天然耐药性,也可同过耐药基因水平转移获得对临床常见抗菌药物的耐药,本文综述了该菌对临床常见药物尤其是磺胺甲基异噁唑/甲氧苄啶的体外药敏情况,并阐... 嗜麦芽窄食单胞菌,为条件致病菌,近年来感染率在不断增加。其不仅对多种抗生素存在天然耐药性,也可同过耐药基因水平转移获得对临床常见抗菌药物的耐药,本文综述了该菌对临床常见药物尤其是磺胺甲基异噁唑/甲氧苄啶的体外药敏情况,并阐述耐药基因对抗菌药物耐药的作用。 展开更多

关键词 嗜麦芽窄食单胞菌 磺胺甲基异噁唑/甲氧苄啶 细菌耐药 耐药机制

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2008—2012年安徽省3154株非发酵菌分布特点及耐药分析 被引量：18

3

作者 周翔天 高丽萍 +4 位作者 夏粤华 梅清 刘艳艳 叶英 李家斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期301-305,315,共6页

目的了解安徽地区医院感染非发酵革兰阴性菌的分布特点及耐药状况,为临床抗感染治疗提供依据。方法抽取安徽省40家参加医院2008年至2012年,每年9月份临床分离的非发酵革兰阴性菌,采用国际标准琼脂糖平皿二倍稀释法进行体外药物敏感试验... 目的了解安徽地区医院感染非发酵革兰阴性菌的分布特点及耐药状况,为临床抗感染治疗提供依据。方法抽取安徽省40家参加医院2008年至2012年,每年9月份临床分离的非发酵革兰阴性菌,采用国际标准琼脂糖平皿二倍稀释法进行体外药物敏感试验,用最低抑菌浓度(MIC值)表示抗菌药物的抗菌活性,并按2012年美国临床和实验标准化研究所(CSLI)指导原则的标准计算细菌对抗菌药物的耐药率。使用WHONET5.6分析软件分析数据。结果共检测安徽省内3154株非发酵菌,占临床分离总数的27%。其中,占首位的是铜绿假单胞菌,其次为鲍曼不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌,分别占50.1%、36.8%和6.7%。非发酵菌感染部按检出率高低依次为:下呼吸道、伤口创面、泌尿生殖道、胸腹腔,上述4种标本占整个临床分离株的89.2%。病区分布主要为呼吸内科(48.7%),其次为重症监护室(20.2%)、烧伤科和神经内科分别占19.8%和14.3%。药敏结果显示,安徽地区非发酵菌对碳青霉烯类药物耐药率逐年升高,对头孢菌素类、青霉素类、喹诺酮类药物呈现高度耐药,并且多重耐药和泛耐药情况严重。结论近5年来,安徽地区非发酵菌的分离率较高,多重耐药现象严重,应重视非发酵菌的感染情况并做好对其的耐药性监测。 展开更多

关键词 非发酵菌 细菌耐药性监测 微生物敏感性试验 医院获得性感染 临床特征

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2007—2009年安徽省痰标本中分离的革兰阴性菌耐药性监测 被引量：11

4

作者 费君 李家斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期948-951,共4页

目的分析2007—2009年安徽省临床分离痰标本中革兰阴性菌对抗菌药物耐药性变迁情况。方法采用2009年美国CLSI推荐的琼脂对倍稀释法进行抗菌药物敏感实验,计算抗菌药物的耐药率、敏感率和中介率,结果采用SPSS11.5软件进行统计分析。结果 ... 目的分析2007—2009年安徽省临床分离痰标本中革兰阴性菌对抗菌药物耐药性变迁情况。方法采用2009年美国CLSI推荐的琼脂对倍稀释法进行抗菌药物敏感实验,计算抗菌药物的耐药率、敏感率和中介率,结果采用SPSS11.5软件进行统计分析。结果 2007年1月至2009年12月从临床送检的痰标本中分离出革兰阴性菌1492株。来自ICU的不动杆菌对亚胺培南及美罗培南的敏感率分别为70.0%和61.3%,其对哌拉西林/三唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、头孢曲松、庆大霉素、阿米卡星和环丙沙星的耐药率均高于非ICU菌株。来自ICU与非ICU的铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢他啶的敏感率均在50%以上。来自ICU的铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南和庆大霉素的耐药率均高于非ICU菌株。肺炎克雷伯菌对哌拉西林/三唑巴坦、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的耐药率低于30%。大肠埃希菌对哌拉西林/三唑巴坦、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的耐药率在30%以下,对氨苄西林、头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、氟喹诺酮类的耐药率大于50%。结论定期进行耐药性监测有助于了解我省细菌耐药性变迁,为临床经验用药提供依据。 展开更多

