一株好氧反硝化菌的鉴定及反硝化特性研究 被引量：17

1

作者 许尚营 张华 +4 位作者 李娜 李风 杨俊忠 郑永良 刘德立 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期10-13,共4页

从湖北某纺织厂废水生化处理池中分离得到1株好氧反硝化细菌HS-N2,并对其反硝化能力进行了研究。结果表明,HS-N2在能有效去除培养基中的硝酸盐氮。在好氧条件下,30℃培养24h,能将10mmol/L硝酸盐氮去除95%以上;在兼性厌氧条件下,24h的脱... 从湖北某纺织厂废水生化处理池中分离得到1株好氧反硝化细菌HS-N2,并对其反硝化能力进行了研究。结果表明,HS-N2在能有效去除培养基中的硝酸盐氮。在好氧条件下,30℃培养24h,能将10mmol/L硝酸盐氮去除95%以上;在兼性厌氧条件下,24h的脱氮率达到85%。研究了该菌株的好氧反硝化特性。结果表明:其反硝化最适温度和pH分别为30℃和7.0。设计特异性引物,扩增HS-N2菌株的16SrDNA并测序,运用Blast比对构建了进化树,发现该菌与肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)的同源性高达100%。结合形态观察和生理生化鉴定,初步鉴定该菌属于沙门氏菌属(Salmonella),命名为Salmonella sp.HS-N2。目前关于沙门氏菌属具有反硝化能力的菌株鲜有报道。 展开更多

关键词 好氧反硝化 沙门氏菌属 系统发育

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蜡状芽胞杆菌nos基因簇基因克隆及生物信息学分析

2

作者 陈元磊 李丹丹 +5 位作者 李景龙 Amina Zahra 袁永泽 熊丽 耿辉 刘德立 《氨基酸和生物资源》 CAS 2015年第1期41-48,共8页

为了探究革兰氏阳性菌蜡状芽胞杆菌HS-N10 nos基因簇相关基因的特点,PCR扩增获得了HS-N10 nos基因簇相关基因,其中包括nosZ全长1 914bp、nosR部分片段1 749bp、nosD部分片段946bp和nosF部分片段495bp。经BLASTN分析,HS-N10 nosZ序列和n... 为了探究革兰氏阳性菌蜡状芽胞杆菌HS-N10 nos基因簇相关基因的特点,PCR扩增获得了HS-N10 nos基因簇相关基因,其中包括nosZ全长1 914bp、nosR部分片段1 749bp、nosD部分片段946bp和nosF部分片段495bp。经BLASTN分析,HS-N10 nosZ序列和nosD序列分别与施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)相应序列相似性最高;HS-N10 nosR序列和nosF序列分别与裂环无色杆菌(Achromobacter cycloclastes)相应序列相似性最高。通过在线数据库与分析工具分别对HSN10nos基因簇相关基因进行了生物信息学分析。 展开更多

关键词 nos基因簇 蜡状芽胞杆菌 克隆表达 生物信息学分析

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HgCl_2对斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)生理生化特性的影响 被引量：18

3

作者 牟文 熊丽 +4 位作者 胡芹芹 周巧巧 杨雪 张灿 刘德立 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第6期854-859,共6页

为探讨汞对藻类的毒性效应,以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)为实验材料,检测了HgCl2对藻细胞数目、光合色素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量等生化指标的影响.结果表明,各暴露组(0.2～1.5mg·L-1)HgCl2对斜生栅... 为探讨汞对藻类的毒性效应,以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)为实验材料,检测了HgCl2对藻细胞数目、光合色素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量等生化指标的影响.结果表明,各暴露组(0.2～1.5mg·L-1)HgCl2对斜生栅藻的生长均有抑制作用,随HgCl2暴露浓度的增大,藻细胞密度逐渐降低,HgCl2对斜生栅藻的48、72、96hEC50值分别为1.194、1.113、0.986mg·L-1.随着HgCl2暴露浓度的升高(0.01～1.5mg·L-1),叶绿素a、b及类胡萝卜素等光合色素含量均呈逐渐降低趋势;SOD活性表现为先激活后抑制;MDA含量则显著增加(p<0.05,p<0.01). 展开更多

关键词 斜生栅藻 HgCl2 超氧化物歧化酶 丙二醛 光合色素

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一株高效DEHP降解菌的分离、鉴定及其降解特性 被引量：15

