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非小细胞肺癌外周血CD4^+CD25^(high)调节T细胞分析 被引量:6
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作者 刘莉 姚军霞 +1 位作者 丁乾 黄士昂 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期552-554,558,共4页
目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25high调节T细胞(Tr)比例及变化规律,初步探讨其临床意义。方法:采用流式细胞仪检测61例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者(对照组)外周血中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25highTr细胞比例,并... 目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25high调节T细胞(Tr)比例及变化规律,初步探讨其临床意义。方法:采用流式细胞仪检测61例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者(对照组)外周血中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25highTr细胞比例,并进行分层分析。结果:NSCLC患者CD4+CD25highTr细胞比例明显高于正常对照组,分别为(4.36±2.07)%、(2.04±1.03)%,(P<0.01)。而且,随疾病进展外周血CD4+CD25highTr细胞比例逐渐升高,分别为Ⅰ+Ⅱ期(2.26±0.6)%;Ⅲ期(3.28±1.38)%,(P<0.05);Ⅳ期(6.06±4.08)%,(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,外周血CD4+CD25highTr细胞比例较高者预后较差(P=0.0026)。结论:NSCLC患者外周血CD4+CD25highTr细胞比例升高,提示与肺癌免疫逃逸有关。去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为NSCLC治疗提供一种新的方法。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NSCLC) CD4^+CD25^high调节T(Tr)细胞 外周血 流式细胞术
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NanoString数字基因定量技术在生物医学领域的应用进展 被引量:1
2
作者 胡东 王芳 +3 位作者 周围 段家玺 范灵灵 黄士昂 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2013年第6期351-356,F0003,共7页
NanoString数字化基因分析系统是最新的多重基因定量检测技术.此技术可直接检测条形码探针标记的单个mRNA转录子,并通过数字计数进行定量;它仅需100 ng的RNA即可对逾八百个特异的mRNA转录子进行准确的定量;它无需酶促和扩增过程,其检测... NanoString数字化基因分析系统是最新的多重基因定量检测技术.此技术可直接检测条形码探针标记的单个mRNA转录子,并通过数字计数进行定量;它仅需100 ng的RNA即可对逾八百个特异的mRNA转录子进行准确的定量;它无需酶促和扩增过程,其检测的敏感性和准确性与实时荧光定量PCR(RQ-PCR)技术相当.近年来,NanoString技术的特点及优势使其被越来越广泛地应用到生物医学前沿领域,包括高通量基因表达结果验证、基因表达谱研究、基因调控网络研究、临床疾病分子分型及诊断预后等领域. 展开更多
关键词 NanoString 数字基因分析 多重基因定量 生物医学领域
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115例急性髓细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析 被引量:20
3
作者 王兴兵 姚军霞 +8 位作者 郑金娥 刘隽 李小青 贺艳丽 喻竞明 杨晶 魏君 刘仲萍 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期250-253,共4页
免疫表型检测已成为白血病诊断和分类的重要手段。为了解急性髓细胞白血病(AML)免疫表型特征,利用 三色流式细胞术CD45/SSC参数散点图设门方法,对115例AML患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析;结 合FAB分类,比较AML不同亚型中抗... 免疫表型检测已成为白血病诊断和分类的重要手段。为了解急性髓细胞白血病(AML)免疫表型特征,利用 三色流式细胞术CD45/SSC参数散点图设门方法,对115例AML患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析;结 合FAB分类,比较AML不同亚型中抗原表达的差异,并对其诊断价值加以探讨。结果显示:在AML患者中,CD33、 CD38和CD13的表达最常见,分别达94.8%、91.3%、89.6%。在淋系抗原中,CD7的表达最为常见(20.2%),其次是 CD19(16.5%)和CD2(15%)。某些免疫表型特征与FAB分类具有相关性,包括M3中缺乏表达HLA-DR、CD34和 CD56,但CD2的表达增加;M2中CD19,M5中CD14和CD56的表达增加,而M0中未见MPO的表达。结论:多参数 流式细胞术是诊断AML的一项可靠技术,AML某些免疫表型特征与FAB分类具有明显相关性。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 免疫表型 多参数流式细胞术