关键词 不动杆菌 铜绿假单胞菌 肺炎克雷伯菌:大肠埃希菌 药物敏感试验 细菌耐药监测

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亚胺培南或美罗培南联合利福平降低不动杆菌防耐药突变浓度的体外研究 被引量：11

5

作者 马慧敏 胡立芬 +2 位作者 叶英 朱玉林 李家斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1690-1694,共5页

目的在体外探讨亚胺培南(IMP)和美罗培南(MER)单用及其分别与利福平(RFP)联用对不动杆菌的防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用琼脂二倍稀释法,测定IMP或MER与RFP在体外单独以及联合应用的最低抑菌浓... 目的在体外探讨亚胺培南(IMP)和美罗培南(MER)单用及其分别与利福平(RFP)联用对不动杆菌的防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用琼脂二倍稀释法,测定IMP或MER与RFP在体外单独以及联合应用的最低抑菌浓度(MIC)、计算部分抑菌浓度(FIC)指数。用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml不动杆菌,采用琼脂平板二倍稀释法测定IMP和MER单药以及分别与RFP联用时对16株临床分离不动杆菌的MPC,并计算相应的选择指数(SI)。结果 IMP或MER分别与RFP联合应用后均以无关作用为主,未见拮抗作用,存在一定比例协同作用。IMP和MER单用对上述16株不动杆菌的SI均为16～128;分别与RFP联合使用SI均下降为1～32,联合用药较单独用药SI下降2～32倍。结论 IMP或MER分别与RFP联合使用均可降低其单用对不动杆菌的MPC,缩小MSW,防止耐药突变菌的产生。 展开更多

关键词 不动杆菌 防耐药突变浓度 耐药突变选择窗 亚胺培南 美罗培南 联合用药

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黏质沙雷菌中AmpC酶的检测及药敏率分析 被引量：11

6

作者 杨海飞 程君 +4 位作者 胡立芬 刘艳艳 潘亚超 朱玉林 李家斌 《安徽医学》 2012年第2期129-132,共4页

目的了解安徽省临床分离的104株黏质沙雷菌中AmpC酶的产生情况及其对常用抗菌药物的耐药特征,以指导临床合理用药。方法采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。药敏试验采用琼脂稀释... 目的了解安徽省临床分离的104株黏质沙雷菌中AmpC酶的产生情况及其对常用抗菌药物的耐药特征,以指导临床合理用药。方法采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。药敏试验采用琼脂稀释法,依据CLSI 2010年推荐的标准进行判读结果。结果 104株黏质沙雷菌在呼吸道痰标本中检出率最高,达59.6%;主要分布于呼吸内科、重症监护病房、老年病科等;头孢西丁纸片筛选法阳性率为39.4%,经三维试验确证产AmpC酶的有8株,阳性率为7.7%。产AmpC酶菌株除对亚胺培南、美罗培南全部敏感及对头孢吡肟、左氧氟沙星和加替沙星敏感率较高外,对其他大多数抗菌药物耐药率均高于非产酶株。结论产AmpC酶黏质沙雷菌对临床常用抗菌药物的耐药率均较高,对产酶株临床经验用药可选用碳青霉烯类、氟喹喏酮类及四代头孢菌素类抗菌药物。 展开更多

