以多种教学方式改进医学微生物学教学 被引量：16

1

作者 钟启平 訾自强 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2004年第2期113-114,共2页

对医学微生物学课程的教学采取了多种教学方式--利用本学科前沿知识和实例;利用实验课教学内容;利用课堂讨论的形式等,加强了课堂教学效果,受到学生欢迎.通过开设选修课弥补基础阶段学时的不足,以适应本学科的发展与需求.

关键词 教学方式 医学微生物学 医学教学 课堂教学 课堂讨论

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加强七年制医学生早期科研能力培养的探讨 被引量：15

2

作者 何建民 李晓眠 《医学教育》 2005年第5期12-13,共2页

目的通过医学微生物学的课外实践活动,加强七年制医学生早期科研能力的培养与训练。方法针对本专业的特点及结合教师的科研课题方向,指导学生参加部分科研项目;指导学生围绕感兴趣的某个专题查阅文献,撰写综述;由能力强的学生独立选题... 目的通过医学微生物学的课外实践活动,加强七年制医学生早期科研能力的培养与训练。方法针对本专业的特点及结合教师的科研课题方向,指导学生参加部分科研项目;指导学生围绕感兴趣的某个专题查阅文献,撰写综述;由能力强的学生独立选题、立题设计出实验方案,再结合本教研室的实际情况,由教师适当地予以指导。结果学生通过课题的研究了解了医学微生物学的新进展、新发现及相关的科研思路,力求科研题目有前沿性。学生参加科研活动,通过实验设计了解了实验的整体过程,培养了科学的思维方法及独立思考、解决问题的能力,并培养了学生的严谨的科学态度。 展开更多

关键词 微生物学 七年制医学生 科研能力 培养

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家蝇蛹凝集素的纯化及其免疫调节和抑菌作用 被引量：10

3

作者 曹小红 陈一 +3 位作者 张燕 高嘉 陈锦英 王志锐 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期805-808,共4页

目的　从家蝇蛹中分离纯化一种能结合半乳糖的凝集素 ,并研究其免疫和抑菌活性。方法　家蝇蛹凝集素提取纯化方法包括 :缓冲液浸提、戊二醛固定化红细胞吸附、亲和层析和凝胶过滤。以淋巴细胞转化、溶血空斑和抑菌试验研究此凝集素的性... 目的　从家蝇蛹中分离纯化一种能结合半乳糖的凝集素 ,并研究其免疫和抑菌活性。方法　家蝇蛹凝集素提取纯化方法包括 :缓冲液浸提、戊二醛固定化红细胞吸附、亲和层析和凝胶过滤。以淋巴细胞转化、溶血空斑和抑菌试验研究此凝集素的性质。结果　本纯化方法使样品的血凝活力提高了 5 39倍 ,纯化后的家蝇蛹凝集素电泳测得其相对分子质量 (Mr)为 84× 10 3,由 3个亚单位组成 ,含有糖成分。纯化凝集素的浓度为 15 .6～ 10 0 0 μg ml时 ,具有刺激T、B细胞的作用 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。对大肠埃希菌 ,枯草芽胞杆菌和伤寒沙门菌的抑制活性分别为39 .8%、4 5 .3%和 6 6 .2 %。结论　家蝇蛹凝集素具有免疫调节功能和抑菌活性 ,为家蝇免疫机制的深入研究提供了资料。 展开更多

关键词 家蝇蛹 凝集素 纯化 免疫调节 抑菌作用 免疫活性

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血管紧张素转换酶基因多态性与2型糖尿病肾病的关系 被引量：7