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结直肠癌患者外周血CD4^+CD25^(high)调节性T细胞分析 被引量:10
4
作者 刘莉 丁乾 +1 位作者 姚军霞 黄士昂 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第2期110-113,共4页
目的探讨结直肠癌患者外周血高表达CD25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)的比率变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测37例结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并进行分层分析。结果结直肠癌患者外周血高表达CD25T细... 目的探讨结直肠癌患者外周血高表达CD25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)的比率变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测37例结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并进行分层分析。结果结直肠癌患者外周血高表达CD25T细胞水平占总CD4+T细胞的(4.59±1.62)%(n=37),与健康对照组比较(2.04±1.03)%(n=15),差异有统计学意义(t=2.007582;P=0.0000012)。该CD4+CD25highTr细胞低表达CD45RA,不表达CD69。Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr占总T细胞的(3.93±1.48)%(n=17),Ⅳ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞占总T细胞的(5.18±1.54)%(n=20),明显高于Ⅰ~Ⅲ期患者,差异有统计学意义(t=2.08091;P=0.015)。结论结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞比率明显升高,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 T淋巴细胞亚群/免疫学 流式细胞术
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Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究 被引量:11
5
作者 熊芳 王兴兵 +5 位作者 张佳华 刘伟 孙思 刘黎琼 王萍 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期449-453,共5页
本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9... 本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9mRNA的表达,用流式细胞术检测TLR8的表达。用不同浓度的TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于体外培养的U937细胞后,采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果表明:U937细胞表达TLR1-9,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于U937细胞明显地抑制了U937细胞生长,抑制率可达70%,且呈明显的量效关系;作用后处于G0/G1期细胞比例由(44.67±1.05)%增高到(54.08±1.19)%,但凋亡细胞的比例无明显变化。结论:TLR1-9可在U937细胞中表达,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec具有抗肿瘤细胞增殖的作用,使细胞阻滞在G0/G1期,但无明显的促凋亡作用。 展开更多
关键词 TOLL样受体 TLR8激动剂 U937细胞 ssRNA40/LyoVec
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两种方法检测全血C-反应蛋白在儿童感染性疾病中的应用 被引量:8
6
作者 王平 高云 +2 位作者 王利民 杨露 贺艳丽 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第22期5611-5613,共3页
目的评估不同血细胞压积(BCV)算法对儿童感染性疾病患儿校正全血C-反应蛋白(CRP)检测结果的影响。方法选取2016年5-6月华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科住院治疗的390例感染性疾病患儿为观察组,另选取同期100例健康查体儿童为对... 目的评估不同血细胞压积(BCV)算法对儿童感染性疾病患儿校正全血C-反应蛋白(CRP)检测结果的影响。方法选取2016年5-6月华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科住院治疗的390例感染性疾病患儿为观察组,另选取同期100例健康查体儿童为对照组。对照组采用特定蛋白分析仪测定血清CPR,观察1组采用实时动态BCV算法分析仪测定全血CRP值,观察2组采用固定红细胞比容(Hct)算法换算出全血CRP值。分析各观察组测得全血CRP与血清CRP结果的差异。结果 33%<Hct<53%时,两观察组校正后全血CRP水平与对照组血清CRP水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。Hct<33%或Hct>53%时,观察1组与对照组CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);观察2组与对照组CRP水平差异有统计学意义(P<0.05),观察组结果均高于对照组,且随着CRP水平增高结果偏差越大。结论实时动态BCV算法检测全血CRP准确率优于固定细胞压积算法。采用实时动态BCV算法测定全血CRP,与血清CRP结果有较好的一致性,结果更加准确可靠。尤其在血常规与CRP联合检测中,具有较高的准确性和便利性。 展开更多
