奶子藤属植物中生物碱研究进展 被引量：3

1

作者 王亚兰 王晓静 王志伟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期175-183,共9页

奶子藤属植物为傣族传统常用药材,含有大量结构复杂,生物活性良好的生物碱类成分。本文针对奶子藤属植物中已分离鉴定的95个生物碱及其体外抗肿瘤和抗HIV活性研究进行了系统综述,为更加合理地开发利用奶子藤属植物资源提供参考依据。

关键词 奶子藤属 奶子藤 闷奶果 生物碱 研究进展

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奶子藤吲哚生物碱化学成分研究 被引量：2

2

作者 王亚兰 张金苹 +1 位作者 王志伟 王晓静 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1753-1757,共5页

为研究奶子藤(Bousigonia mekongensis)根的化学成分及生物活性。采用正相硅胶、RP-18、制备液相等色谱技术,对奶子藤根中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到9个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为:quebrachamine(1)、(-)-is... 为研究奶子藤(Bousigonia mekongensis)根的化学成分及生物活性。采用正相硅胶、RP-18、制备液相等色谱技术,对奶子藤根中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到9个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为:quebrachamine(1)、(-)-isoeburnamine(2)、rhazinilam(3)、tetrahydroalstonine(4)、leuconodine D(5)、leucophyllidine(6)、(-)-O-ethyleburnamine(7)、(-)-ebumamenine(8)、eburenine(9)。化合物1和3~7首次从该属植物中分离得到,化合物2为首次从该植物中分离得到。所有化合物测试了拮抗高糖所致的足细胞损伤和抑制淀粉样蛋白-β(Aβ)两种生物活性,结果显示化合物6具有一定的Aβ抑制活性(IC 50=26.1μM),其余化合物均未显示出生物活性。 展开更多

关键词 奶子藤 吲哚生物碱 生物活性 化学成分

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核桃果化学成分及药理活性研究进展 被引量：2

3

作者 殷姝君 赵焕新 王晓静 《食品与药品》 CAS 2018年第2期147-152,共6页

核桃(Juglans regia L.)为胡桃科(Juglandaceae)胡桃属(Juglans)植物,其果实主要包括果皮、核桃壳、果仁及核桃隔膜。研究发现,核桃果各部位化学成分及药理活性有一定差异,但也有相似之处。本文论述了近年核桃果在化学成分及药理活性方... 核桃(Juglans regia L.)为胡桃科(Juglandaceae)胡桃属(Juglans)植物,其果实主要包括果皮、核桃壳、果仁及核桃隔膜。研究发现,核桃果各部位化学成分及药理活性有一定差异,但也有相似之处。本文论述了近年核桃果在化学成分及药理活性方面的研究进展,为促进核桃的开发利用提供参考。 展开更多

关键词 核桃 化学成分 药理活性 临床应用

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黑螵蛸多糖的制备及活性测定 被引量：2

4

作者 梅桂雪 孙捷 王晓静 《食品与药品》 CAS 2019年第2期94-99,共6页

目的对黑螵蛸多糖进行分离纯化,并初步测定其活性。方法采用水提-醇沉法制备黑螵蛸粗多糖,经DEAE Sephadex A-25离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶柱色谱纯化得到均一的黑螵蛸多糖组分HPP-1。采用凝胶渗透色谱,紫外光谱等技术对HPP-1... 目的对黑螵蛸多糖进行分离纯化,并初步测定其活性。方法采用水提-醇沉法制备黑螵蛸粗多糖,经DEAE Sephadex A-25离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶柱色谱纯化得到均一的黑螵蛸多糖组分HPP-1。采用凝胶渗透色谱,紫外光谱等技术对HPP-1进行分析,另外探究多糖的抗氧化活性、抗菌活性和胆碱酯酶抑制活性。结果黑螵蛸多糖HPP-1的相对分子质量(Mr)为13 048,不含蛋白质、核酸和色素,DPPH自由基和羟基自由基清除IC_(50)值分别为10.35±0.12,100.33±0.06μg/ml;多糖对枯草芽孢杆菌有抑制活性,最小抑菌浓度为18.8μg/ml;抑制乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的IC_(50)值分别为6.52±0.03,18.26±0.26μg/ml。结论黑螵蛸多糖具有较好的抗氧化活性、抗菌活性和胆碱酯酶抑制活性,可作为潜在的抗氧化剂、抑菌剂和胆碱酯酶抑制剂进行深入研究和开发。 展开更多