关键词 粘质沙雷菌 AMPC酶 抗菌药物 细菌耐药性

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万古霉素联合用药降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究 被引量：10

7

作者 喻婷 梅清 +3 位作者 朱玉林 程君 叶英 李家斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期859-863,共5页

目的体外研究万古霉素(vancomycin,VAN)分别与左氧氟沙星(levofloxacin,LVX)、利福平(rifampincin,RFP)、磷霉素(fosfomycin,FOM)联用对降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)的比较,为指导临床联合应用抗菌药物,制定新的用药策略,... 目的体外研究万古霉素(vancomycin,VAN)分别与左氧氟沙星(levofloxacin,LVX)、利福平(rifampincin,RFP)、磷霉素(fosfomycin,FOM)联用对降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)的比较,为指导临床联合应用抗菌药物,制定新的用药策略,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法采用肉汤富集1010CFU/mL金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用琼脂平板二倍稀释法测定单独用药的最低抑菌浓度(MIC),琼脂平板稀释法测定单独应用VAN以及与其他三种药物联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC。并计算出各药单独应用的MSW(MPC/MIC)。结果 VAN、LVX、RFP、FOM单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC分别为1,0.125,0.008和2μg/mL;MPC分别为64,2,>32,64μg/mL,MSW为64,6,>4000,32。联合用药后各药的MPC(μg/mL)降低程度如下:VAN+LVX(MPCNVA–4,MPCLVX–0.125),VAN+RFP(MPCNVA–4,MPCRFP–0.008),VAN+FOM(MPCNVA-1,MPCFOM-2)。联合LVX和RFP可使VAN的MPC降至原来的1/16倍,联合FOM可使VAN的MPC降至原来的1/64倍。结论 VAN与另三种药物联用,可以明显降低各自单独用药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC,其中联合FOM降低其MPC幅度最大,缩小其MSW效果最好。 展开更多

关键词 万古霉素 联合用药 金黄色葡萄球菌:防耐药突变浓度 耐药突变选择窗

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113株表皮葡萄球菌耐药性监测与分析 被引量：9

8

作者 范昊 程君 +2 位作者 叶英 杨志宇 李家斌 《安徽医学》 2011年第3期339-341,共3页

目的了解临床分离的表皮葡萄球菌的耐药状况,指导临床合理用药。方法采用琼脂倍比稀释法,按2009年美国临床实验标准委员会（CLSI）指导原则判读结果,并采用SPSS 13.0软件对数据进行统计分析。结果 113株表皮葡萄球菌中,在各类标本中的... 目的了解临床分离的表皮葡萄球菌的耐药状况,指导临床合理用药。方法采用琼脂倍比稀释法,按2009年美国临床实验标准委员会（CLSI）指导原则判读结果,并采用SPSS 13.0软件对数据进行统计分析。结果 113株表皮葡萄球菌中,在各类标本中的分布以痰及呼吸道分泌物最多为38.94%。药物敏感试验结果表明,表皮葡萄球菌对青霉素及苯唑西林耐药率最高（90%以上）,其次为红霉素（68.4%-76%）及克林霉素（63.2%-70.7%）,对利福平及碳青霉烯类的美罗培南及亚胺培南较为敏感,耐药率分别为（13.3%-15.8%）、（5.3%-31.6%）和（4%-10.5%）,对万古霉素和替考拉宁的敏感率为100%。结论表皮葡萄球菌的耐药情况严重,总耐药率较高,临床应根据药敏试验结果合理使用抗菌药物。 展开更多

关键词 表皮葡萄球菌 耐药性 医院感染

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p62基因过表达慢病毒载体的构建及表达

9

作者 张春 苏丛 +1 位作者 伍婷 朱立雨 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期398-402,共5页