4

作者 李咏梅 齐秀英 《中国慢性病预防与控制》 CAS 2005年第1期12-13,共2页

目的研究血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法采用以医院为基础的配对病例鄄对照研究方法,病例与对照的配比条件为年龄和性别。对101对研究对象进行了研究。应用聚合酶链反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳方法进行... 目的研究血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法采用以医院为基础的配对病例鄄对照研究方法,病例与对照的配比条件为年龄和性别。对101对研究对象进行了研究。应用聚合酶链反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳方法进行ACE基因多态性分析。结果ACE基因第16内含子的Alu序列插入/缺失(I/D)多态性与DN的发生之间有统计学关联,D等位基因的出现使DN发生的危险增加,与II基因型相比,基因型为ID、DD的2型糖尿病患者并发DN的OR值分别为2.419(95%可信区间1.180～4.959)和3.417(95%可信区间1.608～7.260)。结论ACE基因D等位基因的出现增加发生DN的危险性。 展开更多

关键词 血管紧张素转换酶基因 多态性 糖尿病肾病

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医学生参与科研活动的实践与认识 被引量：8

5

作者 徐建设 钟启平 李晓霞 《中华医学教育杂志》 2006年第3期50-51,共2页

鼓励学生参加科研活动是多元化教育手段之一。让学生利用课余时间和假日参与教研室的科研工作,通过查阅资料、课题立项、实施实验、撰写论文等,可以学到单纯课堂教学学不到的东西。这种学习方式对学生的未来发展有重要的帮助,是培养本... 鼓励学生参加科研活动是多元化教育手段之一。让学生利用课余时间和假日参与教研室的科研工作,通过查阅资料、课题立项、实施实验、撰写论文等,可以学到单纯课堂教学学不到的东西。这种学习方式对学生的未来发展有重要的帮助,是培养本科生动手能力、分析解决问题能力和创新精神,提高综合素质的有效途径。 展开更多

关键词 课外科研活动 第二课堂 素质教育

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结合医学微生物实验教学加强科研能力培养 被引量：6

6

作者 李梅 石立莹 +3 位作者 何健民 李晓眠 钟启平 訾自强 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2006年第1期73-75,共3页

通过精选实验课内容，开设综合性、自主设计性和应用性实验，改进对实验课成绩的评价方法；扩展讨论课内容；鼓励和引领学生参加科研活动，同时重视团结协作精神的培养，延伸了实验课教学，加强了医学生科研素质的培养。

关键词 医学微生物学 实验教学 科研素质

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副粘病毒Tianjin株F基因克隆及序列分析 被引量：6

7

作者 石立莹 李晓眠 +2 位作者 李梅 何健民 袁立军 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期751-757,共7页

目的探索副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位。方法以副粘病毒Tianjin株基因组RNA为模板,通过RT-PCR方法获得包括F基因全长的两个质粒克隆,分别进行序列测定。将拼接得到的F基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中公布的15... 目的探索副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位。方法以副粘病毒Tianjin株基因组RNA为模板,通过RT-PCR方法获得包括F基因全长的两个质粒克隆,分别进行序列测定。将拼接得到的F基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列与GenBank中公布的15株仙台病毒相应序列进行同源性比较,并构建系统进化树。结果副粘病毒Tianjin株与15株仙台病毒F基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别在85.3%～94.5%和90.4%～95.4%之间。进化树分析表明,Tianjin株与仙台病毒BB1株亲缘关系较近,但仍有一定差距,与其他仙台病毒株关系较远。结论副粘病毒Tianjin株很可能不属于仙台病毒现有的Ohita株、Z株及BB1株所代表的3个进化分支,而是独立于这3个分支之外。 展开更多

关键词 副粘病毒 仙台病毒 F基因 系统进化树

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体外诱导大鼠脂肪源间充质干细胞成肌腱潜能的研究 被引量：6

8

作者 侯凯 李梅 +4 位作者 李金茹 杨逸昆 李纯 王文秀 黄德清 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期929-933,共5页