关键词 黑螵蛸 多糖 抗氧化活性 抗菌活性 胆碱酯酶抑制活性

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大叶糖胶树吲哚生物碱化学成分研究 被引量：1

5

作者 张金苹 闫慧娇 +2 位作者 王亚兰 王志伟 王晓静 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期622-626,共5页

为研究大叶糖胶树(Alstonia macrophylla)化学成分及生物活性。采用正相硅胶、葡聚糖凝胶、制备液相等色谱技术,对大叶糖胶树中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到6个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为vallesamine(1)、picr... 为研究大叶糖胶树(Alstonia macrophylla)化学成分及生物活性。采用正相硅胶、葡聚糖凝胶、制备液相等色谱技术,对大叶糖胶树中的化学成分进行了分离纯化,共分离得到6个化合物,通过NMR、MS等波谱方法将其结构鉴定为vallesamine(1)、picrinine(2)、khasuanine A(3)、scholaricine(4)、echitamine(5)、strictosamide(6)。化合物3和6首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、4、5为首次从该植物中分离得到。所有化合物测试了对HCT-116人结肠癌细胞和DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞的细胞毒性,结果显示化合物2和4具有一定的细胞毒性,化合物4对DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞的细胞毒性较为明显(IC50 =16.7μg/mL),其余化合物均未显示出生物活性。 展开更多

关键词 大叶糖胶树 吲哚生物碱 生物活性 化学成分

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一种阿霉素/NO供体光敏纳米复合物的合成与性质研究

6

作者 殷姝君 王晓静 +2 位作者 王兵 梅桂雪 孙捷 《化学研究》 CAS 2017年第3期371-377,共7页

以硫化铜纳米晶(CuS-NCs)为核心,聚N-异丙基丙烯酰胺接枝壳聚糖(PNIPAM-g-CS)微粒为壳合成一种新型光敏纳米复合材料.在温度的调节下,N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)包覆CuS纳米晶,并接枝壳聚糖(CS),合成CuS杂PNIPAM-g-CS纳米复合材料.CuS在... 以硫化铜纳米晶(CuS-NCs)为核心,聚N-异丙基丙烯酰胺接枝壳聚糖(PNIPAM-g-CS)微粒为壳合成一种新型光敏纳米复合材料.在温度的调节下,N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)包覆CuS纳米晶,并接枝壳聚糖(CS),合成CuS杂PNIPAM-g-CS纳米复合材料.CuS在近红外光(980 nm)照射下具有光热效应,导致纳米复合物中PNIPAM-g-CS微粒受热体积收缩.负载阿霉素,这种纳米复合物就可作为光热诱导释放阿霉素的多功能纳米载体.再负载NO光敏供体(RBS),就可制备出阿霉素/RBS双负载的CuS杂PNIPAM-g-CS纳米载体.在可见光(365 nm)照射下,RBS光解释放NO.近红外光和可见光分别触发纳米载体释放阿霉素和NO,加上CuS纳米晶的光热效应,这种纳米载体可实现光触发双药物释放协同光热化疗杀伤肿瘤细胞. 展开更多

关键词 CUS 纳米复合材料 药物释放 光热疗法

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丹皮酚衍生物及其药理活性研究进展 被引量：42

7

作者 吴桂莹 亓玉玲 +2 位作者 郝宝燕 王积磊 孙敬勇 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1001-1006,共6页

丹皮酚具有广泛的药理活性,主要具有保护心脑血管系统、促进微循环、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗变态反应、增强免疫力以及治疗糖尿病、骨质疏松症等作用。近年来,为了提高丹皮酚生物利用度,不仅改进其人工合成的方法,还对丹皮酚进... 丹皮酚具有广泛的药理活性,主要具有保护心脑血管系统、促进微循环、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗变态反应、增强免疫力以及治疗糖尿病、骨质疏松症等作用。近年来,为了提高丹皮酚生物利用度,不仅改进其人工合成的方法,还对丹皮酚进行了大量的结构修饰及改造,包括羰基、酚羟基、羰基α-氢、甲氧基以及苯环,生成了羧酸酯类、磺酸酯类、磷酸酯类、醚类、NO供体类、糖苷化类、丹皮酚钠盐、Schiff碱类、噻唑类、肟类、羟烷基化类、α,β-不饱和酮类、胺甲基化类、α-氢卤代类、去甲基化类、苯环卤代类16种丹皮酚衍生物。结合国内外有关丹皮酚衍生物的文献,对丹皮酚衍生物及其药理活性方面进行综述,为此类化合物的进一步研究提供参考。 展开更多

