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慢性乙肝患者树突状细胞对Treg分化为Th17细胞的影响 被引量：2
1
作者 吕丽君 汪晓莺 +3 位作者 汤伟 孙强 胡迎青 周晓荣 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期296-300,共5页
研究慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)患者树突状细胞(dendritic cells,DC)对外周血调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)分化为Th17细胞的影响。分离CHB患者和正常对照者外周血单个核细胞,以rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养DC,流式细胞术(f... 研究慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)患者树突状细胞(dendritic cells,DC)对外周血调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)分化为Th17细胞的影响。分离CHB患者和正常对照者外周血单个核细胞,以rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养DC,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测DC表面CD80、CD83、TLR4分子表达情况。分离CHB患者和正常对照者PBMC,FCM检测Th17细胞和Treg亚群的比例。免疫磁珠法分离外周血Treg分别与同种异体的DC共培养,PMA+Ionomycin刺激后FCM检测细胞内Th17型细胞因子IL-17表达。结果:CHB患者的DC表达CD80、CD83、TLR4分子水平明显低于正常人(P<0.05)。与正常人相比,CHB患者PBMC中Th17细胞和Treg比例均显著高于正常对照组(P<0.05)。CHB患者DC与同种异体的正常人Treg共培养,Treg分化为Th17细胞的比例明显低于正常人(P<0.01),而正常人DC与CHB患者Treg共培养,Treg分化为Th17细胞的比例无明显变化(P>0.05)。上述结果提示,乙肝患者DC功能发生改变,使Treg分化为Th17细胞的比例显著下降。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 树突状细胞 辅助性T细胞(Th17) TREG
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正、反义β-1,4-半乳糖基转移酶V表达质粒在星形胶质细胞瘤细胞中的转染与鉴定
2
作者 严美娟 程纯 +2 位作者 李爱红 邵晓轶 顾建新 《南通大学学报（医学版）》 2005年第1期7-9,12,共4页
目的 :构建 β- 1,4 -半乳糖基转移酶 - V(β- 1,4 - Gal TV)正、反义表达质粒 ,并将其转染到人脑星形胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中 ,为探讨神经胶质瘤细胞表达β- 1,4 - Gal TV的生物学意义提供研究基础。方法 :构建 β- 1,4 - Gal TV表... 目的 :构建 β- 1,4 -半乳糖基转移酶 - V(β- 1,4 - Gal TV)正、反义表达质粒 ,并将其转染到人脑星形胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中 ,为探讨神经胶质瘤细胞表达β- 1,4 - Gal TV的生物学意义提供研究基础。方法 :构建 β- 1,4 - Gal TV表达质粒 ,并将其转染到人脑星形胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中 ;用 Western印迹和 Northern印迹鉴定转染情况。结果 :通过酶切鉴定和测序分析 ,实验成功构建 β- 1,4 - Gal TV表达质粒。将构建的表达质粒转染到胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中 ,经鉴定表明 ,转染的正义表达质粒能增加胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中的 β- 1,4 -Gal TV表达量 ,而转染反义质粒则能降低细胞中 β- 1,4 - Gal TV表达量。结论 :正、反义 β- 1,4 - Gal TV表达质粒在人脑星形胶质细胞瘤细胞 SHG- 4 4中的稳定转染和表达 ,对分析胶质瘤细胞表达β- 1,4 - Gal TV的意义如对肿瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 β-1 4-半乳糖基转移酶-V 星形胶质细胞瘤 SHG-44细胞 表达质粒
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季德胜蛇药抗乙型肝炎病毒的体外实验研究 被引量：4
3
作者 孙晓雷 丁丽娟 +1 位作者 汤伟 汪晓莺 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期57-60,共4页
目的:探讨季德胜蛇药的体外抗乙型肝病毒作用。方法:采用灌服给药方法制备季德胜蛇药的含药兔血清。体外培养HepG2.2.15细胞,培养液中加入不同浓度的兔含药血清。于细胞培养至第4d和第7d,应用微粒子酶免疫分析法测定细胞培养上清中HBsAg... 目的:探讨季德胜蛇药的体外抗乙型肝病毒作用。方法:采用灌服给药方法制备季德胜蛇药的含药兔血清。体外培养HepG2.2.15细胞,培养液中加入不同浓度的兔含药血清。于细胞培养至第4d和第7d,应用微粒子酶免疫分析法测定细胞培养上清中HBsAg、HBeAg的分泌量和采用实时荧光定量PCR方法测定细胞培养上清液中的HBV DNA拷贝数。结果:培养4d,含药血清添加浓度为5%～12.5%各组细胞上清的HBsAg和HBeAg含量均明显低于正常血清组(P<0.05),12.5%组含药血清对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制率最高(48.64%和27.44%)、药物抑制率分别为24.50%和27.44%;培养7d,含药血清添加浓度12.5%组细胞上清的HBsAg和HBeAg含量明显低于正常血清组(P<0.05),含药血清的抑制率分别为62.30%和69.16%、药物抑制率分别为20.68%和42.24%。以12.5%浓度含药血清培养4d时,对HBV DNA合成的抑制率最高,为10.53%。结论:季德胜蛇药有一定的抗HBV作用。 展开更多