4

作者 严佳丽 陈湖星 +5 位作者 杨杨 张凯 王丽 熊丽 耿辉 刘德立 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1532-1540,共9页

【目的】分离得到高效的邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)降解菌。【方法】采用富集培养法筛选分离菌株,并对菌株进行驯化;通过PCR扩增得到其16S rRNA和gyrB基因序列,进行同源序列分析及分子系统发育树的构建,同时结合形态学观察和生理生... 【目的】分离得到高效的邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)降解菌。【方法】采用富集培养法筛选分离菌株,并对菌株进行驯化;通过PCR扩增得到其16S rRNA和gyrB基因序列,进行同源序列分析及分子系统发育树的构建,同时结合形态学观察和生理生化实验对菌株进行初步鉴定;采用高效液相色谱(HPLC)分析菌株对DEHP的降解特性。【结果】分离得到一株能以DEHP为唯一碳源和能源生长的菌株,命名为HS-NH1,初步鉴定其为戈登氏菌(Gordoniasp.)。菌株HS-NH1最适的生长和降解条件为30°C、pH 7.0,在此条件下,该菌株60 h内能够将浓度为500 mg/L的DEHP降解90%以上。高效液相色谱(HPLC)分析表明,菌株HS-NH1在降解DEHP过程中产生了一种重要的中间代谢产物——邻苯二甲酸。底物广谱性试验证明,菌株HS-NH1能够有效地利用多种常见的邻苯二甲酸酯(PAEs)与芳香族衍生物。【结论】筛选得到了一株DEHP降解菌Gordonia sp.HS-NH1,该菌降解效率高,具有良好的底物广谱性,在邻苯二甲酸酯类化合物的污染治理中将会有一定的应用潜力。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP) 微生物降解 gyrB基因 戈登氏菌属 邻苯二甲酸

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一株高效好氧反硝化菌的分离及特性 被引量：10

5

作者 杨俊忠 倪砚 +4 位作者 许尚营 徐可瀚 刘义 曾丽霞 刘德立 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1594-1599,共6页

利用富集培养的方法从南昌市郊某养鱼塘采样分离出22株反硝化细菌,其中8株反硝化率较高,从中选择一株效果最好的作为研究对象,命名为HS-N62,对其生长特性进行了深入研究。结果表明:硝酸盐氮初始浓度为140mg/L,菌株HS-N62在12h内对硝酸... 利用富集培养的方法从南昌市郊某养鱼塘采样分离出22株反硝化细菌,其中8株反硝化率较高,从中选择一株效果最好的作为研究对象,命名为HS-N62,对其生长特性进行了深入研究。结果表明:硝酸盐氮初始浓度为140mg/L,菌株HS-N62在12h内对硝酸盐氮的去除率可达96%,而且没有亚硝酸盐氮的积累。该菌最适生长温度范围为30°C-37°C,最适生长pH范围6.0-8.0,最适C/N比为10:1,并能利用多种碳源生长。运用正交试验探讨了该菌株最适的反硝化条件。反硝化菌株HS-N62还具有较好的除磷能力,12h除磷率达到67.7%(初始磷酸盐浓度57mg/L)。通过形态学特性和生理生化分析以及16S rRNA基因序列分析,菌株HS-N62与Pseudomonas sp.亲缘关系最为接近,相似性达99%,初步鉴定该菌为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。 展开更多

关键词 好氧反硝化 分离鉴定 特性研究

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脂蛋白酯酶基因PvuⅡ多态与中国人高脂血症和冠心病的Meta分析 被引量：8