关键词 丹皮酚 衍生物 结构修饰 结构改造 保护心脑血管系统 促进微循环 抗菌 抗炎 抗肿瘤

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苯乙醇苷类化合物的分类及研究进展 被引量：13

8

作者 薛景 王英爱 +2 位作者 贾献慧 杜成林 唐文照 《药学研究》 CAS 2018年第5期282-290,共9页

通过对大量相关文献的阅读整理,对苯乙醇苷类化合物的研究进展进行总结。按年份顺序对植物来源进行整合,并按照糖基的个数对其进行了分类,根据结构特征简述了药理活性,以便更为有效地开发利用苯乙醇苷类化合物。

关键词 苯乙醇苷类化合物 植物来源 结构分类

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花椒属植物抗感染作用研究进展 被引量：12

9

作者 娄京荣 郑重飞 +3 位作者 李莹 王文雪 亓超 姚庆强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期5477-5484,共8页

芸香科花椒属Zanthoxylum植物在我国有50余种,是十分重要的中药,具有多种药理活性,尤其是抑制病原微生物和寄生虫生长作用,可以作为抗感染药物的来源。对近年来花椒属植物抗感染性作用成分的研究进展进行综述,所涉及的感染性病原体包括... 芸香科花椒属Zanthoxylum植物在我国有50余种,是十分重要的中药,具有多种药理活性,尤其是抑制病原微生物和寄生虫生长作用,可以作为抗感染药物的来源。对近年来花椒属植物抗感染性作用成分的研究进展进行综述,所涉及的感染性病原体包括细菌、真菌、病毒、寄生虫,以期为寻找结构新颖和具有新的作用机制的抗感染药物提供参考。 展开更多

关键词 花椒属 抗细菌 抗真菌 抗病毒 抗疟疾

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土荆皮化学成分及其抗黄嘌呤氧化酶活性研究 被引量：6

10

作者 杜洪芳 贾献慧 +5 位作者 赵焕新 肖成梅 蔡敏 王子潇 杜成林 唐文照 《食品与药品》 CAS 2019年第6期444-450,共7页

目的研究土荆皮中具有抗黄嘌呤氧化酶活性的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、反相柱色谱(ODS)、高效液相色谱(HPLC)制备等方法对土荆皮的乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱[核磁共振氢谱(1H-NMR),核磁共振碳谱(13C-NMR)... 目的研究土荆皮中具有抗黄嘌呤氧化酶活性的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、反相柱色谱(ODS)、高效液相色谱(HPLC)制备等方法对土荆皮的乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱[核磁共振氢谱(1H-NMR),核磁共振碳谱(13C-NMR),高分辨电喷雾电离质谱(HRESI-MS)]数据进行结构鉴定,采用HPLC测定化合物的黄嘌呤氧化酶抑制活性。结果从土荆皮乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到13个化合物,分别鉴定为土荆皮乙酸(1),土荆皮甲酸(2),土荆皮丙酸(3),土荆皮乙酸甲酯(4),土荆皮乙酸乙酯(5),土荆皮乙酸葡糖苷(6),杨梅素(7),二氢去氢二愈创木基醇(8),罗汉松脂素(9),cedrusin(10),ligraminol E(11),原儿茶酸(12),3,5-二羟基-2-[2-(4-羟苯乙酰基)]苯甲酸(13)。化合物7,12,13的黄嘌呤氧化酶抑制活性较好,半数抑制浓度(IC50)分别为0.32,0.38,0.29 mmol/L。结论化合物8,9,11,12,13为首次从土荆皮中分离得到,其所含的多酚类化合物具有较好的抗黄嘌呤氧化酶活性。 展开更多