目的体外诱导脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,AT-MSCs)成肌腱细胞,为临床肌腱损伤的修复提供理论基础。方法从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离出脂肪源间充质干细胞,经生长分化因子-5(growth differentiat... 目的体外诱导脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,AT-MSCs)成肌腱细胞,为临床肌腱损伤的修复提供理论基础。方法从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离出脂肪源间充质干细胞,经生长分化因子-5(growth differentiation factor 5,GDF-5)诱导,使其向肌腱细胞分化。应用形态观察和RT-PCR等方法,从形态和分子水平上对诱导分化的细胞进行鉴定。结果从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离出的AT-MSCs呈散在分布,排列不规则,以星形和多角形细胞为主,能稳定增殖传代。经5、10 ng/mL GDF-5诱导8 d后,大部分细胞呈梭形。RT-PCR结果显示经GDF-5诱导的细胞,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达明显高于未经诱导的对照组;GDF-5诱导的细胞Bcl-2/Bax均高于对照组。结论从脂肪组织中可以获得具有多向分化能力的AT-MSCs,并能在体外稳定传代。经GDF-5诱导后,AT-MSCs有向肌腱细胞分化的倾向。GDF-5在一定时间内对细胞凋亡有抑制作用,有利于AT-MSCs向肌腱细胞的分化。AT-MSCs有可能替代骨髓间充质干细胞作为组织工程学的种子细胞,用于肌腱损伤的修复。 展开更多

关键词 脂肪源间充质干细胞 肌腱细胞 生长分化因子-5 细胞凋亡

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内源性与外源性加亚嘉西科逆转录病毒基因组序列分析 被引量：5

9

作者 杜文才 李咏梅 +3 位作者 朱泽 张晶 李伟霞 Mohd Zamri-Saad 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第9期685-688,I0003,共5页

目的:确定内蒙古JSRV-NM病毒株在逆转录病毒与宿主共进化史上的地位。方法:从我国内蒙古羊种绵羊肺腺瘤病羊肺组织标本中分离出exJSRV-NM株。PCR方法扩增出exJSRV-NM和enJSRV-NM株全长cDNA并进行全基因组测序。应用DNAstar软件对JSRV-N... 目的:确定内蒙古JSRV-NM病毒株在逆转录病毒与宿主共进化史上的地位。方法:从我国内蒙古羊种绵羊肺腺瘤病羊肺组织标本中分离出exJSRV-NM株。PCR方法扩增出exJSRV-NM和enJSRV-NM株全长cDNA并进行全基因组测序。应用DNAstar软件对JSRV-NM基因组上的U3、ENV、GAG/POL核苷酸序列进行分析。结果:克隆的exJSRV-NM株和enJSRV-NM株全基因全长分别为7462bp和7430bp。序列分析表明,exJSRV-NM株序列与Gen-Bank上收录的南非代表株基因组和JSRV21核苷酸全序相比其同源性分别为93.3%和99.2%。enJSRV-NM株序列与GenBank上收录的enJS56A1相比其同源性为94.8%。结论:我国内蒙古羊种所携带的JSRV-NM在逆转录病毒与宿主共进化史上属于古老型。 展开更多

关键词 逆转录病毒科 肺腺瘤病 羊 腺癌 细支气管肺泡 基因 序列分析 绵羊

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红细胞生成素水平与多发性硬化合并贫血的相关性 被引量：5

10

作者 王德河 李咏梅 +4 位作者 吴彤华 李晶 苏丹惠 项诺巍 职心乐 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期84-87,共4页

目的研究多发性硬化并发贫血患者对红细胞生成素的反应是否降低。方法分别检测多发性硬化并发贫血患者、缺铁性贫血患者和健康人群血清红细胞生成素水平,同时检测血常规、网织红细胞、血红蛋白、肝肾功能等指标。结果多发性硬化并发贫... 目的研究多发性硬化并发贫血患者对红细胞生成素的反应是否降低。方法分别检测多发性硬化并发贫血患者、缺铁性贫血患者和健康人群血清红细胞生成素水平,同时检测血常规、网织红细胞、血红蛋白、肝肾功能等指标。结果多发性硬化并发贫血组患者血清红细胞生成素水平为(101.3±17.6)U/L,明显低于缺铁性贫血组的(166.1±8.7)U/L(P<0.01),且多发性硬化并发贫血组血清红细胞生成素水平随并发的贫血严重程度而降低,低、中、重度贫血患者血清红细胞生成素水平分别为(95.7±9.6)、(101.7±8.1)、(123.7±9.3)U/L,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论多发性硬化并发贫血患者血清红细胞生成素水平明显降低,且与并发的贫血病情严重程度相关,红细胞生成素治疗可能对这些患者有益。 展开更多