关键词 血细胞压积 红细胞比容 C-反应蛋白 儿童
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BCR-ABL抑制剂STI571对慢性髓系白血病细胞株K562中SARI基因表达影响的研究 被引量:8
7
作者 黄庆 李小青 +1 位作者 杨琰 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期865-868,共4页
为了探讨抑癌基因SARI(suppressor of AP-1regu lated by IFN)在慢性髓系白血病(CML)中表达调控可能的分子机制,收集了46名CML患者和40名健康志愿者外周血样品,使用实时定量PCR技术检测2组人群中SARI基因的相对表达水平。在体外以CML细... 为了探讨抑癌基因SARI(suppressor of AP-1regu lated by IFN)在慢性髓系白血病(CML)中表达调控可能的分子机制,收集了46名CML患者和40名健康志愿者外周血样品,使用实时定量PCR技术检测2组人群中SARI基因的相对表达水平。在体外以CML细胞株K562为研究模型,使用BCR-ABL抑制剂STI571(im atinib)处理K562细胞,用实时定量PCR技术检测SARI基因的相对表达水平。结果表明,CML患者外周血中SARImRNA相对表达量明显低于健康志愿者,2组间具有明显的统计学差异(p<0.001)。使用STI571(2.5μm o l/L)处理K562细胞24小时后SARImRNA相对表达量明显高于未处理K562细胞,两组间差异具有显著性(p<0.001)。结论:CML患者外周血SARImRNA表达水平降低可能与该疾病的发生发展过程相关联,而且SARI基因表达下调与BCR-ABL抑制作用有关。本研究为CML患者基因治疗的研究提供了新线索。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 SAR/基因 STI571 K562细胞
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CART技术及其临床应用 被引量:8
8
作者 朱昕赟 姚军霞 《临床血液学杂志》 CAS 2015年第3期428-431,共4页
嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种新的细胞免疫治疗技术,它将抗原抗体的高亲和性和T淋巴细胞的杀伤作用相结合,通过构建特异性嵌合抗原受体,经基因转导使T淋巴细胞表达这种嵌合抗原受... 嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种新的细胞免疫治疗技术,它将抗原抗体的高亲和性和T淋巴细胞的杀伤作用相结合,通过构建特异性嵌合抗原受体,经基因转导使T淋巴细胞表达这种嵌合抗原受体,特异性识别靶抗原从而杀伤靶细胞。目前,CAR技术已经发展到第四代,临床上在血液系统肿瘤和实体瘤的治疗上取得了显著成绩。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体 T淋巴细胞 肿瘤 细胞免疫治疗
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肿瘤患者中高表达人白细胞分化抗原25的调节T细胞检测及其临床意义 被引量:7
9
作者 刘莉 姚军霞 +3 位作者 丁乾 曹如波 王晶 黄士昂 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期304-306,共3页
目的探讨肿瘤患者外周血高表达人白细胞分化抗原(CD)25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)比率变化特点及其临床意义。方法用流式细胞术检测62例肿瘤患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并分层分析。结果62例肿瘤患者外周血中CD25highT... 目的探讨肿瘤患者外周血高表达人白细胞分化抗原(CD)25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)比率变化特点及其临床意义。方法用流式细胞术检测62例肿瘤患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并分层分析。结果62例肿瘤患者外周血中CD25highTr细胞占CD4+T细胞的百分比率(4·2%±1·9%)明显高于15名健康体检者(2·0%±1·0%,P<0·001);CD4+CD25highTr细胞且具有调节性T细胞的表面标记特征,即CD45-RA(-),CD69(-)。随疾病进展外周血D25highT细胞占CD4+T细胞百分比率逐渐升高,15例恶性肿瘤Ⅰ+Ⅱ期患者外周血D25highT细胞占CD4+T细胞的百分比率(2·4%±0·6%)与健康体检者比,差异无统计学意义(P>0·05)。21例Ⅲ期(3·5%±1·5%)、26例Ⅳ期(4·9%±1·7%)患者外周血D25highT细胞占CD4+T细胞的百分比率显著升高,与健康体检者比,差异有统计学意义(P<0·001)。Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ期比较,Ⅲ期与Ⅳ期比较,差异均有统计学意义(P<0·05,P<0·01)。提示外周血CD4+CD25highTr细胞比率高者预后较差。结论肿瘤患者外周血CD4+CD25highTr细胞水平明显升高,与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生发展密切相关。监测外周血CD4+CD25highTr细胞比率可评价肿瘤患者预后。 展开更多