关键词 土荆皮 化学成分 抗黄嘌呤氧化酶活性

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玛咖化学成分研究 被引量：3

11

作者 赵雪飞 马宁 +1 位作者 杨尚军 白少岩 《食品与药品》 CAS 2018年第2期93-97,共5页

目的研究玛咖(Lepidium meyenii Walp.)的化学成分。方法采用各种分离技术(包括硅胶、HP-20大孔吸附树脂、ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及重结晶),研究玛咖乙醇提取物化学成分,并通过各种分析手段对化合物的结构进行确证。结果从玛咖乙... 目的研究玛咖(Lepidium meyenii Walp.)的化学成分。方法采用各种分离技术(包括硅胶、HP-20大孔吸附树脂、ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及重结晶),研究玛咖乙醇提取物化学成分,并通过各种分析手段对化合物的结构进行确证。结果从玛咖乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位分离得15个化合物,分别鉴定为N-苄基-十六碳酰胺(1)、苯乙酰胺(2)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(3)、烟酸(4)、棕榈酸(5)、松柏苷(6)、松脂素-O-β-D-葡糖苷(7)、β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9)、酒渣碱(10)、琥珀酸(11)、烟酰胺(12)、野黑樱苷(13)、5-(3-羟丙基)-2-甲氧基苯基-β-D-吡喃葡糖苷(14)、腺嘌呤(15)。结论其中化合物6、10、12、13、14系首次从独荇菜属植物中分离得到,化合物5、6、10、12、13、14、15系首次从玛咖中分离得到。 展开更多

关键词 玛咖 生物碱 化学成分

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一氧化氮供体化合物的合成方法研究进展 被引量：2

12

作者 王兵 李娜 +3 位作者 刘腾 王英爱 王晓静 孙捷 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第4期777-797,共21页

一氧化氮(NO)作为生物信使或效应分子在体内发挥重要的生理作用,因其具有多种多样的生物活性在临床应用方面得到广泛关注.体内NO生成不足常与多种疾病的形成密切相关,NO供体化合物可以通过在体内释放NO治疗和预防多种疾病.随着NO供体化... 一氧化氮(NO)作为生物信使或效应分子在体内发挥重要的生理作用,因其具有多种多样的生物活性在临床应用方面得到广泛关注.体内NO生成不足常与多种疾病的形成密切相关,NO供体化合物可以通过在体内释放NO治疗和预防多种疾病.随着NO供体化合物的广泛应用,其合成方法引起了国内外研究人员的高度重视.结合国内外学者对这方面的研究,对近10年NO供体化合物的合成方法研究进展进行综述. 展开更多

关键词 一氧化氮供体 合成方法 药理活性

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RP-HPLC测定感冒清热颗粒中紫堇灵与乙酰紫堇灵的含量 被引量：2

13

作者 张桂英 王英爱 +3 位作者 薛景 贾献慧 杜成林 唐文照 《食品与药品》 CAS 2017年第5期354-357,共4页

目的建立反相高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中紫堇灵与乙酰紫堇灵含量的方法。方法采用Inert Sustain~?C_(18)色谱柱,以乙腈-0.03%乙二胺水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为289 nm,流速为1.0 mL/min。结果在此分离条件下,紫堇灵峰与... 目的建立反相高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中紫堇灵与乙酰紫堇灵含量的方法。方法采用Inert Sustain~?C_(18)色谱柱,以乙腈-0.03%乙二胺水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为289 nm,流速为1.0 mL/min。结果在此分离条件下,紫堇灵峰与乙酰紫堇灵峰分离较好,阴性空白溶液无干扰;紫堇灵浓度4.00~40.00μg/mL,乙酰紫堇灵浓度2.04~20.40μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数(r)分别为0.9996和0.9995;加样回收率分别为100.56%与97.23%,RSD分别为2.12%与2.35%;不同厂家生产的感冒清热颗粒中紫堇灵与乙酰紫堇灵的含量差异较大。结论该方法操作简便、结果准确、专属性强,可为感冒清热颗粒质量检测方法的制定提供参考。 展开更多

关键词 感冒清热颗粒 高效液相色谱法 苦地丁 紫堇灵 乙酰紫堇灵

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雪胆甲素及其衍生物的研究概况 被引量：2

14

作者 喻琨 刘爱芹 +1 位作者 刘波 姚庆强 《食品与药品》 CAS 2019年第2期161-165,共5页

雪胆甲素主要存在于葫芦科雪胆属植物雪胆中,药理作用广泛,现已用于临床。现对其化学结构、含量测定、药理作用、药效学作用及结构修饰作一综述,以冀为雪胆甲素的深入研究提供参考。