6

作者 崔璐璐 王敏 黄青阳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1031-1036,共6页

国内多个研究报道了脂蛋白酯酶基因(LPL)PvuⅡ多态(rs285)与中国人高脂血症和冠心病的关系,但单个研究的样本量都较小(119～647),结果不尽一致。为了全面客观评价LPL基因PvuⅡ多态在中国人高脂血症和冠心病发病中的作用,文章对所有中国... 国内多个研究报道了脂蛋白酯酶基因(LPL)PvuⅡ多态(rs285)与中国人高脂血症和冠心病的关系,但单个研究的样本量都较小(119～647),结果不尽一致。为了全面客观评价LPL基因PvuⅡ多态在中国人高脂血症和冠心病发病中的作用,文章对所有中国人群的研究进行了Meta分析。共11篇文献纳入研究,其中关于高脂血症的研究6项,包括患者943例,正常对照1093例,关于冠心病的研究5项,包括患者821例,正常对照727例。入选研究无明显的发表偏倚,但经同质性检验存在明显的异质性。Meta分析结果显示LPLPvuⅡ多态的P+等位基因增加高脂血症的患病风险(OR=1.36,95%CI1.07～1.73,P=0.011),但与冠心病相关不显著(P=0.755)。因此,文章结果表明LPL基因PvuⅡ多态与中国人高脂血症易感性相关联,与冠心病关联不显著。 展开更多

关键词 脂蛋白酯酶 多态性 高脂血症 冠心病 META分析

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高效氯氰菊酯急性暴露中斑马鱼相关酶活性和基因表达变化 被引量：7

7

作者 王丽 张耘泽 +3 位作者 耿歌 秦婷婷 刘德立 熊丽 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期146-154,共9页

高效氯氰菊酯广泛地应用于农业生产及日常生活中的害虫防治,但对水生生物却毒性极高。为探究高效氯氰菊酯对斑马鱼的急性毒性,以总超氧化物歧化酶(总SOD)、过氧化氢酶(CAT)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)活性以及相关的基因表达量变化为检测指标... 高效氯氰菊酯广泛地应用于农业生产及日常生活中的害虫防治,但对水生生物却毒性极高。为探究高效氯氰菊酯对斑马鱼的急性毒性,以总超氧化物歧化酶(总SOD)、过氧化氢酶(CAT)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)活性以及相关的基因表达量变化为检测指标,研究其对斑马鱼成鱼的影响。急性毒性试验结果显示,高效氯氰菊酯对斑马鱼属剧毒物质,斑马鱼的急性中毒症状为身体蜷曲、抽搐,鳃盖扇动加快,游动能力减弱,间歇性出现无规律急速游动和撞壁行为。酶活测定结果显示,斑马鱼组织中总SOD、CAT和ACh E活性与高效氯氰菊酯呈现低浓度诱导、高浓度抑制的剂量效应关系;相关基因表达量的检测结果显示,高效氯氰菊酯会诱导斑马鱼肝脏、肠和脑中Sod1、Cat以及Ache的m RNA表达上调。研究表明,高效氯氰菊酯的神经毒性和氧化损伤共同造成了斑马鱼的中毒甚至死亡。 展开更多

关键词 高效氯氰菊酯 斑马鱼 急性毒性 氧化损伤

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HgCl_2对斑马鱼SOD,AChE酶活性和基因相对转录量的影响 被引量：6

8

作者 何桢 牟文 +8 位作者 周巧巧 杨雪 张灿 胡芹芹 胡晓静 郭佳 钟秋 熊丽 刘德立 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2011年第6期649-654,共6页

以HgCl2为实验毒物,研究其对斑马鱼的毒性效应,经染毒后,分别在第1天和第7天取斑马鱼的肌肉测定超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,半定量RT-PCR检测肌肉中乙酰胆碱酯酶、细胞色素P450(CYP1A)和超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基... 以HgCl2为实验毒物,研究其对斑马鱼的毒性效应,经染毒后,分别在第1天和第7天取斑马鱼的肌肉测定超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,半定量RT-PCR检测肌肉中乙酰胆碱酯酶、细胞色素P450(CYP1A)和超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的相对转录量。结果显示HgCl2对斑马鱼的毒性很强,低浓度染毒1d后,基因转录量显著变化,而酶活性7d后才有显著变化。HgCl2对斑马鱼96h-LC50为244.06μg·L-1;AChE活性和基因相对转录量在第1天呈下降趋势;第7天,酶活性依然下降,但基因相对转录量在低、中浓度组呈上升趋势;高浓度组呈下降趋势,和对照组相比差异显著。SOD活性第7天表现促进作用,与染毒浓度成正相关,并有显著性差异;Cu/Zn-SOD基因转录量第1天总体呈下降趋势,第7天低浓度HgCl2对Cu/Zn-SOD基因转录量有诱导作用,高浓度有抑制作用。CYP1A基因相对转录量第1天整体呈下降趋势;第7天呈现出低浓度升高,中、高浓度降低的变化规律。以上结果说明基因转录水平的变化比其蛋白翻译水平的变化出现更早,更灵敏,因此可作为环境污染物的早期预警;同时说明污染物对生物大分子的影响比较复杂,受多种因素调控。 展开更多