关键词 季德胜蛇药 HEPG2.2.15细胞株 HBV DNA
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肝素诱导的DC对慢性乙肝患者Th1/Th2分化的影响 被引量：3
4
作者 孙伟红 周晓荣 +1 位作者 危晓莉 汪晓莺 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期155-158,共4页
探讨肝素体外对慢性乙肝患者CD4^+T细胞亚群分化的影响。分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以rhIL-4(50 ng/ml)、rhGM-CSF(10 ng/ml)、rhTNF-α(100 u/ml)和肝素(50 u/ml)诱导培养DC。免疫磁珠分离外周血CD4^+T细胞亚群,ELISA法检测DC或C... 探讨肝素体外对慢性乙肝患者CD4^+T细胞亚群分化的影响。分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以rhIL-4(50 ng/ml)、rhGM-CSF(10 ng/ml)、rhTNF-α(100 u/ml)和肝素(50 u/ml)诱导培养DC。免疫磁珠分离外周血CD4^+T细胞亚群,ELISA法检测DC或CD4^+T细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量。以流式细胞仪检测肝素处理前后DC表面CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子表达情况。结果:纯化的慢性乙肝患者CD4^+T细胞培养上清中IFN-γ显著低于同期培养的正常人CD4^+T细胞(P<0.05);肝素处理的慢性乙型肝炎患者的DC表达CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子水平及分泌的IL-12水平明显升高(分别P<0.05、P<0.01);而分泌的IL-6水平降低(P<0.05)。肝素处理后的DC与慢性乙肝患者外周血中CD4^+T细胞共培养后,其上清中Th1型细胞因子IFN-γ的水平明显升高(P<0.01)。体外肝素处理后的慢性乙肝患者的DC能部分改善外周血Th1细胞分化的不足。 展开更多
关键词 树突状细胞 慢性乙型肝炎 TH1/TH2
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PBL与LBL教学法相结合运用于医学微生物学教学的探索 被引量：2
5
作者 邵晓轶 孙晓雷 +2 位作者 季玉红 汪晓莺 程纯 《科技信息》 2012年第33期14-15,共2页
医学微生物学是一门重要的基础医学课程,交叉渗透于其他学科。为提高教学质量,适应当代医学教育的要求,需要探索新的教学方法。在教学实践中发现,LBL(Lecture-based learning)结合PBL(Problem-based learning)教学法在医学微生物学理论... 医学微生物学是一门重要的基础医学课程,交叉渗透于其他学科。为提高教学质量,适应当代医学教育的要求,需要探索新的教学方法。在教学实践中发现,LBL(Lecture-based learning)结合PBL(Problem-based learning)教学法在医学微生物学理论授课中可让学生在扎实掌握基本理论的同时,激发学生学习的主动性,提高学生独立思考及分析问题能力,培养团队合作精神。 展开更多
关键词 医学微生物学 LBL PBL 教学改革
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HBsAg负载的慢性乙肝患者DCs诱导特异性Th1细胞分化的作用
6
作者 吴琼 汪晓莺 +2 位作者 周晓荣 汤伟 苏丽 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第12期1344-1349,共6页
目的:研究HBsAg负载的慢性乙肝患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)对自身Th1细胞分化的诱导作用.方法:Ficoll密度梯度离心和贴壁法分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以含rhIL-4+rhGM-CSF的完全培养基诱导DCs.流式细胞术检测各组D... 目的:研究HBsAg负载的慢性乙肝患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)对自身Th1细胞分化的诱导作用.方法:Ficoll密度梯度离心和贴壁法分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以含rhIL-4+rhGM-CSF的完全培养基诱导DCs.流式细胞术检测各组DC表面CD80,CD86,CD40和HLA-DR分子的表达,CCK-8法检测各组DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,ELISA法检测各组DCs培养液上清中IL-12的水平.免疫磁珠分选慢性乙肝患者外周血CD4+T细胞,分别与患者自身的DCs共培养,细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测共培养后CD4+T细胞内特征性细胞因子IFN-γ和IL-4,ELISA法检测共培养上清中IFN-γ/IL-4的水平.结果:与对照组相比,HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs表面表达CD80,CD86,CD40和HLA-DR分子水平较高;刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力较强;DCs分泌的上清液中,IL-12水平也较高.与对照组相比,HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs与自身Th细胞共培养后,Th1细胞占CD4+T细胞的百分比升高(10.76%±3.98%,11.43%±4.32%,15.28%±4.73%vs7.84%±3.10%,P<0.01),Th2细胞占CD4+T细胞的百分比降低(1.43%±0.96%,1.68%±0.16%,0.92%±0.21%vs2.61%±1.27%,P<0.01),共培养上清中IFN-γ的水平增高(578±47mg/L,496±92mg/L,784±97mg/Lvs342±34mg/L,P<0.05),IL-4的水平降低(187±52mg/L,169±38mg/L,89±37mg/Lvs226±48mg/L,P<0.05),以HBsAg+IFN-γ组最为明显.结论:经HBsAg负载的DCs可以改善患者体内因DCs功能低下而引起的Th1细胞分化不足的状态. 展开更多