关键词 雪胆甲素 研究概况 化学结构 药理作用

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楸叶泡桐种子的苯乙醇苷类化学成分研究 被引量：1

15

作者 薛景 王英爱 +2 位作者 贾献慧 杜成林 唐文照 《食品与药品》 CAS 2018年第5期325-328,共4页

目的研究楸叶泡桐种子的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱等方法对楸叶泡桐种子的70%乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定。结果从楸叶泡桐种子中分离纯化得到7个苯乙醇苷类化合物,分别鉴定为:i... 目的研究楸叶泡桐种子的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱等方法对楸叶泡桐种子的70%乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定。结果从楸叶泡桐种子中分离纯化得到7个苯乙醇苷类化合物,分别鉴定为:ilicifolioside A和isoilicifolioside A混合物(1),isoacteoside(2),plantalloside(3),orobanchoside(4),darendoside B(5),acteoside(6),tomentoside(7)。结论其中,化合物3,4,5为首次从泡桐属中分离得到,化合物1,2,6,7为首次从该植物中分离得到。 展开更多

关键词 泡桐属 楸叶泡桐 化学成分

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苣荬菜的毛细管电泳指纹图谱研究 被引量：1

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作者 孙姗 吕元琦 +1 位作者 袁哲 姚庆强 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期384-387,共4页

目的研究不同产地苣荬菜的高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱。方法区带毛细管电泳法的条件为：未涂层石英毛细管柱（56cm×75μm，有效长度51cm），以20mmol·L^-1硼砂-0．5mol·L^-1硼酸-18mmol·L^-1α-环糊精（pH8．... 目的研究不同产地苣荬菜的高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱。方法区带毛细管电泳法的条件为：未涂层石英毛细管柱（56cm×75μm，有效长度51cm），以20mmol·L^-1硼砂-0．5mol·L^-1硼酸-18mmol·L^-1α-环糊精（pH8．5）作为缓冲溶液，工作电压15kV，压差进样（高度11．5cm），进样时间20s，检测波长214nm。结果建立了苣荬菜的HPCE指纹图谱，对其进行相似度评价和聚类分析；在指纹图谱中有9个共有峰，并指认了其中的3个共有峰；除德州平原样品的相似度小于0．9外，其余10个产地样品的相似度均大于0．9；聚类分析将11个产地的样品分为两类。结论所用方法简便、准确、重复性好，可为苣荬菜药材的质量评价提供参考。 展开更多

关键词 苣葜菜 高效毛细管电泳 指纹图谱 质量评价 相似度评价 聚类分析 共有峰

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马蹄香化学成分研究 被引量：1

17

作者 王瀚民 马宁 +1 位作者 杨尚军 白少岩 《食品与药品》 CAS 2019年第1期41-44,共4页

目的研究马蹄香(Saruma henryi Oliv.)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、HPLC等柱色谱技术和重结晶,对马蹄香干燥全草95%乙醇和75%乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯部位进行分离纯化,通过理化性质和波... 目的研究马蹄香(Saruma henryi Oliv.)的化学成分。方法采用硅胶、ODS、HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、HPLC等柱色谱技术和重结晶,对马蹄香干燥全草95%乙醇和75%乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯部位进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从中分离得9个化合物,分别鉴定为细辛脂素(1)、金粟兰内酯C(2)、shizukanolide H(3)、吲哚-3-甲酸甲酯(4)、丁二酸(5)、异嗪皮啶(6)、银线草醇F(7)、β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9)。结论其中化合物1、2、3、4、6、7均为首次从马蹄香中分离得到。 展开更多

关键词 马蹄香 细辛脂素 化学成分

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肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)对RA的影响 被引量：1

18

作者 刘肖帅 葛鲁娜 +3 位作者 韩金祥 常晓天 朱有名 王世立 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期103-108,共6页