目的构建p62基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62基因的作用提供途径与方法。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA3.1-Flag-PCDH10... 目的构建p62基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62基因的作用提供途径与方法。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA3.1-Flag-PCDH10真核表达慢病毒载体;PCR鉴定重组质粒,将构建成功的重组质粒和包装质粒共转染至人胚胎肾细胞293(HEK 293T);用重组慢病毒感染人单核细胞白血病(THP-1)细胞,氨苄霉素筛选阳性细胞克隆株;Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测高表达p62基因的THP-1细胞株(过表达组)和转染不含p62基因空质粒(对照组)的THP-1细胞株;感染肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae,K.p.)后,RT-qPCR检测THP-1细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和趋化因子1(Cxcl1)表达水平。结果通过PCR成功获得p62基因片段并连接到pcDNA3.1-Flag-PCDH10病毒载体上,并且PCR检测显示p62-pcDNA3.1-Flag-PCDH10重组质粒构建成功;挑选慢病毒感染THP-1细胞后抗氨苄青霉素细胞株,Western blot检测结果显示药筛存活的THP-1细胞较对照组细胞P62蛋白表达增多(P<0.001),且RT-qPCR检测显示p62 mRNA表达增高(P<0.001),说明成功构建高表达P62蛋白的THP-1细胞株;感染K.p.后,高表达P62的THP-1细胞中TNF-α、IL-1β和Cxcl1表达水平增高(P<0.01)。结论经三质粒包装系统可以成功构建p62-pcDNA3.1-Flag-PCDH10慢病毒载体及高表达P62蛋白THP-1细胞株,为后续p62基因的研究提供了基础。 展开更多

关键词 P62 慢病毒载体构建 三质粒包装系统 THP-1细胞 肺炎克雷伯菌 过表达

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糖尿病合并细菌性肝脓肿患者的临床特点分析

10

作者 李旭峰 郑亚虹 +5 位作者 杨懿 杨宁 丁予婷 陆健娟 刘艳艳 李家斌 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期674-679,共6页

目的比较糖尿病(DM)合并肝脓肿(PLA)与非糖尿病(NDM)合并PLA患者之间的临床特征,以期为临床诊断及治疗提供依据。方法选取安徽医科大学某附属医院2002年7月—2022年2月收治的PLA患者,按照是否合并DM分为DM+PLA组和NDM+PLA组。回顾性分... 目的比较糖尿病(DM)合并肝脓肿(PLA)与非糖尿病(NDM)合并PLA患者之间的临床特征,以期为临床诊断及治疗提供依据。方法选取安徽医科大学某附属医院2002年7月—2022年2月收治的PLA患者,按照是否合并DM分为DM+PLA组和NDM+PLA组。回顾性分析两组患者的一般情况、临床表现和体征、并发症、生化和病原学检查结果、影像学表现、临床疗效及影响因素。结果共纳入PLA患者695例,其中DM+PLA组191例(27.5%),NDM+PLA组504例(72.5%)。DM+PLA组患者中男性、合并高血压的占比高于NDM+PLA组,而胆道疾病及恶性肿瘤占比低于NDM+PLA组(均P<0.05)。DM+PLA组患者出现发热,乏力,并发贫血、低蛋白血症的占比高于NDM+PLA组(均P<0.05)。与NDM+PLA组相比,DM+PLA组患者中性粒细胞计数、中性粒细胞百分比升高,而总蛋白、清蛋白含量及清蛋白/球蛋白比值均降低(均P<0.05)。DM+PLA组患者肺炎克雷伯菌检出、肝右叶脓肿发生的占比较NDM+PLA组更高(均P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,恶性肿瘤是影响PLA患者临床疗效的危险因素,侵入性治疗是影响PLA患者临床疗效的保护因素,而血糖是影响NDM+PLA组患者临床疗效的危险因素。结论DM+PLA较NDM+PLA患者感染症状重,且伴有更高的肺炎克雷伯菌感染和肝右叶脓肿的比例。应加强对恶性肿瘤患者的关注,控制好血糖水平,必要时应及时辅以侵入性治疗手段。 展开更多