关键词 Hgck 斑马鱼 ACHE CYP IA Cu/Zn—SOD

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计算机辅助药物设计筛选嗜水气单胞菌AhyⅠ合成酶抑制剂

9

作者 奉玉欣 李冰昕 +6 位作者 邹飘 张耘泽 孙维宝 刘家璇 宋杰 耿辉 熊丽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2081-2093,共13页

【背景】AhyⅠ合成酶在嗜水气单胞菌(Aromonas hydrophila)群体感应调控毒力产生中发挥着关键作用。【目的】研究其结构以寻找高效抑制剂,切断细菌致病性的源头,具有极其重要的意义。【方法】利用已解析的蛋白质结构为模板,运用同源模... 【背景】AhyⅠ合成酶在嗜水气单胞菌(Aromonas hydrophila)群体感应调控毒力产生中发挥着关键作用。【目的】研究其结构以寻找高效抑制剂,切断细菌致病性的源头,具有极其重要的意义。【方法】利用已解析的蛋白质结构为模板,运用同源模建和分子动力学模拟手段,成功建立了AhyⅠ合成酶的三维结构。接下来,基于先前研究的基础,选取2个高效抑制剂N-3-氧代己酰基高丝氨酸内酯(N-3-oxo-hexanoyl-homoserine lactone,NOO)和5-脱氧-5-甲硫腺苷(5'-deoxy-5'-methylthioadenosine,MTA)以及传统中药中的部分活性成分,共选取214个候选配体与受体蛋白进行分子对接。【结果】筛选出4个潜在抑制剂,经过最小抑菌浓度(minimal inhibit concentration, MIC)值、生长曲线、紫色菌素、生物膜形成、胞外蛋白酶、群集运动和泳动实验验证后,发现青蒿素可以作为嗜水气单胞菌群体感应系统的高效抑制剂。【结论】传统中药青蒿素为水产养殖业中嗜水气单胞菌的有效防治提供基础,在治疗细菌感染方面具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 AhyⅠ合成酶 群体感应抑制剂 计算机辅助药物设计

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双酚A对小鼠肝脏和肾脏细胞的氧化损伤(英文) 被引量：5

10

作者 付宇 王慧玉 +3 位作者 可尘娟 王景明 熊国梅 杨旭 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期360-366,共7页

为探究双酚A(BPA)的氧化毒性,分别以剂量为20、40和80mg·kg^(-1)·d^(-1)的BPA对雄性昆明小鼠灌胃处理1周,并测定了小鼠体内活性氧自由基(ROS)水平、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量和DNA-蛋白质交联系数(DPC)。与... 为探究双酚A(BPA)的氧化毒性,分别以剂量为20、40和80mg·kg^(-1)·d^(-1)的BPA对雄性昆明小鼠灌胃处理1周,并测定了小鼠体内活性氧自由基(ROS)水平、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量和DNA-蛋白质交联系数(DPC)。与对照组相比,各BPA暴露组小鼠肝脏和肾脏细胞中的ROS生成量、MDA含量和DPC系数均升高,而GSH含量下降(P<0.05或P<0.01)。ROS生成量、GSH含量和DPC系数均显示出剂量-效应关系。研究表明,BPA可扰乱小鼠肝脏和肾脏细胞的氧化应激平衡,诱导细胞氧化损伤。 展开更多

关键词 双酚A 昆明小鼠 活性氧 还原型谷胱甘肽 丙二醛 DNA蛋白质交联系数 氧化损伤

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鲤TYK2基因的克隆鉴定及组织表达分析 被引量：4

11

作者 吴平 高谦 +3 位作者 刘德立 付友 袁永泽 文春根 《水生生物学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期229-233,共5页