类风湿关节炎(RA)是一种病因和发病机制尚不清楚的自身免疫疾病,一般认为是由多种遗传因素和环境因素共同作用的结果。遗传因素中以组织相容性白细胞抗原HLA最为重要,另外作为非HLA的肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)也参与了RA的发病。PADI... 类风湿关节炎(RA)是一种病因和发病机制尚不清楚的自身免疫疾病,一般认为是由多种遗传因素和环境因素共同作用的结果。遗传因素中以组织相容性白细胞抗原HLA最为重要,另外作为非HLA的肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)也参与了RA的发病。PADI4是一种翻译后修饰酶,可在钙离子存在的情况下将精氨酸残基转化为瓜氨酸残基,瓜氨酸化后的蛋白质往往改变其分子构象,从而导致其生化活性亦发生改变。在不用种族的人群中,PADI4基因多态性与RA的易感性不尽相同。PADI4在RA患者血清中含量明显升高,在机体内产生自身抗PADI4抗体,并且PADI4瓜氨酸化多种蛋白质引起机体自身的免疫反应参与RA的发生与发展。近些年来的其他研究表明PAID4也参与了肿瘤、溃疡性结肠炎、多发性硬化症的发病。尽管针对PADI4的研究已经取得了很多重大进展,但是仍然存在很多悬而未决的问题等待科研工作者进一步的研究和证实。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 肽基精氨酸脱亚胺酶4 SNP 瓜氨酸化 抗PADI4抗体

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rTNSALP-FcD10重组表达质粒的构建及在CHO-K1细胞的稳定表达

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作者 徐颖 付加芳 +2 位作者 唐超 韩金祥 王世立 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期521-526,共6页

目的构建重组表达质粒pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10及p EF1-rTNSALP-FcD10,获得能够稳定表达rTNSALP-FcD10蛋白的CHO-K1细胞株。方法去除重组人非组织特异碱性磷酸酶(tissue-nonspecific alkaline phosphatase,TNSALP)多钛链C端氨基酸连接I... 目的构建重组表达质粒pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10及p EF1-rTNSALP-FcD10,获得能够稳定表达rTNSALP-FcD10蛋白的CHO-K1细胞株。方法去除重组人非组织特异碱性磷酸酶(tissue-nonspecific alkaline phosphatase,TNSALP)多钛链C端氨基酸连接IgG1的Fc片段及10个天冬氨酸,构建目的基因rhALP-FcD10,将基因分别克隆至pcDNA3. 1及p EF1/Myc-His B载体上,均转化E. coli DH5α细胞;将签定正确的两组重组质粒均转染CHO-K1细胞,进行G418压力筛选,建立稳定转染的CHO-K1细胞系,采用RT-qPCR及Western blot方法检测细胞中rTNSALPFcD10 mRNA转录水平及蛋白表达量。结果重组质粒pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10及pEF1-rTNSALP-FcD10经双酶切鉴定证明构建正确;G418最低致死浓度确定为800μg/m L;CHO-K1细胞中rTNSALP-FcD10 m RNA转录及蛋白水平均高于空白对照组,差异均有统计学意义(P <0. 01);转染p EF1-rTNSALP-FcD10组的蛋白表达量较转染pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10组高。结论成功构建了rTNSALP-FcD10的重组表达质粒pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10及pEF1-rTNSALP-FcD10,获得了稳定转染的CHO-K1细胞系,成功表达目的蛋白rTNSALP-FcD10,为蛋白进一步纯化奠定了良好的实验基础。 展开更多

关键词 重组人非组织特异碱性磷酸酶 CHO-K1细胞 转染 稳定表达

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《分析化学》四大反应及滴定整合式教学的探索与实践

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作者 张平平 王延风 +3 位作者 路文娟 吴忠玉 孙捷 张磊 《课程教育研究（学法教法研究）》 2017年第31期37-37,250,共2页

传统单一讲授式的《分析化学》教学方法不能发挥学生主动学习的积极性，本文探讨《分析化学》整合式教学的方法，启发和锻炼学生的创新思维，调动学生学习的主观能动性，培养学生整理归纳总结知识点的能力，使学生由被动学习向创造性主... 传统单一讲授式的《分析化学》教学方法不能发挥学生主动学习的积极性，本文探讨《分析化学》整合式教学的方法，启发和锻炼学生的创新思维，调动学生学习的主观能动性，培养学生整理归纳总结知识点的能力，使学生由被动学习向创造性主动学习转变，提高学习效果。 展开更多

关键词 分析化学 整合式教学 主观能动性

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