关键词 肿瘤 T淋巴细胞 流式细胞术
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人脐带华通胶间充质干细胞的体外分离培养及鉴定 被引量:6
10
作者 胡晶琼 李慧玉 +4 位作者 欧阳为相 胡丽 卢聪 张兰男 陈莉莉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期529-533,共5页
目的研究由脐带华通胶组织(Wharton’s jelly)在体外分离、培养、扩增获得脐带间充质干细胞(umbilical cord derived mesenchymal stem cells,以下简称UC-MSCs)的方法,并进行UC-MSCs的各项鉴定。方法脐带华通胶组织采用胶原酶以及胰酶... 目的研究由脐带华通胶组织(Wharton’s jelly)在体外分离、培养、扩增获得脐带间充质干细胞(umbilical cord derived mesenchymal stem cells,以下简称UC-MSCs)的方法,并进行UC-MSCs的各项鉴定。方法脐带华通胶组织采用胶原酶以及胰酶序贯消化法分离得到UC-MSCs,用流式细胞仪分析其表型特征,向成骨、成脂以及成神经元细胞诱导分化并鉴定。结果由人脐带华通胶可以有效获得间充质干细胞。原代细胞培养24~48h内细胞开始贴壁生长,5~7d左右可以传代培养,在2~3周时间内可以迅速扩增至107到108数量级。各项分化鉴定试验证实UC-MSCs具有多向分化潜能,能分化成骨、成脂细胞以及神经元细胞。UC-MSCs在体外培养传至20~30代仍保持稳定的细胞表面标记。结论由人脐带华通胶可以有效地获得间充质干细胞,这种UC-MSCs能在体外长期传代培养,生物学特性稳定,具有多向分化的潜能,是今后细胞治疗很有前景的种子细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 华通胶 诱导分化
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胃癌和食管癌外周血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞检测及其临床意义 被引量:6
11
作者 刘莉 姚军霞 +1 位作者 丁乾 黄士昂 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期301-304,共4页
目的探讨胃癌和食管癌外周血表达CD_(25)的CD_4^+调节T细胞(CD_4^+CD_(25)^+Tr)比率变化的特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测49例胃癌和28例食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+调节T细胞水平,并进行分层分析。结果食管癌患者外周... 目的探讨胃癌和食管癌外周血表达CD_(25)的CD_4^+调节T细胞(CD_4^+CD_(25)^+Tr)比率变化的特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测49例胃癌和28例食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+调节T细胞水平,并进行分层分析。结果食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占总CD_4^+T细胞的(24.37±4.82)%(n=28);胃癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占总CD_4^+T细胞的(17.74±4.24)%(n=49)。与健康对照组比较,外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率均明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。该CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞低表达CD_45RA及CD69。分层分析外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率与肿瘤临床分期的关系显示,胃癌患者Ⅰ ̄Ⅲ期,其外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的比率为(16.69±5.71)%(n=15);Ⅳ期为(18.08±4.99)%(n=16)。与Ⅰ ̄Ⅲ期比较,Ⅳ期患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率升高,但是,差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌复发患者18例,其外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的比率为(23.32±4.98)%(n=18)。明显高于原发胃癌组(P<0.01)。食管癌患者Ⅰ-Ⅲ期外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的(25.17±5.87)%(n=18),Ⅳ期患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的(26.46±4.84)%(n=10),差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌和食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率明显升高。提示祛除人的CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞是一种有效的治疗肿瘤的新方法。 展开更多