关键词 多发性硬化 贫血 红细胞生成素 血红蛋白

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自制录像片在医学微生物学实验教学中的重要作用 被引量：5

11

作者 石立莹 钟启平 +1 位作者 李梅 李晓眠 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2009年第6期752-754,共3页

教学录像是申报精品课程工作的重要组成部分,但是在各大高校申报精品课程的网页上,自制实验录像仍然比较少见。该文结合医学微生物学实验教学现状及存在的问题,阐述了自制微生物学实验录像的优势和对提高本科教学质量的作用,以及自制实... 教学录像是申报精品课程工作的重要组成部分,但是在各大高校申报精品课程的网页上,自制实验录像仍然比较少见。该文结合医学微生物学实验教学现状及存在的问题,阐述了自制微生物学实验录像的优势和对提高本科教学质量的作用,以及自制实验录像片需要重点解决的问题等,旨在号召各大院校自己动手制作实验录像片。 展开更多

关键词 医学微生物学 多媒体教学 实验教学

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柠檬提取物抗小鼠柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎的研究 被引量：4

12

作者 李咏梅 李晓眠 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第5期357-359,共3页

目的:观察柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎的影响。方法:选取4～6周龄雄性Balb/C鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3m株(CVB3m)建立实验性小鼠急性病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型对照组及3个实验组(实验Ⅰ～Ⅲ... 目的:观察柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎的影响。方法:选取4～6周龄雄性Balb/C鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3m株(CVB3m)建立实验性小鼠急性病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型对照组及3个实验组(实验Ⅰ～Ⅲ组),每组10只。模型对照组和各实验组小鼠腹腔注射病毒1h后灌胃给药,实验Ⅰ～Ⅲ组分别灌服20、60、180倍稀释的柠檬提取液,模型对照组灌服等体积生理盐水,连用7d,正常对照组自然喂养,于第14天处死小鼠。观察各组小鼠心脏质量与体质量比(HM/BM)及心肌HE染色切片病理变化,并测定血清心肌酶含量。结果:(1)各实验组HM/BM较模型对照组明显降低(P<0.05),实验Ⅰ组、Ⅱ组心肌病理积分较模型对照组明显降低(P<0.05)。(2)实验Ⅰ组、Ⅱ组血清心肌酶活性较模型对照组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎具有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 柠檬 柯萨奇病毒感染 心肌炎 小鼠

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PBL教学模式在医学微生物学教学中的应用探索 被引量：5

13

作者 李咏梅 石立莹 +2 位作者 耿鹏 李光明 李梅 《高校医学教学研究（电子版）》 2015年第4期52-54,共3页

在医学微生物学教学中,探索使用PBL教学方法。学生反馈结果显示,PBL教学法在医学微生物学教学中是一种培养和提高学生各种能力及综合素质的较好教学模式,但其在教学实践过程中尚存在一些问题,需要结合实际情况进行合理运用。

关键词 医学微生物学 PBL教学方法 医学教育

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致肾盂肾炎大肠杆菌特异性片段R049聚集性分布的研究 被引量：5

14

作者 葛新 陈锦英 +3 位作者 张玉梅 高英堂 侯敏 贺靖冬 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期777-780,共4页