关键词 树突状细胞 慢性乙型肝炎 TH1/TH2 细胞因子 流式细胞术 酶联免疫吸附试验
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胰腺癌患者树突状细胞诱导I型调节性T细胞的特征及其意义
7
作者 丁晓凌 黄介飞 +1 位作者 周晓荣 周国雄 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期483-486,共4页
为了检测胰腺癌患者树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导I型调节性T细胞(typeⅠregulatory T cells,Tr1)的特征、功能及其临床意义。采用外周血单核细胞来源的未成熟DC,诱导同种异体初始T细胞分化为Tr1,ELISA、流式细胞仪检测Tr1细胞因... 为了检测胰腺癌患者树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导I型调节性T细胞(typeⅠregulatory T cells,Tr1)的特征、功能及其临床意义。采用外周血单核细胞来源的未成熟DC,诱导同种异体初始T细胞分化为Tr1,ELISA、流式细胞仪检测Tr1细胞因子表达水平。用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)检测Tr1的免疫抑制功能。结果:经胰腺癌患者DC诱导分化的Tr1分泌IL-10(P<0.05)和TGF-β(P<0.01)水平高于正常对照组。IL-10胞内染色结果也表明,分泌IL-10的Tr1在胰腺癌组明显增加(P<0.01)。胰腺癌患者DC诱导的Tr1抑制MLR增殖的能力也明显增强(P<0.01)。胰腺癌患者DC诱导同种异体Tr1分化的能力明显增强,提示过度Tr1活化可能与胰腺癌的病理形成有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 树突状细胞 I型调节性T细胞
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细胞外信号调节激酶在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用
8
作者 贲志云 程纯 +3 位作者 钱佶 肖锋 张福鹏 季玉红 《南通大学学报（医学版）》 2008年第6期430-432,共3页
目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)表达的调节作用。方法:应用ERK通路抑制剂U012... 目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)表达的调节作用。方法:应用ERK通路抑制剂U0126预处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)2 h,再用LPS刺激HUVECs 4 h,分别用RT-PCR和Western-blot方法检测β-1,4-GalT-ⅠmRNA及蛋白水平表达变化,并通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果:U0126显著抑制LPS引起的HUVECsβ-1,4-GalT-Ⅰ表达的上调及其黏附能力的上词。结论:ERK信号转导通路可能参与调节LPS诱导的内皮细胞β-1,4-GalT-Ⅰ的表达,并影响内皮细胞的黏附能力。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶 脂多糖 β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 内皮细胞
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细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在T淋巴细胞活化中的作用
9
作者 王滢 吴圆圆 +5 位作者 薛琴 贲志云 孙晓雷 胡迎青 周晓荣 汪晓莺 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期151-155,共5页
本文探讨细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-Ⅰ)在Jurkat细胞活化过程中的作用。采用植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,CCK-8法检测Jurkat细胞增殖;分别采用实时荧光定量P... 本文探讨细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-Ⅰ)在Jurkat细胞活化过程中的作用。采用植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,CCK-8法检测Jurkat细胞增殖;分别采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术、Western blot技术及流式细胞术检测活化过程中的不同时间点β-1,4-GalT-Ⅰ在Jurkat细胞中的表达变化;采用免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦技术观察Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的分布。Jurkat细胞经PHA刺激后增殖,在36 h达高峰;细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的mRNA表达量、蛋白表达量以及平均荧光表达强度均较未活化状态增高;Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在未活化状态下的平均分布于细胞表面,活化后其发生重排和聚集。结果提示在T细胞活化过程中细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ分子的表达增高且发生了分布变化。 展开更多
关键词 β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 活化 T淋巴细胞
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