关键词 糖尿病 细菌性肝脓肿 临床特点 临床疗效 影响因素

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2023年安徽省细菌耐药监测(HuiNet)结果

11

作者 刘艳艳 李亚胜 +6 位作者 余梁 杨懿 伍婷 殷俊 胡立芬 叶英 李家斌 《中华临床感染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期113-125,共13页

目的分析安徽省细菌耐药的现状,及时掌握细菌耐药形势,为临床抗菌药物合理使用提供科学数据。方法选取2022年10月至2023年9月安徽省细菌耐药监测网(HuiNet)成员单位83所医院的监测数据,分析主要检出菌对常用抗菌药物的耐药情况及临床常... 目的分析安徽省细菌耐药的现状,及时掌握细菌耐药形势,为临床抗菌药物合理使用提供科学数据。方法选取2022年10月至2023年9月安徽省细菌耐药监测网(HuiNet)成员单位83所医院的监测数据,分析主要检出菌对常用抗菌药物的耐药情况及临床常见耐药菌的检出情况。采用WHONET 5.6和SPSS 25.0软件对数据进行分析。结果共纳入201647株细菌,革兰阴性菌占74.8%(150847/201647)。革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌(32.8%,16648/50800)、表皮葡萄球菌(14.0%,7098/50800)、粪肠球菌(10.7%,5458/50800)、屎肠球菌(9.1%,4613/50800)和人葡萄球菌(7.4%,3778/50800)为主;革兰阴性菌以大肠埃希菌(28.9%,43577/150847)、肺炎克雷伯菌(22.5%,34006/150847)、铜绿假单胞菌(14.7%,22171/150847)、鲍曼不动杆菌复合体(9.4%,14194/150847)和阴沟肠杆菌(3.5%,5235/150847)为主。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS)检出率分别为39.5%(6442/16325)和75.7%(12343/16312),未检测到对万古霉素及替考拉宁耐药的葡萄球菌属。粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为0.5%和0.6%。耐碳青霉烯类大肠埃希菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CR-ECO)和耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KPN)的检出率分别为1.9%(805/42956)和11.7%(3950/33761);CR-KPN对替加环素的耐药率为3.9%。耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CR-PAE)和耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CR-ABA)复合体检出率分别为18.4%(3936/21447)和62.9%(8649/13744)。CR-PAE和CR-ABA复合体对多黏菌素B的耐药率分别为6.9%和1.7%。皖北地区的MRSA、CR-ABA复合体、耐三代头孢菌素大肠埃希菌(third-generation cephalosporin-resistant Escherichia coli,CTX/CRO-R-ECO)和耐� 展开更多

关键词 细菌 耐药性 抗菌药物 安徽省细菌耐药监测网

原文传递

自发性腹膜炎肠道菌群的变化研究 被引量：6

12

作者 魏媛媛 胡立芬 李家斌 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期532-534,共3页

目的基于16SrDNA基因测序技术分析自发性腹膜炎患者肠道菌群变化。方法采集自发性腹膜炎患者和健康人粪便DNA标本,利用Illumina Miseq测序平台,对肠道菌群16S rDNA V4-V5可变区测序,对比自发性腹膜炎患者与健康人肠道菌群多样性的差异... 目的基于16SrDNA基因测序技术分析自发性腹膜炎患者肠道菌群变化。方法采集自发性腹膜炎患者和健康人粪便DNA标本,利用Illumina Miseq测序平台,对肠道菌群16S rDNA V4-V5可变区测序,对比自发性腹膜炎患者与健康人肠道菌群多样性的差异。结果自发性腹膜炎患者与健康人群肠道菌群存在差异。自发性腹膜炎组以变形菌门、厚壁菌门和梭杆菌门为主,健康组以拟杆菌门为主。且前者肠道菌群丰富度较后者降低。结论自发性腹膜炎患者肠道菌群组成结构和丰富度与健康人不同,存在多种条件致病菌的增多和有益菌的减少。 展开更多