目的研究致肾盂肾炎大肠杆菌（UPEC）132特异性片段R049在UPEC菌株和正常人粪便分离的大肠杆菌菌株中的分布情况。方法对20株UPEC和40株粪便分离大肠杆菌采用PCR方法扩增R049片段，对R049阳性菌株检测编码5种毒力因子的基因（papC、fimH... 目的研究致肾盂肾炎大肠杆菌（UPEC）132特异性片段R049在UPEC菌株和正常人粪便分离的大肠杆菌菌株中的分布情况。方法对20株UPEC和40株粪便分离大肠杆菌采用PCR方法扩增R049片段，对R049阳性菌株检测编码5种毒力因子的基因（papC、fimH、hfy、aer、cnfl），并对其基因组DNA用XbaⅠ酶切，进行脉冲场凝胶电泳分析，继而用毛细管法将DNA片段转移至尼龙膜，利用地高辛标记的R049 ORF探针片段进行Southern杂交，分析杂交条带的分布特征。结果20株UPEC中有8株（40％）、40株粪便分离的大肠杆菌中有3株（7．5％）R049片段扩增阳性，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。R049阳性菌株中，R049片段与5种UPEC毒力因子密切相关。Southern杂交结果表明3株粪便分离大肠杆菌R049阳性杂交带分别为150kb、15kb与240kb；8株UPEC中有6株阳性杂交带均为350kb，其余2株分别为280kb和25kb。结论UPEC132特异性片段R049在国内分离的UPEC菌株中具有共有性和聚集性分布的特征。 展开更多

关键词 致肾盂肾炎大肠杆菌 R049片段 脉冲场凝胶电泳 SOUTHERN杂交

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致肾盂肾炎大肠埃希菌新基因R049免疫保护作用的研究 被引量：4

15

作者 葛新 张玉梅 +2 位作者 陈锦英 林旭 赵凤玲 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期712-716,共5页

目的克隆和表达致肾盂肾炎大肠埃希菌（UPEC）132新基因R049，研究R049重组蛋白对小鼠的免疫保护作用。方法利用PCR定向克隆方法构建R049基因原核表达系统，表达后通过镍亲和层析纯化获得R049重组蛋白，制备鼠多克隆抗体。重组蛋白与UPE... 目的克隆和表达致肾盂肾炎大肠埃希菌（UPEC）132新基因R049，研究R049重组蛋白对小鼠的免疫保护作用。方法利用PCR定向克隆方法构建R049基因原核表达系统，表达后通过镍亲和层析纯化获得R049重组蛋白，制备鼠多克隆抗体。重组蛋白与UPEC132全菌蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析，继而R049重组蛋白免疫BALB／c小鼠，用同源菌对小鼠经尿道上行感染，比较免疫组与对照组小鼠尿液与肾脏细菌计数差异。结果成功构建重组株E．coli BL21（DE3）／pET32a-R049ORF，重组蛋白相对分子质量（MT）约为66．9×10^3，纯化后其纯度达到95％，制备多克隆抗体效价为≥1：102400。Western blot证实重组R049蛋白与UPEC132全菌蛋白均能与小鼠抗血清发生特异性反应。动物实验结果表明尿液和肾脏菌落计数在免疫组均明显低于对照组（P〈0．01，P〈0．05）。结论UPEC132的新基因R049具有一定的免疫保护作用，其机制有待进一步研究。 展开更多

关键词 致肾盂肾炎大肠埃希菌 R049基因 克隆表达 免疫保护 动物实验

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肠侵袭性大肠埃希菌O抗原多糖的致病作用 被引量：2

16

作者 钟启平 陈恩临 +1 位作者 徐建设 董亚利 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期83-86,共4页

目的研究肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)O抗原多糖(OPS)的特异性致病作用。方法提取并纯化大肠埃希菌O29———EIEC的脂多糖(LPS)亚单位分子———OPS进行体内外试验,观察其毒性作用并与LPS作对比。结果EIECOPS可引起HeLa细胞病变;致兔回肠... 目的研究肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)O抗原多糖(OPS)的特异性致病作用。方法提取并纯化大肠埃希菌O29———EIEC的脂多糖(LPS)亚单位分子———OPS进行体内外试验,观察其毒性作用并与LPS作对比。结果EIECOPS可引起HeLa细胞病变;致兔回肠袢肠黏膜出血,但不引起肠腔积液;电镜观察OPS致病变的HeLa细胞,明显可见细胞的超微病理损害。结论EIECOPS有特异的致病作用,与其LPS的内毒素作用不同;大肠埃希菌O29(致病菌株)OPS毒性作用比大肠埃希菌HB101(非致病菌株)OPS毒性强烈。 展开更多