关键词 胃癌CD4^+CD25^+T淋巴细胞 调节性T细胞(Tr) 消化道恶性肿瘤 流式细胞术
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实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较 被引量:3
12
作者 向稚丹 方峰 +3 位作者 甄宏 徐翼 刘隽 聂兴草 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期434-436,443,共4页
目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCM... 目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCMV拷贝数与短时培养结果比较,并同时分析19例接受更昔洛韦治疗前后尿排毒量的变化。结果132份尿标本实时定量PCR结果:短时培养(-)组HCMVDNA为(83±155)拷贝/5×105细胞(n=16例),(+)组为(571±231)拷贝/5×105细胞(n=26例),(++)组为(792±303)拷贝/5×105细胞(n=35例),(+++)组为(1126±416)拷贝/5×105细胞(n=16例),(++++)组为(2201±1043)拷贝/5×105细胞(n=9例);19例38份更昔洛韦治疗前后尿样本中3例治疗前后短时培养结果无改变,而实时定量结果明显改变。结论实时定量PCR法比短时培养法更适于评价抗病毒疗效,而短时培养法判断HCMV是否为活动感染优于实时定量PCR法。 展开更多
关键词 实时定量PCR 短时培养法 人巨细胞病毒 尿样本
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镁离子对谷氨酸诱发的螺旋神经节细胞损伤的保护作用 被引量:5
13
作者 鄢开胜 薛秋红 +4 位作者 张佳华 罗凌惠 谢静 崔勇 龚树生 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期1572-1574,共3页
关键词 螺旋神经节神经元 节细胞损伤 保护作用 神经递质 谷氨酸 镁离子 离子对 细胞内钙离子浓度 中枢神经系统 诱发
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干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的现状和前景展望 被引量:1
14
作者 胡晶琼 黎钢 《卒中与神经疾病》 2023年第1期96-99,104,共5页
肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是运动神经元病(Motor neuron disease)最常见的类型,是一种病因未明、选择性侵犯脑与脊髓上、下运动神经元的神经系统变性疾病(Neurodegenerative disease)。ALS最早由法国医生Jean-... 肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是运动神经元病(Motor neuron disease)最常见的类型,是一种病因未明、选择性侵犯脑与脊髓上、下运动神经元的神经系统变性疾病(Neurodegenerative disease)。ALS最早由法国医生Jean-Martin Charcot报道,因此在法国被称为Charcot病[1]。在美国则被称为Lou Gehrig\s disease[2]。患者从最初发现症状开始平均仅能存活3~5年,预后极差。目前尚无实质性减缓疾病进展的治疗手段[3]。干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞。ALS的核心病理特征是脑和脊髓运动神经元的选择性死亡与缺失[5],而干细胞治疗能促进神经系统再生以及修复,因此,其是ALS极具潜力的治疗方法。本研究综合相关文献对干细胞治疗ALS的现状、进展、机理以及应用前景作一综述,供临床参考。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化 干细胞治疗 下运动神经元 神经系统变性疾病 运动神经元病 疾病进展 未明 脊髓运动神经元
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EVI1与BCR/ABL基因共表达的儿童白血病临床分析 被引量:5
15
作者 姜敏 李小青 +4 位作者 胡东 张志泉 杨玉瑶 白路超 金润铭 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期489-493,共5页
目的研究EVI1与BCR/ABL基因共表达的儿童白血病的临床特征。方法收集并比较分析4例EVI1与BCR/ABL基因共表达的儿童白血病以及8例BCR/ABL基因表达阳性而EVI1表达阴性的慢性粒细胞性白血病(CML)的临床资料。结果 4例EVI1与BCR/ABL基因共... 目的研究EVI1与BCR/ABL基因共表达的儿童白血病的临床特征。方法收集并比较分析4例EVI1与BCR/ABL基因共表达的儿童白血病以及8例BCR/ABL基因表达阳性而EVI1表达阴性的慢性粒细胞性白血病(CML)的临床资料。结果 4例EVI1与BCR/ABL基因共表达的白血病患儿初诊时2例为CML慢性期,1例为CML加速期,1例为高危急性淋巴细胞性白血病(ALL)。3例EVI1与BCR/ABL基因共表达的CML与8例BCR/ABL基因表达阳性而EVI1表达阴性CML临床特征比较无明显差异。EVI1与BCR/ABL共表达的患儿均高表达CD33、CD38。染色体分析发现4例患儿都存在t(9;22)。截止到随访日期2013年8月,3例EVI1基因表达阳性的CML患儿2例在治疗1个月或3个月后达到血液学缓解;2例BCR/ABL基因和EVI1基因均未转阴,1例EVI1基因转阴而BCR/ABL基因仍未转阴。除ALL第一疗程治疗后未达缓解,放弃治疗失访外,其余3例患儿均存活,无复发,总生存期分别为20、13、14个月。结论 EVI1与BCR/ABL融合基因共表达可存在于儿童CML和ALL中,其临床特征无特异性,其预后还需扩大样本量进一步明确。 展开更多