关键词 肠道菌群 高通量测序 自发性腹膜炎

原文传递

巨噬细胞Lamtor2基因敲除小鼠对肺炎克雷伯菌易感性的研究 被引量：4

13

作者 苏丛 伍婷 +5 位作者 徐方明 陈昊然 刘艳艳 律娜 兰燕虎 李家斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第4期505-509,共5页

目的通过建立Lamtor2巨噬细胞条件敲除小鼠感染肺炎克雷伯菌(Kp)模型,初步研究Lamtor2基因生物学功能及其在Kp感染过程中的相关机制。方法将引进的Lamtor2^(flox/+)小鼠自交,Lyz2-Cre小鼠与Lamtor2^(flox/+)进行杂交,获得基因型为Lamtor... 目的通过建立Lamtor2巨噬细胞条件敲除小鼠感染肺炎克雷伯菌(Kp)模型,初步研究Lamtor2基因生物学功能及其在Kp感染过程中的相关机制。方法将引进的Lamtor2^(flox/+)小鼠自交,Lyz2-Cre小鼠与Lamtor2^(flox/+)进行杂交,获得基因型为Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-)和Lamtor2^(flox/+)Lyz2-Cre^(+/-)的子代小鼠;将上述两种基因型子代小鼠进行杂交,得到对照组小鼠(Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-))和Lamtor2条件性基因敲除小鼠(Lamtor2^(flox/floxLyz)2-Cre^(+/-))。提取小鼠脚趾基因组DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定子代小鼠基因型并提取肺泡巨噬细胞,利用qRT-PCR和Western blot验证Lamtor2基因敲除效果。小鼠感染Kp,观察生存状况;体外采用RT-qPCR检测Kp感染肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和Cxcl1表达水平,两组间比较采用t检验;Western blot验证iNOS的表达水平。结果成功建立Lamtor2条件性基因敲除小鼠模型,子代存活且可育;与对照组小鼠比较,实验组小鼠在感染Kp后生存率降低;Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(+/-)小鼠来源的肺泡巨噬细胞中的TNF-α(t=17.54,P=0.0032)、IL-1β(t=15.37,P=0.0042)和Cxcl1(t=37.82,P=0.0007)表达水平降低,且iNOS表达下降。结论构建了Lamtor2条件性基因敲除小鼠,感染肺炎克雷伯菌后,小鼠的生存率下降;肺泡巨噬细胞iNOS表达降低。 展开更多

关键词 Lamtor2 条件性基因敲除 繁育 肺炎克雷伯菌

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万古霉素单用及联合用药对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的防突变浓度研究 被引量：5

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作者 刘丽光 朱玉林 +3 位作者 胡立芬 程君 叶英 李家斌 《安徽医学》 2013年第6期679-682,共4页

目的在体外测定万古霉素单药及分别与利福平、左氧氟沙星、磷霉素联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）的防突变浓度（MPC），为优化抗菌治疗提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为10^10CFU／ml细菌，琼脂平板倍比稀释法测定上述各... 目的在体外测定万古霉素单药及分别与利福平、左氧氟沙星、磷霉素联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）的防突变浓度（MPC），为优化抗菌治疗提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为10^10CFU／ml细菌，琼脂平板倍比稀释法测定上述各药单用及分别与万古霉素联用对10株临床分离MRSE的MPC，上述与万古霉素联用药物浓度为常规用药可以达到的血药浓度，均远低于各自对MRSE的MPC。结果万古霉素单药对上述10株MRSE的MPC为16或32mg／L；与利福平或左氧氟沙星联用时万古霉素的MPC为16或32mg／L，与磷霉素联用时万古霉素的MPC降为1～4mg／L。结论与磷霉素联用可以显著降低万古霉素对MRSE的MPC，从而减少耐药菌的产生。 展开更多

关键词 耐甲氧西林表皮葡萄球菌 万古霉素 联合用药 防耐药突变浓度

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2019年安徽省皖北、皖中和皖南地区细菌耐药差异性分析 被引量：5

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作者 贺玲玲 刘艳艳 李家斌 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期859-863,共5页