两面神激酶(JAK,Janus kinase)是一类酪氨酸蛋白激酶(PTK,protein tyrosine kinase),迄今已发现有4个成员,即JAK1、JAK2、JAK3和TYK2(Tyrosine kinase 2),JAK分子具有7个独特的结构域,从C端到N端依次为JAK同源区1(JAK homology 1,JH1)-J... 两面神激酶(JAK,Janus kinase)是一类酪氨酸蛋白激酶(PTK,protein tyrosine kinase),迄今已发现有4个成员,即JAK1、JAK2、JAK3和TYK2(Tyrosine kinase 2),JAK分子具有7个独特的结构域,从C端到N端依次为JAK同源区1(JAK homology 1,JH1)-JH7[1]。细胞因子与相应受体结合后,JAK与受体偶联并发生酪氨酸磷酸化而激活,活化的JAK能催化受体上特定部位的酪氨酸残基磷酸化,形成信号转导和转录激活因子(Signal Transducer and Activator of Transcription,STAT)等含Src同源区2(SH2, 展开更多

关键词 鲤 TYK2 JAK1 基因克隆 组织表达分析

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抗人软骨寡聚基质蛋白单克隆抗体的研制及表位鉴定 被引量：3

12

作者 董佳慧 揭瑞 +6 位作者 余金辉 韩冬 王瑞玲 邓灵福 熊丽 刘德立 耿辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期370-376,共7页

目的:为了揭示循环血液中存在的软骨寡聚基质蛋白(Cartilage Oligomeric Matrix Protein,COMP)片段,探索COMP逃避自身免疫耐受的途径及机制,需制备高效、专一的识别COMP不同结构域的单克隆抗体。方法:利用真核表达系统对人COMP进行了一... 目的:为了揭示循环血液中存在的软骨寡聚基质蛋白(Cartilage Oligomeric Matrix Protein,COMP)片段,探索COMP逃避自身免疫耐受的途径及机制,需制备高效、专一的识别COMP不同结构域的单克隆抗体。方法:利用真核表达系统对人COMP进行了一系列的表达、并用亲和层析法结合离子交换层析法进行纯化。纯化的COMP为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术结合有限稀释传代法筛选得到稳定分泌抗人COMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用COMP单结构域片段结合生物信息学方法分析鉴定单克隆抗体结合表位。用不同种属来源的COMP分析单克隆抗体结合表位的保守性。结果:COMP及单结构域片段为分泌到细胞外的可溶性分子利于蛋白的纯化,筛选获得4株稳定分泌抗人COMP单克隆抗体细胞株,4株单克隆抗体的亚型为IgG1,经COMP单结构域片段检测证明4株单克隆抗体识别不同的表位,表位预测软件初步确定4株单克隆抗体识别表位所在区域,间接ELISA及免疫组化证实其中3株单克隆抗体与不同种属来源的COMP有较好的结合特性。结论:成功制备了4株识别不同表位的抗COMP单克隆抗体,为揭示血液中存在的COMP片段和进一步研究COMP逃避自身免疫耐受机理提供了研究工具。 展开更多

关键词 软骨寡聚基质蛋白 单克隆抗体 表位 类风湿性关节炎

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抗人α-烯醇化酶单克隆抗体的研制及其抗原识别表位初步鉴定 被引量：2

13

作者 韩冬 王瑞玲 +5 位作者 韩魏巍 秦婷婷 袁永泽 熊丽 刘德立 耿辉 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期393-398,共6页

研制抗人α-烯醇化酶的单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步研究。利用原核表达系统对人α-烯醇化酶进行一系列重组表达。表达纯化后的人α-烯醇化酶作为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术以及克隆化培养筛选稳定分泌抗人α-烯醇化酶... 研制抗人α-烯醇化酶的单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步研究。利用原核表达系统对人α-烯醇化酶进行一系列重组表达。表达纯化后的人α-烯醇化酶作为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术以及克隆化培养筛选稳定分泌抗人α-烯醇化酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用免疫荧光技术、免疫组化技术对此单克隆抗体加以验证,并应用噬菌体随机十二肽库展示技术结合生物信息学方法对抗体识别表位进行初步鉴定。结果显示,克隆表达了人α-烯醇化酶,筛选获得一株稳定分泌抗人α-烯醇化酶单克隆抗体细胞株,此单克隆抗体的亚型为IgG1,它可与腹腔巨噬细胞的胞膜及胞浆的烯醇化酶特异性结合。噬菌体随机十二肽库展示技术筛选出的氨基酸序列经生物信息学分析,初步确定此单克隆抗体的抗原表位为第259-262氨基酸与第267-269氨基酸,其恰好位于人α-烯醇化酶三维结构表面的凸环上。成功制备了一株抗人α-烯醇化酶单克隆抗体并对其抗原识别表位进行初步鉴定,为探究人α-烯醇化酶在人体病理生理活性中的作用提供了研究工具。 展开更多