关键词 肠侵袭性大肠埃希菌 O抗原多糖 致病作用 脂多糖(LPS) EIEC Hela细胞 毒性作用 致病菌株 体内外试验 OPS 细胞病变 黏膜出血 电镜观察 病理损害 特异性 亚单位 内毒素

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小鼠对仙台病毒Tianjin株易感性研究 被引量：4

17

作者 赵桂金 李梅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期103-107,共5页

研究129Sv、DBA/2、Kunming、BALB/c四种小鼠对仙台病毒Tianjin株的感染特点,并通过观察易感性的不同,确定适于研究此病毒致病性及疫苗的小型啮齿类实验动物。用9～11d龄鸡胚接种仙台病毒Tianjin株,72h后收集尿囊腔内效价为1:1 280病毒... 研究129Sv、DBA/2、Kunming、BALB/c四种小鼠对仙台病毒Tianjin株的感染特点,并通过观察易感性的不同,确定适于研究此病毒致病性及疫苗的小型啮齿类实验动物。用9～11d龄鸡胚接种仙台病毒Tianjin株,72h后收集尿囊腔内效价为1:1 280病毒液,用5μl和6倍稀释的30μl病毒液分别接种129Sv、DBA/2、Kunming、BALB/c小鼠,观查12d小鼠体重变化,计算生存率。用6倍稀释的30μl病毒液接种Kunming、BALB/c小鼠,于接种前第1天以及接种后第4、7天断颈处死,取左肺制成切片,HE染色观察病理改变,综合判断仙台病毒Tianjin株对四种鼠感染的易感性的不同。129Sv、DBA/2小鼠在接种仙台病毒Tianjin株5μl后,最高平均体重下降分别为13.0%、4.7%,四种鼠12d生存率均为100%;接种稀释的30μl病毒液,129Sv、DBA/2、Kunming、BALB/c最高平均体重下降21.7%、30.3%、16.7%、9.6%;12d生存率分别为20%、0%、80%、100%。Kunming鼠在感染后第4、7d的肺组织病理改变较BALB/c严重,表现为大量炎细胞渗出,粘膜下层实质性增厚。以上实验结果表明DBA/2对仙台病毒Tianjin株感染最易感,BALB/c耐受性最强,易感顺序为DBA/2>129Sv>Kunming>BALB/c。DBA/2和129Sv小鼠可作为仙台病毒Tianjin株致病性及疫苗研究的首选实验动物。 展开更多

关键词 仙台病毒 Tianjin株 体重下降 生存率 易感性

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致肾盂肾炎大肠杆菌毒力因子的基因分布 被引量：4

18

作者 高新蕾 陈锦英 +3 位作者 侯敏 贺靖冬 葛新 王风山 《中国慢性病预防与控制》 CAS 北大核心 2009年第6期551-553,共3页

目的了解致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)毒力因子基因的分布。方法用PCR方法对41株UPEC菌株和40株健康人粪便分离的大肠杆菌进行5种毒力因子基因及新基因R049的扩增检测,并进行对比分析。结果 UPEC组和健康人粪便分离大肠杆菌6种毒力因子基因... 目的了解致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)毒力因子基因的分布。方法用PCR方法对41株UPEC菌株和40株健康人粪便分离的大肠杆菌进行5种毒力因子基因及新基因R049的扩增检测,并进行对比分析。结果 UPEC组和健康人粪便分离大肠杆菌6种毒力因子基因papC、fimH、hly、cnf1、aer和R049的检出率分别为100%和2.5%,53.66%和5%,63.41%和10%,34.15%和5%,60.98%和35%,40%和7.5%;前者高于后者(P<0.01)。结论 UPEC毒力因子基因分布呈现多态性。 展开更多