关键词 EVI1基因 BCR ABL基因 白血病 儿童
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检测结直肠癌患者血清中结肠癌特异性抗原-3和结肠癌特异性抗原-4的意义 被引量:5
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作者 王平 曾筱倩 +3 位作者 高云 王利民 刘善凤 贺艳丽 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期403-405,共3页
结直肠癌是世界第三大常见的癌症,在癌症病死率中排名第4位。我国结直肠癌在消化道肿瘤中发病仅次于胃癌,位居第2位。结直肠癌多由腺瘤演变而来,一般需要5至10年或更长时间,癌前病变伴有获得性基因的突变,抑癌基因、致癌基因和其... 结直肠癌是世界第三大常见的癌症,在癌症病死率中排名第4位。我国结直肠癌在消化道肿瘤中发病仅次于胃癌,位居第2位。结直肠癌多由腺瘤演变而来,一般需要5至10年或更长时间,癌前病变伴有获得性基因的突变,抑癌基因、致癌基因和其他基因突变可以进展到浸润性癌。 展开更多
关键词 特异性抗原 直肠癌患者 结肠癌 血清 检测 结直肠癌 抑癌基因 基因突变
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EGFP标记的hVEGF_(165)重组腺病毒构建新方法及其相关特性的体外研究 被引量:4
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作者 仲照东 邹萍 +3 位作者 黄士昂 胡中波 刘凌波 卢运萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期238-242,共5页
利用细菌内同源重组法快速构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)标记的人血管内皮细胞生长因子 16 5(hVEGF165)重组腺病毒载体 ,并对其相关特性进行体外研究。首先将hVEGF165cDNA亚克隆到含EGFP基因的腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV中 ,然后与... 利用细菌内同源重组法快速构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)标记的人血管内皮细胞生长因子 16 5(hVEGF165)重组腺病毒载体 ,并对其相关特性进行体外研究。首先将hVEGF165cDNA亚克隆到含EGFP基因的腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV中 ,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共同电击转化大肠杆菌BJ5183 ,同源重组获得重组腺病毒质粒 pAd EGFP/hVEGF165,鉴定后通过脂质体法转染HEK2 93细胞 ,产生重组腺病毒Ad EGFP/hVEGF165。通过体外试验观察病毒的形态、均一性和安全性 ,靶细胞的感染效率及hVEGF165的表达情况。结果显示 ,通过细菌内质粒间同源重组法在短期内成功地构建了复制缺陷型重组腺病毒载体Ad EGFP/hVEGF165;借助于EGFP的表达 ,直接在荧光显微镜下观测到靶细胞的感染效率和外源基因的表达。经纯化的病毒颗粒在电镜下成分均一 ,滴度可达 2× 10 12 pfu/ml。病毒感染Hela细胞后经多次传代未见细胞病变。以感染复数 (MOI) =10 0感染hUVEC可获得最大增殖刺激作用。同样浓度感染小鼠骨髓单个核细胞效率达 2 7.3% ,培养上清中hVEGF165蛋白含量达 1385± 332 pg/ 10 6cells。结论 :细菌内同源重组法构建腺病毒载体具有高效、省时、省力的特点 ,辅以EGFP为标记基因可以直观检测靶细胞感染和外源基因的表达情况。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 血管内皮细胞生长因子 重组腺病毒 造血细胞
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EVI1基因阳性的儿童急性髓细胞性白血病生物学及临床特征分析 被引量:4
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作者 姜敏 李小青 +5 位作者 胡东 邱奕宁 张志泉 张冰玉 韩娟 金润铭 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期129-134,共6页
目的研究EVI1基因在急性髓细胞性白血病(AML)患儿中的表达及EVI1基因阳性AML患儿的临床特征。方法收集分析EVI1阳性患儿的临床资料;采用RT-PCR法和实时荧光定量聚合酶链反应法(RQ-PCR)定性和定量测定EVI1的表达;流式细胞术检测骨髓细胞... 目的研究EVI1基因在急性髓细胞性白血病(AML)患儿中的表达及EVI1基因阳性AML患儿的临床特征。方法收集分析EVI1阳性患儿的临床资料;采用RT-PCR法和实时荧光定量聚合酶链反应法(RQ-PCR)定性和定量测定EVI1的表达;流式细胞术检测骨髓细胞免疫表型;多参数流式细胞术(MFC)监测微小残留白血病(MRD);同时对染色体进行检查。结果 241例AML患儿中,有33例EVI1基因表达呈阳性(13.7%);与EVI1基因表达阴性的AML患儿相比,EVI1阳性AML患儿的初诊年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白含量和血小板计数差异均无统计学意义(均P>0.05),但女性患儿比例增加(P<0.05);EVI1表达改变与临床缓解和MRD改变不同步,部分患儿EVI1转阴滞后于临床缓解和MRD转阴,而部分患儿临床未缓解或MRD仍呈阳性,但EVI1已转阴;EVI1常与其他融合基因共表达;免疫表型分析提示EVI1阳性AML患儿高表达CD33(100%)、CD38(88%)和HLADR(76%);15例患儿发现染色体结构或数目异常;EVI1表达阳性AML患儿第1疗程完全缓解(CR)率明显低于EVI1表达阴性患儿(P<0.05)。结论 EVI1基因表达阳性的AML患儿近期预后差;EVI1基因在AML的病程中活化不是孤立的,而是与其他基因相互作用或染色体异常的结果,其活化机制及功能还需进一步研究。 展开更多