目的分析2019年安徽省皖北、皖中和皖南地区细菌临床分布和耐药差异性,为不同地区临床医生选择抗菌药物提供合理参考。方法收集2019年安徽省细菌耐药监测网38家成员单位临床分离菌株按地区分成皖北、皖中和皖南地区,采用WHONET 5.6软件... 目的分析2019年安徽省皖北、皖中和皖南地区细菌临床分布和耐药差异性,为不同地区临床医生选择抗菌药物提供合理参考。方法收集2019年安徽省细菌耐药监测网38家成员单位临床分离菌株按地区分成皖北、皖中和皖南地区,采用WHONET 5.6软件和SPSS 17.0软件进行统计分析。结果皖北地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率高于皖中和皖南地区,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为20.8%和60.4%;皖中地区耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌高于皖北和皖南地区,肺炎克雷伯菌对头孢菌素类耐药率>40.0%,对亚胺培南和美洛培南耐药率>20.0%;皖南地区耐甲氧西林葡萄球菌对氨基糖苷类和喹诺酮类耐药率高于皖北地区。结论安徽省不同地区之间细菌耐药差异明显,需根据本地区细菌耐药情况合理选用抗菌药物。 展开更多

关键词 细菌耐药 病原菌 抗菌药物 耐药性

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基于CRISPR-Cas9技术构建gpr41基因敲除的RAW264.7细胞系 被引量：3

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作者 苏丛 徐方明 +6 位作者 伍婷 张鹏飞 陈昊然 刘艳艳 兰燕虎 李家斌 律娜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第5期800-803,共4页

采用CRISPR-Cas9基因编辑技术,构建G-蛋白偶联受体41(gpr41)基因敲除的RAW264.7细胞系。利用慢病毒转染,构建稳定表达Cas9蛋白的巨噬细胞株。针对gpr41基因作用的功能区域,设计靶向gpr41基因的向导RNA(gRNA),构建pLenticrisprV2重组质... 采用CRISPR-Cas9基因编辑技术,构建G-蛋白偶联受体41(gpr41)基因敲除的RAW264.7细胞系。利用慢病毒转染,构建稳定表达Cas9蛋白的巨噬细胞株。针对gpr41基因作用的功能区域,设计靶向gpr41基因的向导RNA(gRNA),构建pLenticrisprV2重组质粒转化DH5α感受态细胞,筛选出重组子测序验证gRNA的有效性。鉴定成功的pLenticrisprV2-gpr41-gRNA重组质粒采用转染试剂转染巨噬细胞系RAW264.7。筛选阳性单克隆细胞株,Western blot检测gpr41基因的表达。测序结果证实pLenticrisprV2-gpr41-gRNA重组质粒构建成功;Western blot筛选出重组质粒pLenticrisprV2-gpr41-gRNA3转染RAW264.7细胞13号单克隆株的GPR41蛋白不表达。利用CRISPR-Cas9基因编辑技术成功构建了gpr41基因敲除的巨噬细胞株,为研究gpr41基因在RAW264.7细胞中的作用机制奠定基础。 展开更多

关键词 CRISPR-Cas9技术 gpr41 巨噬细胞 基因敲除

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2009-2011年阜阳地区常见病原菌分布和耐药性分析 被引量：4

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作者 李莎莎 刘艳艳 李家斌 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期394-397,共4页

