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牛膝多糖刺激的DC联合CIK细胞对SW480的杀伤作用研究 被引量：10
1
作者 周智东 夏大静 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1056-1060,共5页
从中药材牛膝中提取牛膝多糖(ABPS),用ABPS和/或SW480肿瘤抗原刺激的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)对结肠癌细胞株SW480进行杀伤试验,研究ABPS刺激的DC联合CIK细胞的抗肿瘤效果。分离人外周血单个核细胞培养成DC和CI... 从中药材牛膝中提取牛膝多糖(ABPS),用ABPS和/或SW480肿瘤抗原刺激的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)对结肠癌细胞株SW480进行杀伤试验,研究ABPS刺激的DC联合CIK细胞的抗肿瘤效果。分离人外周血单个核细胞培养成DC和CIK细胞。①把DC分成4个组合:单纯DC组作为对照组,ABPS刺激DC实验组(ABPS刺激的质量浓度为50mg·L-1),SW480肿瘤抗原刺激DC实验组,ABPS(50mg·L-1)和SW480肿瘤抗原联合刺激DC实验组,流式检测比较各组DC细胞表面分子CD80,CD86,CD11c,CD40,HLA-DR的阳性率的差异(每组均为6例样本)。②以上述4个组合的DC与CIK细胞以1:5比例混合共同作为效应细胞;以SW480肿瘤细胞株为靶细胞,设置效靶比分别为30:1,20:1及10:1,进行细胞杀伤活性试验,用CCK-8试剂盒检测、比较各组细胞杀伤活性的差异。③ELISA检测并比较上述细胞杀伤活性试验中效靶比为30:1的实验组各反应孔(3个复孔)上清液中细胞因子IL-2,IL-12p70,IL-17及TNF-α的分泌水平的差异。结果显示:①ABPS和SW480肿瘤抗原联合刺激的DC表面CD80,CD11c,HLA-DR的阳性率显著高于其他实验组的DC(P<0.05);CD86,CD40的阳性率显著高于单纯DC实验组(P<0.05),与其他实验组无显著差异。②在效靶比分别为30:1,20:1及10:1细胞杀伤活性试验中,ABPS刺激的DC+CIK细胞组、SW480肿瘤抗原刺激的DC+CIK细胞组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著高于DC+CIK细胞组(P<0.05);ABPS+SW480肿瘤抗原+DC+CIK实验组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性均显著高于其他实验组(P<0.05)。③效靶比为30:1的细胞杀伤活性试验中,ABPS+SW480抗原+DC+CIK细胞组上清液中IL-12p70,TNF-α的分泌水平高于其他实验组,差异具有统计学意义(P<0.05);IL-2,IL-17的分泌水平各组之间无显著差异。说明ABPS刺激的DC+CIK细胞对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著提高,ABPS和SW480肿瘤抗原共同刺激DC能协同CIK提高对SW480肿瘤细胞株的杀� 展开更多
关键词 牛膝多糖 细胞因子诱导的杀伤细胞 树突状细胞 人结肠癌细胞株(SW480) 细胞因子 细胞毒作用
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DC与CIK或LAK联合对结肠癌细胞株SW480杀伤作用的研究 被引量：4
2
作者 周智东 汪旭明 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2013年第3期122-126,共5页
[目的]研究树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导或未诱导的杀伤细胞(CIK)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。提供DC联合CIK或LAK治疗结肠癌的实验依据。[方法]取人外周血分离出单个核细胞(PBMNC),诱导生成DC、CI... [目的]研究树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导或未诱导的杀伤细胞(CIK)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。提供DC联合CIK或LAK治疗结肠癌的实验依据。[方法]取人外周血分离出单个核细胞(PBMNC),诱导生成DC、CIK、LAK细胞;流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后的表型变化;以CIK+DC细胞、CIK细胞、LAK+DC细胞及LAK细胞作为效应细胞,SW480为靶细胞,以15∶1、30∶1、45∶1为效靶比,LDH释放法测定细胞杀伤试验活性;ELISA检测杀伤试验中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-17的分泌水平。[结果]流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后,其表面分子HLA-DR、CD40、CD80和CD86表达分别平均为90.23%、73.68%、85.96%、57.55%,与未经肿瘤抗原冲击DC比较,DC成熟的表面标志分子表达明显增加(P<0.01)。相同效靶比下,CIK+DC细胞组对SW480的杀伤作用最强,明显高于其他细胞组(P<0.01);CIK+DC细胞组在效靶比为45∶1时,杀伤活性最强(P<0.01);单独CIK细胞组的杀伤活性明显高于LAK+DC细胞组(P<0.01);LAK+DC细胞组的杀伤活性明显高于单独LAK细胞组(P<0.01)。效靶比为45:1时,各杀伤试验细胞组上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17的分泌量,CIK+DC细胞组的IFN-γ、IL-12的分泌量显著高于其他细胞组(P<0.05);LAK+DC、单独LAK细胞组IL-2的分泌量明显高于CIK+DC、单独CIK细胞组(P<0.05);单独CIK细胞组IFN-γ的分泌量明显高于LAK+DC、单独LAK细胞组(P<0.05)。[结论]CIK+DC细胞组对SW480的杀伤活性明显强于单独CIK、LAK+DC组、单独LAK细胞组。其机制可能是,SW480抗原致敏的DC分泌IFN-γ、IL-12等刺激、诱导CIK细胞的活化和增殖,明显增强CIK细胞杀伤SW480的活性。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 淋巴因子激活的杀伤细胞 人结肠癌细胞株 杀伤作用 细胞因子
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牛膝多糖对人树突状细胞功能影响的体外研究
3
作者 何桂萍 孔芝慧 周智东 《九江学院学报（自然科学版）》 CAS 2011年第3期49-52,共4页
目的:研究牛膝多糖(ABPS)对人树突状细胞(DC)的功能的影响,为评价牛膝多糖对免疫系统功能的影响提供实验依据。方法:用浓度分别为0.1mmol/L、0.05mmol/L、0.025mmol/L的牛膝多糖处理成熟DC细胞72h,以CCK-8试剂检测各组DC的同种混合淋巴... 目的:研究牛膝多糖(ABPS)对人树突状细胞(DC)的功能的影响,为评价牛膝多糖对免疫系统功能的影响提供实验依据。方法:用浓度分别为0.1mmol/L、0.05mmol/L、0.025mmol/L的牛膝多糖处理成熟DC细胞72h,以CCK-8试剂检测各组DC的同种混合淋巴细胞反应(MLR)能力的差异;以ELISA双抗体夹心法检测各组DC分泌细胞因子IL-12p70、IL-17、TNF-α功能的差异。结果:与未处理组相比,各浓度牛膝处理组DC的同种MLR能力明显增强(p<0.05),尤其以0.1mmol/L处理组为甚。各浓度牛膝处理组DC的IL-12p70、IL-17、TNF-α的分泌能力有显著提高。结论:在本实验条件下,牛膝多糖对DC细胞因子的分泌及DC对同种T细胞的刺激能力具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 树突状细胞 牛膝多糖 同种混合淋巴细胞反应 细胞因子
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