关键词 烯醇化酶 单克隆抗体 免疫荧光 免疫组化 噬菌体展示技术

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呋喃丹和氯氰菊酯的类雌激素活性研究 被引量：2

14

作者 郭佳 杨雪 +4 位作者 张灿 何桢 钟秋 熊丽 刘德立 《农药》 CAS 北大核心 2012年第2期105-107,150,共4页

[目的]探究呋喃丹和氯氰菊酯的类雌激素活性。[方法]采用重组人雌激素受体α基因的双杂交酵母测定了17β-雌二醇和2种农药诱导产生β-半乳糖苷酶活性的EC50值。[结果]17β-雌二醇、呋喃丹、氯氰菊酯对应的EC50值分别为4.04×10-10、... [目的]探究呋喃丹和氯氰菊酯的类雌激素活性。[方法]采用重组人雌激素受体α基因的双杂交酵母测定了17β-雌二醇和2种农药诱导产生β-半乳糖苷酶活性的EC50值。[结果]17β-雌二醇、呋喃丹、氯氰菊酯对应的EC50值分别为4.04×10-10、2.34×10-7、1.04×10-6mol/L,诱导的最大酶活分别为4.97、1.82、1.59 U。[结论]2种农药均具有不同程度的类雌激素活性,且呋喃丹的类雌激素活性高于氯氰菊酯。 展开更多

关键词 重组基因酵母 类雌激素活性 氯氰菊酯 呋喃丹

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小鼠外侧丘系背核上行输入对下丘神经元反应的可塑性影响 被引量：1

15

作者 杨丹丹 郑维维 +2 位作者 赵莎莎 罗峰 王欣 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期132-140,共9页

听觉系统具备随着环境的变化来改变自身结构和功能的能力,这种能力称为听觉可塑性。中脑下丘(inferior colliculus,IC)是听觉系统重要的中继站,外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)上行输入对IC神经元的声反应特性... 听觉系统具备随着环境的变化来改变自身结构和功能的能力,这种能力称为听觉可塑性。中脑下丘(inferior colliculus,IC)是听觉系统重要的中继站,外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)上行输入对IC神经元的声反应特性具有重要的定型作用。本研究旨在探讨DNLL上行输入在IC神经元可塑性形成中的作用。以昆明小鼠为实验动物,持续电刺激对侧DNLL,采用单单位细胞外记录的方法观察IC神经元的可塑性变化。结果显示,95%的受抑制IC神经元和86%的受易化IC神经元在对侧DNLL 30 min电刺激停止后仍表现出可塑性的变化。在对侧DNLL电刺激停止1 h后,74%的受抑制IC神经元发生的可塑性变化消失,26%的受抑制IC神经元发生的可塑性变化仍然存在。以上结果提示,对侧DNLL上行输入可引起IC神经元的可塑性变化,并维持较长时间,这有利于提高IC神经元的声信号检测能力。 展开更多

关键词 外侧丘系背核 上行输入 听觉可塑性 下丘神经元 小鼠

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斑马鱼4个小maf时空表达分析及在调控胰外分泌酶原基因表达中的作用研究 被引量：1

16

作者 曾俏慧 吴纯 +3 位作者 卢飞 赵浩斌 钟雪萍 周青春 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期449-458,共10页