关键词 尿路感染 致肾盂肾炎大肠杆菌 粪便大肠杆菌 毒力因子

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CXCR4和Survivin启动子的克隆及其在乳腺癌细胞系的转录特异性分析 被引量：1

19

作者 李晓霞 王宝利 姚智 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第5期321-324,350,共5页

目的:评估CXCR4和Survivin启动子在乳腺癌细胞系中的特异转录活性。方法:采用PCR方法扩增CXCR4和Survivin启动子序列,将其分别克隆到含有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒载体pEGFP-1和含有荧光素酶(LUC)的质粒载体pGL3-Basic,经... 目的:评估CXCR4和Survivin启动子在乳腺癌细胞系中的特异转录活性。方法:采用PCR方法扩增CXCR4和Survivin启动子序列,将其分别克隆到含有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒载体pEGFP-1和含有荧光素酶(LUC)的质粒载体pGL3-Basic,经脂质体分别转染乳腺癌细胞系(MCF-7MDA-MB-231和T-47D)和乳腺上皮细胞(HBL-100)。荧光显微镜下观察EGFP的表达情况,并测定2个启动子在乳腺癌细胞中的荧光素酶活性。结果:CXCR4和Sur-vivin启动子在3种乳腺癌细胞中均表现特异的转录活性。CXCR4启动子在MDA-MB-231中的活性高于Survivin启动子(P=0.004);而在MCF-7细胞中活性低于Survivin启动子(P=0.006),两者在T-47D细胞中的启动子活性相当,P=0.615。结论:CXCR4和Survivin启动子在乳腺癌细胞中具有强的特异转录活性,且在不同乳腺癌细胞类型表现的转录特异性有一定差异。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 CXCR4 SURVIVIN 启动子 转录靶向性

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hTERT启动子的克隆及在MCF7乳腺癌细胞中的特异转录活性 被引量：1

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作者 李晓霞 王宝利 姚智 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第1期68-71,共4页

背景与目的利用肿瘤特异性启动子增强肿瘤细胞中治疗基因的转录选择性是达到基因治疗靶向性的有效途径。人端粒酶催化亚基(hTERT)在大部分肿瘤细胞中呈特异性高表达[1-2],有可能成为肿瘤特异性启动子。本文扩增了hTERT基因启动子并分别... 背景与目的利用肿瘤特异性启动子增强肿瘤细胞中治疗基因的转录选择性是达到基因治疗靶向性的有效途径。人端粒酶催化亚基(hTERT)在大部分肿瘤细胞中呈特异性高表达[1-2],有可能成为肿瘤特异性启动子。本文扩增了hTERT基因启动子并分别克隆于报告基因重组质粒pEGFP-1和pGL3-Basic,检测并证实hTERT启动子在乳腺癌细胞MCF7中的特异转录活性。方法采用套式PCR法扩增hTERT启动子,将其分别克隆到含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的重组质粒pEGFP-1和含Luciferase的重组质粒pGL3-Basic,经脂质体分别转染人乳腺正常上皮细胞系HBL100和乳腺癌细胞MCF7,荧光显微镜观察EGFP的表达情况,并测定两种细胞中荧光素酶转录表达差异。结果与正常细胞HBL100相比,hTERT启动子在MCF7细胞呈现强的绿色荧光表达;荧光素酶活性检测与其一致,hTERT启动子在MCF7乳腺癌细胞的荧光素酶相对活性RLU/U值(33784)约相当于HBL100细胞中(2400)的15倍。结论hTERT启动子在乳腺癌MCF7细胞中具有很强的特异性,为进一步开发肿瘤的特异性基因治疗奠定实验基础。 展开更多

关键词 HTERT 启动子 乳腺癌 特异转录活性

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