关键词 EVI1基因 急性髓细胞性白血病 免疫分型 核型 儿童
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恶性肿瘤患者CD4^+CD25^+/CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的研究 被引量:3
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作者 姚军霞 刘莉 黄士昂 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期430-433,437,共5页
目的:探讨恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)水平的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测Treg水平,并进行分层分析。结果:62例恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+Treg、CD4+CD25high Treg... 目的:探讨恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)水平的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测Treg水平,并进行分层分析。结果:62例恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+Treg、CD4+CD25high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%,高于正常对照组(分别为P<0.05和P<0.001),它们与NK细胞呈负相关(r分别为-0.2361和-0.306)。随疾病进展,CD4+ CD25+Treg水平升高,肿瘤进展期(IV期)与前3期比较有极显著差异(P<0.001)。CD4+CD25high Treg占CD4+T细胞的百分比率逐渐升高,中期(Ⅲ期)患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异(P<0.001);晚期患者与中期患者比较有极显著差异(P<0.001)。结论:恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high Treg水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 CD4^+CD25^+/CD4^+CD25^high调节T细胞 流式细胞仪
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EVI1基因阳性儿童急性淋巴细胞性白血病临床特征及免疫表型分析 被引量:3
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作者 姜敏 金润铭 +5 位作者 杜雯 李小青 胡东 吴介洪 蔡莎 张志泉 《国际儿科学杂志》 2014年第1期80-83,共4页
目的 研究Evi1基因在儿童急性淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的表达及免疫表型特点.方法 采用逆转录-聚合酶链反应法和流式细胞仪检测2010年12月至2013年2月华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科血液病区262... 目的 研究Evi1基因在儿童急性淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的表达及免疫表型特点.方法 采用逆转录-聚合酶链反应法和流式细胞仪检测2010年12月至2013年2月华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科血液病区262例ALL EVI1基因的表达及免疫表型,比较EVI1基因表达阳性与表达阴性患儿的免疫表型及临床特征的差异.结果 262例ALL患儿有29例EVI1基因表达阳性.EVI1表达阳性与表达阴性的ALL患儿相比,EVI1阳性的ALL患儿初诊外周血白细胞计数增高,血小板下降,女性患儿所占比例高,强的松试验敏感者明显减少,第一疗程诱导缓解率明显降低(P<0.05),而年龄、血红蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05).EVI1阳性的B系ALL高表达cCD79a、CD38、CD10、CD19、CD22,CD123、TDT、HLADR、CD34,T系ALL高表达CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD38、cCD3.B系EVI1阳性组与阴性组相比,B系EVI1阳性组CD13、CD33、CD11b等髓系相关抗原表达增加,CD19、CD20、CD22等B细胞相关抗原表达减少(P<0.05).结论 EVI1基因表达阳性的ALL是一种特殊类型的白血病亚型,近期预后差.B系EVI1阳性ALL患儿部分髓系相关抗原表达增加,部分B细胞相关抗原表达减少. 展开更多
关键词 EVI1基因 急性淋巴细胞性白血病 免疫分型 儿童
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