Maf蛋白家族作为重要的转录调控因子,参与细胞众多生命进程。它分为大Maf蛋白和小Maf蛋白,小Maf蛋白需要与其他B-Zip家族蛋白结合形成异二聚体才能发挥作用。在斑马鱼(Danio rerio)中,小Maf包括Mafk、Mafg1、Mafg2和Maft,Mafg1和Mafg2是... Maf蛋白家族作为重要的转录调控因子,参与细胞众多生命进程。它分为大Maf蛋白和小Maf蛋白,小Maf蛋白需要与其他B-Zip家族蛋白结合形成异二聚体才能发挥作用。在斑马鱼(Danio rerio)中,小Maf包括Mafk、Mafg1、Mafg2和Maft,Mafg1和Mafg2是Mafg在鱼类中特有的分化出的两个旁系同源基因。为了研究这4个小maf在物种之间的进化关系及表达模式,实验对4个小maf进行进化树、染色体线性关系分析,结果显示4个小maf的分子进化方向与物种进化方向一致,mafk和maff在物种间的更趋于保守,mafg比前两者要相对活跃。同时,实验选取斑马鱼胚胎发育十个不同时期(1 cell、2 cells、3.5 hpf、6 hpf、12 hpf、24 hpf、36 hpf、48 hpf、72 hpf、96 hpf),对其表达模式进行了详细的研究,结果显示4个小maf中,mafg2的表达量最高,maft和mafk的表达量次之,mafg1的表达量最低。在胚胎发育的后期(48 hpf),除了mafg2在躯干的血液循环处有明显的表达,maft在躯干的血液循环处有较弱的表达,而除mafk和mafg1在血液循环处没有检测到表达之外,4个基因的表达部位基本重叠,都在全身广泛表达,这可能也与它们之间存在功能叠加和替换有关。利用双荧光素酶检测系统检测了4个小Maf参与调控胰外分泌酶原基因转录的不同功能,结果显示4个小maf的过表达都能使胰外分泌酶原基因的表达下调。研究结果将为深入研究4个小maf基因的功能叠加和互补作用奠定基础。 展开更多

关键词 斑马鱼 MAF 原位杂交 胰外分泌酶原基因

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普通鲤与建鲤MSTN基因比较分析 被引量：1

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作者 彭扣 赵浩斌 +1 位作者 彭英 洪一江 《南昌大学学报（理科版）》 CAS 北大核心 2013年第2期191-197,共7页

肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子。采用RACE和基因组步移分别克隆获得了普通鲤MSTN cDNA基因全序列和MSTN基因组序列;普通鲤MSTN cDNA全长2 188bp,共编码375个氨基酸,提交GenBank获得序列登录号G... 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子。采用RACE和基因组步移分别克隆获得了普通鲤MSTN cDNA基因全序列和MSTN基因组序列;普通鲤MSTN cDNA全长2 188bp,共编码375个氨基酸,提交GenBank获得序列登录号GQ214769.1,普通鲤MSTN基因组序列长为3 690bp,包含3个外显子和2个内含子,获得序列登录号GQ214770.1。聚类分析表明,克隆的鲤MSTN为MSTN1a;将普通鲤MSTN与人工育成品种建鲤MSTNs多层次比较,普通鲤MSTN同建鲤MSTN1a在核苷酸水平上的碱基差异位点分别为G(320)A,G(723)A,G(730)A,G(2121)A,A(2794)G,在蛋白水平仅V(78)I替换,暗示了MSTN1a在育种工作中承受的选择压力较大,研究结果为突变位点与鲤生长性能有可能的关联分析奠定基础。 展开更多

关键词 MSTN 普通鲤 建鲤 序列比较

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水稻根部2-酮戊二酸感应蛋白OsGlnB的铵同化碳架结合特性

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作者 郭继林 曹倩文 +1 位作者 袁永泽 郑勇 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1971-1978,共8页

为了揭示2-酮戊二酸(2-OG)感应蛋白OsGlnB在水稻根部铵同化碳架调节中的功能,本文采用2-OG、草酰乙酸(OAA)或丙酮酸(PYR)营养液处理水稻(Oryza sativa L.cv.9311)幼苗,检测根部谷氨酰胺合成酶(GS)活性和OsGlnB基因转录量。克隆表达并分... 为了揭示2-酮戊二酸(2-OG)感应蛋白OsGlnB在水稻根部铵同化碳架调节中的功能,本文采用2-OG、草酰乙酸(OAA)或丙酮酸(PYR)营养液处理水稻(Oryza sativa L.cv.9311)幼苗,检测根部谷氨酰胺合成酶(GS)活性和OsGlnB基因转录量。克隆表达并分离纯化根部OsGlnB蛋白,采用同源模建、分子对接与等温滴定鉴定该信号蛋白与碳架效应物的相互作用。结果表明所选碳架分子中只有2-OG和OAA促使根部GS活性与OsGlnB基因转录量同步上升,2-OG与ATP含量也相应升高。同源模建与分子对接表明OsGlnB蛋白与ATP-Mg^(2+)形成的复合物能有效结合2-OG或OAA,但不能结合PYR。等温滴定证明2-OG与上述复合物的结合常数大于OAA,未检测到丙酮酸热效应,结果与分子对接结论一致。本研究说明碳架效应物结合2-OG感应蛋白是这类碳营养信号调节水稻根部铵同化的必要条件。 展开更多