目的分析阜阳地区2009—2011年细菌分布及耐药性流行趋势。方法采用2009年美国临床实验室标准协会（CLSI）推荐的琼脂对倍稀释法进行抗菌药物敏感试验，计算抗菌药物的耐药率。结果临床分离出2673株革兰阴性菌和787株革兰阳性菌，检出... 目的分析阜阳地区2009—2011年细菌分布及耐药性流行趋势。方法采用2009年美国临床实验室标准协会（CLSI）推荐的琼脂对倍稀释法进行抗菌药物敏感试验，计算抗菌药物的耐药率。结果临床分离出2673株革兰阴性菌和787株革兰阳性菌，检出率在前5位的细菌分别为大肠埃希菌（20．4％）、鲍曼不动杆菌（16．9％）、铜绿假单胞菌（14．4％）、肺炎克雷伯菌（9．5％）、阴沟肠杆菌（6．8％）。未检测到耐万古霉素的葡萄球菌和肠球菌，2011年检出1例耐替考拉宁的屎肠球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率均较高（均〉50％），铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的对亚胺培南和美罗培南的耐药率均较高（15．7％～44．1％）。结论阜阳地区的细菌感染仍以革兰阴性菌为主，多重耐药菌感染严重，抗菌药物的耐药率逐年上升，临床应根据细菌培养结果合理选用抗菌药物，并需加强抗菌药物的管理。 展开更多

关键词 细菌 耐药性 流行病学研究

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2008-2009年安徽省铜绿假单胞菌耐药性监测 被引量：3

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作者 江守伟 程君 +4 位作者 朱玉林 叶英 许夕海 李家斌 孙秋林 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期3248-3250,共3页

目的了解临床分离铜绿假单胞菌对抗菌药物耐药性。方法对2008-2009年安徽省30所医院的细菌耐药监测资料中铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性情况进行分析,细菌药敏采用琼脂稀释法;并按2009年CLSI指导原则的标准计算细菌对抗菌药物的药敏率... 目的了解临床分离铜绿假单胞菌对抗菌药物耐药性。方法对2008-2009年安徽省30所医院的细菌耐药监测资料中铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性情况进行分析,细菌药敏采用琼脂稀释法;并按2009年CLSI指导原则的标准计算细菌对抗菌药物的药敏率,采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果 2008、2009年分离出铜绿假单胞菌分别为121、198株,检出率为13.4%、16.0%,同时2008、2009年多药耐药株数分别为56、49株,多药耐药率分别为46.3%、24.8%;阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类抗菌药物是对铜绿假单胞菌作用较强的抗菌药物,同时较2008年相比较,2009年头孢菌素类、喹诺酮类耐药性有所下降。结论铜绿假单胞菌的耐药情况比较严重;合理使用抗菌药物是控制耐药性的有效手段。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 抗菌药物 敏感 试验 耐药性 监测

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人脐血干细胞移植术治疗肝炎后肝硬化的临床应用与观察 被引量：3

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作者 李浩 周翔天 +3 位作者 殷俊 刘艳艳 叶英 李家斌 《安徽医药》 CAS 2014年第7期1246-1249,共4页

目的观察人脐血干细胞移植术对肝炎后肝硬化失代偿期患者的治疗效果及分析。方法使用产妇分娩后的脐带血,经一系列处理后得到脐血干细胞并于24 h之内经股动脉由肝固有动脉输注入肝硬化患者的肝脏组织内。结果所有患者术后精神、腹水、... 目的观察人脐血干细胞移植术对肝炎后肝硬化失代偿期患者的治疗效果及分析。方法使用产妇分娩后的脐带血,经一系列处理后得到脐血干细胞并于24 h之内经股动脉由肝固有动脉输注入肝硬化患者的肝脏组织内。结果所有患者术后精神、腹水、食欲等相关临床症状及黄疸、腹水等体征均有所改善,肝功能检查白蛋白、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血氨指标均已达到正常标准,与术前相比可见明显好转(P<0.05)。结论术后患者临床症状得到明显的改善,相关生化指标有明显好转趋势,说明本治疗方法有效。 展开更多

关键词 干细胞 肝炎后肝硬化失代偿期 移植术

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肠道菌群在肝硬化发病机制中的作用 被引量：4

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作者 魏媛媛 胡立芬 李家斌 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2016年第2期122-124,共3页

肝硬化作为多种慢性肝脏疾病进程中的发展阶段，具有发病率高、症状重、预后差的特点。近年来，肠道菌群在肝硬化发生发展中的作用越来越受到重视。此文就肠道菌群对肝硬化发生发展的影响进行了综述。

关键词 肝硬化 肠道菌群

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