关键词 OsGlnB 碳架效应物 等温滴定 根部铵同化 水稻

原文传递

采用X射线衍射解析人鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)Ras结合结构域的空间结构

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作者 黄雪英 雷明 +5 位作者 沈阳 张巍 刘艳丽 刘珂 赵浩斌 祁超 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期893-898,共6页

Ras结合结构域(RBD)是鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(Ral GDS)家族成员C-端的高保守区,通过它连接Ras和Ras相关蛋白。利用Red Wings和SGC-1 screens相关的悬滴法设盘结晶,按体积比1∶1加蛋白液到含1∶100胞内蛋白酶Glu-C(w/w)的结晶溶液(2 m... Ras结合结构域(RBD)是鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(Ral GDS)家族成员C-端的高保守区,通过它连接Ras和Ras相关蛋白。利用Red Wings和SGC-1 screens相关的悬滴法设盘结晶,按体积比1∶1加蛋白液到含1∶100胞内蛋白酶Glu-C(w/w)的结晶溶液(2 mol/L(NH4)2SO4,0.2 mol/L Na Ac,0.1 mol/L HEPES,5%MPD,p H 7.5)中,晶体3天长成可组装大小。利用X-射线晶体衍射技术解析了人Ral GDS的Ras结合域(Ral GDS-RBD)的晶体结构,对比鼠和人Ral GDS-RBD,主要是Ras结合区的C-端不同。人Ral GDS-RBD通过Glu838和Glu840在Ral GDS和Ras蛋白间形成氢键,而在同一位点,鼠Ral GDS-RBD通过Asp820和Asp822形成氢键。人Ral GDS-RBD结构中含ββαββαβ-型三维结构的泛素样构象,一个单体的C-端残基与相邻单体的β折叠形成平行βββββ结构。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(Ral GDS) Ras结合结构域(RBD) RAS蛋白

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青海湖盐单胞菌QHL1 ectABC基因簇克隆鉴定及二氨基丁酸转氨酶基因ectB的异源表达

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作者 刘建 朱德锐 +3 位作者 李逸 李丹丹 李耀东 刘德立 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期5-9,共5页

从青海湖20份水样筛选得到一株优势中度嗜盐菌QHL1,经初步鉴定为盐单胞菌属。设计保守基因ectB的引物,以基因组DNA为模板,PCR扩增获得ectB基因(1269 bp)。利用染色体步移技术,克隆获得四氢嘧啶合成基因簇ectABC及其上下游调控序列。DNAS... 从青海湖20份水样筛选得到一株优势中度嗜盐菌QHL1,经初步鉴定为盐单胞菌属。设计保守基因ectB的引物,以基因组DNA为模板,PCR扩增获得ectB基因(1269 bp)。利用染色体步移技术,克隆获得四氢嘧啶合成基因簇ectABC及其上下游调控序列。DNAStar软件分析表明ectA、ectB和ectC位于同一个操纵子上,大小分别为579 bp、1269 bp和390 bp,预测分别编码192、422和129个氨基酸的肽链。同源性分析表明:Halomonas sp.QHL1ectABC基因簇所编码的二氨基丁酸转乙酰基酶(EctA)、二氨基丁酸转氨酶(EctB)和四氢嘧啶合成酶(EctC)与Halomonas sp.Nj223 ectABC基因簇所编码的酶蛋白相似性分别达57%、96%和85%。利用分子克隆技术构建二氨基丁酸转氨酶基因ectB的重组表达载体pET-28-ectB,通过限制性内切酶酶切和测序分析,结果表明其目的基因的插入位置、大小和读码框均正确。诱导表达重组菌,SDS-PAGE分析,目的蛋白条带约46 kDa。 展开更多

关键词 青海湖 四氢嘧啶 染色体步移 ectABC基因簇 克隆表达

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